雷 廷 咼于明 杜恩存 邵玉新

(中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193)

飼料原料中氨基酸含量及消化率的準(zhǔn)確測(cè)定對(duì)于飼料生產(chǎn)中滿足畜禽氨基酸和蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)需求，提高飼料蛋白質(zhì)氨基酸利用效率，減少排泄物氮排放是至關(guān)重要的。過去對(duì)雞飼料氨基酸消化率的評(píng)價(jià)多用蛋用型品種的成年公雞，在生長(zhǎng)雞或肉雞上的評(píng)價(jià)極少。由于生長(zhǎng)雞或肉雞與成年公雞在消化生理上有差異［1］，導(dǎo)致以往由成年蛋雞得出的飼料氨基酸消化率不能完全適用于生長(zhǎng)雞或肉雞［2-3］。消化率測(cè)定方法過去常采用全收糞法或去盲腸手術(shù)全收糞法。全收糞法由于操作費(fèi)時(shí)費(fèi)力、糞尿難以分開、糞中羽毛和飼料難以完全揀出、盲腸微生物對(duì)氨基酸消化影響較大等因素［4-6］使得測(cè)定結(jié)果誤差較大;而去盲腸公雞對(duì)外科手術(shù)要求較高，去掉盲腸后雞處于非正常生理狀態(tài)，Parson等［7］研究發(fā)現(xiàn)去盲腸法測(cè)定飼料氨基酸消化率總會(huì)低于正常雞。標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率法采用指示劑測(cè)定回腸食糜氨基酸消化率，同時(shí)考慮了內(nèi)源氮損失的影響，由于不受盲腸微生物的影響，因此更能代表動(dòng)物的真實(shí)氨基酸消化率，測(cè)定結(jié)果更具有可加性［8-11］。肉雞在不同日齡對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率不同，肉雞在剛出殼的1周內(nèi)消化器官發(fā)育不成熟，消化酶分泌不足，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率較低，之后隨著日齡增長(zhǎng)而升高［12-13］。但肉雞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率不是隨日齡一直升高，一些報(bào)道指出肉雞隨著日齡增長(zhǎng)消化率會(huì)降低［14-17］，另外一些報(bào)道則表明氨基酸消化率會(huì)隨著日齡的增長(zhǎng)而升高［18-20］，而關(guān)于肉仔雞在14日齡和35日齡的氨基酸消化率的比較國(guó)內(nèi)外目前鮮有報(bào)道。本研究綜合考慮飼料原料和日齡對(duì)肉仔雞氨基酸消化率的影響，選取了肉仔雞中具有代表性的2個(gè)品種(科寶500和羅斯308)以及能代表其消化特點(diǎn)的日齡(14日齡和35日齡)，結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期試驗(yàn)總結(jié)出的標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率測(cè)定方法，以二氧化鈦為指示劑，采用無氮飼糧法估測(cè)內(nèi)源氨基酸損失，測(cè)定肉仔雞的標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率，為高效、準(zhǔn)確地配制肉仔雞飼糧提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)1選用540只體重和健康狀況一致的1日齡科寶500肉仔雞，采用公母各半混養(yǎng)，隨機(jī)分為5個(gè)處理，每個(gè)處理6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)平均體重變異控制在不超過平均體重的3%，每個(gè)重復(fù)18只雞。4個(gè)處理分別飼喂豆粕型飼糧、菜籽粕型飼糧、玉米蛋白粉型飼糧及玉米干酒糟及其可溶物(DDGS)型飼糧，另外1個(gè)處理飼喂無氮飼糧。試驗(yàn)以0.5%二氧化鈦為指示劑，采用無氮飼糧法估測(cè)內(nèi)源氨基酸損失，測(cè)定肉仔雞在14日齡和35日齡的豆粕、菜籽粕、玉米蛋白粉和玉米DDGS的標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率。

