王慧凱 周 星 逄淑霞 林海燕

1濱州醫(yī)學院中西醫(yī)結(jié)合學院 煙臺市 264003;2濱州醫(yī)學院中藥藥理學教研室

益氣升白湯治療放化療后白細胞減少癥的實驗研究*

王慧凱1周 星1逄淑霞1林海燕2

1濱州醫(yī)學院中西醫(yī)結(jié)合學院 煙臺市 264003;2濱州醫(yī)學院中藥藥理學教研室

目的 探討益氣升白湯治療放化療后白細胞減少癥的效果。方法 用腹腔注射環(huán)磷酰胺的方法建立小鼠白細胞減少癥模型;益氣升白湯灌胃 7 d,測定用藥前后白細胞總數(shù)變化;測定小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)含量,做小鼠游泳實驗,取胸腺、脾臟,對胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)進行統(tǒng)計學處理。結(jié)果 中藥組與模型組、西藥組在白細胞總數(shù)變化、血清SOD含量、游泳時間、胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)等方面均有顯著性差異。結(jié)論 益氣升白湯能明顯改善放化療后白細胞減少癥。

益氣升白湯;白細胞減少癥;化療

白細胞減少癥(leukopenia)為常見血液病,臨床多用鯊肝醇、利血生、瑞白等藥物治療,但療效較差,且副作用較大。近年來采用的粒細胞集落因子雖有一定療效但價格昂貴、副作用大,限制了藥物的推廣。

益氣升白湯是由雞血藤、五味子、鹿角膠、補骨脂、黃芪、黨參、黃精、阿膠等十三味藥物組成,其功能為補血養(yǎng)陰,調(diào)和陰陽。經(jīng)多年的臨床驗證,對放化療后白細胞減少癥患者具有顯著效果。為探討其升高白細胞的可能機制,為臨床提供科學依據(jù),現(xiàn)將動物實驗情況報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物與藥品試劑 動物:昆明種二月齡小鼠 60只,體重(20±2)g,雌雄各半,購自山東綠葉制藥有限公司。藥品與試劑:益氣升白湯:雞血藤、五味子、鹿角膠、補骨脂、黃芪、黨參、黃精、阿膠等十三味藥物由煙臺中醫(yī)世家提供,經(jīng)中藥藥理學實驗室鑒定符合《中藥鑒定學》[1]要求。超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒由南京建成生產(chǎn),批號:2009-04-19;環(huán)磷酰胺注射劑由上海華聯(lián)制藥有限公司,生產(chǎn)批號:2009306;鯊肝醇由廣東市橋制藥廠(番禺)生產(chǎn)批號:090309。

1.2 儀器 邁瑞 BC2300全自動血細胞分析儀;721分光光度計(上海第二分析儀器廠生產(chǎn));恒溫箱;GL218A高速離心機(江蘇醫(yī)療器械廠生產(chǎn));電動勻漿機,微量天平;秒表等。

1.3 制備方法 ①益氣升白湯制備方法:中藥先用蒸餾水浸泡 30min,武火煮至藥沸后,文火煎 2次,每次60min,合并2次煎液,6層紗布過濾,80℃恒溫水中濃縮為 50 m l,濃度為 1.0 g/ml,冰箱貯存。用時水浴加熱。②環(huán)磷酰胺制備方法:按文獻記載[2～8],用生理鹽水配制成濃度為 10 mg/ml的混懸液,冰箱貯存?zhèn)溆谩＂埘徃未计渲品椒?按文獻記載[2～8],用生理鹽水配制成濃度為 1mg/ml的混懸液,冰箱貯存?zhèn)洹?/p>

