漆 萍，鐘方才，萬(wàn)小濤，鄧文英，吳垚林

(1.內(nèi)江市中心血站;2.內(nèi)江第一人民醫(yī)院，四川 內(nèi)江 641000)

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丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase，ALT)是臨床評(píng)價(jià)肝功能的常用指標(biāo)［1］，衛(wèi)生部將ALT 作為采供血機(jī)構(gòu)篩查獻(xiàn)血者必檢項(xiàng)目之一［2］。但是ALT 是非特異性的指標(biāo)，在飲酒、運(yùn)動(dòng)、藥物以及標(biāo)本溶血等情況下也會(huì)使ALT 升高［3－5］。據(jù)文獻(xiàn)［6－9］報(bào)道ALT 檢測(cè)的預(yù)期效果低，許多假陽(yáng)性導(dǎo)致正常血液被處理，對(duì)于血液資源是較嚴(yán)重的浪費(fèi)。核酸擴(kuò)增技術(shù)(nucleic acid amplification techniques，NAT)主要是直接檢測(cè)病毒DNA 或RNA，具有較高的靈敏度和特異性。本文研究探討ALT 作為血液質(zhì)量判斷指標(biāo)的價(jià)值，以及利用NAT 檢測(cè)其是否攜帶病毒，評(píng)價(jià)NAT 的篩選價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源

選擇2012 年7 月至8 月通過(guò)體格檢查與血液HBsAg(金標(biāo)法)初篩合格的無(wú)償獻(xiàn)血者標(biāo)本3 675份，選出ALT ＞40 U/L 的標(biāo)本397 份。

1.2 主要儀器與試劑

日本日立7600 全自動(dòng)生化分析儀;瑞士Mcrolab STAR 全自動(dòng)加樣系統(tǒng);瑞士ML-FAME2420 全自動(dòng)酶免操作系統(tǒng);達(dá)安DA-7600PCR 擴(kuò)增儀。HBsAg 初篩采用HBsAg 金標(biāo)法(艾康生物技術(shù)有限公司，批號(hào)201112196/3.3)，復(fù)檢標(biāo)本ALT 檢測(cè)使用速率法(四川邁克，批號(hào)0912151)。HBsAg、抗-HCV 均采用酶免法: HBsAg (廈門新創(chuàng)，批號(hào)2012085119;Murex，批號(hào)D107810);抗-HCV(北京萬(wàn)泰，批號(hào)C20120712; Murex，批號(hào)V907120)。HBV-DNA(達(dá)安基因有限公司，批號(hào)2012016)、HCV-RNA(達(dá)安基因有限公司，批號(hào)2012005)。所有的試劑均有批檢，并在有效期內(nèi)使用。

1.3 方法

在采集獻(xiàn)血者的血液時(shí)同時(shí)留取ELISA 檢測(cè)管和核酸檢測(cè)管。將對(duì)經(jīng)過(guò)初篩合格且使用速率法檢測(cè)ALT ＞40 U/L 的397 份標(biāo)本使用上述兩種不同廠家的試劑檢測(cè)HBsAg、抗-HCV，其方法按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。同時(shí)對(duì)397 份標(biāo)本采用NAT 進(jìn)行HBV-DNA 和HCV-RNA 的檢測(cè)，按照操作說(shuō)明書進(jìn)行。每次檢測(cè)均設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照，嚴(yán)格按試劑說(shuō)明書的要求判定結(jié)果。

2 結(jié)果

3 675 份無(wú)償獻(xiàn)血者標(biāo)本中篩選出397 份ALT＞40 U/L，其血液的不合格率為10.80%。在397份ALT 升高的獻(xiàn)血者標(biāo)本中，有389 份(97.99%)標(biāo)本的HBsAg 和抗-HCV 定性均為陰性，HBV-DNA和HCV-RNA 定量均＜1.0 ×103IU/mL;有3 份標(biāo)本HBsAg 定性為陽(yáng)性，HBV-DNA 定量呈現(xiàn)高拷貝數(shù);有4 份標(biāo)本抗-HCV 定性為陽(yáng)性，HCV-RNA 定量呈現(xiàn)高拷貝數(shù);有1 份標(biāo)本的HBV-DNA 定量呈現(xiàn)高拷貝數(shù)，但是HBsAg 和抗-HCV 定性均為陰性。其具體結(jié)果，見表1。

