韓 威，李慧芳，朱云芬，宋 遲，徐文娟

(1.中國農(nóng)業(yè)科學院 家禽研究所,江蘇 揚州 225125；2. 南京農(nóng)業(yè)大學，江蘇 南京 210095)

性早熟在家禽生產(chǎn)上具有重要經(jīng)濟價值，是高產(chǎn)蛋用型和優(yōu)質(zhì)肉用型品種(品系)培育中的一個重要選擇性狀[1-2]。在長期的選擇和進化過程中，我國地方家禽品種資源形成了明顯的早熟特性，如蛋用型的白耳黃雞、仙居雞、濟寧百日雞，肉用型的文昌雞、寧都黃雞、廣西三黃雞等開產(chǎn)日齡都在100～110 d，比國外品種提前20 d以上，比蛋雞專門化品種提前10 d以上；紹興鴨、山麻鴨的開產(chǎn)日齡也在105～110 d[3]。然而，與哺乳類、嚙齒類動物相比，禽類早熟性狀遺傳機理研究相對滯后。由于性早熟在人類上表現(xiàn)為疾病狀態(tài)，因此備受關(guān)注，相關(guān)研究報道較多；尤其是近年來全基因關(guān)聯(lián)分析方法的應(yīng)用，使得研究者對性成熟啟動調(diào)控系統(tǒng)的認識更加深入，更重要的是新發(fā)現(xiàn)了一些關(guān)鍵基因。本文綜述了人類性早熟相關(guān)基因調(diào)控系統(tǒng)研究進展，以期為禽類早熟性狀研究提供煎借鑒。

1 遺傳因素是性成熟啟動調(diào)控的組成

人類的性早熟按照啟動機制的不同可分為：(1)GnRH依賴型性早熟(GnRH-dependent precocious puberty，GDPP)，也稱中樞性或真性性早熟，是由下丘腦-垂體-性腺軸(hypothalamic-pituitary-gonadal axis，HPG)的提前發(fā)動引起的。其表現(xiàn)除了第二性征外，還包括生長加速，骨齡增加和具有生殖能力，且成年身高往往較矮。(2)非GnRH依賴型性早熟(GnRH-independent precocious puberty)，該類型的HPG軸功能并未成熟，是由于外周組織產(chǎn)生的性激素而致性早熟癥狀的出現(xiàn)，但不具備生育能力。按照中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system，CNS)是否受到損傷，GDPP又可分為“器質(zhì)性”和“先天性”兩種類型；“器質(zhì)性”的指因中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷引發(fā)了GnRH脈沖式釋放增加，“先天性”的指中樞神經(jīng)系統(tǒng)并不存在解剖學異常而GnRH脈沖式釋放仍增加。

GDPP與正常性成熟(青春期)啟動的調(diào)控機制相同，可通過測定性腺類固醇激素及促性腺激素(LH、FSH、GnRH)水平進行診斷[4-5]。女孩GDPP的發(fā)病率遠高于男孩(比率超過20∶1)，且約90%的女性病例是先天性的[4，6]；而男孩GDPP病例中超過75%是由于器質(zhì)性損傷引起的[6-8]。

性成熟的啟動時機受遺傳和環(huán)境因素的共同調(diào)節(jié)[9]，人類遺傳學研究為肯定遺傳調(diào)控作用提供了有力的證據(jù)[10]：(1)青春期的啟動時機在不同種族群體間存在差異[11]；(2)母親和女兒的初潮期之間存在正相關(guān)；(3)同卵雙胞胎比雙卵生雙胞胎的性成熟發(fā)育過程表現(xiàn)出更強的一致性。性成熟啟動是由包含一系列抑制因子、刺激因子和允許性神經(jīng)內(nèi)分泌因子的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)控制的。嚙齒類和靈長類動物上研究表明，興奮性(易化性)輸入的增加和抑制性因素的減少引起了GnRH脈沖分泌的增加和青春期的起始[12]。這些錯綜復(fù)雜的神經(jīng)通路的紊亂將會導(dǎo)致性成熟啟動時機異常[13-14]。人類上的研究也證實，大量的基因參與了神經(jīng)內(nèi)分泌控制的性成熟啟動過程[15-18]。近來，基因組關(guān)聯(lián)分析研究揭示人類LIN28B 基因6q21位點與初潮期相關(guān)[19-20]。然而，到目前為止，僅發(fā)現(xiàn)有限的幾個分子突變和SNP與GDPP有關(guān)。

