吳才良 龍瓊先 劉欣雅

【摘 要】目的：探討前列腺增生電切術(shù)后碎塊組織標本的病理檢查方法及免疫組化染色在診斷可疑前列腺癌病例中的作用。方法：回顧性觀察738例前列腺增生電切術(shù)后碎塊組織的常規(guī)HE染色及部分病例的免疫組化染色結(jié)果，統(tǒng)計分析其中診斷為PCa的病例。結(jié)果：738例前列腺增生術(shù)后碎塊組織標本中，鏡下形態(tài)結(jié)合免疫組化染色結(jié)果診斷為惡性的病例有89例（12.0%），其中88例為PCa病例，另有1例為非寉奇金氏淋巴瘤；41例可疑病例經(jīng)免疫組化染色后診斷為前列腺癌的有19例。結(jié)論：前列腺增生電切術(shù)后碎塊組織中可能存在前列腺癌，免疫組化染色在可疑病例中的診斷具有重要的作用。

【關(guān)鍵詞】前列腺增生；前列腺腫瘤； 病理檢查； 免疫組織化學

前列腺增生癥（benign prostatic hyperplasia， BPH） 是老年男性的常見疾病，其中25%有癥狀的BPH需手術(shù)治療，目前常用的手術(shù)方法是行經(jīng)尿道前列腺電切術(shù)（TURP）。研究報道，前列腺增生術(shù)后標本中可能伴有前列腺癌（prostate cancer， PCa）。而臨床送檢標本多為前列腺碎塊組織，如何在無數(shù)碎塊組織的診斷中不漏診Pca，尤其是一些疑難病例，這是病理醫(yī)生必須解決的問題。為此，本文針對送檢BPH碎塊組織的取材、制片及診斷方法做一探討。

1 材料與方法

1.1 材料 收集本院2009年至2012年臨床診斷為前列腺增生的經(jīng)尿道前列腺電切術(shù)后碎塊組織標本738例，年齡38歲到87歲，平均為71歲。選用CK34βE12、P63、P504S、PSA、PSAP等抗體，抗體均從北京中杉生物公司購買。

1.2 方法 前列腺碎塊組織標本經(jīng)常規(guī)取材、脫水、浸蠟包埋后，切片、HE染色，顯微鏡下觀察病變。對可疑病例進行免疫組化染色，其方法如下：石蠟切片脫蠟至水，PBS液沖洗。用PH為6.0的檸檬酸鹽緩沖液對組織抗原進行修復(fù)。3% H2O2室溫下孵育10min，PBS液沖洗。滴加正常山羊血清工作液，室溫孵育20分鐘，傾去液體。滴加稀釋好的一抗（1：50）50ul，4℃孵育過夜，PBS緩沖液沖洗。滴加生物素化二抗工作液，37℃孵育15分鐘，PBS沖洗。滴加辣根酶標記鏈酶卵白素工作液，37℃孵育15分鐘，PBS液沖洗。DAB顯色，自來水沖洗，以蘇木素復(fù)染細胞，中性樹膠封固切片。

1.3 免疫組化染色結(jié)果判斷 CK34βE12、P504S、PSA、PSAP以細胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，P63以細胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，無棕黃色顆粒出現(xiàn)即為陰性，出現(xiàn)微灶性或散在棕黃色顆粒為可疑陽性。

2 結(jié)果

2.1 BPH術(shù)后標本中的PCa病例 在738例臨床送檢前列腺增生電切術(shù)標本，共發(fā)現(xiàn)有惡性病例89例（12.0%），其中88例為PCa病例，另有1例為非寉奇金氏淋巴瘤。經(jīng)常規(guī)HE染色后直接診斷為PCa的有69例，可疑病例41例。41例可疑病例經(jīng)免疫組化染色后，其中19例診斷為PCa，1例診斷為非寉奇金氏淋巴瘤。