1.4 方法

1.4.1 實驗方法:將 60只小鼠隨機分成 4組:空白對照組、模型組、西藥組、中藥組。正常喂養(yǎng) 3 d后,除空白對照組外其余各組均腹腔注射環(huán)磷酰胺 100 mg/kg體重,1次 /天,連用 3 d造模,斷尾取血測白細胞總數(shù)。造模完成后空白對照組、模型組、西藥組、中藥組分別灌胃生理鹽水、生理鹽水、鯊肝醇、益氣升白湯,均按 0.3m l/10 g,連續(xù)用藥 7 d。

1.4.2 檢測指標及方法:灌胃 7 d后,各組小鼠尾靜脈取血,測定白細胞總數(shù)。將各組小鼠全部稱重,眶動脈和眶靜脈取血 1 ml后,棉球壓迫止血,測定血清 SOD含量(按說明書進行)。做小鼠抗疲勞實驗,每只小鼠尾部墜一 2 g重物,在 40 cm×30 cm×20 cm玻璃容器,20℃水溫下進行游泳實驗,秒表計時,至小鼠浸入水下 10 s不能上浮為止,記錄數(shù)據(jù)。解剖小鼠,取出胸腺和脾臟,生理鹽水洗凈,濾紙吸凈血液。用微量天平測胸腺和脾臟重量,計算胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。計算公式為:胸腺指數(shù)(脾臟指數(shù))=胸腺 mg(脾臟 mg)/小鼠體重(10 g)。

1.5 統(tǒng)計學方法 統(tǒng)計分析采用 SPSS13.0軟件對數(shù)據(jù)進行處理,計量資料以±s表示,采用方差分析和兩兩比較用 t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 各組小鼠一般情況 空白對照組小鼠毛發(fā)正常,皮膚無松弛,活動正常,精神正常,活躍,食欲旺盛;模型組小鼠精神萎靡,食欲低下,運動少,嗜睡;中藥組和西藥組造模后同模型組,灌胃 3 d后情況改善,到灌胃第 7天小鼠毛發(fā)有光澤,皮膚恢復彈性,活潑好動,嗜睡減輕,食欲增長,大便干濕適中。模型組小鼠前后一般情況無顯著性變化。

2.2 各實驗數(shù)據(jù)及分析見表 1,2。

表1 小鼠外周血白細胞含量的比較(±s,109/L)

表1 小鼠外周血白細胞含量的比較(±s,109/L)

注:△表示模型組、西藥組、中藥組與空白對照組比較,P＜0.01;#表示西藥組、中藥組與模型組比較 P＜0.05

組別 n 造模后白細胞總數(shù)灌胃 7 d后白細胞總數(shù)空白對照組 12 6.92±1.62 7.08±1.32模型組 12 1.97±0.82△ 3.85±1.40西藥組 12 1.86±0.62△ 6.89±1.36#中藥組 12 2.11±0.59△ 7.32±0.68#

表2 小鼠血清 SOD含量及對胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)的影響(±s)

表2 小鼠血清 SOD含量及對胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)的影響(±s)

注:△表示西藥組、中藥組與模型組比較,P＜0.01;#表示中藥組與西藥組比較 P＜0.05

組別 n SOD(U/m l) 胸腺指數(shù)(mg/10 g) 脾臟指數(shù)(mg/10 g) 游泳時間(min)空白對照組 12 104.78±5.34 2.76±1.45 4.27±1.26 31.46±12.43模型組 12 47.25±3.67 0.46±0.38 4.32±0.82 7.07±4.06西藥組 12 91.86±4.32△ 0.89±0.49△ 9.09±1.38△ 10.34±3.29△中藥組 12 99.35±10.54△ 1.38±0.62△# 9.96±1.03△ 13.34±6.86△

3 討論

白細胞減少癥(leukopenia)為常見血液病,屬中醫(yī)虛勞、血虛范疇。西藥多用鯊肝醇、利血生、瑞白等藥物治療,但療效較差,且副作用較大。近年來采用的粒細胞集落因子雖有一定療效但價格昂貴、副作用大,限制了藥物的推廣。采用中西藥結(jié)合治療對提高升白類藥物的治療效果,降低毒副作用,增強機體免疫力,具有很好的協(xié)同作用。但目前臨床與實驗未能很好的結(jié)合,很多中藥臨床證明有效,但未能進一步用實驗數(shù)據(jù)來證明。

