童 寧

南京市第二醫(yī)院藥劑科，南京 210046

黃芪（Radix astragali）是豆科黃芪屬植物蒙古黃 芪 [Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.var.mongholicus（Bge.）Hsiao]和膜莢黃芪[Astragalus membranceus（Fisch.）Bge.]的干燥根。別名綿黃芪、箭芪、口芪。其味甘、溫；歸肺、脾經(jīng)。主要適用于病后體虛；陽虛自汗、虛人感冒；脾虛泄瀉、脾虛水腫、小便不利等。其主要化學(xué)成分為多糖、黃酮類及皂苷類等。其多糖類成分以葡聚糖和雜多糖為主；黃酮類化合物有黃酮、異黃酮、異黃烷和紫檀烷四大類；皂苷類化合物有黃芪皂苷及其大豆皂苷。此外還含有氨基酸、蛋白質(zhì)、核黃素、葉酸、尼克酸、維生素D、亞油酸、香草酸、阿魏酸、異阿魏酸、β-谷甾醇、胡蘿卜苷、羽扇豆醇、對(duì)羥苯基丙烯酸、咖啡酸、綠原酸、微量元素等成分[1]。多年來對(duì)黃芪的單味、復(fù)方及黃芪的有效成分進(jìn)行研究，證實(shí)黃芪的藥理作用廣泛，療效肯定，安全無毒。具有明顯的調(diào)節(jié)機(jī)體體液免疫、細(xì)胞免疫功能，增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞的活性及抗病毒作用[2]。隨著對(duì)黃芪藥理作用研究的深入，其臨床應(yīng)用前景愈加廣泛，尤其對(duì)兒科常見病、多發(fā)病的治療提供了新的藥物來源。

1 黃芪抗呼吸道感染的作用機(jī)理

1.1 影響免疫器官發(fā)育

免疫器官是機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)的主要場(chǎng)所，免疫器官的重量與免疫器官的發(fā)育狀況直接影響到機(jī)體免疫力的高低。Zhang等[3]證實(shí)黃芪減緩了小鼠免疫器官脾臟和胸腺細(xì)胞凋亡。Sugiura等[4]研究表明，黃芪組小鼠脾的重量明顯高于對(duì)照組，且黃芪組小鼠的免疫能力和自身抵抗力都強(qiáng)于對(duì)照組。這些研究結(jié)果表明，黃芪多糖不但可以促進(jìn)機(jī)體正常免疫器官的發(fā)育和免疫活性細(xì)胞的生成，提高免疫活性，且能抗免疫抑制劑對(duì)免疫器官的損害，或修復(fù)受損的免疫器官，使免疫器官的組織結(jié)構(gòu)恢復(fù)到正常水平，維持機(jī)體的正常免疫機(jī)能。