試驗(yàn)2選用360只體重和健康狀況一致的雌性1日齡羅斯308肉仔雞，隨機(jī)分為3個(gè)處理，每個(gè)處理6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)平均體重變異控制在不超過平均體重的3%，每個(gè)重復(fù)20只雞。2個(gè)處理飼喂豆粕型飼糧、菜籽粕型飼糧，另外1個(gè)處理飼喂無氮飼糧，采用與試驗(yàn)1同樣的方法測(cè)定肉仔雞在14日齡和35日齡的豆粕、菜籽粕的標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率以及空腸食糜酶活性和腸道指標(biāo)。

2個(gè)試驗(yàn)在不同時(shí)間階段展開，但飼養(yǎng)過程完全一致。

1.2 基礎(chǔ)飼糧和試驗(yàn)飼糧

非試驗(yàn)期肉仔雞飼喂按照我國(guó)《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)配制的基礎(chǔ)飼糧，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)期(10～14日齡以及31～35日齡)肉仔雞飼喂試驗(yàn)飼糧和無氮飼糧，試驗(yàn)飼糧為半純合飼糧，以待測(cè)飼料原料作為唯一的飼糧蛋白質(zhì)來源，盡量保證除氨基酸外的營(yíng)養(yǎng)平衡，飼糧粗蛋白質(zhì)含量在20%左右，其組成見表2。無氮飼糧參照蔣純衛(wèi)等［21］方法配制，其組成見表3。原料中常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分和氨基酸含量的測(cè)定值及試驗(yàn)飼糧中氨基酸和粗蛋白質(zhì)含量的測(cè)定值分別見表4和表5。

1.3 樣品采集與指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 空腸、回腸食糜的采集

2個(gè)試驗(yàn)中采集食糜過程完全相同，肉仔雞在10日齡和31日齡時(shí)絕食8 h后，根據(jù)體重調(diào)整雞群，使處理間和重復(fù)間雞的平均體重的變異最小，之后開始預(yù)飼試驗(yàn)飼糧，預(yù)試期為4 d。在14日齡和35日齡時(shí)，肉仔雞先饑餓2～3 h，再自由采食1 h，再過3 h后開始?xì)㈦u取樣。14日齡和35日齡時(shí)每個(gè)重復(fù)分別取12和6只雞，翅靜脈注射苯巴比妥鈉麻醉后稱重，立即剖腹，分離整段空腸和回腸，空腸取前半段輕輕擠出食糜于10 mL離心管中，每個(gè)重復(fù)全部收集在一起，用液氮保存，用于酶活性的測(cè)定;回腸對(duì)折后取回腸后段1/2(棄去最后2 cm)，剩余腸段食糜輕輕擠于鋁盒中，每個(gè)重復(fù)食糜混在1個(gè)鋁盒內(nèi)，采集完后迅速轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱冷凍，之后采用冷凍干燥機(jī)凍干食糜后備測(cè)。

1.3.2 腸道指標(biāo)的測(cè)定

試驗(yàn)2中，肉仔雞在13日齡和34日齡時(shí)，從每個(gè)重復(fù)中挑選1只雞饑餓12 h后用于測(cè)定肉仔雞體重、小腸重和小腸各部分腸段長(zhǎng)度。計(jì)算小腸相對(duì)重量和十二指腸和空腸相對(duì)長(zhǎng)度，計(jì)算公式如下:

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets(air-dry basis) %

表2 試驗(yàn)飼糧組成(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 2 Composition of experimental diets(air-dry basis)%

續(xù)表2

表3 無氮飼糧組成(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 3 Composition of the nitrogen-free diet(air-dry basis) %

1.3.3 樣品中干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)和二氧化鈦含量的測(cè)定

干物質(zhì)含量測(cè)定參照GB 5497—85，粗蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法測(cè)定，二氧化鈦含量參照Short等［22］和鄧雪娟等［23］方法進(jìn)行測(cè)定。