白細胞減少癥中醫(yī)辨證屬氣血兩虛,脾腎不足證。中醫(yī)認為:腎藏精,主骨生髓,為先天之本;脾主升清,運化水谷,為后天之本。腎氣虛則精不足,髓不滿,則生血無源;脾氣虛則運化無力,精血虧虛。益氣升白湯為補氣養(yǎng)血,調(diào)和陰陽之劑。方中黨參甘溫,補益脾胃調(diào)節(jié)機體氣機;茯苓降逆化痰;雞血藤甘溫補血行血;補骨脂溫腎助陽,納氣;黃芪益氣固表;黃精滋腎潤肺,補脾益氣;阿膠滋陰養(yǎng)血;鹿角膠溫補肝腎,益精血;五味子斂肺滋腎,生津斂汗,澀精止瀉;茯苓淡滲利濕助黨參建脾運濕,下濟腎臟通陽利水;黃芪益氣助補骨脂、黃精、雞血藤養(yǎng)陰生血。諸藥共奏補氣養(yǎng)血,調(diào)和陰陽之功?，F(xiàn)代藥理學也證實方中黨參、雞血藤、阿膠等均有確切的升高白細胞的作用[7]。

超氧化物歧化酶(orgotein superoxide dismutase,SOD)是一種源于生命體的活性物質(zhì),能消除生物體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)[12,13],對人體不斷地補充 SOD具有抗衰老的特殊效果。SOD是中國衛(wèi)生部批準的具有抗衰老、免疫調(diào)節(jié)、美容功能的物質(zhì)之一。研究表明 SOD是化療副作用的消除劑。表 2示西藥組、中藥組與模型組比較有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);中藥組與西藥組比較有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)亦均為重要的免疫指標,結(jié)果表明益氣升白湯能顯著提高小鼠免疫功能。

本實驗結(jié)果顯示,益氣升白湯對造模后白細胞降低有明顯改善作用。血清 SOD含量、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、游泳時間較模型組均有顯著性差異。益氣升白湯在胸腺指數(shù)方面較西藥組有顯著性差異。

綜上表明,益氣升白湯對放化療所致的白細胞減少癥有顯著治療效果,根據(jù)實驗結(jié)果推測可能與增強造血功能、提高機體免疫力、抗疲勞有關(guān)。

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Experimental study of Yiqisheng baidecoction on leukopenia after chemotherapy

WANG Huikai1ZHOU Xing1PANG Shuxia1LIN Haiyan2
1 School of Medicine,Binzhou Medical University;2 Teaching and Research of Pharmacology,Binzhou Medical University

ObjectiveTo p robe the effect Yiqishengbai decoction on leukopenia after chemotherapy from experimental study.MethodsThe method of the establishment of mice Leukopenia model is intraperitoneal injection of cyclophosphamide.After Yiqishengbai decoction was Ig for 7 days,determinate the changes of total Interleukin number before and afterusing the decoction.Determ inate the content of serum SOD,do swimming test in mice,remove thymus and spleen,and calculate thymus index and spleen index.Experimental data was statistical analysed.ResultsThe traditional Chinese medicine group,model group and western medicine group have significant differences in the changes of total Interleukin number,serum concentration of SOD,swimming time,thymus index and spleen index.ConclusionYiqishengbai decoction can improve leukopenia clearly after chemotherapy.

Yiqishengbai decoction,leukopenia,chemotherapy

R557

A

1001-9510(2010)01-0023-03

項目:濱州醫(yī)學院大學生科技創(chuàng)新活動基金(BY 2008DKCX 09)

林海燕,E-mail:mailizhong@163.com

2009-11-06)