王曉華 王彥錚
抗核抗體(ANA)與ENA結(jié)果及其相關(guān)性分析
王曉華 王彥錚
目的 比較抗核抗體(ANA)熒光核型與抗可提取性核抗原(ENA)抗體結(jié)果之間的相互關(guān)系。方法ANA用間接免疫熒光法(IIF),ENA采用歐蒙印跡法。結(jié)果 1000例抗ENA抗體陽性病例中ANA陽性97.6 %, 1100例ANA陽性的病例ENA抗體陽性率為84%。結(jié)論 ANA陽性, ENA常規(guī)檢測項目未必都能檢出, 說明若ENA常規(guī)檢測陰性, 應(yīng)進一步做其他抗體檢測。而ENA抗體陽性的病例, ANA抗體絕大多數(shù)陽性, 陽性率達97.%??梢哉f明用猴ANA陽性的病例ENA不一定全是陽性;抗ENA抗體陽性的病例其ANA也不一定全陽性, ANA與ENA聯(lián)合常規(guī)檢測, 對風(fēng)濕免疫病的早期診斷, 鑒別和治療更有價值。
抗核抗體;抗ENA抗體
抗核抗體(ANA)是傳統(tǒng)認為抗細胞核內(nèi)成分的抗體。目前隨著免疫熒光技術(shù)的改進和分子生物學(xué)的發(fā)展, 對ANA的理解已不再局限于核成分, 而是指抗核酸和核蛋白抗體的總稱。根據(jù)細胞內(nèi)各分子的理化特性和分布部位將ANA分為四大類:包括抗DNA抗體, 抗組蛋白抗體, 抗非組蛋白抗體, 抗核仁抗體??狗墙M蛋白抗體是指不含組蛋白, 而可被鹽水提取的可溶性核抗原抗體, 故通常稱抗ENA抗體。其包括抗Sm、U1RNP、SSA、SSB、SCL-70、Jo-1、rRNP、PM-1、KU、PCNA、RA、Mi-2、Sa、PL-7、Filaggrin等抗體。這些抗體對風(fēng)濕性疾病的診斷和鑒別診斷具有極大的幫助。本文統(tǒng)計了ANA與前六種抗ENA抗體之間結(jié)果對照, 旨在探討不同種類的ENA抗體陽性的病例與其ANA結(jié)果及不同核型之間的相關(guān)性。
1.1 一般資料 所有標(biāo)本均來源于2009年1月~2012年12 月在本院就診的門診和住院患者。
1.2 ANA檢測方法 ANA用間接免疫熒光法(IIF)。篩選實驗檢測試劑盒是德國ENROIMMUN公司的產(chǎn)品。試劑盒商品號:FA1570-1005;每個反應(yīng)區(qū)2種抗原復(fù)合基質(zhì):猴肝組織和HEP-2細胞。ANA滴度測定用協(xié)和醫(yī)院熒光室制備的HEP-2細胞抗原基質(zhì)片。檢測步驟嚴格按說明書操作。
1.3 ENA檢測方法 ENA采用歐蒙印跡法。檢測試劑盒是德國ENROIMMUN公司的產(chǎn)品。試劑盒商品號:DL1590-1601;每人份可以檢測抗Sm、U1RNP、SSA、SSB,SCL-70、Jo-1六種不同抗原種類抗體。檢測步驟嚴格按說明書操作。
2.1 1000例抗ENA抗體(抗Sm、U1RNP、SSA、SSB、SCL-70、Jo-1)陽性病例ANA陽性976例, 統(tǒng)計結(jié)果見表1。
表1 ENA陽性病例的ANA結(jié)果及各種核型比例
2.2 1100例ANA陽性的病例(滴度在1: 100~1280之間),ENA抗體陽性的930例,陰性的170例,陽性率為84.5%。
風(fēng)濕性疾病的一大特征是患者血液中自身抗體的出現(xiàn)。 隨著對風(fēng)濕免疫病研究的深入, 目前國內(nèi)外的許多醫(yī)院已經(jīng)開展了這些自身抗體的檢測, 特別是ANA和ENA抗體的檢測。臨床醫(yī)生要求實驗室對ANA陽性的患者除了檢測其滴度外, 還要分清是哪一類型的ANA。因為患者血清中存在不同性質(zhì)的特異性的ANA, 同檢測底物靶抗原結(jié)合, 而呈現(xiàn)形態(tài)各異的熒光染色核型。通過熒光核型分析, 可初步判斷相應(yīng)抗體性質(zhì)范圍, 從而進一步檢測特異性抗體。
本研究分析了1000例抗ENA抗體中六種不同特異性抗體陽性時的ANA結(jié)果及核型分析和1100例ANA陽性時的ENA結(jié)果統(tǒng)計。結(jié)果表明, ANA陽性, ENA常規(guī)檢測項目未必都能檢出, 本文統(tǒng)計陽性率僅為85%左右。說明若ENA常規(guī)檢測陰性,應(yīng)進一步做其他抗體檢測。而ENA抗體陽性的病例, ANA抗體絕大多數(shù)陽性, 陽性率達97.%??梢哉f明用猴肝組織和HEP-2細胞聯(lián)合作底物檢測ANA結(jié)果很好, 大大提高了檢測陽性率。
從理論上講, ANA熒光核型斑點型主要與ENA有關(guān), 并且抗Sm、抗U1RNP抗體陽性時的ANA熒光核型表現(xiàn)為粗顆粒, 且在兩種基質(zhì)中反應(yīng)強度一致;抗SSA、SSB抗體表現(xiàn)為細顆粒, 在兩種基質(zhì)中反應(yīng)強度不一致, 在肝組織明顯較弱, 且在胞漿含量較豐富;抗SCL-70表現(xiàn)為核仁型;抗Jo-1表現(xiàn)為 胞漿顆粒型。從統(tǒng)計結(jié)果看, 各種核型都占有一定比例, 且較分散。抗Sm、抗U1RNP抗體陽性時的ANA熒光核型斑點型占比例較高, 達到80%以上, 抗SSA, SSB抗體陽性時的ANA熒光核型最分散,斑點型僅占35%~48%, 其他核型也占較高比例??筍CL-70陽性時的ANA結(jié)果確實與核仁有關(guān), 但也可以核仁與其他核型并存。因抗SCL-70抗體是系統(tǒng)性硬皮病的特異性抗體, 所以可以說ANA表現(xiàn)為核仁陽性時與PSS有關(guān)??笿o-1抗體陽性病例較少,所以核型很分散。
綜上所述, ANA陽性的病例ENA不一定全是陽性;抗ENA抗體陽性的病例其ANA也不一定全陽性,所以建議臨床醫(yī)生ANA作為自身免疫病的初篩實驗可以, 但最好ANA、ENA作聯(lián)合常規(guī)檢測, 這樣才能對風(fēng)濕免疫病的早期診斷, 鑒別和治療更有價值。
[1]劉海青, 李永哲.不同抗原底物檢測抗核抗體的結(jié)果比較.上海醫(yī)學(xué)檢驗雜志, 2001,16(1):31-33.
[2]鄧學(xué)新, 曲昌華.818例自身免疫病抗ENE抗體與抗核抗體的對照分析, 臨床檢驗雜志, 2005,23(4):302-303.
[3]丁華, 劉和錄, 陳偉光, 等.ENA多肽抗體的檢測對風(fēng)濕病的診斷意義.中國實驗診斷學(xué), 2010,14(8):1299-1300
R446
A
1674-9308(2013)03-0025-02
10.3969/J.ISSN.1674-9308.2013.03.014
264001 山東省煙臺市煙臺山醫(yī)院檢驗科