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奇管沖劑止咳化痰平喘作用及毒性研究

2013-09-16 04:39:58周繼胡溫富春徐惠波
中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥 2013年25期
關(guān)鍵詞:沖劑豚鼠藥組

周繼胡 溫富春 徐惠波

奇管沖劑止咳化痰平喘作用及毒性研究

周繼胡 溫富春 徐惠波

目的 研究奇管沖劑的止咳化痰平喘作用及毒性反應(yīng)。方法 通過化學(xué)藥物二氧化硫、氨水、枸櫞酸引起小鼠和豚鼠的咳嗽,觀察奇管沖劑的鎮(zhèn)咳作用;通過小鼠酚紅的排出量觀察藥物的祛痰作用;通過藥物磷酸組織胺和氯化乙酰膽堿引起豚鼠哮喘,觀察藥物的平喘作用。同時(shí)對(duì)奇管沖劑進(jìn)行了急性毒性和長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)觀察。結(jié)果 奇管沖劑能明顯延長(zhǎng)二氧化硫、氨水、枸櫞酸引起咳嗽的潛伏期,減少咳嗽次數(shù);能增加酚紅的排出量;明顯延長(zhǎng)豚鼠發(fā)生哮喘的潛伏期。奇管沖劑的最大給藥量為81 g/kg,長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)沒有明顯的毒副反應(yīng)發(fā)生。結(jié)論 在本次試驗(yàn)中,奇管沖劑表現(xiàn)出明顯的鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘作用,且安全性高。

奇管沖劑;鎮(zhèn)咳;祛痰;平喘

馬加木(Sorbus Pohuashanensis Hedl)系薔薇科植物花楸,主要產(chǎn)于東北三省以及河北、內(nèi)蒙古、山西等地,吉林省林區(qū)均有分布,具有抗輻射、抗癌、抗氧化、止咳平喘的功效,民間常用于治療老年慢性氣管炎。但其相關(guān)的化學(xué)、藥理研究報(bào)道甚少。本文則以馬加木為君藥,配以紫苑、款冬花、車前草、杏仁等制成的奇管沖劑的止咳化痰平喘作用進(jìn)行了動(dòng)物試驗(yàn)觀察,為馬加木的應(yīng)用奠定理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 ICR小鼠,體重18~22 g,雌雄均用;Wistar大鼠,體重130~160 g,雄性;豚鼠,體重150~200 g,雌雄均用,所有動(dòng)物均購(gòu)自吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。

1.2 藥物 氣管沖劑,由本單位制劑室提供;止咳桔紅丸,北京中藥三廠生產(chǎn);復(fù)方茶堿片,哈爾濱制藥四廠生產(chǎn)。

1.3 儀器 752型分光光度計(jì),有上海第三分析儀器廠生產(chǎn)。ZS-2001A型水電分體式超聲霧化器,由中國(guó)天津中亞科技開發(fā)公司,中國(guó)北京市醫(yī)療器械研究所出品。

1.4 方法

1.4.1 止咳作用

1.4.1.1 對(duì)二氧化硫引發(fā)小鼠咳嗽的影響[2]取50只小鼠,隨機(jī)分為五組,分別為空白對(duì)照組、止咳桔紅丸24 g/kg給藥組,奇管沖劑5、2.5、1.25 g/kg給藥組。給藥1次/d,連續(xù)給藥7 d。末次給藥后1 h,取一盛有0.5 g無水亞硫酸鈉的25 ml的蒸發(fā)皿,將5 ml(50%)的硫酸迅速注入蒸發(fā)皿中,并立即將500 ml的玻璃燒杯口在蒸發(fā)皿上,待其反應(yīng)2 min,使燒杯中充滿恒定濃度的二氧化硫氣體后,隨即將小鼠放入含有二氧化硫的燒杯內(nèi),觀察小鼠發(fā)生咳嗽的潛伏期及2 min 內(nèi)的咳嗽次數(shù)。

1.4.1.2 對(duì)氨水引發(fā)小鼠咳嗽的影響[2]取60只小鼠,隨機(jī)分為五組,分別為空白對(duì)照組、復(fù)方茶堿片0.39 g/kg給藥組,奇管沖劑5、2.5、1.25 g/kg給藥組。給藥1次/d,連續(xù)給藥7 d。末次給藥1 h 后,將小鼠置于300 ml三角燒瓶中,然后通過水電分體式超聲霧化器向燒杯中噴入氨霧3 s,觀察小鼠發(fā)生咳嗽的潛伏期及1 min內(nèi)的咳嗽次數(shù)。

