丁福秀

卡介菌多糖核酸輔助治療對初始涂陽肺結(jié)核患者血清VIP和IL-17的影響

丁福秀

目的探討卡介菌多糖核酸輔助治療對初始涂陽肺結(jié)核患者血清血管活性腸肽VIP和白細(xì)胞介素-17(IL-17)的影響。方法106例初始涂陽肺結(jié)核患者隨機(jī)分為兩組，對照組50例，治療組56例，對照組采用單純化療，治療組在化療的基礎(chǔ)上加用卡介菌多糖核酸。兩組所有患者治療前后測定血清VIP和IL-17。結(jié)果對照組總有效率為80%，治療組總有效率為91．1%，兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0．05)。兩組患者治療前血清VIP和IL-17無明顯差異(P＞0．05)。治療后兩組均可減少VIP和IL-17的表達(dá)，并且治療后治療組降低程度更明顯(P＜0．05)。結(jié)論卡介菌多糖核酸輔助治療可以明顯降低初始涂陽肺結(jié)核患者血清VIP和IL-17。

肺結(jié)核;卡介菌多糖核酸;血管活性腸肽;白細(xì)胞介素-17

2 結(jié)果

2.1 兩組總療效的比較經(jīng)治療后比較，對照組總有效率為80%，治療組總有效率為91．1%，兩組比較有顯著性差異(P＜0．05)，見表1。

2.2 兩組治療前后血清VIP和IL-17的比較經(jīng)比較，兩組患者治療前血清VIP和IL-17無明顯差異(P＞0．05)。治療后兩組均可減少VIP和IL-17的表達(dá)，并且治療后治療組降低程度更明顯(P＜0．05)，見表2。

表1 兩組總療效的比較

表2 兩組治療前后血清VIP和IL-17的比較

3 討論

結(jié)核病是一種常見慢性傳染病，肺結(jié)核是由結(jié)核分支桿菌引起的，并且臨床最為常見的一種。肺結(jié)核是一種慢性消耗性疾病，嚴(yán)重危及患者身心健康，并且其還具有較強(qiáng)的傳播性，對患者周圍人群健康和社會發(fā)展均可造成巨大的威脅，其中涂片陽性肺結(jié)核患者是重要的傳染源。雖然現(xiàn)在各國已經(jīng)有具體的治療，但臨床工作者仍然在努力嘗試發(fā)現(xiàn)更有效的治療方法。人們對結(jié)核病的認(rèn)識隨著細(xì)胞免疫學(xué)、分子生物學(xué)的進(jìn)展，發(fā)生了深刻變化。結(jié)核病的發(fā)生、發(fā)展與機(jī)體的免疫狀況有密切關(guān)系，因此，免疫治療成為目前結(jié)核病治療的研究熱點(diǎn)之一。

卡介菌多糖核酸為卡介苗的提取物，是一種非特異性免疫調(diào)節(jié)劑。早在20世紀(jì)70年代，卡介菌多糖核酸即用于肺結(jié)核治療的臨床中，發(fā)現(xiàn)并無很好的療效，且可導(dǎo)致少數(shù)穩(wěn)定的肺結(jié)核病灶復(fù)發(fā)，研究表明遲發(fā)型過敏反應(yīng)在復(fù)發(fā)的過程中起重要作用，并且過多的腫瘤壞死因子(TNF)產(chǎn)生所致。卡介菌多糖核酸在過去的基礎(chǔ)上，采用熱酚法去掉了菌體蛋白質(zhì)，這種可誘發(fā)遲發(fā)型過敏反應(yīng)的物質(zhì)，再用乙醇沉淀法提取免疫活性較強(qiáng)的菌體脂多糖成分，使其成份更加精純。它可以通過刺激機(jī)體的細(xì)胞免疫，使體內(nèi)輔助性T細(xì)胞亞群的失衡得到調(diào)節(jié)和恢復(fù)，同時(shí)可以使體液免疫平衡，激活單核巨噬細(xì)胞功能，肥大細(xì)胞穩(wěn)定，脫粒細(xì)胞釋放活性物質(zhì)得到進(jìn)一步減少，綜上可以提高機(jī)體的抗病能力［7］。

