馬蓮美 王寶宏 吳福玲 傅振榮 胡 艷

濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院兒科 濱州市 256603

S-100 b蛋白在小兒病毒性腦炎病情判斷和預(yù)后評(píng)估中的價(jià)值

馬蓮美 王寶宏 吳福玲 傅振榮 胡 艷

濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院兒科 濱州市 256603

目的 觀察病毒性腦炎急性期和恢復(fù)期腦脊液(cerebrospinal fluid,CSF)和血清中S-100 b蛋白含量的變化,探討S-100 b在病毒性腦炎病情判斷和預(yù)后評(píng)估的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 選擇 46例病毒性腦炎患兒為觀察組,又分為昏迷組(15例)和無(wú)昏迷組(31例),20例無(wú)神經(jīng)系統(tǒng)疾病、需行外科腰麻的患兒作為對(duì)照組,采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)急性期、恢復(fù)期CSF和血清中S-100 b蛋白含量,進(jìn)行比較和動(dòng)態(tài)觀察。結(jié)果 ①觀察組CSF和血清中S-100 b蛋白明顯高于對(duì)照組(P＜0.01);②昏迷組CSF和血清中 S-100b蛋白明顯高于無(wú)昏迷組(P＜0.01);③觀察組急性期 CSF和血清中 S-100 b蛋白水平明顯高于恢復(fù)期 (P＜0.01);④CSF中 S-100 b蛋白含量與其血清含量呈正相關(guān)(r=0.746,P=0.05)。結(jié)論 CSF和血清中S-100b蛋白的含量與病毒性腦炎腦損傷程度正相關(guān),對(duì)病毒性腦炎的病情判斷和預(yù)后評(píng)估具有重要的臨床價(jià)值。

S-100b蛋白;病毒性腦炎;腦脊液;血清

病毒性腦炎(viral encephalitis)是小兒時(shí)期常見(jiàn)的由多種病毒引起的顱內(nèi)急性炎癥,是造成小兒腦損傷的原因之一。輕者病情具有自限性,重者可遺留不同程度的后遺癥,甚至威脅患兒的生命。目前,臨床上對(duì)病毒性腦炎患兒腦損傷程度和預(yù)后的評(píng)估,主要依靠臨床表現(xiàn)和腦電圖檢查,缺乏量化指標(biāo)。近年來(lái),作為腦損傷后的神經(jīng)生化標(biāo)志物,S-100 b蛋白引起了人們的極大關(guān)注。我們檢測(cè)了 46例病毒性腦炎患兒腦脊液(CSF)和血清中 S-100 b蛋白的含量,旨在為病情的判斷和預(yù)后評(píng)估提供臨床參考價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 ①觀察組嚴(yán)格按照《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》第 7版診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]篩選,均系 2007年 10月—2009年 2月在我科住院的患兒,共 46例,男 26例,女 20例,年齡 10個(gè)月 ～12歲。根據(jù)患兒病程中有無(wú)昏迷,分為昏迷組和無(wú)昏迷組,昏迷組 15例,男 7例,女 8例,年齡 10個(gè)月 ～11歲,平均年齡(4.6±3.7)歲。12例患兒 CSF和血清標(biāo)本采自昏迷期,3例在首次腰穿后 2～4 d出現(xiàn)昏迷,再次采血標(biāo)本。無(wú)昏迷組 31例,男 19例,女 12例,年齡 1～12歲,平均年齡(5.5±3.9)歲。腦電圖均廣泛異常,輕度22例,中度 9例,重度 15例?；杳越M頭顱 CT均顯示腦實(shí)質(zhì)和(或)腦干內(nèi)異常低密度灶。2例死亡患兒頭顱 CT顯示腦實(shí)質(zhì)和腦干內(nèi)大片低密度灶。②對(duì)照組 20例,男 13例,女 7例,年齡 3～13歲,平均年齡 7.8歲,均為無(wú)神經(jīng)系統(tǒng)疾病、需行外科腰麻的患兒。兩組兒童年齡與性別無(wú)差異。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集:觀察組患兒在急性期(入院后 24～48 h內(nèi))同時(shí)采集血清和 CSF標(biāo)本,除 2例分別在入院后第 3天、第 5天死亡外,其余患兒均在恢復(fù)期(治療后 8～10 d)同時(shí)采集血清和 CSF標(biāo)本。留取靜脈血 2 ml,立即注入硅化玻璃內(nèi),室溫下 3000 r/min離心 10min,收集上清液,凍存于 -20℃冰箱待測(cè)。腰椎穿刺(均無(wú)穿刺損傷)留取腦脊液 1 ml,凍存于 -20℃冰箱待測(cè),同時(shí)送檢腦脊液常規(guī)和生化。對(duì)照組 20例按上述方法收集血清和 CSF標(biāo)本,凍存于 -20℃冰箱待測(cè)。

