蘇慧,劉萍,溫薇,蘇云明
(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),黑龍江 哈爾濱 150040)
中藥紅花為菊科植物紅花干燥管狀花,性溫,味辛,具有活血化瘀的功效。紅花黃色素為紅花的主要活性成分,研究證實(shí)[1-5],紅花黃色素能明顯減輕心肌缺血及缺血再灌注損傷,抑制血小板聚集并改善血流動(dòng)力學(xué)[6]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)大鼠動(dòng)靜脈旁路血栓形成及體外血栓形成實(shí)驗(yàn),觀察紅花黃色素凍干粉針對(duì)體內(nèi)、體外血栓形成的影響,為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
1.1 實(shí)驗(yàn)藥物 注射用紅花黃色素凍干粉針由烏魯木齊郎潤(rùn)醫(yī)藥開發(fā)有限公司提供;規(guī)格:80mg/支;用法:每天1支,用時(shí)以0.9%生理鹽水15~20ml溶解。
1.2 陽(yáng)性對(duì)照藥 復(fù)方丹參注射液由上海第九制藥廠提供;規(guī)格:2m l/支;用法:靜脈注射4m l/次,溶于20m l 50%葡萄糖溶液中,1日1~2次。
1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wistar大鼠,體質(zhì)量250~300g,雌雄各半,由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥物安全性評(píng)價(jià)中心提供;動(dòng)物合格證號(hào):09-3-3。
1.4 實(shí)驗(yàn)儀器 LBY-S5型血栓形成儀(北京宇華國(guó)際技術(shù)公司);DG-1型電熱干燥箱(重慶實(shí)驗(yàn)設(shè)備
作者簡(jiǎn)介:蘇慧(1979-),女,講師,主要研究方向:中藥現(xiàn)代藥理學(xué)研究。
收稿日期:2012-07-15
修回日期:2012-08-14
廠);DT100分析天平(北京光學(xué)儀器廠);CS213電熱培養(yǎng)箱(重慶實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠)。
2.1 紅花黃色素凍干粉針對(duì)大鼠動(dòng)靜脈旁路血栓形成的影響
取50只Wistar大鼠,稱質(zhì)量后隨機(jī)分5組,每組10只,以0.3%戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔麻醉,仰位固定于大鼠手術(shù)臺(tái)上,實(shí)施手術(shù)。彎剪剪去頸部位毛,正中切開頸部皮膚,鈍剝離分離右頸總動(dòng)脈及左頸外靜脈,將事先充滿肝素生理鹽水(50u/ml)的聚乙烯管(分三段連結(jié),在中段放入長(zhǎng)6cm的4號(hào)手術(shù)線)的一端插入左頸外靜脈后,從聚乙烯管注入肝素50u/kg,夾住管壁,將右頸總動(dòng)脈近心端以止血夾阻斷血流,眼科剪剪一“△”口,將聚乙烯管另一端插入右頸總動(dòng)脈,結(jié)扎,立即舌下靜脈注射紅花黃色素凍干粉針溶液,低劑量組7.2mg/kg;中劑量組14.4mg/kg;高劑量組28.8mg/kg;陽(yáng)對(duì)藥復(fù)方丹參注射液1.8ml/kg;陰性對(duì)照組給予等體積生理鹽水,10min后打開止血夾開放血流,血液從右頸總動(dòng)脈經(jīng)聚乙烯管返回左頸外靜脈,開放血流15min后,中斷血流,迅速取下聚乙烯管,取出手術(shù)線并稱重,以總重量減去線重計(jì)算血栓濕重。2.2 紅花黃色素凍干粉針對(duì)大鼠體外血栓形成的影響
取50只Wistar大鼠,隨機(jī)分為5組,每組10只,0.3%戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔麻醉大鼠,仰位固定于大鼠手術(shù)臺(tái)上,手術(shù)剝離頸總動(dòng)脈及股靜脈。舌靜脈給藥,劑量同上,10min后頸總動(dòng)脈插管取血1.8ml,注入標(biāo)好刻度線的血栓硅膠管中,套緊血栓管裝入體外血栓形成儀,啟動(dòng)轉(zhuǎn)盤,計(jì)時(shí),轉(zhuǎn)動(dòng)15min后,停機(jī),取下血栓管,將管內(nèi)血液及已形成的血栓迅速倒在預(yù)先鋪好濾紙的平皿中,用眼科鑷子輕輕由一端提出血栓,使血栓下垂,移放干燥濾紙上,用分規(guī)刻度尺測(cè)血栓長(zhǎng)度,后提起血栓重新放在稱量好的濾紙上,稱其濕重后,置恒溫烤箱60℃烘烤30min,稱干重。