2 參與性成熟啟動的基因調(diào)控系統(tǒng)

2.1 kisspeptin 系統(tǒng)

2.1.1KISS1RSeminara等[21]首次報道了性成熟發(fā)育受損病人中KISS1R基因的功能缺失突變。自此以后，其他抑制性突變陸續(xù)被報道[22-24]。KISS1及其受體KISS1R也被認為是性成熟啟動的關(guān)鍵看門基因(gatekeeper)[25]。到目前為止，發(fā)現(xiàn)約5%的特發(fā)性低促性腺激素性性腺功能減退癥(nIHH)病例與KISS1R突變有聯(lián)系[26]。kisspeptin是GnRH分泌的一個強有力刺激物，其通過與下丘腦GnRH神經(jīng)元表面的G蛋白偶聯(lián)受體KISS1R結(jié)合發(fā)揮作用[27]。使用低劑量的kisspeptin處理嚙齒類、靈長類動物，不論是中樞性的或邊緣性的，都能夠引發(fā)強烈的GnRH依賴的促性腺激素釋放激素的分泌[27-28]；嚙齒類和靈長類動物性成熟啟動時，下丘腦KISS1和KISS1R基因的表達均增加。另一方面，與長時間持續(xù)性刺激會導(dǎo)致GnRH/GnRHR系統(tǒng)受體敏感性降低相類似，連續(xù)的kisspeptin注入會降低去勢青年公猴的LH水平[25]。

Teleset等[15]探討了kisspeptin/KISS1R系統(tǒng)在人類GDPP發(fā)病機理中的作用，研究掃描了53個患有先天性GDPP的巴西兒童的KISS1R突變，并在一個女孩上首次發(fā)現(xiàn)了雜合的激活突變p.R386P。這個女孩自出生后就顯現(xiàn)出緩慢的和漸進性的乳房發(fā)育現(xiàn)象，表明存在一個早期的、持續(xù)的和緩慢升高的雌激素分泌；在7歲時，即表現(xiàn)出生長加速、骨骼成熟和連續(xù)的乳房發(fā)育，且伴隨有接近正常性成熟期的E2和LH激素水平。體外研究表明，p.R386P突變位于KISS1R基因的羧基末端，導(dǎo)致細胞內(nèi)kisspeptin信號通路持續(xù)保持激活狀態(tài)，進而引起高水平高肌糖磷酸鹽累積[15]。相對于最為熟知的G蛋白偶聯(lián)受體功能組成型激活形式(即受體并不需要配體的存在去激活信號傳輸)，在體外，p.R386P突變的KISS1R與其配體的親和力以及基礎(chǔ)條件下的細胞內(nèi)信號傳導(dǎo)能力并沒有發(fā)生改變，表明該突變是一個非組成型激活KISS1R突變；然而，p.R386P突變KISS1R的脫敏率有一個顯著的減少(即仍保持較高的敏感性)。脫敏現(xiàn)象是一種配體誘導(dǎo)受體信號傳輸終止機制，緩慢的受體脫敏將導(dǎo)致持續(xù)增強的細胞性反應(yīng)，GnRH釋放脈沖幅度增加。與此相同的受體激活機制，在一個患有促腎上腺皮質(zhì)激素非依賴性庫欣綜合征(adrenocorticotropic hormone-independent cushing syndrome)的病人中也被發(fā)現(xiàn)，其激活是由位于皮質(zhì)素受體2(MC2R)羧基末端的一個突變引起的[29]。事實上，KISS1R的組成型激活也可能會擾亂脈沖式的GnRH釋放，進而導(dǎo)致性成熟啟動遲緩，因為持續(xù)性的GnRH分泌會導(dǎo)致受體脫敏。2011年，Bianco等[30]探討了p.R386P突變延長KISS1R對kisspeptin反應(yīng)的可能機制。在中國GDPP女孩中，6個KISS1R多態(tài)位點也已經(jīng)被鑒定[31]；僅發(fā)現(xiàn)有1個非同義改變與GDPP有輕微的關(guān)聯(lián)。

