李 力，楊桂芳，漆詠梅，吳惠玲

(1武漢市普仁醫(yī)院，武漢430081;2武漢大學中南醫(yī)院)

研究表明，趨化因子CXCL12及其受體CXCR4構成的信號轉導通路與腫瘤細胞的增殖潛能和靶器官轉移密切相關，但其在胃癌組織中的表達及其與腫瘤浸潤、轉移關系的報道較少。本研究應用免疫組化法檢測了50例胃癌患者癌組織中的CXCL12及CXCR4表達，并探討二者在胃癌浸潤及淋巴結轉移中表達的臨床意義。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 選擇武漢市普仁醫(yī)院2005～2010年收治的胃癌患者50例，男23例、女27例，年齡45～80

歲，術前均未行放、化療。收集患者術后胃癌組織標本，組織學分類為乳頭狀腺癌13例、管狀腺癌15例、黏液腺癌11例、印戒細胞癌11例，其中40例伴淋巴結轉移(胃周淋巴結轉移癌)。同時選取上述患者距胃癌組織5 cm以上的正常胃黏膜組織(癌旁正常組織)作對照，病理切片證實無增生及腫瘤病變。

1．2 方法

1．2．1 檢測方法 將受檢者石蠟標本切4μm厚切片，烤干，以松節(jié)油脫蠟、梯度濃度乙醇脫水，用3%雙氧水消除內源性過氧化物酶活性、檸檬酸修復液修復，玻片封閉后在孵育盒中孵育，暴露抗原;然后加入血清、一抗及二抗，行DBA顯色，蘇木精復染。采用免疫組化SP法檢測各組織中的CXCR4、CXCL12。結果由兩位病理醫(yī)師雙盲評定，以細胞膜和細胞質內出現(xiàn)淺黃色、棕黃色著色顆粒，顯色面積至少25%判定為陽性表達。

1．2．2 統(tǒng)計學方法 采用SPSS13．0統(tǒng)計軟件，數(shù)據比較用χ2檢驗。P≤0．05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2．1 CXCR4及CXCL12在各組織中的表達 見表1。表1顯示，胃癌組織及胃周淋巴結轉移癌組織的CXCR4、CXCL12陽性表達率均高于癌旁正常組織(P均＜0．05)，陽性表達主要位于細胞膜和細胞質。

表1 CXCR4、CXCL12在各組織中的表達比較［例(%)］

2．2 CXCL12及CXCR4與胃癌患者臨床病理特征的關系 見表2。表2顯示，CXCL12及CXCR4在胃癌浸潤至肌層漿膜者和有淋巴結轉移者中呈高表達。CXCL12和CXCR4表達與患者的性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤大小、組織學分型及腫瘤分化程度無明顯相關性。

表2 CXCR4及CXCL12與胃癌患者臨床病理特征的關系(n=50)

3 討論

胃癌是消化道最常見的惡性腫瘤，其轉移率、病死率高。近年來，趨化因子及其受體在腫瘤浸潤生長及淋巴結轉移過程中的作用成為研究的熱點。研究表明，CXCR4/CXCL12可調節(jié)多種腫瘤細胞增殖［1］，在多種腫瘤浸潤及淋巴結轉移中發(fā)揮作用［2］，其中 CXCR4在乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌及惡性黑色素瘤等23種腫瘤中表達［3］，但目前對其在胃癌組織中的表達及其與腫瘤浸潤轉移的關系報道較少。

趨化因子是具有趨化作用的細胞因子，目前已發(fā)現(xiàn)幾十種，這些因子多為小分子多肽。趨化因子根據結構內半胱氨酸的位置分為4個亞族，即C、CC、CXC及CX3X，其對應的受體分別為XCR、CCR、CXCR與CX3C［4］。趨化因子及受體的相互作用對免疫細胞的分化、黏附及遷移起重要作用，參與炎癥及組織修復的免疫反應。某些趨化因子可直接刺激腫瘤細胞生長，有的則通過促進瘤組織內新血管形成促進腫瘤生長。研究表明，趨化因子及受體與腫瘤的遷移、轉移密切相關。CXCL12又稱基質細胞源性因子，屬于趨化因子CXC亞家族，編碼區(qū)含267 bp，編碼89個氨基酸殘基多肽。CXCL12由基質細胞持續(xù)分泌，CXCR4是其惟一的受體。CXCR4編碼352個氨基酸，也是CXCL12惟一的配體。近年研究顯示，CXCL12和CXCR4廣泛表達于心、腦、腎、肺、肝等組織。對乳腺癌患者的研究發(fā)現(xiàn)，其CXCR4抗體明顯升高;對乳腺癌動物模型應用CXCR4拮抗劑T140治療后，發(fā)現(xiàn)其陽性表達明顯降低，提示其抑制了乳腺癌轉移的發(fā)生［5］。對結直腸癌的研究顯示，CXCL12和CXCR4與癌組織局部浸潤及淋巴結轉移密切相關。卵巢上皮性癌原發(fā)灶的CXCL12和CXCR4表達陽性率分別為91%和59%［6，7］。研究表明，CXCL12 和 CXCR4 參與了肝細胞肝癌的發(fā)生、發(fā)展［8］。對膠質瘤的研究證實，CXC12/CXCR4生物學軸在介導膠質瘤生長、侵襲性及新生血管形成中具有重要作用，并與高級別膠質瘤中血管生成的水平和腫瘤的惡性程度及患者的預后密切相關［9］。而對腺樣囊性癌的研究說明，CXCL12/CXCR4在癌組織嗜神經浸潤過程中具有一定的作用［10］。本研究結果顯示，CXCR4和 CXCL12在胃癌組織中的表達明顯高于癌旁正常組織，表明二者在胃癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。

研究表明，趨化因子CXCL12、CXCR4在腫瘤的轉移中發(fā)揮重要作用［11］。本研究發(fā)現(xiàn)，CXCR4、CXCL12在浸潤深的胃癌及轉移淋巴結組織中表達較高，進一步證實CXCR4和CXCL12與胃癌轉移密切相關。其可能機制為腫瘤的侵襲與轉移本身可分泌多種趨化因子并表達其受體，進一步刺激腫瘤生長;而腫瘤生長又與腫瘤血管的生成密切相關，CXCR4在許多器官血管內皮細胞中高表達，而CXCL12是血管內皮細胞趨化誘導劑［12］，因此，CXCR4和CXCL12高表達可能反過來促進腫瘤的侵襲與轉移。

綜上所述，CXCR4和CXCL12高表達可促進胃癌的浸潤及淋巴結轉移。檢測CXCR4在胃癌組織中的表達可預測患者的預后，CXCR4和CXCL12檢測可作為判斷胃癌患者癌轉移或復發(fā)的參考指標。

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