陳 晨，趙曉輝，文懷秀，陶燕鐸，邵 赟*，梅麗娟

(1.中國科學(xué)院西北高原生物研究所，青海西寧810008;2.中國科學(xué)院研究生院，北京100049)

虎耳草(Saxifraga stolonifera Meerb.)為虎耳草科虎耳草屬植物。性味:辛、苦，寒;小毒。有疏風(fēng)清熱，涼血解毒之功效。用于風(fēng)熱咳嗽，急性中耳炎、大泡性鼓膜炎，風(fēng)疹瘙癢等疾病治療。其主要成分有巖白菜素、鼠李糖苷、槲皮素、原兒茶酸、沒食子酸、琥珀酸、反甲基丁烯二酸等［1－5］。而對虎耳草的石油醚中提取物分析研究較少。作者采用微波輔助石油醚提取法提取虎耳草中的脂溶性成分，利用氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對其化學(xué)成分進行分析，為虎耳草的開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 分析儀器

GC6890N/MSD5973N聯(lián)用儀;N－1001旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海愛朗儀器有限公司);AG204電子分析天平(梅特勒公司)。

1.2 虎耳草藥材

于2010年8月采自青海省玉樹州。經(jīng)中國科學(xué)院西北高原生物研究所梅麗娟高級工程師鑒定為虎耳草(Saxifraga stolonifera Meerb.)，全株清洗后用去離子水沖洗，然后自然陰干，粉碎后備用。

1.3 脂溶性成分的提取

稱取粉碎后的虎耳草30 g，加入150 mL石油醚，用微波提取30 min，過濾，殘渣加石油醚50 mL，微波提取10 min，過濾，濾液合并，減壓蒸餾去除溶劑至干，得到黑色半油狀固體物2.02 g，得率為6.73%。將石油醚提取物用小柱分成3部分既得極性餾分、弱極性餾分、非極性餾分。然后將3個餾分分別用乙醚溶劑，作為測定的樣品。

1.4 氣相色譜一質(zhì)譜一計算機聯(lián)用分析條件

GC汽化室溫度250℃，美國J＆WHP－5(30 m×0.25 mm ×0.25 μm)彈性石英毛細(xì)管柱，以4 ℃ /min的升溫速率由80℃程序升溫至290℃，恒溫30 min，載氣為99.999%高純氦。MSD離子源為 EI源，離子源溫度230℃，電子能量70 eV;使用美國NIST02譜庫。

表1 虎耳草石油醚提取物中極性餾分化學(xué)成分

2 結(jié)果與討論

2.1.1 極性餾分GC－MS分析

采用分辨率高、質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫龐大、分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠的GC—MS聯(lián)機法進行分離、鑒定。經(jīng)分離得到23個峰，通過各組分的質(zhì)譜碎片解離規(guī)律以及與美國NIST02數(shù)據(jù)庫的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對照分析，確定其中主要的23種成分。極性餾分的總離子圖和測定結(jié)果見表1。

虎耳草極性餾分中主要的化學(xué)成分有正十六烷酸含量高達(41%)，8，10－二甲氧基－十八烷酸(15%)，反式－11－羥基－5甲氧基－11－十八烯酸(5.5%)，反式－10－羥基－6－甲氧基－10－十八烯酸(5.1%)，順式－10－羥基－6－甲氧基－10－十八烯酸(5.1%)，順式－11－羥基－5甲氧基－11－十八烯酸(2.5%)，10，15－二甲氧基－13－二十烯酸(2.3%)。

2.1.2 弱極性餾GC－MS分析

采用分辨率高、質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫龐大、分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠的GC－MS聯(lián)機法進行分離、鑒定。經(jīng)分離得到49個峰，通過各組分的質(zhì)譜碎片解離規(guī)律以及與美國NIST02數(shù)據(jù)庫的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對照分析，確定其中主要的47種成分。弱極性餾分的總離子圖和測定結(jié)果見表2。

表2 虎耳草石油醚提取取物中弱極性餾分化學(xué)成分

虎耳草弱極性餾分中主要的化學(xué)成分有十六烷酸乙酯含量高達(21.3%)，新植二烯(8.4%)，反式－油酸乙酯(5.8%)，降姥鮫－2－酮(4.2%)。

(續(xù)表2)

表3 虎耳草石油醚提取物中非極性餾分化學(xué)成分

2.1.3 非極性餾GC－MS分析

采用分辨率高、質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫龐大、分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠的GC－MS聯(lián)機法進行分離、鑒定。經(jīng)分離得到30個峰，通過各組分的質(zhì)譜碎片解離規(guī)律以及與美國NIST02數(shù)據(jù)庫的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對照分析，確定其中主要的30種成分。非極性餾分的總離子圖和測定結(jié)果見表3。

虎耳草非極性餾分中主要的化學(xué)成分有正二十九烷含量高達(60%)，正二十七烷(19.2%)，正三十一烷(4.9%)，正二十五烷(2.6%)。

3 討論

本文采用微波提取虎耳草具有省時、省溶劑、操作簡便、提高產(chǎn)率等優(yōu)點。采用氣相色譜－質(zhì)譜－數(shù)據(jù)系統(tǒng)聯(lián)用技術(shù)能夠?qū)]發(fā)油和低極性部位的化學(xué)成分快捷、簡便、準(zhǔn)確的分析。

［1］貴州省藥品監(jiān)督局.貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)［M］.貴陽:貴州科技出版社，2003:235.

［2］江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典［M］.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社.1977:1335.

［3］羅厚蔚，吳葆金，陳節(jié)庵，等.虎耳草有效成分的研究［J］.中國藥科大學(xué)學(xué)報，1988:19(1):1－3.

［4］岳美娥，姜廷福，師彥平，等.高效毛細(xì)管電泳測定虎耳草屬植物中虎耳草素含量［J］.分析測試技術(shù)與儀器，2005，11(1):7－9.

［5］張秋海，丁家欣，張 玲，等不同產(chǎn)地與采收季節(jié)虎耳草中原兒茶素的含量測定［J］.現(xiàn)代中藥研究與實踐，2004，18(4):30－31.