2.1.2Kiss1 鑒于kisspeptin在性成熟啟動控制中的關(guān)鍵作用，以及其受體KISS1R的p.R386P突變會引起性腺軸的提前激活，因此Kiss1基因是GDPP的候選基因。Silveira等[32]掃描了83個患有GDPP的孩子(77個女孩、6個男孩，包括15.3%的家族病例)Kiss1突變，發(fā)現(xiàn)2個極少見的kisspeptin突變體p.P74S和p.H90D。

p.P74S突變是在一個1歲時即患有GDPP的男孩中被鑒定出，處于雜合狀態(tài)。這個男孩表現(xiàn)出的癥狀包括：沒有中樞性損傷，過早發(fā)育、高水平的基礎(chǔ)LH和睪丸激素，提示是由遺傳因素造成的。大多數(shù)患有GDPP的男孩子，尤其是那些4歲以下的，一般有潛在的中樞性異常[7]。該男孩的媽媽和外祖母性發(fā)育正常，也帶有雜合的p.P74S突變，表明不完全性別依賴性外顯(incomplete sex-dependent penetrance)；另外一種可能就是涉及其它基因。

p.H90D突變體是在2個沒有親緣關(guān)系的GDPP女孩中被鑒定出，處于純合狀態(tài)。盡管該突變體并不存在于巴西人群中，但在一些正常個體及來自于美國和法國的性腺機能減退病人中并鑒定為雜合狀態(tài)，這表明該突變是一個稀有SNP[33]。p.H90D突變體在體外對kisspeptin生物利用效率無變化。

大量位于Kiss1基因編碼區(qū)、非翻譯區(qū)及啟動子區(qū)的SNP在統(tǒng)計上并未顯示出與GDPP有顯著關(guān)聯(lián)[31-32，34]。其中的一個SNP(p.P110T)在中國人和韓國人群體中等位基因頻率很低[31，34]，在非洲和西方人群體中未被發(fā)現(xiàn)。然而，在韓國人群體中p.P110T突變頻率是正常人高于GDPP病人，表明該突變體可能對早熟性發(fā)育起到保護作用，該突變位點功能仍需要進一步的驗證。

Vries等[35]評價了Kisspeptin在性早熟臨床上的應(yīng)用，比較了兩個實驗組血清kisspeptin水平：一組是31個被臨床診斷為GDPP的女孩，另一組是14個處于青春期前期健康的對照組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)GDPP女孩的Kisspeptin水平還是顯著高于對照組。因此，Kisspeptin水平可被用作中樞性性早熟診斷的一個指標。

2.2 GABA系統(tǒng)

γ-氨基丁酸(GABA)是參與靈長類動物性成熟啟動調(diào)節(jié)的一個支配性的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)。GABA對GnRH神經(jīng)元的抑制效應(yīng)主要是通過GABRA1受體介導(dǎo)的[36]。掃描了31個患有GDPP女孩(其中包括3個家族病例)的GABRA1基因，并沒有發(fā)現(xiàn)功能性突變。除此之外，已被鑒定的7個GABRA1 SNPs中沒有一個在統(tǒng)計上與GDPP關(guān)聯(lián)，這表明GABRA1突變體不是引起中樞性性早熟的常見原因[37]。

2.3 NPY和leptin系統(tǒng)

機體的營養(yǎng)狀態(tài)對于性成熟的啟動和初潮期是非常重要的[38]。主要是由脂肪細胞分泌的Leptin(瘦蛋白)已經(jīng)被證實與性成熟啟動的調(diào)節(jié)相關(guān)，它被視為一個邊緣性的代謝信號，扮演“允許信號”(permissive signal)作用，告知大腦有關(guān)外緣能量沉積情況，允許性成熟啟動及其進程。Leptin或leptin受體突變個體表現(xiàn)出嚴重的肥胖和性腺機能減退[38]癥狀。研究證實leptin對GnRH的分泌的促進效用是通過kisspeptin神經(jīng)元介導(dǎo)的，而這種效用的下調(diào)是通過 NPY神經(jīng)元信號通路實現(xiàn)的[39]。在靈長類動物青春期前期，NPY對脈沖式GnRH分泌有抑制效用。NPY通過激活至少6個不同的受體類型介導(dǎo)其效用，NPY-Y1R亞型是一個抑制性G蛋白偶聯(lián)受體，在所有類型中效用最顯著[40]。Freitas等[41]調(diào)查了48個患有先天性GDPP病人的NPY-Y1R突變，在一個有家族性GDPP 病史的女孩中發(fā)現(xiàn)一個雜合型NPY-Y1R突變體K374T。然而，K374T突變在GDPP中的作用仍然需要進一步證實，因為它并沒有導(dǎo)致該受體的NPY刺激活性顯著降低。 Barker 等[42]也研究了GDPP患者的NPY-Y1和NPY-Y5受體基因，均沒有發(fā)現(xiàn)與性早熟有關(guān)聯(lián)的突變體。