成熟T淋巴細(xì)胞分為CD4+和CD8+兩類，按CD4+輔助性T淋巴細(xì)胞(Th)分泌的細(xì)胞因子譜不同，分為Thl和Th2兩個(gè)亞群;Thl亞群主要分泌IL-2、TNF-α、IFN-γ等細(xì)胞因子，Th2亞群主要分泌IL-4、IL-5、IL-l3等細(xì)胞因子［8］。在胸腺細(xì)胞的增殖、分化、成熟中VIP起著一定的調(diào)節(jié)作用，同時(shí)對免疫細(xì)胞的黏附、遷移以及體內(nèi)再分布VIP均有一定的影響［9］。學(xué)者們研究已證實(shí)，結(jié)核免疫是以Thl細(xì)胞優(yōu)勢為主的細(xì)胞免疫抑制，其抑制Th1程度與病情的嚴(yán)重程度相關(guān)。在Thl細(xì)胞下降的同時(shí)可以伴隨Th2細(xì)胞水平增加，提示宿主的細(xì)胞免疫功能失衡，疾病可能向排菌、空洞形成、重癥方向進(jìn)展［10］。VIP最近研究是體內(nèi)重要的內(nèi)分泌免疫調(diào)節(jié)肽，在未成熟樹突狀細(xì)胞和靜止巨噬細(xì)胞的表達(dá)，可優(yōu)先誘導(dǎo)抗原遞呈細(xì)胞表面的共刺激分子B7-2，促進(jìn)Th2型免疫應(yīng)答［11，12］。VIP維持記憶性Th2細(xì)胞的產(chǎn)生和Th2效應(yīng)細(xì)胞的存活，顆粒酶及Fas配體的表達(dá)達(dá)到抑制，使Th2型細(xì)胞免遭克隆清除［13］。這樣在抗原刺激下，Th2的自身調(diào)節(jié)環(huán)路可以由Th2細(xì)胞產(chǎn)生和分泌VIP來平衡［14］。

并且現(xiàn)在研究在免疫平衡中不僅有Th1，Th2的參與，Th17也起重要的作用，Th17細(xì)胞主要分泌細(xì)胞因子IL-17。IL-17是一種前炎性細(xì)胞因子，IL-l7有促進(jìn)多種細(xì)胞因子釋放及強(qiáng)大的招募中性粒細(xì)胞的作用，能誘導(dǎo)和激活中性粒細(xì)胞在呼吸道的募集，被認(rèn)為參與了機(jī)體多種炎癥性疾病的發(fā)生，參與呼吸道的炎癥，在呼吸系統(tǒng)炎癥性疾病的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。Hamada等［15］研究發(fā)現(xiàn)結(jié)核病患者體內(nèi)的也能夠分泌IL-17，在抗結(jié)核感染中發(fā)揮重要作用，其主要是銜接固有免疫與適應(yīng)性免疫的橋梁細(xì)胞因子。

我們研究也證實(shí)，采用卡介菌多糖核酸輔助治療的治療組患者治療后總療效明顯優(yōu)于對照組(P＜0．05)。雖然兩組治療后都可降低患者血清VIP和IL-17的表達(dá)，但是治療組降低程度更明顯(P＜0．05)，提示采用卡介菌多糖核酸輔助治療可以明顯改善肺結(jié)核患者的免疫平衡而改善病情。

［1］Cobett EL，Watt CJ，Walker N，et al．The growing burden of tuberclosis:global trend and interactions with the HIV epidemic．Arch Intern Med，2003，163(9):1009-1021．

［2］WHO．Global tuberculosis control:epidemiology，strategy，financingWHO/HTM/TB/2009．411．World Health Organization，2009．

［3］Yet ww，Leung CC．Updme in tuberculosis 2008．AM J Respir Crlt Care Med，2009，179(5):337-43．