表1 8 份NAT 陽(yáng)性標(biāo)本的結(jié)果

3 討論

ALT 主要存在于肝臟組織中，其次為腎臟、心等。ALT 是肝臟損傷的敏感指標(biāo)，尤其是病毒性肝炎的重要標(biāo)志。但是飲食不規(guī)律、抽煙嗜酒等都可能導(dǎo)致ALT 升高，Morisco 等［10］研究報(bào)道在沒(méi)有病毒攜帶的人導(dǎo)致ALT 升高的主要原因是身體質(zhì)量指數(shù)的超標(biāo)。且有文獻(xiàn)［3］報(bào)道在所有獻(xiàn)血者血液報(bào)廢的原因分析中ALT 不合格是血液報(bào)廢的首要原因。本研究中3 675 份無(wú)償獻(xiàn)血者標(biāo)本篩選出397 份ALT ＞40 U/L，其血液的不合格率為10.80%。與文獻(xiàn)［11］報(bào)道的ALT 報(bào)廢率為1.99%相比，本研究中的比例要高很多。因此我們更應(yīng)對(duì)ALT 作為血液質(zhì)量判斷指標(biāo)的價(jià)值進(jìn)行評(píng)價(jià)。

ELISA 方法的試劑靈敏度偏低且檢測(cè)獻(xiàn)血者的HBsAg 或抗-HCV 受被檢者是否處于感染窗口期及感染后抗原或抗體滴度的影響。據(jù)文獻(xiàn)［12］報(bào)道HBV 血清轉(zhuǎn)換前窗口期與隱匿性HBV 感染獻(xiàn)血者是導(dǎo)致HBsAg 篩查后輸血傳播感染HBV 殘余風(fēng)險(xiǎn)的主要原因。NAT 主要是直接檢測(cè)病毒DNA 或RNA 具有高靈敏度和高特異性。有文獻(xiàn)［13］報(bào)道采用高靈敏度的NAT 篩查獻(xiàn)血者血液中的HBV 和HCV，有助于提高輸血及血液安全。

本文研究的是在ALT 升高的獻(xiàn)血者中利用ELISA 檢測(cè)HBsAg 和抗-HCV，利用NAT 檢測(cè)HBVDNA 和HCV-RNA。其結(jié)果顯示在397 份ALT 升高的獻(xiàn)血者標(biāo)本中有389 份(97.99%)標(biāo)本的HBsAg和抗-HCV 定性均為陰性且定量結(jié)果HBV-DNA 和HCV-RNA 均＜1.0 ×103IU/mL?？梢娢覀冄芯康臉?biāo)本中ALT 升高大部分都不是由于感染病毒所導(dǎo)致。在全國(guó)血源如此緊張的情況下，如果我們將這一批血源視為不合格，這將是很大的資源浪費(fèi)。本研究中的222 號(hào)標(biāo)本是在HBsAg 和抗-HCV 定性均為陰性的情況下檢出HBV-DNA 的拷貝數(shù)為4.34 ×107IU/mL，與文獻(xiàn)［5］報(bào)道的采用ELISA 不能完全確保血液的安全性其觀點(diǎn)較一致。Shang 等［14］報(bào)道他們利用NAT 技術(shù)在2 例HBsAg 定性陰性的獻(xiàn)血者中檢出HBV-DNA 定量的拷貝數(shù)分別為1.12 ×107IU/mL、2.75 ×107IU/mL，這表明用NAT 來(lái)檢測(cè)獻(xiàn)血者病毒含量有著極其重要的作用。

由于諸多因素可導(dǎo)致血液的ALT 升高，若將ALT 升高作為判斷獻(xiàn)血者血液質(zhì)量指標(biāo)，必將造成大量可用血液被報(bào)廢、獻(xiàn)血者供血期延長(zhǎng)、血液資源進(jìn)一步緊張。因此，ALT 作為判斷血液質(zhì)量指標(biāo)的價(jià)值可信度低，實(shí)用性差，科學(xué)性不強(qiáng)。我們推薦使用特異性和靈敏度較高的NAT 作為獻(xiàn)血者血液質(zhì)量檢測(cè)，以期更能真實(shí)的判斷血液質(zhì)量，保證有限的血源不被浪費(fèi)。

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