2.4 LIN28B系統(tǒng)

2009年，4個獨立的全基因組關(guān)聯(lián)分析在LIN28B基因6q21處發(fā)現(xiàn)了與早初潮期有關(guān)的突變[43]。Elks等[44]開展了一個被稱之為“ReproGen”的更大規(guī)模的初潮期性狀全基因組關(guān)聯(lián)分析，總計包括87 820個女性；結(jié)果在全基因組水平上新發(fā)現(xiàn)30個與初潮期有關(guān)聯(lián)的位點，其中2個關(guān)聯(lián)最顯著的位點進一步證實了前期發(fā)現(xiàn)的LIN28B(rs7759938)和9q31.2 (rs2090409)。新位點位于包含與體質(zhì)指數(shù)、能量平衡、激素調(diào)節(jié)相關(guān)基因的區(qū)域，提示能量平衡與性成熟啟動的遺傳調(diào)控有關(guān)。

證實LIN28基因?qū)π猿墒彀l(fā)育作用的進一步證據(jù)，來自于表達LIN28A的轉(zhuǎn)基因鼠研究[45]，這些小鼠生長速率和成年體重增加、性成熟啟動推遲。

2.5 NKB 系統(tǒng)

神經(jīng)激肽B (Neurokinin B，NKB)是一個速激肽家族成員，屬興奮性神經(jīng)傳遞素[46]。人類的NKB及其受體NK3R分別由TAC3和TACR3基因編碼。

近年來，研究發(fā)現(xiàn)TAC3和TACR3基因的功能缺失突變與人類的特發(fā)性低促性腺激素性性腺功能減退癥(nIHH)發(fā)病機理有關(guān)。到目前為止，大概49個帶有TAC3和TACR3突變的個體被報道，這49個個體來源于多個不同種族，區(qū)域分布廣泛。Gianetti等[47]報道，NKB系統(tǒng)突變是性腺機能減退癥的常見原因，在nIHH群體中的發(fā)生率超過5%。更有趣的是，這個報道表明大多數(shù)病人表現(xiàn)出陰莖短小現(xiàn)象，更突顯出NKB系統(tǒng)在新生兒時期的重要性，超過80%的在成年期表現(xiàn)出可逆性。這些報道揭示NKB信號通路是人類性成熟啟動和促性腺激素分泌的一個必不可少的成分[46]。

NKB系統(tǒng)的作用機制依然未知，僅有的幾個證據(jù)表明NKB可能具有GnRH分泌調(diào)節(jié)作用。NKB在大鼠下丘腦正中隆起表達，其受體在GnRH神經(jīng)元上表達，表明該系統(tǒng)可能直接調(diào)節(jié)GnRH神經(jīng)元功能[47]；更近一步，NKB在表達Kisspeptin的下丘腦神經(jīng)元中也是高表達[48]。這些結(jié)果表明NKB復(fù)合體是人類生殖控制的一個重要組分。

參考文獻：

[1] 儲明星，馮 濤，狄 冉，等. 哺乳動物性早熟相關(guān)基因的研究進展[J]. 遺傳，2009,31(1)：13-28.

[2] 陳寬維. 我國優(yōu)質(zhì)雞產(chǎn)業(yè)發(fā)展展望[J]. 中國家禽，2010，32(19)：1-4.

[3] 國家畜禽遺傳資源委員會.中國畜禽遺傳資源志(家禽志)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2011.

[4] Bianco S D, Kaiser U B.The genetic and molecular basis of idiopathic hypogonadotropic hypogonadism[J]. Nat Rev Endocrinol，2009，5: 569-576.

[5] Carel J C, Leger J. Clinical practice Precocious puberty[J]. N Engl J Med，2008, 358: 2 366-2 377.

[6] Kakarla N, Bradshaw K D. Disorders of pubertal development: precocious puberty[J]. Semin Reprod Med，2003,21:339-351.

[7] Partsch C J, Heger S, Sippell W G.Management and outcome of central precocious puberty[J]. Clin Endocrinol (Oxf)，2002,56:129-148.

[8] De Sanctis V, Corrias A, Rizzo V, et al.Etiology of central precocious puberty in males: the results of the Italian Study Group for Physiopathology of Puberty[J]. J Pediatr Endocrinol Metab,2000,13 (S1)687-693.