1.2 調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫能力

免疫功能異常是小兒反復(fù)呼吸道感染的一個(gè)重要原因[5]。據(jù)報(bào)道，黃芪具有良好的免疫調(diào)節(jié)作用[6]。T淋巴細(xì)胞是特異性細(xì)胞免疫的主要細(xì)胞，其主要功能是通過其亞群發(fā)揮的。T淋巴細(xì)胞亞群CD4+、CD8+分別發(fā)揮著輔助和抑制免疫功能的作用，輔助性T淋巴細(xì)胞Th1/Th2細(xì)胞失衡，即Th2型反應(yīng)模式是哮喘氣道炎癥的重要特征，也是哮喘病理生理過程形成的始動(dòng)和維持因素。影響Th細(xì)胞分化的胞外信號(hào)分子包括細(xì)胞因子、抗原提呈細(xì)胞（APC）的類型、抗原的性質(zhì)及劑量，其中最關(guān)鍵的是細(xì)胞因子[7]。誘導(dǎo)Th1分化的關(guān)鍵細(xì)胞因子是IL-12[8]。CD4+/CD8+比值可直接反映細(xì)胞免疫功能的狀態(tài)。CD4+細(xì)胞根據(jù)其細(xì)胞因子分泌模式的不同分為Th1和Th2兩個(gè)主要功能亞群。Th1細(xì)胞分泌IL-2、IFN-γ等Th1類細(xì)胞因子，參與細(xì)胞免疫的調(diào)節(jié)。Th2細(xì)胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-10等Th2類細(xì)胞因子，參與體液免疫的調(diào)節(jié)[9]。在無病理狀態(tài)的情況下，Th1/Th2處于平衡狀態(tài)，對(duì)人體的免疫調(diào)節(jié)起著重要作用。黃芪不僅能改善其臨床療效，減少呼吸道感染反復(fù)發(fā)作，同時(shí)能提高其Th1細(xì)胞因子降低Th2細(xì)胞因子的作用。Th1/Th2平衡紊亂與許多疾病的發(fā)生發(fā)展和預(yù)后有著密切關(guān)系[10]。其機(jī)理可能與黃芪能促進(jìn)淋巴細(xì)胞中IL-2 mRNA的表達(dá)，降低抑制性T細(xì)胞（Ts細(xì)胞）對(duì)淋巴細(xì)胞IL-2 mRNA的抑制，并對(duì)IFN-γ較明確的誘生有關(guān)[11]，其發(fā)病病因與多種因素相關(guān)，而機(jī)體的免疫功能紊亂是近年來一直研究的熱點(diǎn)。Clement-Kruzel等認(rèn)為黃芪可能作用于T淋巴細(xì)胞的調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答和刺激[12]。

1.3 調(diào)節(jié)體液免疫功能的不足

反復(fù)呼吸道感染一般認(rèn)為與免疫異常有關(guān)[13]。體液免疫功能不足，除總IgG異常和體液免疫異常外，還可能存在IgG亞類缺乏[14]，血清IgM降低等。反復(fù)呼吸道感染患者血清IgG、IgA水平均較健康人群明顯降低，其影響因素較多，可能與自身免疫狀態(tài)等有一定關(guān)系[15]。用黃芪注射液治療后可明顯提高其水平，并顯著降低呼吸道感染的發(fā)病次數(shù)，減輕病情。其免疫機(jī)制可能是黃芪注射液中抗原物質(zhì)進(jìn)入黏膜下層，刺激巨噬細(xì)胞，激活T細(xì)胞，使B細(xì)胞向漿細(xì)胞轉(zhuǎn)化，從而觸發(fā)一系列免疫反應(yīng)，包括T細(xì)胞產(chǎn)生淋巴因子和漿細(xì)胞產(chǎn)生Ig[16]。Kong等[17]發(fā)現(xiàn)黃芪多糖能促進(jìn)體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)，預(yù)期可作為一種新型免疫增強(qiáng)劑成分藥物。

1.4 拮抗細(xì)菌的黏附

近幾十年來在國(guó)外出現(xiàn)了根據(jù)細(xì)菌感染理論提出的黏附學(xué)說，該學(xué)說認(rèn)為，在細(xì)菌對(duì)人體的感染過程中，細(xì)菌黏附于上皮細(xì)胞是整個(gè)感染過程的第一步，只有在黏附的基礎(chǔ)上，細(xì)菌才能進(jìn)一步在組織表面定居、繁殖，從而形成炎癥[18]；黏附分子參與多種病原微生物如耶爾森菌、幽門螺旋桿菌、巨細(xì)胞病毒、鼻病毒以及艾滋病病毒等對(duì)機(jī)體的侵襲或宿主細(xì)胞感染[19]。黃芪多糖能拮抗綠膿桿菌的黏附，是扶正補(bǔ)益類中藥起到阻斷感染作用的主要成分，可通過對(duì)呼吸道黏膜的修復(fù)作用和抗細(xì)菌黏附作用，并通過纖毛運(yùn)動(dòng)將吸入的綠膿桿菌從氣管清除，從而起到抵抗感染的作用。朱淵紅等[20]觀察了黃芪注射液對(duì)慢性阻塞性肺疾病患者黏附分子表達(dá)的影響，證實(shí)血清中細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）增高和CD11b/CD18表達(dá)增加參與了慢性阻塞性肺疾病的發(fā)生發(fā)展，黃芪注射液具有抗白細(xì)胞黏附的作用[21]。

