程紅兵，武延雋，張雄鷹，陳云霞，孟 莉 (長治醫(yī)學院微生物學教研室，長治 046000;長治醫(yī)學院病原綜合實驗室;通訊作者，E-mail:wyj34@6.com)

結核病是一個主要的全球公共衛(wèi)生問題［1］。各種抗結核藥物在20世紀相繼問世，使結核病的治愈成為可能，但隨后，在治療結核病的過程中出現了結核分枝桿菌的耐藥性問題。有關結核分枝桿菌的耐藥性目前主要有兩種:獲得性耐藥(acquired drug resistance)和原發(fā)耐藥(primary drug resistance)。原發(fā)耐藥的測定，可反映一個地區(qū)結核分枝桿菌耐藥性的流行趨勢和抗結核治療成效，因此，對原發(fā)耐藥的測定和研究就顯得十分重要。而不同年齡組病人與耐藥性形成的相關性，近年來研究較少。本研究對長治市各年齡組結核病原發(fā)耐藥性進行了監(jiān)測，并對其結果進行了統計分析，為制定結核病的控制策略提供科學依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象 收集2000－01～2006－12在長治市各個醫(yī)院和長治市結核病防治所就診的739例原發(fā)結核患者痰標本。根據病人年齡將研究對象分為青年組(18－39歲)，中年組(40－59歲)和老年組(≥60歲)，各組間性別及病情差異無統計學意義，具有可比性。

1.2 耐藥性分類 采用WHO結核病耐藥監(jiān)測指南中的分類，將既往從未用過抗結核藥物或用藥不足1月表現為耐藥性者列為原發(fā)耐藥。耐多藥結核病(MDR-TB)是指至少同時對異煙肼(isoniazid，INH)和利福平(rifampicin，RFP)耐藥的結核病患者。對所有患者進行耐藥性測定。

1.3 實驗方法 收集的各標本經常規(guī)處理后接種至我室自制的改良羅氏培養(yǎng)基中，進行分離培養(yǎng)，鑒定為結核分枝桿菌后，采用絕對濃度法的間接法，用鏈霉素(streptomycin，SM)、異煙肼(isoniazid INH)、利福平(rifampicin，RFP)、乙胺丁醇(ethambutol，EMR)等4種抗癆藥物進行耐藥性測定。具體方法嚴格按照1996年《結核病診斷細菌學檢驗規(guī)程進行操作》［2］。試驗中所用的抗癆藥物均購自上海市醫(yī)藥信托責任有限公司信宜制藥總廠。

1.4 質控方式 在進行上述藥物的耐藥性測定時，每批藥敏試驗均用結核分枝桿菌H37RV藥物敏感株作為對照，用無藥的我室自制的改良羅氏培養(yǎng)基作為空白對照，進行質量控制。

1.5 統計學分析 耐藥率用百分率表示;組間差異使用SPSS13.0軟件進行χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同年齡組原發(fā)耐藥情況 結核病患者總的原發(fā)耐藥率為31.0%，中年組最高為34.9%，其次為青年組31.3%，老年組最低24.5%，但是三組間比較差異無統計學意義(P＞0.05，見表1)。每個年齡組各藥耐藥率從高到低依次為 SM、INH、RFP、EMR，耐 SM率最高為 22.2%，耐 EMR最低為7.6%。三組間耐SM率、耐RFP率、耐INH率比較差異無統計學意義(P＞0.05);青年組和老年組耐EMR 率差異無統計學意義(χ2=0.058，P=0.809)，青年組和中年組(χ2=8.125，P=0.004)及中年組和老年組(χ2=5.772，P=0.016)比較差異有統計學意義。

表1 不同年齡組原發(fā)耐藥情況 株(%)Tab 1 The primary drug-resistance in different age groups strains(%)

