吳興利,裴 翔,李德印,李金珉,楊丁友,高玉玲,朱 梅,陳 琪,王士雯

不穩(wěn)定型心絞痛(UAP)的病理學(xué)基礎(chǔ)主要為動脈粥樣硬化(AS)斑塊破裂及血栓形成以致管腔阻塞,實(shí)驗(yàn)表明血液炎性細(xì)胞以及發(fā)生表型轉(zhuǎn)化的血管平滑肌細(xì)胞的遷移、浸潤以及活化等在引起斑塊破裂中起關(guān)鍵作用[1-3]。白細(xì)胞介素-18(IL-18)、白細(xì)胞介素-1(IL-1)均為“多效能”細(xì)胞因子,其在AS斑塊中以及在冠心病患者血液中的高水平表達(dá)已經(jīng)引起學(xué)者們的關(guān)注[4,5]。多項研究也發(fā)現(xiàn),可溶性細(xì)胞間黏附分子-1(sICAM-1)升高可反映單核細(xì)胞與血管內(nèi)皮的黏附性增強(qiáng),其升高與AS程度及冠心病高危事件顯著相關(guān)[6]。丹參多酚酸鹽是從中藥丹參中提取的以丹參乙酸鎂為主要成分的丹參多酚酸鹽類化合物,具有活血化瘀作用,臨床已開始應(yīng)用于冠心病的治療[7]。本研究通過觀察UAP患者應(yīng)用丹參多酚酸鹽治療前后血清IL-18、IL-1以及sICAM-1水平的變化,探討該藥治療冠心病的免疫藥理學(xué)機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 病例選擇 根據(jù)1979年WHO《缺血性心臟病的命名及診斷標(biāo)準(zhǔn)》,共收集經(jīng)冠狀動脈造影確診的冠心病不穩(wěn)定型心絞痛患者72例,年齡65歲～85歲(69.5歲±8.5歲),其中男41例,女31例。除外高血壓未控制[收縮壓≥180mmHg(1mmHg=0.133kPa),舒張壓≥110mmH g],重度心、肺、肝、腎功能不全,出血性疾病,精神病患者,過敏體質(zhì)者。

1.2 病例分組 將72例UAP患者隨機(jī)分為丹參多酚酸鹽組(39例)與常規(guī)治療組(33例)。丹參多酚酸鹽組男24例,女15例,年齡65歲～85歲,病程7.5年～15.5年;常規(guī)治療組男19例,女14例,年齡65歲～85歲,病程7.4年～14.9年。兩組在年齡、性別、基礎(chǔ)病等方面無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。另以體檢健康的18名老年人為正常對照組,其中男12名,女6名,年齡65歲～85歲。

1.3 給藥方法 常規(guī)治療組皮下注射低分子肝素(連續(xù)用3 d),口服單硝酸異山梨醇酯緩釋片、美托洛爾、硫酸氫氯吡格雷、阿司匹林及辛伐他汀。丹參多酚酸鹽組在常規(guī)治療組治療基礎(chǔ)上加用注射用丹參多酚酸鹽200 mg加入生理鹽水或葡萄糖溶液250 m L中靜脈輸注,1次/日,療程14 d。

1.4 標(biāo)本采集 正常組采血1次,兩治療組于治療前及治療14 d后各采血1次。于清晨空腹時靜脈采血4 m L,分離血清后置-70℃冰箱保存待測。

1.5 細(xì)胞因子測定 采用酶聯(lián)免疫比色法測定血清IL-18、IL-1和sICAM-1含量,嚴(yán)格按試劑盒說明書測定。IL-18和IL-1的測定范圍為15.6 ng/L～100 ng/L。sICAM-1的測定范圍為0.125 ng/L～10 ng/L。

1.6 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 15.0軟件統(tǒng)計分析,計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,多組間比較采用方差分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

治療前兩治療組血清IL-18、IL-1和sICAM-1含量無統(tǒng)計學(xué)意義,但均顯著高于正常對照組(P＜0.01)。治療14 d后,丹參多酚酸鹽組治療后IL-18、IL-1和sICAM-1含量較治療前及常規(guī)治療組治療后均有明顯下降(P＜0.05或P＜0.01),常規(guī)治療組僅IL-18和IL-1較治療前降低明顯(P＜0.05或P＜0.01)。詳見表1。

表1 丹參多酚酸鹽對UAP患者血清三種細(xì)胞因子水平的影響(±s)

表1 丹參多酚酸鹽對UAP患者血清三種細(xì)胞因子水平的影響(±s)

組別n IL-18(ng/L)IL-1(ng/L)sICAM-1(μg/L)正常對照組18 37.42±11.57 60.72±23.97 58.37±19.52常規(guī)治療組 治療前33 115.32±37.021)341.23±68.441)547.69±157.811)治療后33 88.21±27.662)280.36±69.073)492.39±149.52丹參多酚酸鹽組 治療前39 116.17±38.331)340.88±67.961)551.39±162.371)治療后39 68.11±23.373)4)122.79±45.883)5)127.62±79.383)5)與正常對照組比較,1)P＜0.01;與本組治療前比較,2)P＜0.05,3)P＜0.01;與常規(guī)治療組治療后比較,4)P＜0.05,5)P＜0.01

3 討 論

大量研究證實(shí),UAP的發(fā)病主要與動脈壁的免疫病理性炎癥加重,促使AS斑塊破裂及血栓形成有關(guān)[1-3],因此,發(fā)現(xiàn)對此炎癥進(jìn)程中重要炎性因子具有較全面調(diào)節(jié)作用的藥物正在成為AS防治研究方向之一。丹參多酚酸鹽是中藥丹參主要活性成分,應(yīng)用于冠心病的治療已經(jīng)取得較好療效,但其對炎癥因子的影響及機(jī)制尚不明確[7]。