3.1 紅花黃色素凍干粉針對(duì)大鼠動(dòng)靜脈旁路血栓形成的影響
復(fù)方丹參組及紅花黃色素凍粉針各劑量組與生理鹽水組組間比較用t檢驗(yàn),結(jié)果顯示,復(fù)方丹參組與紅花黃色素凍干粉針各劑量組均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01或P<0.005),說(shuō)明紅花黃色素凍干粉針及復(fù)方丹參均具有明顯的抑制大鼠體內(nèi)血栓形成的作用,且紅花黃色素凍干粉針中劑量組作用優(yōu)于高、低劑量組及復(fù)方丹參組。結(jié)果見表1。
表1 紅花黃色素凍干粉針對(duì)大鼠血栓形成的影響(±s,n=10)
表1 紅花黃色素凍干粉針對(duì)大鼠血栓形成的影響(±s,n=10)
注:與生理鹽水組比較,**P <0.01,***P <0.005。
組別 劑量(mg/kg) 血栓濕重(mg)生理鹽水組 等體積62.89 ±20.41復(fù)方丹參組 1.8(ml) 33.59 ±13.30***紅花黃色素凍干粉針低劑量組 7.2 35.85 ±16.52**紅花黃色素凍干粉針中劑量組 14.4 30.30 ±13.18***紅花黃色素凍干粉針高劑量組 28.8 35.94 ±14.78**
3.2 紅花黃色素凍粉針對(duì)大鼠體外血栓形成的影響
紅花黃色素凍干粉針各劑量組及復(fù)方丹參注射液組與生理鹽水組組間比較用t檢驗(yàn),結(jié)果顯示,紅花黃色素凍干粉針各組及復(fù)方丹參組血栓長(zhǎng)度均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05或P<0.005);紅花黃色素凍干粉針各組及復(fù)方丹參組血栓濕重均有顯著性差異(P<0.05或P<0.01或P<0.005);紅花黃色素凍干粉針各組能減少血栓干重形成,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,而復(fù)方丹參組有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01);結(jié)果顯示,紅花黃色素凍干粉針及復(fù)方丹參注射液均有抑制血栓形成的作用,其中紅花黃色素凍干粉針中劑量組優(yōu)于低、高劑量組,與復(fù)方丹參組作用相當(dāng)。結(jié)果見表2。
表2 紅花黃色素對(duì)大鼠體外血栓形成的影響(±s,n=10)
表2 紅花黃色素對(duì)大鼠體外血栓形成的影響(±s,n=10)
注:與生理鹽水組比較,*P <0.05,**P <0.01,***P <0.005
組別 劑量(mg/kg) 血栓長(zhǎng)度(mm) 血栓濕重(mg) 血栓干重(mg)生理鹽水組 等體積103.0 ±51.9 578.7 ±363.0 64.33 ±36.0復(fù)方丹參組 1.8(ml) 24.0±30.4*** 105.2±103.5*** 21.12±14.5**凍干粉針低劑量組 7.2 53.0 ±26.9* 267.6 ±155.1* 49.72 ±31.7凍干粉針中劑量組 14.4 29.7±25.3*** 152.9±127.2** 35.83±31.9凍干粉針高劑量組 28.8 47.6 ±52.7* 215.7 ±220.7*41.23 ±41.1
通過(guò)大鼠動(dòng)靜脈旁路血栓形成和體外血栓形成實(shí)驗(yàn),觀察紅花黃色素凍干粉針的抗血栓作用,證實(shí)紅花黃色素凍干粉針具有明顯的抑制大鼠體內(nèi)與體外血栓形成作用,其中在體內(nèi)血栓形成試驗(yàn)中,紅花黃色素凍干粉針組藥效優(yōu)于復(fù)方丹參組。在體外血栓形成試驗(yàn)中,紅花黃色素凍干粉針對(duì)血栓濕重、干重影響與復(fù)方丹參組作用相當(dāng)。說(shuō)明紅花黃色素凍干粉針具有較好的活血化瘀作用,具有較好的臨床應(yīng)用前景。
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