2.2 不同年齡組原發(fā)耐1－4藥及耐多藥率 從表2可知，耐1藥、耐2藥、耐4藥、耐多藥不同年齡組的耐藥順序均為:中年組＞青年組＞老年組。耐3藥的耐藥順序為:中年組＞老年組＞青年組。三組間耐藥率比較差異無統計學意義(P＞0.05)。原發(fā)耐多藥率中年組最高(5.5%)，其中青年組和中年組(χ2=1.784，P=0.182)及青年組和老年組(χ2=1.647，P=0.199)比較差異無統計學意義，中年組和老年組比較差異有統計學意義(χ2=4.634，P=0.031)。

表2 不同年齡組原發(fā)耐1－4藥及耐多藥率 株(%)Tab 2 The conditions of 1－4 drug-resistance and multi-drug resistance in different age groups strains(%)

3 討論

結核桿菌是重大傳染病結核病的病原體。進入21世紀，結核病又有死灰復燃的跡象，全球每年新增約800萬結核病例，180萬人死于結核病。世界衛(wèi)生組織2009年公布的全球結核病控制報告估計2007年全球發(fā)生927萬結核病例。耐藥結核菌，尤其是耐多藥結核菌仍然是結核病防治的難點。原發(fā)耐藥是結核分枝桿菌產生耐藥性產生的重要原因，在結核病耐藥監(jiān)測中，更應加強原發(fā)耐藥結核菌的監(jiān)控［3］。本文報道的長治市2000－2006年7年間原發(fā)耐藥率為31.9%，低于黑龍江省的36.2%［4］和上海市的40.7%［5］，高于2000年全國結核病流行病學調查18.6%，其耐藥水平偏高。本次調查原發(fā)耐藥率中年組最高，與王國斌等［6，7］報道一致。以耐藥類型看，耐單一藥物中以耐SM為首位;每個年齡組各藥耐藥率從高到低依次為 SM、INH、RFP、EMR，青年組和中年組對各藥的耐藥率高于老年組。如果以同時耐INH、RFP作為耐多藥的標準，長治市原發(fā)耐多藥率為3.5%，低于全國結核病流行病學調查7.6%;其中中年組顯著高于老年組(P＜0.05)。在原發(fā)耐藥率、耐多藥率中，均以中年組為最高，其原因可能與不合理、不規(guī)則以及盲目用藥等有關。原發(fā)耐藥率較高，說明應加強控制傳染源、特別是耐藥結核分枝桿菌的傳播。

綜上所述，長治市原發(fā)結核患者存在較高的耐藥率，且不同年齡組原發(fā)耐藥率的差異較大，建議應重視不同年齡組結核病患者的耐藥監(jiān)測，開展快速準確的結核分枝桿菌的耐藥性測定，針對個人耐藥性的測定結果，建立有效治療方案，減少復發(fā)率，降低耐藥率，使長治市結核病的發(fā)生率得到控制。

［1］ Hristea A，Otelea D，Paraschiv S，et al.Detection ofMycobacterium tuberculosisresistance mutations to rifampin and isoniazid by realtime PCR［J］.Indian J Med Microbiol，2010，28(3):211－216.

［2］ 中國防癆協會.結核病診斷細菌學檢驗規(guī)程［J］.中國防癆雜志，1996，18(2):80－85.

［3］ 梅建，薛楨，沈鑫，等.原發(fā)性耐藥是耐藥結核菌產生的重要原因［J］.中華結核和呼吸雜志，2006，29(2):75－78.

［4］ 謝艷光，李發(fā)斌，閆興錄.黑龍江省WHO結核病耐藥監(jiān)測報告［J］.中國防癆雜志，2008，30(5):395－398.

［5］ 唐神結，肖和平，夏祥新，等.不同年齡組結核分枝桿菌耐藥性的研究［J］.中華結核和呼吸雜志，2001，24(2):83－86.

［6］ 王國斌，彭義利，張國龍，等.河南省WHO結核病耐藥監(jiān)測報告［J］.中國防癆雜志，1999，21(3):167－168.

［7］ 王國斌，彭義利，張國龍，等.中國河南省WHO結核病耐藥監(jiān)測報告(續(xù))［J］.中國防癆雜志，1999，21(4):185－190.