IL-18是一種促炎因子,它具有復(fù)雜的生物學(xué)功能,包括誘導(dǎo)輔助性T細(xì)胞、B細(xì)胞、單核細(xì)胞和NK細(xì)胞等多種細(xì)胞產(chǎn)生干擾素-γ(INF-γ)、IL-1、IL-2、IL-8、單核細(xì)胞趨化蛋白1、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子等細(xì)胞因子,并且上調(diào)ICAM-1和血管細(xì)胞黏附分子的表達(dá)[8,9]。實(shí)驗(yàn)證實(shí),多種器官、組織和細(xì)胞包括AS斑塊內(nèi)的巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)均產(chǎn)生IL-18,它在局部誘導(dǎo)INF-γ的產(chǎn)生進(jìn)而激發(fā)炎癥級聯(lián)反應(yīng),導(dǎo)致AS斑塊破裂。新近研究認(rèn)為IL-18是預(yù)示AS斑塊穩(wěn)定性的標(biāo)志物。臨床研究發(fā)現(xiàn)[4],血清IL-18水平增高是患者未來發(fā)生致死性心血管事件的獨(dú)立預(yù)測因子,因此抑制IL-18可能成為治療UAP的新途徑。本研究顯示,UAP患者的血清IL-18明顯高于正常人,這與上述臨床研究報道一致,提示IL-18可能參與老年人UAP的發(fā)病。

已有的實(shí)驗(yàn)表明,IL-1是AS斑塊中重要的炎癥因子之一,它可上調(diào)血管壁細(xì)胞因子及黏附分子的基因表達(dá)水平,增強(qiáng)這些分子的黏附能力,現(xiàn)已明確多種因素包括細(xì)胞因子IL-18、促有絲分裂因子等可促使VSMC表達(dá)IL-1。IL-1具有多種生物學(xué)功能,它作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞、VSMC、單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞等,誘導(dǎo)ICAM-1、單核細(xì)胞趨化蛋白-1、IL-1、腫瘤壞死因子-α的表達(dá),增加炎性細(xì)胞對VSMC的黏附,促進(jìn)VSMC增生,損傷內(nèi)皮功能,直接抑制內(nèi)皮細(xì)胞釋放舒血管物質(zhì),促進(jìn)內(nèi)膜增殖及AS的形成[5,10-13]。本研究結(jié)果顯示,UAP患者血清IL-1明顯高于正常人,提示在UAP的發(fā)病中有包括IL-1在內(nèi)的炎性因子參與。

ICAM-1廣泛表達(dá)于動脈內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞,在AS炎癥反應(yīng)的各階段均起重要作用[6,14,15]。它具有調(diào)節(jié)細(xì)胞間免疫黏附和啟動免疫反應(yīng)的功能,可加強(qiáng)巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞和肥大細(xì)胞與血管內(nèi)皮的黏附、遷移與轉(zhuǎn)化,促進(jìn)炎性反應(yīng)的發(fā)生、發(fā)展。sICAM-1是ICAM-1的可溶形式,由蛋白酶裂解使后者的胞外成分脫落而來,基本反映與膜結(jié)合的ICAM-1的表達(dá)情況。通過測定血液中sICAM-1水平變化,一些學(xué)者認(rèn)為它是動脈粥樣硬化程度及冠心病高危事件的獨(dú)立預(yù)測因子[16,17]。本研究發(fā)現(xiàn)UAP患者血清sICAM-1較正常人明顯升高,說明ICAM-1高表達(dá)與UAP的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)。

丹參多酚酸鹽是丹參的水溶性有效部位,它具有抗血小板聚集、抗血栓形成、改善微循環(huán)、抗氧化損傷、抑制低密度脂蛋白的氧化、促進(jìn)血管生成、增加冠狀動脈流量等作用。并且通過促進(jìn)鉀通道開放,抑制內(nèi)皮細(xì)胞參與的炎癥反應(yīng)、促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移、抑制醛糖還原酶活性、減輕鈣超載等對缺血再灌注損傷組織發(fā)揮保護(hù)作用[7,18]。幾項臨床研究也表明,其對穩(wěn)定型心絞痛、UAP等均具有較好療效[19,20]。本研究結(jié)果表明,與本組治療前及常規(guī)治療組治療后比較,丹參多酚酸鹽能夠顯著降低血清中IL-1 8、IL-1及sICAM-1水平(P＜0.05或P＜0.01)。常規(guī)治療組治療后僅IL-18、IL-1水平較治療前降低(P＜0.05或P＜0.01),而sICAM-1水平未見明顯變化。此項試驗(yàn)結(jié)果提示丹參多酚酸鹽可能通過抑制IL-18、IL-1及sICAM-1表達(dá),較全面調(diào)控AS部位的炎癥反應(yīng),穩(wěn)定斑塊,降低急性冠脈事件發(fā)生率。這也可能是其具有防治動脈粥樣硬化的機(jī)制之一。

現(xiàn)有的研究結(jié)果提示,IL-18,IL-1及sICAM-1等多功能炎癥因子可能協(xié)同參與UAP的發(fā)生發(fā)展,丹參多酚酸鹽的滿意臨床療效可能與其抑制多種細(xì)胞因子的產(chǎn)生,較全面調(diào)控AS局部炎癥反應(yīng),穩(wěn)定斑塊有關(guān)。此將有助于推進(jìn)以丹參多酚酸鹽為代表的中藥防治AS機(jī)制研究,為其臨床應(yīng)用理論提供支持。但是,丹參多酚酸鹽調(diào)控細(xì)胞因子分泌的更深入機(jī)制有待進(jìn)一步闡明。

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