1.4.1.3 對(duì)枸櫞酸引發(fā)豚鼠咳嗽的影響[3]取50只豚鼠,隨機(jī)分為五組,分別為空白對(duì)照組、復(fù)方茶堿片0.39 g/kg給藥組,奇管沖劑5、2.5、1.25 g/kg給藥組。給藥1次/d,連續(xù)給藥5 d。末次給藥1 h后,將豚鼠置于氣霧箱中,通過水電分體式超聲霧化器向氣霧箱中噴入17.5%枸櫞酸氣體80 s,觀察豚鼠發(fā)生咳嗽的潛伏期及5 min內(nèi)的咳嗽次數(shù)。

1.4.2 祛痰作用-對(duì)小鼠酚紅法祛痰試驗(yàn)的影響[2]取50只小鼠,隨機(jī)分為五組,分別為空白對(duì)照組、止咳桔紅丸24 g/kg給藥組,奇管沖劑5、2.5、1.25 g/kg給藥組。給藥1次/d,連續(xù)給藥6 d。末次給藥前動(dòng)物禁食不禁水12 h,末次給藥后1 h,給小鼠腹腔注射5%酚紅生理鹽水溶液50 mg/kg,30 min 后將動(dòng)物脫臼處死,分離氣管。在喉結(jié)處插入8號(hào)針頭,固定。然后用1 ml生理鹽水緩慢沖洗氣道三次,最后取出沖洗液600 μl,加生理鹽水補(bǔ)充至2 ml,再向其中加入0.2 ml氫氧化鈉。于546nm處比色,計(jì)算酚紅量。

1.4.3 平喘作用-對(duì)藥物引發(fā)豚鼠哮喘的影響[2]取50只豚鼠,隨機(jī)分為五組,分別為空白對(duì)照組、復(fù)方氨茶堿片0.39 g/kg給藥組,奇管沖劑5、2.5、1.25 g/kg給藥組。給藥1次/d,連續(xù)給藥8 d。末次給藥后1 h,將豚鼠放入霧化箱中,通過水電分體式超聲霧化器向氣霧箱中噴入2%氯化乙酰膽堿和0.1%磷酸組織胺等比混合氣體20s,觀察豚鼠發(fā)生哮喘的潛伏期。

1.4.4 毒性試驗(yàn)研究

1.4.4.1 急性毒性試驗(yàn) 因限于給藥濃度及給藥體積,未能測(cè)出奇管沖劑的LD50。則取40只小鼠,雌雄各半,分為空白對(duì)照組和給藥組,給藥組以6.75 g/kg的劑量、40 ml/kg的體積一日內(nèi)連續(xù)給藥三次,測(cè)定小鼠的最大給藥量。

1.4.4.2 長(zhǎng)期毒性試驗(yàn) 奇管沖劑以20 g/kg、10 g/kg、5 g/kg的劑量連續(xù)給藥180 d,觀察動(dòng)物的狀態(tài)、體重的變化,并于給藥90 d、180 d及停藥21 d測(cè)定血液學(xué)、血液生化學(xué)等指標(biāo),稱量心、肝、脾、肺、腎、腎上腺等主要臟器,計(jì)算臟器指數(shù),并進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。

2 結(jié)果

2.1 止咳作用

2.1.1 對(duì)二氧化硫引發(fā)小鼠咳嗽的影響 奇管沖劑各劑量組能明顯延長(zhǎng)小鼠發(fā)生咳嗽的潛伏期,減少咳嗽次數(shù)。結(jié)果見表1。

表1 奇管沖劑對(duì)二氧化硫引發(fā)小鼠咳嗽的影響±s)

注:與空白對(duì)照組比較:*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001(以下表均同)

2.1.2 對(duì)氨水引發(fā)小鼠咳嗽的影響 奇管沖劑三個(gè)劑量組均能使小鼠發(fā)生咳嗽的潛伏期明顯延長(zhǎng),咳嗽次數(shù)亦有減少的趨勢(shì)。陽性對(duì)照組復(fù)方茶堿片能明顯減少小鼠的咳嗽次數(shù),延長(zhǎng)咳嗽的潛伏期。結(jié)果見表2。

表2 奇管沖劑對(duì)氨水引發(fā)小鼠咳嗽的影響±s)

2.2.3 對(duì)枸櫞酸引發(fā)豚鼠咳嗽的影響 奇管沖劑高、中劑量組能明顯延長(zhǎng)豚鼠咳嗽的潛伏期,減少咳嗽次數(shù)。復(fù)方茶堿片能減少咳嗽的次數(shù),對(duì)咳嗽潛伏期有延長(zhǎng)的趨勢(shì)。結(jié)果見表3。

表3 對(duì)枸櫞酸引發(fā)豚鼠咳嗽的影響±s)