2.2 相關(guān)免疫標記在PCa中的表達 CK34βE12在腺泡基底細胞胞漿中特異性著色，P63在腺泡基底細胞胞核上特異性著色，P504S、PSA、PSAP在PCa中癌細胞中呈陽性表達，具體表達情況見圖1。

3 討論

BPH是老年男性常見疾病，其治療方式多為經(jīng)尿道前列腺電切術(shù)，所送病理活檢組織為前列腺碎塊組織。有資料報告，PCa患者前列腺內(nèi)都有BPH結(jié)節(jié)狀病變，有的結(jié)節(jié)內(nèi)同時會有腺癌和部分癌變或不典型增生腺體上皮細胞，說明PCa與BPH有一定形態(tài)學聯(lián)系[1]。Sakr等[2]報道年齡在40歲～49歲的男性病人中，發(fā)現(xiàn)組織學可以診斷為PCa的發(fā)生率高達34%；而在30歲～39歲組中則為27%，但均無臨床癥狀，故早期發(fā)現(xiàn)PCa有著重要的作用。趙宏等[3]報道BPH術(shù)后有7例發(fā)現(xiàn)了PCa。但要在無數(shù)碎塊小組織中判斷是否隱匿有癌灶，對病理技術(shù)及診斷均有一定的要求。

就臨床送檢前列腺碎塊組織標本，在常規(guī)取材及診斷方面應(yīng)注意一下幾點：1）碎塊組織標本應(yīng)全部送檢，以免漏診。2）每一包埋盒不要放太多組織，避免脫水不好、包埋不平而影響切片質(zhì)量，建議每一盒最好不要超過8塊。3）應(yīng)做連續(xù)切片，王剛等[4]報道前列腺標本間隔5 mm切片，偶發(fā)癌的比例為27%，如果切片間隔2～3 mm，偶發(fā)癌的比例達到41%。4）鏡下觀察前列腺碎塊組織標本時一定要細心，不能漏看任何一小塊組織，對明確的病例可以直接報告為PCa，對疑為癌的病例應(yīng)做進一步檢查。本研究中，經(jīng)常規(guī)HE染色后能直接診斷為癌的病例有69例，另有疑為癌病例41例。

對于可疑病例，目前最常用的檢查方法是免疫組化染色。針對前列腺癌的診斷及鑒別診斷，常用的抗體有CK34βE12、P63、P504S、PSA、PSAP、PSMA。其中CK34βE12、P63可以觀察到基底細胞是否存在，有助于前列腺癌的診斷，P504S、PSA、PSAP、PSMA在Pca中表達陽性，而BPH中表達陰性。研究認為CK34βE12在前列腺癌中的染色具有不確定性，對于少數(shù)病例，僅用CK34βE12來說明基底細胞的存在或缺失具有局限性，應(yīng)聯(lián)合應(yīng)用P63檢測基底細胞[5-6]。PSA對PCa有很強的特異性，但其敏感性卻不佳，有少數(shù)PCa病例不表達該標記物。PSAP比PSA敏感性強，特別是在低分化的PCa上。然而，有一些專家稱有5%的低分化PCa是不表達這兩種抗原的，PSMA在識別這部分并不表達PSA和PAP的低分化PCa上特別有用。有報道稱PSMA對PCa的陽性檢出率要明顯高于PSA（分別為94.28%、78.57%）[7]。最近有研究認為SPON2能發(fā)現(xiàn)PSA陰性的PCa病例，是一個敏感性及特異性均好的免疫標記[8]。應(yīng)用免疫組化技術(shù)，用34βE12、P63染基底細胞，用P504S、PSA、PSAP、PSMA染癌細胞，并用PSA、PSAP、PSMA與其它惡性腫瘤進行鑒別，能夠提高PCa、BPH診斷的準確性。

綜上所述，對臨床送檢的前列腺碎塊組織標本，病理醫(yī)生一定要從取材、切片及診斷多方面做好工作，以免漏診PCa病例。對于可疑病例，一定不能放過，應(yīng)聯(lián)合應(yīng)用多種免疫標記進行免疫組化染色，排除有無癌變。

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