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(秦皇島市第一醫(yī)院,河北秦皇島 066000)

隨著分子生物學(xué)研究的不斷拓展和深入,發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用乳腺癌相關(guān)的特異腫瘤標(biāo)記物已成為可能,這為研究乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展提供了更多更新的信息,并可能對(duì)每一個(gè)體腫瘤做出精確的判斷。我們應(yīng)用免疫組化 SP法檢測(cè)了 150例乳腺癌雌激素受體 (ER)、c-erbB2、HMGA 2表達(dá) ,探討其與組織學(xué)分級(jí)及術(shù)后生存期的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 本院 1997年 2月～2005年 6月存檔乳腺癌蠟塊 150例,并術(shù)后隨訪 5～10 a,男 3例、女 147例,年齡 25～71歲、平均 48.6歲。收到隨訪結(jié)果 43例,生存期以 5 a為界分組:5 a以上 24例、5 a以下 19例。病理分型:單純癌 105例、浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌 35例、浸潤(rùn)性小葉癌 4例、黏液腺癌 3例、髓樣癌 3例。組織學(xué)分級(jí)采用 Bloom-Richardson系統(tǒng)的Nottingham改良方案,根據(jù)標(biāo)本的腺管形成、細(xì)胞核異形性及核分裂相計(jì)數(shù)分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí),分別為54、25、71例。 ER、c-erbB2、HMGA 2、SP試劑盒購(gòu)自福州邁新生物有限公司。

1.2 免疫組化方法 采用免疫組化 SP法,實(shí)驗(yàn)步驟按 SP試劑盒說明書進(jìn)行。結(jié)果判斷參照 Campo等[1]的標(biāo)準(zhǔn),結(jié)合細(xì)胞質(zhì)染色強(qiáng)度和細(xì)胞染色百分率進(jìn)行評(píng)分:基本不著色為 0分,著色弱為 1分,著色中度為 2分,著色強(qiáng)為 3分;著色細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)≤5%為 0分,5%～25%為 1分,26%～50%為 2分,≥50%為 3分。最后以陽性細(xì)胞的百分比和染色強(qiáng)度評(píng)分之積所得的總分進(jìn)行結(jié)果判定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用 SPSS 10.0軟件處理數(shù)據(jù),組間比較采用 χ2檢驗(yàn),變量之間的相關(guān)性用 Pearson等級(jí)相關(guān)分析檢驗(yàn),以 P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 蛋白表達(dá) ER、c-erbB2、HMGA2在乳腺癌的陽性表達(dá)率分別為 54.2%、45.8%、42.8%。各種蛋白表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)的關(guān)系見表1。

表1 ER、c-erbB 2、HMGA 2表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)關(guān)系

2.2 相關(guān)性分析 ER表達(dá)與生存期未見明確的關(guān)系。c-erbB2在生存期≤5 a患者中陽性表達(dá)率為79.6%、＞5 a患者中為 32.4%,P＜0.01;HMGA2在生存期≤5 a患者中陽性表達(dá)率為 81.7%、＞5 a患者中為 46.4%,P＜0.05。 c-erbB2、HMGA2表達(dá)與生存期呈負(fù)相關(guān)(r=-0.342、-0.394,P均 ＜0.05)。

3 討論

ER蛋白由 595個(gè)氨基酸組成,分子量為 66 kDa,具有轉(zhuǎn)錄激活和阻遏、核定位、DNA結(jié)合、激素結(jié)合等多種功能,在乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展中起著關(guān)鍵性的作用[2]。ER陽性乳腺癌患者具有較長(zhǎng)的無瘤生存期,但遠(yuǎn)期隨訪其預(yù)后的差別很小,缺乏統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本文結(jié)果顯示 ER表達(dá)隨組織學(xué)分級(jí)升高而降低,提示腫瘤對(duì) ER的依賴性隨之降低,ER對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)和增殖調(diào)控能力逐漸缺失。

c-erbB2是分子量為 185 kDa的原癌基因,與表皮生長(zhǎng)因子受體高度同源,其蛋白產(chǎn)物與細(xì)胞生長(zhǎng)密切相關(guān),在細(xì)胞增殖、分化中起重要的作用。它在乳腺癌中的表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)有關(guān),即級(jí)別高的腫瘤 c-erbB2陽性率較高,證實(shí)它可以作為判斷乳腺癌預(yù)后的重要指標(biāo)。本研究表明 c-erbB2表達(dá)隨組織學(xué)分級(jí)升高而升高,提示腫瘤對(duì)其依賴性隨之增加,其對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)和增殖調(diào)控能力逐漸增強(qiáng)。

HMGA2屬于高遷移率蛋白 I家族一員,是細(xì)胞核內(nèi)一組小分子的染色體結(jié)合蛋白。許多研究表明它在基因的表達(dá)調(diào)控以及細(xì)胞的增殖和分化方面均起重要作用。迄今已經(jīng)發(fā)現(xiàn)來源于脂肪、甲狀腺、造血組織、子宮、肺和乳腺等組織的許多良惡性腫瘤都存在 HMGA2的異常表達(dá),提示它在腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)化中起重要作用[3～7]。本研究顯示,HMGA2表達(dá)與乳腺癌分級(jí)升高有明顯上升趨勢(shì)、與生存期負(fù)相關(guān)。分化差的癌組織,參與增殖的細(xì)胞多,腫瘤生長(zhǎng)迅速,病程進(jìn)展快,患者生存時(shí)間短,說明 HMGA2的表達(dá)水平和乳腺癌的惡性程度密切相關(guān),所以 HMGA2能作為判斷預(yù)后的有用指標(biāo)之一。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示 ER陽性是乳腺癌預(yù)后好的標(biāo)志,c-erbB2、HMGA2陽性是預(yù)后差的標(biāo)志,聯(lián)合檢測(cè)這幾項(xiàng)指標(biāo)為臨床判斷乳腺癌患者預(yù)后、指導(dǎo)內(nèi)分泌治療、判斷遠(yuǎn)期療效提供參考價(jià)值。

[1]Campo E,MerinoMJ,Liotta L,et al.Distribution of the 72-kd type IV collagenase in nonneo plastic and neoplastic thyroid tissue[J].Hum Pathol,1992,23(12):1395-1401.

[2]Vasconcelos A,Medeiros R,Veiga I,et al.Analysisof estrogen receptor polymorphism in codon 325 by PCR-SSCP in breast cancer:association with lymph node metastasis[J].Breast J,2002,8(4):226-229.

[3]Pentimalli F,Dentice M,Fedele M,et al.Suppression of HMGA 2 protein synthesis could bea tool for the therapy of well differentiated liposarco mas overex pressing HMGA 2[J].Cancer Res,2003,63(21):7423-7427.

[4]Rogalla P,Drechsler K,Schr?der-Babo W,et al.HMGIC expression patterns in non-small lung cancer and surrounding tissue[J].Anticancer Res,1998,18(5A):3327-3330.

[5]Flohr AM,Rogalla P,Bonk U,et al.High mobility group protein HMGA 1 expression in breast cancer reveals a positive correlation with tumour grade[J].Histol Histopathol,2003,18(4):999-1004.

[6]Sezer O,Langelotz C,Blohmer JU,etal.Detection of HMGI-C in the peripheral blood of breast cancer patients[J].Eur J Cancer,2000,36(15):1944-1948.

[7]Langelotz C,Schmid P,Jakob C,et al.Expression of high-mobility-group-protein HMGI-C mRNA in the peripheral blood is an independent poor prognostic indicator for survival in metastatic breast cancer[J].Br JCancer,2003,88(9):1406-1410.