［4］馮彩蓮，葉輝勝．血清IL-4在卡介苗多糖核酸治療慢性蕁麻疹療效觀察中的應(yīng)用．臨床合理用藥，2010，3(15):61-62．

［5］衛(wèi)生部疾病預(yù)防控制局，衛(wèi)生部醫(yī)政司，中國疾病預(yù)防控制中心．中國結(jié)核病防治規(guī)劃實(shí)施工作指南，2008:21-23．

［6］那琳琳，張莉，王瑩，等．胸腺肽a1聯(lián)合化療治療肺結(jié)核合并糖尿病療效觀察．哈爾濱醫(yī)藥，2012，32(1):9．

［7］廖金英，譚仲楷．斯奇康治療慢性蕁麻疹療效觀察．中國皮膚性病學(xué)雜志，2002，16(6):433．

［8］閆伯強(qiáng)，閆平．檢測支氣管哮喘患者血清1FN-γ和IL-4含量的臨床意義．細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2011，27(7):805．

［9］張旸，李平．血管活性腸肽的研究進(jìn)展．醫(yī)學(xué)綜述，2009，15 (21):3235-3238．

［10］沈云飛，殷凱生，王新寧．肺結(jié)核與肺癌患者血IL-12、IFN-γ和IL-4的聯(lián)合檢測及意義．江蘇醫(yī)藥，2006，32(12): 1110-1111．

［11］Ganea D，Rodriguez R，Delgado M．Vaseactive intestinal peptide and pituitary adenylate cyclase．a(chǎn)ctivating polypoptide:players in innate and adaptive immunity．Cell Mol Biol(Noisy-le-grand)，2003，49(8):127-142．

［12］Delgado M，Leceta J，Gomariz RP，et al．Vasoactive intestinal peptide and pituitary edenylate cyclase-activating polypeptide stimulate the induction of Th2 responses by up-regulating B7-2 expression．J Immunol，2009，163(7):3629-3635．

［13］Sharma V，Delgado M，Ganea D，Granzyme B．a(chǎn) new player in activation-induced cell death，is down-regulated by vasoacfive intestinal peptide in n12 but not Thl effectors．J Immunol，2006，176 (10):97-110．

［14］Delgado M．VIP:a very important peptide in T helper differentiation．Trends Immunol，2003，24(1):221-224．

［15］Hamada S，Umemura M，Shiono T，et al．IL-17A pfoducedby gammadelta T ceUs plays a critical mle in innate immunity against Liste-a monocytogenes infec￡ion in The liver．J lmmunol，2008，181(5):3456-3463．

The effectiveness of BCG polysaccharides nucleic acid on VIP and IL-17 in serum of patients with the initial Tu-positive tuberculosis

Ding fu-xiu.The department of tuberculosis control of jiaonan city，Shandong 266400，China

ObjectiveTo study the effectiveness of BCG polysaccharides nucleic acid(BCG-PSN)on vasoactive intestinal peptide(VIP)and interleukin-17(IL-17)in serum of patients with the initial Tu-positive tuberculosis．MethodsOne hundred and six patients with the initial Tu-positive tuberculosis were randomly divided into two groups，the control group(n=50 cases)and the treatment group(n=56 cases)．The patients in the control group were cured through chemotherapy，while the patients in the treatment group were cured through chemotherapy plus BCG-PSN．The VIP and IL-17 in the serum were detected before and after treatment．Results

The total efficient rates were 80%in the control group and 91．1%in the treatment group．There was a significant difference between two groups(P＜0．05)．There wasn't a significant difference between two groups of VIP and Il-17 before treatment(P＞0．05)．VIP and IL-17 were deceased after treatment in both groups，but these in the treatment were lower than these in the control group(P＜0．05)．ConclusionBCG-PNS can significantly decrease the VIP and IL-17 of patients with the initial Tu-positive tuberculosis．