1.3.4 樣品中氨基酸含量的測(cè)定

胱氨酸和蛋氨酸含量先用過甲酸氧化再用高效液相色譜(HPLC)進(jìn)行測(cè)定;色氨酸含量先用氫氧化鋇水解再用HPLC進(jìn)行測(cè)定，其余氨基酸含量先用6 mol/L鹽酸水解再用氨基酸自動(dòng)分析儀(日立835-50)進(jìn)行測(cè)定，檢測(cè)單位為農(nóng)業(yè)部飼料效價(jià)與安全監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心(北京)，具體方法參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 18246—2000。

1.3.5 空腸食糜酶活性的測(cè)定

胰蛋白酶和糜蛋白酶活性采用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒測(cè)定，試劑盒編號(hào)分別為A080-2、A080-3。胰蛋白酶活性單位定義:在pH 8.0，37℃條件下，每毫克蛋白質(zhì)中含有的胰蛋白酶每分鐘使吸光度變化0.003即為1個(gè)酶活性單位;糜蛋白酶活性單位定義:在37℃條件下，每毫克組織蛋白質(zhì)每分鐘分解蛋白質(zhì)生產(chǎn)1μg氨基酸即為1個(gè)酶活性單位。

1.4 計(jì)算公式

1.4.1 表觀回腸氨基酸消化率

表4 原料中常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分和氨基酸含量的測(cè)定值(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 4 Measured values of conventional nutrient composition and amino acid contents of ingredients(air-dry basis)%

續(xù)表4

表5 試驗(yàn)飼糧中氨基酸和粗蛋白質(zhì)含量的測(cè)定值(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 5 Measured values of amino acid and crude protein contents of experimental diets(air-dry basis) %

續(xù)表5

1.4.2 回腸末端內(nèi)源氨基酸損失

1.4.3 標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率

式中:SIDaa表示標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率，AAd表示待測(cè)飼糧干物質(zhì)狀態(tài)下某氨基酸含量。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

利用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件中ANOVO對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 科寶500肉仔雞在不同日齡的豆粕、菜籽粕、玉米蛋白粉和玉米 DDGS的標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率

由表6可知，玉米蛋白粉中亮氨酸、精氨酸、色氨酸和酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率在14日齡和35日齡之間無顯著差異(P＞0.05)，異亮氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、蛋氨酸和丙氨酸標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率在35日齡有下降趨勢(shì)(P=0.080、P=0.056、P=0.066、P=0.096和P=0.081)，其余所有標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率在14日齡均顯著高于35日齡(P＜0.05);菜籽粕中除丙氨酸外的所有標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率在14日齡均顯著高于35日齡(P＜0.05);豆粕中除胱氨酸標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率在35日齡有降低趨勢(shì)(P=0.076)外，其余所有標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率在14日齡均顯著高于35日齡(P＜0.05);玉米DDGS中色氨酸和脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率在2個(gè)日齡間無顯著差異(P＞0.05)，賴氨酸標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率在35日齡有降低趨勢(shì)(P=0.098)，其余所有標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率在14日齡均顯著高于35日齡(P＜0.05)。

2.2 羅斯308肉仔雞在不同日齡的豆粕和菜籽粕的標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率

由表7可知，豆粕中亮氨酸、色氨酸和脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率在2個(gè)日齡間無顯著差異(P＞0.05)，酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率在35日齡顯著高于14日齡(P＜0.05)，其余所有標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率在14日齡均顯著高于35日齡(P＜0.05);菜籽粕中蘇氨酸、纈氨酸、賴氨酸、胱氨酸、天門冬氨酸、絲氨酸、甘氨酸和丙氨酸標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率在14日齡顯著高于35日齡(P＜0.05)，苯丙氨酸和脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率表現(xiàn)出降低趨勢(shì)(P=0.062、P=0.058)，酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率出現(xiàn)升高趨勢(shì)(P=0.084)，色氨酸標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率則顯著升高(P＜0.05)，其余標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率在2個(gè)日齡間無顯著差異(P＞0.05)。