2 黃芪或黃芪制劑的臨床應(yīng)用

2.1 黃芪口服液

梁宇紅[22]優(yōu)選了黃芪口服液的最佳制備工藝，以黃芪甲苷為檢測(cè)指標(biāo)，即用8倍藥材量的水提取3 h，共提取3次，然后用殼聚糖絮凝法澄清。根據(jù)黃芪對(duì)免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)特點(diǎn)，其已在臨床用于反復(fù)呼吸道感染的治療。黃華等[23]在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上，口服黃芪口服液3個(gè)月，1年后進(jìn)行評(píng)價(jià)，治療組IgG、IgA、IgM、C3、C4均較對(duì)照組明顯升高，且上呼吸道感染發(fā)病次數(shù)明顯少于對(duì)照組。楊君等[24]通過給反復(fù)呼吸道感染患兒服用黃芪精口服液，發(fā)現(xiàn)治療組服用黃芪精前后，兩次血IgG測(cè)定值差異有顯著性（P＜0.101），IgA 含量差異也有顯著性（P＜0.105）；治療前后，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率（LTT）改變也有顯著意義（P＜0.101），表明黃芪對(duì)小兒反復(fù)呼吸道感染具有明確的防治作用。中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶活力可作為兒童呼吸道感染早期鑒別細(xì)菌感染和病毒感染的指標(biāo)之一。唐冬梅[25]認(rèn)為，黃芪對(duì)小兒中性粒細(xì)胞減少癥有顯著療效，經(jīng)合理治療后小兒中性粒細(xì)胞減少癥大多預(yù)后良好，且毒副作用小，價(jià)廉易得。

2.2 黃芪顆粒（沖劑）

黃芪顆粒以多糖、黃酮類及皂苷類等為主要活性成分。取黃芪1000 g，加水煎煮2次，第1次3 h，第2次2 h，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度約為1.26，加乙醇至含醇量為70%，攪勻，靜置，取上清液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.36（38℃）的清膏，加輔料適量，制成顆粒，低溫干燥，制成1000 g，即得[26]。

黃芪顆粒能明顯促進(jìn)小鼠非特異性和特異性免疫（包括體液免疫、細(xì)胞免疫）功能，對(duì)環(huán)磷酰胺所致免疫功能低下模型小鼠的免疫功能具有一定調(diào)節(jié)改善作用[27]。陳健等[28]通過給反復(fù)呼吸道感染患兒口服黃芪顆粒，檢測(cè)免疫球蛋白及T細(xì)胞亞群，證明黃芪顆粒對(duì)反復(fù)呼吸道感染有較好療效，并有提高體液與細(xì)胞免疫功能的作用。郭杰霞[29]給予患兒口服黃芪顆粒治療反復(fù)呼吸道感染，療程結(jié)束經(jīng)隨訪效果良好，可能因?yàn)辄S芪能補(bǔ)益衛(wèi)氣，通過增加免疫球蛋白IgG1和Ig水平，增強(qiáng)體液免疫，誘導(dǎo)干擾素生成，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬功能等一系列免疫調(diào)節(jié)作用，來改變患兒暫時(shí)的免疫功能低下狀態(tài)，以減少反復(fù)呼吸道感染的發(fā)作，縮短病程。