Tuberculosis;BCG polysaccharides nucleic acid;VIP;IL-17

肺結(jié)核病是結(jié)核桿菌感染，以呼吸道傳播為主的慢性傳染病，有較高的傳染性，嚴(yán)重危害著人民的身體健康，特別是發(fā)展中國家，是我國政府重點(diǎn)控制的疾病之一，近年來此病有抬頭趨勢。每年全球有900萬新發(fā)結(jié)核病病例，近300萬人死亡［1］。我國是結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家之一［2］。雖然我們已經(jīng)有規(guī)范的治療，但在臨床具體的治療中仍存在許多不足。已有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，肺結(jié)核發(fā)展到進(jìn)展期甚至出現(xiàn)空洞可能與Th1/Th2失衡有關(guān)［3］，而血管活性腸肽(VIP)能夠調(diào)節(jié)機(jī)體的Th1/Th2的失衡。近年來研究，新發(fā)現(xiàn)的Th17細(xì)胞在肺結(jié)核的發(fā)病中也扮演了重要的角色?？ń槊缍嗵呛怂崾且环N具有廣泛的免疫調(diào)節(jié)作用的非特異性免疫調(diào)節(jié)劑［4］。我們自2007年開始采用卡介菌多糖核酸輔助治療對初始涂陽肺結(jié)核患者，療效顯著，觀察其對患者血清VIP和白細(xì)胞介素17 (IL-17)的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2007年6月至2011年5月106例初始涂陽肺結(jié)核患者。入選對象符合以下標(biāo)準(zhǔn):年齡18～64歲;按照中國結(jié)核病防治規(guī)劃實(shí)施工作指南要求的診斷程序，確診為肺結(jié)核初始涂陽［5］;X線胸片證實(shí)肺部有浸潤性改變;無嚴(yán)重心、肝、肺、腎臟疾病及肺癌、肺氣腫、支氣管擴(kuò)張、HIV感染、糖尿病、精神病等疾病;近3個(gè)月內(nèi)未使用免疫抑制劑。隨機(jī)分為兩組，對照組50例，其中男31例，女19例，年齡19～66歲，平均(35．2±9．7)歲，治療組56例，其中男35例，女21例，年齡20～67歲，平均(36．1±10．5)歲。兩組患者的性別、年齡無明顯差異(P＞0．05)，具有可比性。

266400山東省膠南市結(jié)核病防治所

1.2 治療方法對照組采用單純化療(化療方案為2 h3R3Z3E3)治療:利福平0．6 g，異煙肼0．6 g，吡嗪酰胺2．0 g (體質(zhì)量＜50 kg或年齡＞60歲者用1．5 g)，乙胺丁醇1．25 g (體質(zhì)量＜50 kg或年齡＞6O歲者1．0 g)，隔日、晨、空腹、頓服。8周為1個(gè)療程。治療組在對照組治療的基礎(chǔ)上加用卡介菌多糖核酸(吉林亞泰生物藥業(yè)股份有限公司，批號: 20090316)1 ml肌內(nèi)注射，2次/周，8周為1個(gè)療程，均治療2～3個(gè)療程

1.3 VIP和IL-17的測定方法所有受試者均于清晨空腹抽取肘靜脈血5 ml，分為兩份，注入含有5 g/L EDTA-K2抗凝劑200ul的真空試管內(nèi)，輕輕顛倒混勻后立即送檢。即刻以離心半徑8 cm 2000 r/min，離心15 min分離血清和血漿，并于-20℃保存。VIP水平采用ELISA法，在Labsystems公司W(wǎng)ellscan K3酶標(biāo)儀上測定。HCY試劑由美國DIAZYME Laboratorie公司提供。血清IL-17(試劑盒由美國Linco公司產(chǎn))應(yīng)用EILSA法測定。

1.4 療效判定標(biāo)準(zhǔn)［6］治療期間每月查痰抗酸桿菌3次，每月拍肺CT1次，觀察病灶吸收，痰菌轉(zhuǎn)陰，空洞吸收情況。顯效，肺內(nèi)病變吸收1/2及以上者，空洞縮小或閉合痰菌3個(gè)月內(nèi)轉(zhuǎn)陰。有效，肺內(nèi)病變吸收不足1/2，空洞縮小，痰菌6個(gè)月內(nèi)轉(zhuǎn)陰。無效，未達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)的。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS15．0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，兩組患者性別的比較采用χ2檢驗(yàn)，兩組測定數(shù)據(jù)的計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差±s)表示，兩組總療效的比較采用riddi分析，P＜0．05為兩組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。