2.3 羅斯308肉仔雞在不同日齡的空腸食糜酶活性和腸道指標(biāo)

由表8可知，由于空腸食糜酶活性測(cè)定的誤差較大，肉仔雞空腸食糜的胰蛋白酶和糜蛋白酶活性在2個(gè)日齡間無顯著性差異(P＞0.05)，但是從數(shù)值上仍可以看出肉仔雞在14日齡空腸食糜的胰蛋白酶和糜蛋白酶活性高于35日齡。

由表9可知，肉仔雞在14日齡的小腸相對(duì)重量顯著高于35日齡(P＜0.05)，但十二指腸和空腸相對(duì)長(zhǎng)度在2個(gè)日齡間無顯著差異(P＞0.05)。

?

表7 羅斯308肉仔雞在不同日齡的豆粕和菜籽粕的標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率Table 7 Standardized ileal amino acid digestibility of soybean meal and rapeseed meal for Ross 308 broiler chickens at different ages %

表8 羅斯308肉仔雞在不同日齡的空腸食糜酶活性Table 8 Activties of enzymes in jejunal digesta of Ross 308 broiler chickens at different ages U/mg prot

表9 羅斯308肉仔雞在不同日齡的腸道指標(biāo)Table 9 Intestinal indexes of Ross 308 broiler chickens at different ages %

3 討論

Fonolla等［16］比較了肉雞在21日齡和52日齡的幾種飼料原料的表觀氨基酸消化率，Zuprizal等［15］使用強(qiáng)飼收糞法研究了肉雞在21日齡和42日齡的真氨基酸消化率，均得出前期的消化率高于后期的結(jié)果;鄺賢斌等［14］采用收糞法研究了肉雞在28日齡和42日齡的菜籽粕、棉籽粕、肉骨粉和羽毛粉的真氨基酸消化率，發(fā)現(xiàn)除了羽毛粉外，其他原料前期的氨基酸消化率均極顯著高于后期，這些報(bào)道與本試驗(yàn)結(jié)果相符。Batal等［20］用收糞法研究了1～21日齡肉雞對(duì)常規(guī)飼糧和雜粕飼料的表觀氨基酸消化率，發(fā)現(xiàn)1～14日齡表觀氨基酸消化率呈上升趨勢(shì)，并且在14日齡左右達(dá)到平臺(tái)期，14日齡與21日齡的表觀氨基酸消化率無差異，其原因可能是由于肉雞在剛出雛時(shí)消化道和消化器官?zèng)]有發(fā)育成熟［24-26］，因此肉雞在1～14日齡會(huì)出現(xiàn)消化率上升，但在14日齡的消化器官可能已經(jīng)發(fā)育成熟，從而導(dǎo)致14日齡和21日齡的表觀氨基酸消化率無差異。Huang等［19］研究了肉仔雞在14、28和42日齡的8種飼料原料的表觀回腸氨基酸消化率，結(jié)果表明在谷物類飼料中，小麥和高粱在14日齡的表觀回腸氨基酸消化率高于28日齡;在蛋白質(zhì)類飼料中，除棉籽粕外，均是28日齡和42日齡的表觀回腸氨基酸消化率高于14日齡。Adedokun等［18］則研究發(fā)現(xiàn)，肉仔雞在21日齡的5種飼料原料的表觀回腸氨基酸消化率均大于5日齡，但是經(jīng)過內(nèi)源氮校正之后，豆粕和菜籽粕在5日齡的標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率高于21日齡，這2個(gè)結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果有差異的原因可能是氨基酸消化率的測(cè)定方法、使用的肉雞品種、測(cè)定的日齡、飼養(yǎng)方式和取樣方式等因素不同而造成。