1.2.2 檢測(cè)方法:采用雙抗體夾心 ELISA法檢測(cè)急性期、恢復(fù)期 CSF和血清中 S-100 b蛋白含量,試劑盒購(gòu)自上海西唐生物技術(shù)有限公司,嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用 SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì),所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用±s表示。組間比較采用單因素方差分析,治療前后(急性期和恢復(fù)期)采用重復(fù)測(cè)量資料的方差分析和各變量之間采用Pearson相關(guān)分析(r為相關(guān)系數(shù))。

2 結(jié)果

2.1 血清和腦脊液 S-100 b蛋白含量的檢測(cè)結(jié)果觀察組急性期 CSF和血清中 S-100 b蛋白含量明顯高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01),見(jiàn)表 1;昏迷組急性期 CSF和血清中 S-100 b蛋白明顯高于無(wú)昏迷組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01),見(jiàn)表 2;恢復(fù)期觀察組 CSF和血清中 S-100 b蛋白水平明顯低于急性期(P＜0.01),見(jiàn)表 1和表 2;觀察組急性期CSF中 S-100 b蛋白含量與其血清含量呈正相關(guān)(r=0.746,P=0.05)。

表1 兩組患兒CSF和血清 S-100b蛋白含量測(cè)定(±s,ng/ml)

表1 兩組患兒CSF和血清 S-100b蛋白含量測(cè)定(±s,ng/ml)

注:*2例患兒因早期死亡,未作第二次檢驗(yàn)

組別 n 急性期CSF 血清n 恢復(fù)期CSF 血清觀察組 46 0.526±0.258 0.435±0.065 44* 0.385±0.157 0.165±0.085對(duì)照組 20 0.226±0.038 0.118±0.025 20 0.226±0.038 0.118±0.025 P＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01

2.2 病毒性腦炎患兒 CSF中 S-100 b蛋白含量與頭顱 CT改變的關(guān)系 46例患兒中有 28例患兒于急性期行頭顱 CT檢查。昏迷組患兒頭顱 CT均顯示腦實(shí)質(zhì)和(或)腦干內(nèi)異常低密度灶,尤其 2例死亡患兒頭顱 CT顯示腦實(shí)質(zhì)和腦干大片低密度灶,而無(wú)昏迷組 13例患兒的頭顱 CT僅1例有輕微異常改變。表 2中結(jié)果顯示昏迷組患兒急性期 CSF中S-100 b蛋白含量較無(wú)昏迷組明顯升高(P＜0.01),表明病情重的患兒 CSF中 S-100 b蛋白含量高,其頭顱 CT改變重。

表2 昏迷組與無(wú)昏迷組患兒CSF和血清S-100b蛋白含量測(cè)定(±s,ng/ml)

表2 昏迷組與無(wú)昏迷組患兒CSF和血清S-100b蛋白含量測(cè)定(±s,ng/ml)

