劉淑華

(遼寧省朝陽(yáng)市藥品檢驗(yàn)所，遼寧 朝陽(yáng) 122000)

尼美舒利為非甾體抗炎藥，具有抗炎、鎮(zhèn)痛、解熱作用，主要用于慢性關(guān)節(jié)炎、手術(shù)和急性創(chuàng)傷后的疼痛及原發(fā)性痛經(jīng)的癥狀治療。尼美舒利膠囊現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)采用紫外分光光度法測(cè)定含量[1－2]，專屬性不強(qiáng)。筆者建立了反相高效液相色譜法測(cè)定含量[3]，方法可行、靈敏、準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好，可用于尼美舒利膠囊的含量測(cè)定，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Waters e2695－2489型高效液相色譜儀，Empower2色譜工作站。尼美舒利對(duì)照品(批號(hào)為100555－200501，中國(guó)藥品生物制品檢定所);尼美舒利膠囊(廣州白云山制藥總廠，批號(hào)分別為1110001，1110002，1110003);乙腈為色譜純，磷酸為分析純，水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱:Kromasil C18柱(150 mm × 4.6 mm，5 μm);流動(dòng)相:0.1%磷酸(用氨水調(diào)解 pH至7.0)－乙腈(56∶44);流速:1.0 mL/min;柱溫:室溫;檢測(cè)波長(zhǎng):403 nm;進(jìn)樣量:10 μL。在此色譜條件下，理論板數(shù)以尼美舒利峰計(jì)算不低于5 000，拖尾因子1.03，尼美舒利與相鄰雜質(zhì)峰之間的分離度均大于1.5。

2.2 溶液制備

精密稱取105℃干燥至恒重的尼美舒利對(duì)照品59.25 mg，置50 mL容量瓶中，超聲處理10 min使溶解，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品貯備液。精密量取對(duì)照品貯備液5 mL，置50 mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置25 mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液。取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混合均勻，稱取適量(約相當(dāng)于尼美舒利12 mg)，精密稱定，置50 mL容量瓶中，加流動(dòng)相適量，超聲處理10 min使溶解，放冷，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液5 mL，置50 mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

專屬性試驗(yàn):稱取尼美舒利膠囊內(nèi)容物4份(約相當(dāng)于尼美舒利12 mg)，分別經(jīng)以下條件破壞，加入1.0 mol/L的鹽酸溶液5 mL破壞后，再加入1.0 mol/L的氫氧化鈉溶液5 mL中和至中性;加入1.0 mol/L的氫氧化鈉溶液5 mL破壞后，再加入1.0 mol/L的鹽酸溶液5 mL中和至中性;干燥箱180℃加熱2 h;經(jīng)4 000 lx光照24 h。取上述經(jīng)酸、堿、強(qiáng)熱及光照破壞的產(chǎn)物，照2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，記錄色譜圖。結(jié)果表明，尼美舒利與各降解產(chǎn)物分離良好，分離度均大于1.5，說(shuō)明該法專屬性良好(見(jiàn)圖1)。

圖1 專屬性試驗(yàn)色譜圖

線性關(guān)系考察:精密量取對(duì)照品貯備液10 mL，置50 mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取1.0，2.0，5.0，10.0，15.0 mL，分別置 50 mL 容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，進(jìn)樣 10 μL，測(cè)定峰面積。以進(jìn)樣量(μg，X)為橫坐標(biāo)、峰面積(Y)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得 Y=1 992 384.46 X+1 581.45，r=0.999 9(n=5)。結(jié)果表明，尼美舒利進(jìn)樣量在0.047 4 ～0.711 0 μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn):取對(duì)照品溶液，連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣5次，計(jì)算峰面積。結(jié)果的 RSD為0.42%，證明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn):取供試品溶液，在室溫條件下放置，分別于0，2，4，8，12 h 時(shí)依法測(cè)定峰面積，結(jié)果的 RSD 為 0.62%(n=5)，表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

重現(xiàn)性試驗(yàn):取同一批號(hào)的供試品，按2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液5份，依法測(cè)定含量。結(jié)果平均含量為99.0%(RSD=0.31%)，表明該方法重現(xiàn)性良好。

加樣回收試驗(yàn):精密稱取樣品(批號(hào)為1110001，99.5%)6份，分為3組，每組分別精密加入對(duì)照品貯備液4，5，6 mL，配成低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度，按2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，依法測(cè)定回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 尼美舒利加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

2.4 樣品含量測(cè)定

取尼美舒利對(duì)照品溶液及供試品溶液各10 μL，進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，按外標(biāo)法計(jì)算，批號(hào)為1110001，1110002，1110003的3批樣品中含尼美舒利分別為標(biāo)示量的99.0%，99.1%，99.4%，用現(xiàn)行方法測(cè)定結(jié)果分別為標(biāo)示量的99.5%，99.4%，99.8%。

3 討論

以流動(dòng)相為溶劑，用島津UV－2550型紫外分光光度計(jì)測(cè)定，尼美舒利在403 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，且吸收強(qiáng)度較大，故在此波長(zhǎng)處測(cè)定含量。曾選擇甲醇代替流動(dòng)相中的乙腈，但峰形較差，用本法的流動(dòng)相峰形對(duì)稱(拖尾因子為1.03)，理論板數(shù)較高，符合系統(tǒng)適應(yīng)性的要求。本法具有較寬的線性范圍和較高的回收率，結(jié)果簡(jiǎn)便、可靠、準(zhǔn)確?？疾旖Y(jié)果表明，用反相高效液相色譜法測(cè)定尼美舒利膠囊的含量可行。經(jīng)破壞試驗(yàn)驗(yàn)證，尼美舒利主峰與各降解產(chǎn)物分離良好，能夠排除降解產(chǎn)物的干擾，專屬性強(qiáng)，可有效地控制尼美舒利膠囊的質(zhì)量。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(二部)[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:225－226.

[2]WS1－(X－233)－2003Z－2011，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn) [S].

[3]張先洲，羅順德，劉 莉.尼美舒利片的HPLC測(cè)定[J].中國(guó)工業(yè)醫(yī)藥雜志，1998，29(4):182－183.