2.2 祛痰作用—對(duì)小鼠酚紅法祛痰試驗(yàn)的影響 奇管沖劑各劑量組和止咳桔紅丸均能明顯增加酚紅的排出量,表現(xiàn)出明顯的祛痰作用。結(jié)果見表4。

表4 奇管沖劑對(duì)小鼠酚紅法祛痰試驗(yàn)的影響±s)

表5 奇管沖劑對(duì)組織胺引發(fā)豚鼠哮喘的影響±s)

2.3 平喘作用—對(duì)藥物引發(fā)豚鼠哮喘的影響 奇管沖劑5 g/kg給藥組和復(fù)方茶堿片均能明顯延長(zhǎng)豚鼠發(fā)生哮喘的潛伏期。結(jié)果見表5。

2.4 毒性試驗(yàn)結(jié)果

2.4.1 急性毒性試驗(yàn)結(jié)果 奇管沖劑以81 g/(kg·d)的劑量給藥后,動(dòng)物狀態(tài)良好。因此急性毒性試驗(yàn)中奇管沖劑的最大給藥量為81 g/kg,此給藥量相當(dāng)于臨床用量的354.4倍。

2.4.2 長(zhǎng)期毒性結(jié)果 各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果表明,動(dòng)物給藥期間活動(dòng)自如,皮毛光亮,進(jìn)食進(jìn)水及體重沒有明顯的差異,臟器指數(shù)各組之間沒有明顯的差異;血液學(xué)、血液生化學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)也未見明顯的異常;病理學(xué)檢查表明,各組之間沒有明顯的病理改變。

3 討論

奇管沖劑是用于治療慢性氣管炎、支氣管炎的新藥。實(shí)驗(yàn)證明,其能保護(hù)呼吸道上下皮感受器,使之免受二氧化硫、氨水和枸櫞酸等化學(xué)物質(zhì)的刺激,延長(zhǎng)上述化學(xué)物質(zhì)引發(fā)小鼠咳嗽的潛伏期,表現(xiàn)出明顯的鎮(zhèn)咳作用;同時(shí)能通過促進(jìn)呼吸道粘液腺的分泌功能,促進(jìn)酚紅的排出量增加,進(jìn)而使痰液變稀,易于咳出,起到祛痰作用;奇管沖劑也能使磷酸組織胺和氯化乙酰膽堿引發(fā)哮喘的潛伏期明顯延長(zhǎng),具有一定的平喘作用。同時(shí)另有實(shí)驗(yàn)證明奇管沖劑能明顯抑制小鼠二甲苯耳水腫和大鼠棉球肉芽組織增生,具有一定的抗炎作用。這表明奇管沖劑對(duì)呼吸系統(tǒng)疾病的發(fā)生既能起到預(yù)防作用,同時(shí)又有治療作用。這與臨床上的用于治療老年慢性氣管炎的療效相吻合。而毒性結(jié)果表明,奇管沖劑安全范圍較大,長(zhǎng)期給藥沒有明顯的毒副反應(yīng)發(fā)生。本研究為馬加木的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。

[1] 于明,李銑.花楸屬植物化學(xué)成分藥理作用及其研究進(jìn)展.遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2004,6(5):364-366.

[2] 徐淑云,卞如濂,陳修. 藥理試驗(yàn)方法學(xué).第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1991:1165-1168,1182.

Study of Qiguan medicinal instant granules for relieving cough and reducing sputum and asthma and toxicity

ZHOUJi-hu,DINGTao,WENFu-chun,XUHui-bo.

JilinresearchinstituteofTCMandPharmacy,Changchun130012,China

Objective Stopping coughing and asthma and reducing sputum of Qiguan medicinal instant granules were observed, toxicity reaction were also studied. Methods Through cough models of mice and guinea pigs induced by chemical drugs such as sulfur dioxide and ammonia and citric acid, the effects of relieving cough were observed. The role for eliminating sputum was evaluated by tracheal segment phenol red excretion assay. The anti-asthmatic effect was studied by mixing up histamine phosphate and acetylcholine chloride induced asthmatic to guinea pigs. Acute and chronic toxicity tests were researched as well. Results It could prolong mouse’s cough incubation, reduce cough frequencies, it could increase trachea secreting phenol red, also could prolong the asthma incubation. The maximal oral dose on mice was 81 g/kg, and no clearly toxicity reaction in the long-term toxicity. Conclusion In these experiments, Qiguan medicinal instant granules had evident effects of relieving cough and reducing sputum and relieving asthma, and it was safe.

Qiguan medicinal instant granules; Relieving cough; Reducing sputum; Anti-asthma

130012吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院

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