2.3 注射用黃芪多糖滅菌粉末

黃芪飲片加水浸泡24 h，高壓1 kg煎煮1.5 h，濾后取煎液，殘?jiān)偌铀?，高? kg煎煮1.2 h，殘?jiān)偌铀荩瑸V液留下次提取用。合并濾液，用減壓法濃縮至小體積，濃縮液加95%乙醇，使最后乙醇濃度達(dá)60%，靜止過夜。吸棄上清液，沉淀物加水加熱充分溶解，離心除去不溶物，上清液加95%乙醇，使最后乙醇濃度達(dá)80%，靜止過夜，吸棄上清液。沉淀再用高濃度乙醇洗滌2～3次，離心棄去上清液，沉淀物即為淡黃色精品。為防止氧化，可置于-20℃條件下保存，經(jīng)凍干后，可以得到干品，其中黃芪多糖為指標(biāo)性成分[30]。翁玲[31]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，注射了黃芪多糖粉針劑后的小鼠，其脾細(xì)胞經(jīng)ConA刺激后IL-3、IL-4及IL-6的分泌量顯著增加，而IFN-γ、IL-2的分泌量卻有所減少，提示黃芪多糖粉針劑可能對(duì)正常小鼠TH1/TH2的平衡有一定的調(diào)節(jié)作用。另外黃芪多糖粉針劑大大增強(qiáng)化療后小鼠脾細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的能力[32]。

2.4 黃芪注射液

生藥黃芪，以黃芪甲苷、芒柄花素以及多糖為指標(biāo)成分，加水煎煮3次，每次1.5 h，合并煎液，濾過，濾液濃縮至每1 mL相當(dāng)于生藥1～2 g，用乙醇沉淀處理2次，第1次含醇量達(dá)75%，第2次為85%，每次均冷藏放置，回收乙醇，濾液濃縮至每1 mL相當(dāng)于生藥10 g，用注射用水稀釋至每1 mL相當(dāng)于生藥0.75～1 g，冷藏放置12 h，濾過，濾液濃縮至每1 mL相當(dāng)于生藥5～6 g，放冷，調(diào)節(jié)pH值至7.5，加0.125%活性炭，煮沸5 min，趁熱濾過脫炭，加注射用水稀釋至適量，再調(diào)節(jié)pH值至7.5，濾過，灌封，滅菌，即得[33]。陳滿盛[34]通過實(shí)驗(yàn)證明，黃芪注射液是治療反復(fù)呼吸道感染的良藥，且使反復(fù)呼吸道感染次數(shù)減少，避免了抗生素的濫用，還有安全、療程短、見效快、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn)。黃燕玲等[35]用黃芪注射液治療小兒反復(fù)呼吸道感染，使患兒外周血淋巴細(xì)胞水平趨于正常，其中值亦趨于正常，從而改善了患兒的細(xì)胞免疫功能，說明黃芪注射液是較好的免疫調(diào)節(jié)劑。

2.5 黃芪多糖脂質(zhì)體

用摩爾比為2∶1的比例將卵磷脂和膽固醇溶于氯仿后，補(bǔ)加10 mL氯仿使加入的氯仿總體積為圓底燒瓶容積的1/20，接著置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，在一定溫度和轉(zhuǎn)速下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，并負(fù)壓抽吸至氯仿?lián)]發(fā)盡，直到在燒瓶?jī)?nèi)壁上形成一層干燥的薄膜，然后加入含有適量黃芪多糖的PBS溶液5 mL，置于旋渦振蕩器上振蕩進(jìn)行包封，待薄膜完全脫落，然后放入冰箱4℃過夜保存，以多糖為檢測(cè)指標(biāo)，即制得黃芪多糖脂質(zhì)體懸液[36]。李淑梅[36]等證明這種薄膜法制備的黃芪多糖脂質(zhì)體的包封率比逆相蒸發(fā)法要好。鄧英杰等[37]比較了黃芪多糖脂質(zhì)體和黃芪多糖對(duì)照品、空白脂質(zhì)體的免疫增強(qiáng)效果，研究證明，黃芪脂質(zhì)體比黃芪多糖對(duì)照品和空白脂質(zhì)體具有更加顯著的免疫增強(qiáng)效果。