[9] Gajdos Z K, Hirschhorn J N, Palmert M R.What controls the timing of puberty? An update on progress from genetic investigation[J]. Curr Opin Endocrinol Diabetes Obes,2009， 16：16-24.

[10] Palmert M R, Hirschhorn J N.Genetic approaches to stature, pubertal timing, and other complex traits[J]. Mol Genet Metab，2003，80：1-10.

[11] Parent A S, Teilmann G, Juul A, et al. The timing of normal puberty and the age limits of sexual precocity: variations around the world, secular trends, and changes after migration[J]. Endocr Rev，2003，24：668-693.

[12] Plant T M, Witchel S F. Puberty in nonhuman primates and humans[M]∥Plant T M.The Physiology of Reproduction.San Diego:Academiv Press/Elsevier,2006.

[13] Plant T M, Barker-Gibb M L.Neurobiological mechanisms of puberty in higher primates[J].Hum Reprod Update,2004,10,67-77.

[14] Grumbach M M. The neuroendocrinology of human puberty revisited[J]. Horm Res,2002,57(S2):2-14.

[15] Teles M G, Bianco S D, Brito V N, et al. A GPR54-activating mutation in a patient with central precocious puberty[J]. N Engl J Med,2008,358:709-715.

[16] Freitas K C, Ryan G, Brito V N, et al.Molecular analysis of the neuropeptide Y1 receptor gene in human idiopathic gonadotropin-dependent precocious puberty and isolated hypogonadotropic hypogonadism[J]. Fertil Steril,2007,87:627-634.

[17] Freitas K C, Ryan G, Brito V N, et al.Molecular analysis of the neuropeptide Y1 receptor gene in human idiopathic gonadotropin-dependent precocious puberty and isolated hypogonadotropic hypogonadism[J]. Fertil Steril,2007,87:627-634.

[18] Zhao Y, Chen T, Zhou Y, et al.An association study between the genetic polymorphisms within GnRHI, LHbeta and FSHbeta genes and centralprecocious puberty in Chinese girls[J]. Neurosci Lett,2010,486:188-192.

[19] Sulem P, Gudbjartsson D F, Rafnar T, et al.Genome-wide association study identifies sequence variants on 6q21 associated with age at menarche[J]. Nat Genet,2009,41:734-738.

[20] He C, Kraft P, Chen C, et al.Genome-wide association studies identify loci associated with age at menarche and age at natural menopause[J]. Nat Genet,2009,41: 724-728.

[21] Seminara S B, Messager S, Chatzidaki E E, et al.The GPR54 gene as a regulator of puberty[J]. N Engl J Med,2003,349:1 614-1 627.

[22] Semple R K, Achermann J C, Ellery J, et al.Two novel missense mutations in g proteincoupled receptor 54 in a patient with hypogonadotropic hypogonadism[J]. J Clin Endocrinol Metab,2005, 90:1 849-1 855.

[23] Tenenbaum-Rakover Y, Commenges-Ducos M, Iovane A, et al. Neuroendocrine phenotype analysis in five patients with isolated hypogonadotropic hypogonadism due to a L102P inactivating mutation of GPR54[J]. J Clin Endocrinol Metab,2007,92:1 137-1 144.

[24] Teles M G, Trarbach E B, Noel S D, et al.A novel homozygous splice acceptor site mutation of KISS1R in two siblings with normosmic isolated hypogonadotropic hypogonadism[J]. Eur J Endocrinol,2010,163: 29-34.

[25] Seminara S B, Dipietro M J, Ramaswamy S, et al. Continuous human metastin 45-54 infusion desensitizes G protein-coupled receptor 54-induced gonadotropin-releasing hormone release monitored indirectly in the juvenile male Rhesus monkey (Macaca mulatta): a finding with therapeutic implications[J]. Endocrinology,2006,147: 2 122-2 126.

[26] Bianco S D, Kaiser U B. The genetic and molecular basis of idiopathic hypogonadotropic hypogonadism[J]. Nat Rev Endocrinol,2009,5:569-576.

[27] Navarro V M, Castellano J M, Garcia-Galiano D,et al.Neuroendocrine factors in the initiation of puberty: the emergent role of kisspeptin[J]. Rev Endocr Metab Disord,2007,8:11-20.

[28] Dhillo W S. Kisspeptin: a novel regulator of reproductive function[J]. J Neuroendocrinol,2008,20:963-970.

[29] Swords F M, Baig A, Malchoff D M,et al.Impaired desensitization of a mutant adrenocorticotropin receptor associated with apparent constitutive activity[J]. Mol Endocrinol,2002,16:2 746-2 753.