本試驗(yàn)中2個(gè)不同品種肉仔雞在14日齡的飼料原料的絕大多數(shù)標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率均顯著高于35日齡。Nitsan等［12］在研究中發(fā)現(xiàn)，家禽蛋白質(zhì)消化酶活性在幼齡階段處于上升趨勢(shì)，大約在10～21日齡達(dá)到高峰期，其中胰蛋白酶和糜蛋白酶活性在11日齡達(dá)到最大值，在23日齡后開始降低，由此推斷，幼禽在14日齡左右其消化道可能已經(jīng)發(fā)育很完善，而且蛋白酶活性很高，23日齡之后酶活性開始降低，本試驗(yàn)中測(cè)得14日齡胰蛋白酶和糜蛋白酶活性均有高于35日齡的趨勢(shì)與其相符，因此推斷肉仔雞在14日齡對(duì)蛋白質(zhì)的消化能力高于35日齡。另外，Obst等 的研究得出雞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力在2周齡達(dá)到最高，從3周齡開始降低到1周齡的水平，之后保持低消化率到5周齡，在6周齡時(shí)又達(dá)到最大值，這與本試驗(yàn)肉仔雞在14日齡的標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率高于35日齡亦相符。同時(shí)，由試驗(yàn)測(cè)得腸道指標(biāo)可知，14日齡時(shí)小腸相對(duì)重量顯著高于35日齡，相對(duì)發(fā)達(dá)的小腸可能具有更強(qiáng)的消化能力，這也可能是導(dǎo)致14日齡標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率高于35日齡的另外一個(gè)主要因素。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，2個(gè)品種的肉仔雞在14日齡的豆粕、菜籽粕、玉米蛋白粉和玉米DDGS的絕大部分標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率顯著高于35日齡，表明肉仔雞在14日齡時(shí)已經(jīng)可以滿足對(duì)蛋白質(zhì)的消化;肉仔雞在14日齡時(shí)腸道相對(duì)重量和空腸食糜酶活性高于35日齡可能是其標(biāo)準(zhǔn)回腸氨基酸消化率較高的主要原因之一。

［1］袁建敏，咼于明.蛋公雞和肉仔雞蛋白消化酶活性及飼料氨基酸消化率的比較研究［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，6(1):104-109.

［2］楊桂芹，張艷春.雞用飼料氨基酸消化率的評(píng)定方法評(píng)價(jià)分析［J］.畜牧與獸醫(yī)，2009，41(3):54-57.

［3］GARCIA A R，BATAL A B，DALE N M.A comparison of methods to determine amino acid digestibility of feed ingredients for chickens［J］.Poultry Science，2007，86(1):94-101.

［4］石敏.家禽氨基酸消化率的測(cè)定方法［J］.飼料工業(yè)，2008，29(23):11-16.

［5］KADIM I T，MOUGHAN P J，RAVINDRAN V.Ileal amino acid digestibility assay for the growing meat chicken—comparison of ileal and excreta amino acid digestibility in the chicken［J］.British Poultry Science，2002，43(4):588-597.

［6］RAVINDRAN V，HEW L I，RAVINDRAN G，et al.A comparison of ileal digesta and excreta analysis for the determination of amino acid digestibility in food ingredients for poultry［J］.British Poultry Science，1999，40(2):266-274.

［7］PARSONS C M.Digestibility and bioavailability of protein and amino acids.［M］//MCNAB J M，BOORMAN K N.Poultry Feedstuffs:Supply，Compo-，and Nutritive Value.Wallingford:CABI Publishing，2002:115-135.

［8］ADEDOKUN S A，ADEOLA O，PARSONS C M，et al.Factors affecting endogenous amino acid flow in chickens and the need for consistency in methodology［J］.Poultry Science，2011，90(8):1737-1748.

［9］鄧雪娟，劉國(guó)華，蔡輝益，等.肉雞回腸氨基酸消化率測(cè)定方法研究進(jìn)展［J］.中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2008，24(2):12-16.