2.6 黃芪膠囊

采用醇浸水煎提取有效成分，以多糖為檢測(cè)指標(biāo)，提取物經(jīng)噴霧干燥，并加適量疏松劑，裝藥，即得黃芪膠囊。李鳳文等[38]用黃芪膠囊給予小鼠灌胃發(fā)現(xiàn)黃芪膠囊能促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)化作用及抗體生成細(xì)胞增殖，提高其血清溶血素水平，促進(jìn)小鼠的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)和單核-巨噬細(xì)胞碳廓清功能，說明黃芪膠囊具有增強(qiáng)免疫力的功效。陳振等[39]利用黃芪膠囊對(duì)慢性阻塞性肺疾?。–OPD）穩(wěn)定期Ⅱa肺脾氣虛證療效及其免疫功能的先導(dǎo)性臨床研究表明，黃芪膠囊對(duì)CODP緩解期肺脾氣虛證患者的CD4+和CD4+/CD8+可能有提高的趨勢(shì)；對(duì)COPD穩(wěn)定期Ⅱa型肺脾氣虛證有一定療效。

2.7 復(fù)方黃芪鼻腔噴霧劑

胡國(guó)成等[40]用由常州市氣管炎研究所研制的黃芪鼻腔噴霧劑，以黃芪甲苷為活性成分，證明了黃芪鼻腔噴霧后，IgG、IgA、IgG亞類1～3和唾液 sIgA含量明顯增高。黃芪組的體液免疫功能得到加強(qiáng)，提高防病能力，從而減少了呼吸道感染次數(shù)，且兒童易于接受。86例給予復(fù)方黃芪鼻腔噴霧劑，取得明顯臨床效果，復(fù)方黃芪組在噴藥后IgA、IgG1含量升高[41]。

2.8 黃芪與其他藥物合用

用黃芪與多種維生素的治療過程中發(fā)現(xiàn)，單用中藥黃芪或單用多種維生素治療，療效不顯著，而兩藥聯(lián)用時(shí)，療效明顯。張麗蘭[42]報(bào)道，黃芪和干擾素抗感冒病毒有協(xié)同作用。Ragupathi等[43]通過實(shí)驗(yàn)證明，黃芪中含有輔佐免疫增強(qiáng)的活性成分，能提高其他藥物如云芝的藥理活性。Brush等[44]通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)，黃芪的酊劑通過調(diào)節(jié)CD69在CD4+和CD8+T細(xì)胞的表達(dá)數(shù)目來激活免疫細(xì)胞，這種作用在攝入的24 h內(nèi)起作用，可持續(xù)7天；與海膽和甘草合用時(shí)對(duì)CD69的表達(dá)作用更強(qiáng)。Yin等[45]發(fā)現(xiàn)黃芪和靈芝聯(lián)用可以提高魚的呼吸能力。眾多文獻(xiàn)證明，黃芪與很多其他藥物有協(xié)同作用，使黃芪的應(yīng)用范圍更廣。

3 展 望

反復(fù)呼吸道感染其病程較長(zhǎng)，全身狀況較差，嚴(yán)重威脅小兒健康。因此，黃芪的國(guó)際及國(guó)內(nèi)市場(chǎng)開發(fā)潛力巨大，具有廣泛的應(yīng)用前景。而不同地區(qū)的黃芪有不同程度的抗病毒作用[46]，歷史上商品黃芪以野生為主，但由于長(zhǎng)期過度采挖，致使野生黃芪資源幾近枯竭，不能滿足人們治病保健的需要。國(guó)內(nèi)外學(xué)者[47]利用發(fā)根農(nóng)桿菌，感染膜莢黃芪外植體，建立了黃芪的毛狀根培養(yǎng)系統(tǒng)。黃芪毛狀根的功效依賴于其有效成分，而其有效成分的研究對(duì)于評(píng)價(jià)其質(zhì)量有重大意義。研究結(jié)果表明，同黃芪干燥根一樣，黃芪毛狀根中也含有皂苷、黃酮、多糖、氨基酸等具有生物活性的化合物。用黃芪治療小兒呼吸道感染宜注重劑型的選擇，以便更具針對(duì)性，提高療效。另外，雖然黃芪在預(yù)防和治療呼吸道感染方面應(yīng)用已很廣泛，但在機(jī)理方面仍需要進(jìn)一步的研究。

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