[30] Bianco S D, Vandepas L, Correa-Medina M,et al.KISS1R intracellular trafficking and degradation: effect of the Arg386Pro disease-associated mutation[J]. Endocrinology,2011,152:1 616-1 626.

[31] Luan X, Yu H, Wei X,et al.GPR54 polymorphisms in Chinese girls with central precocious puberty[J]. Neuroendocrinology,2007,86:77-83.

[32] Silveira L F, Trarbach E B, Latronico A C.Genetics basis for GnRHdependent pubertal disorders in humans[J]. Mol Cell Endocrinol,2010,324:30-38.

[33] Houang M, Roze C, Kaci F M,et al.KiSS1 polymorphisms analysis in a cohort of patients with disorder in the timing of pubertal onset shows association between 3' UTR polymorphisms and central precocious puberty[J]. Hormone Research (Abstracts LWPES/ESPE 8th Joint Meeting),2009,72:49.

[34] Ko J M, Lee H S, Hwang J S. KISS1 gene analysis in Korean girls with central precocious puberty: a polymorphism, p.P110T, suggested to exert a protective effect[J]. Endocrinol,2010,57:701-709.

[35] Viswanathan S R, Daley G Q, Gregory R I. Selective blockade of microRNA processing by Lin28[J]. Science,2008,320:97-100.

[36] Terasawa E, Fernandez D L. Neurobiological mechanisms of the onset of puberty in primates[J]. Endocrinol Rev,2001,22:111-151.

[37] Brito V N, Mendonca B B, Guilhoto L M, et al. Allelic variants of the gamma-aminobutyric acid-A receptor alpha1-subunit gene (GABRA1) are not associated with idiopathic gonadotrop-independent precocious puberty in girls with and withoutelectroencephalographic abnormalities[J]. J Clin Endocrinol Metab,2006, 91: 2 432-2 436.

[38] Grumbach M M. The neuroendocrinology of human puberty revisited[J]. Horm Res,2002, 57 (S2): 2-14.

[39] Hill J W, Elmquist J K, Elias C F. Hypothalamic pathways linking energy balance and reproduction[J]. Am J Physiol Endocrinol Metab,2008, 294: 827-832.

[40] Shahab M, Balasubramaniam A, Sahu A, et al. Central nervous system receptors involved in mediating the inhibitory action of neuropeptide Y on luteinizing hormone secretion in the male rhesus monkey (Macaca mulatta)[J]. J Neuroendocrinol,2003, 15: 965-970.

[41] Freitas K C, Ryan G, Brito V N, et al.Molecular analysis of the neuropeptide Y1 receptor gene in human idiopathic gonadotropin-dependent precocious puberty and isolated hypogonadotropic hypogonadism[J]. Fertil Steril,2007, 87: 627-634.

[42] Barker-Gibb M, Plant T M, White C, et al.Genotype analysis of the neuropeptide Y (NPY) Y1 and NPY Y5 receptor genes in gonadotropin-releasing hormone-dependent precocious gonadarche[J]. Fertil Steril,2004, 82: 491-494.

[43] Perry J R, Stolk L, Franceschini N, et al. Meta-analysis of genome-wide association data identifies two loci influencing age at menarche[J]. Nat Genet,2009,41:648-650.

[44] Elks C E, Perry J R, Sulem P, et al.Thirty new loci for age at menarche identified by a meta-analysis of genome-wide association studies[J]. Nat Genet,2010, 42: 1 077-1 085.

[45] Zhu H, Shah S, Shyh-Chang N, et al. Lin28a transgenic mice manifest size and puberty phenotypes identified in human genetic association studies[J]. Nat Genet,2010, 42: 626-630.

[46] Rance N E, Krajewski S J, Smith M A, et al. Neurokinin B and the hypothalamic regulation of reproduction[J]. Brain Res,2010, 1 364: 116-128.

[47] Gianetti E, Tusset C, Noel S D, et al. TAC3/TACR3 mutations reveal preferential activation of gonadotropinreleasing hormone release by neurokinin B in neonatal life followed by reversal in adulthood[J]. J Clin Endocrinol Metab,2010, 95: 2 857-2 867.

[48] Goodman R L, Lehman M N, Smith J T, et al. Kisspeptin neurons in the arcuate nucleus of the ewe express both dynorphin A and neurokinin B[J]. Endocrinology,2007, 148: 5 752-5 760.