［10］LEMME A，RAVINDRAN V，BRYDEN W L.Ileal digestibility of amino acids in feed ingredients for broilers［J］.World’s Poultry Science Journal，2004，60(4):423-438.

［11］ANGKANAPORN K，RAVINDRAN V，BRYDEN W L.Additivity of apparent and true ileal amino acid digestibilities in soybean meal，sunflower meal，and meat and bone meal for broilers［J］.Poultry Science，1996，75(9):1098-1103.

［12］NITSAN Z，DUNNINGTON E A，SIEGEL P B.Organ growth and digestive enzyme levels to fifteen days of age in lines of chickens differing in body weight［J］.Poultry Science，1991，70(10):2040-2048.

［13］蔣正宇，周巖民，王恬.外源α-淀粉酶對(duì)肉仔雞消化器官發(fā)育及小腸消化酶活性影響的后續(xù)效應(yīng)［J］.中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2006，22(10):13-16.

［14］鄺賢斌，咼于明.肉仔雞對(duì)若干國(guó)產(chǎn)原料的氨基酸消化率［J］.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2000，12(4):35-39.

［15］ZUPRIZAL，LARBIER M，CHAGNEAU A M.Effect of age and sex on true digestibility of amino acids of rapeseed and soybean meals in growing broilers［J］.Poultry Science，1992，71(9):1486-1492.

［16］FONOLLA J，PRIETO C，SANZ R.Influence of age on the nutrient utilization of diets for broilers［J］.Animal Feed Science and Technology，1981，6(4):405-411.

［17］HAKANSSON J，ERIKSSON S.Digestibility，nitrogen retention and consumption of metabolizable energy by chickens on feeds of low and high concentration［J］.Swedish Journal of Agricultural Research，1974，(4):195-207.

［18］ADEDOKUN S A，ADEOLA O，PARSONS C M，et al.Standardized ileal amino acid digestibility of plant feedstuffs in broiler chickens and turkey poults using a nitrogen-free or casein diet［J］.Poultry Science，2008，87(12):2535-2548.

［19］HUANG K H，RAVINDRAN V，LI X，et al.Influence of age on the apparent ileal amino acid digestibility of feed ingredients for broiler chickens［J］.British Poultry Science，2005，46(2):236-245.

［20］BATAL A B，PARSONS C M.Effects of age on nutrient digestibility in chicks fed different diets［J］.Poultry Science，2002，81(3):400-407.

［21］蔣純衛(wèi)，咼于明，王永偉，等.無氮飼糧對(duì)肉雞盲腸微生物菌群結(jié)構(gòu)及內(nèi)源氨基酸基礎(chǔ)損失量的影響［J］.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2012，24(10):1878-1887.

［22］SHORT F J，GORTON P，WISEMAN J，et al.Determination of titanium dioxide added as an inert marker in chicken digestibility studies［J］.Animal Feed Science and Technology，1996，59(4):215-221.

［23］鄧雪娟，劉國(guó)華，蔡輝益，等.分光光度計(jì)法測(cè)定家禽飼料和食糜中二氧化鈦［J］.飼料工業(yè)，2008，29(2):57-58.

［24］YADAV G B，KADAM A S，PACHPANDE A M，et al.Post hatch histo-morphological studies of small intestinal development in chicks fed with herbal early chick nutritional supplement［J］.International Journal of Poultry Science，2010，9(9):851-855.

［25］JIN S，CORLESS A，SELL J L.Digestive system development in post-hatch poultry［J］.World’s Poultry Science Journal，1998，54(4):335-345.

［26］張鐵鷹，汪儆，李永清.0～49日齡肉仔雞消化參數(shù)的變化規(guī)律研究［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2005，32(1):6-10.

［27］OBST B S，DIAMOND J.Ontogenesis of intestinal nutrient transport in domestic chickens(Gallus Gallus)and its relation to growth［J］.The Auk，1992，109(3):451-464.