組別 n 急性期CSF 血清n 恢復(fù)期CSF 血清昏迷組 15 0.716±0.327 0.434±0.175 13 0.537±0.087 0.264±0.104無(wú)昏迷組 31 0.385±0.207 0.228±0.047 31 0.389±0.075 0.125±0.034 P＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01

2.3 病毒性腦炎患兒 CSF中 S-100 b蛋白含量與腦電圖的關(guān)系 46例患兒均于急性期行腦電圖(EEG)檢查,結(jié)果顯示均有異常改變。表 2中結(jié)果顯示昏迷組患兒急性期 CSF中 S-100 b蛋白含量較無(wú)昏迷組急性期明顯升高(P＜0.01),表明患兒病情愈重,CSF中 S-100 b蛋白含量愈高,其 EEG異常改變愈嚴(yán)重。

2.4 病毒性腦炎患兒 CSF中 S-100 b蛋白含量與預(yù)后的關(guān)系 無(wú)昏迷組 31例患兒均 1周左右痊愈,不遺留任何后遺癥。昏迷組 15例患兒,2例死亡,13例存活患兒隨診 3～6個(gè)月,10例遺留后遺癥,表現(xiàn)為智力低下、生長(zhǎng)發(fā)育落后、繼發(fā)性癲癇、精神及行為異常等。表 3中 2例死亡患兒 CSF和血清中S-100 b蛋白含量明顯高于存活者;表 4中昏迷組有后遺癥患兒急性期 CSF和血清中 S-100 b蛋白含量明顯高于無(wú)昏迷組者(P＜0.01)。表明急性期 CSF及血清中 S-100 b蛋白含量明顯升高的患兒預(yù)后多不良,死亡率高,幸存者常遺留不同程度的后遺癥。

表3 2例死亡患兒CSF和血清S-100b蛋白含量測(cè)定(ng/m l)

表4 后遺癥組與無(wú)后遺癥組患兒急性期CSF和血清S-100b蛋白含量測(cè)定(±s,ng/ml)

表4 后遺癥組與無(wú)后遺癥組患兒急性期CSF和血清S-100b蛋白含量測(cè)定(±s,ng/ml)

組別 n CSF 血清后遺癥組 10 0.721±0.265 0.452±0.182無(wú)后遺癥組 3 0.523±0.122 0.310±0.108 P＜0.01 ＜0.01

3 討論

S-100蛋白是一種酸性的鈣離子結(jié)合蛋白,相對(duì)分子量為 21000。有 α、β兩種亞基組成,形成 S-100a0(αα),S-100a(αβ),S-100b(ββ)三種組合形式。S-100 b主要存在于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和雪旺細(xì)胞中,S-100 a主要存在于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,而 S-100a0(αα)主要存在于心臟、橫紋肌和腎臟中[2]。S-100 b是一種神經(jīng)組織蛋白,高濃度、特異性地存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞及某些神經(jīng)原細(xì)胞中,因 96%存在于腦內(nèi),故被認(rèn)為是腦特異性蛋白[3,4]。腦組織急性損傷后腦脊液和血清中 S-100 b蛋白濃度升高已在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床研究中得到證實(shí),并作為腦損傷的早期診斷、動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)病情、判斷預(yù)后的有用指標(biāo)[5～7]。Kim等[8]認(rèn)為 S-100 b蛋白是迄今為止最能反映腦損傷程度的特異性蛋白。綜上表明,S-100 b蛋白的升高水平與腦損傷的程度和預(yù)后相關(guān),而其水平愈高,腦損傷程度愈重,預(yù)后愈差。

本研究結(jié)果顯示,觀察組 CSF和血清中S-100 b蛋白含量明顯高于對(duì)照組 (P＜0.01);昏迷組 CSF和血清中 S-100 b蛋白明顯高于無(wú)昏迷組 (P＜0.01);觀察組急性期 CSF和血清中 S-100 b蛋白水平明顯高于恢復(fù)期(P＜0.01);且與腦內(nèi)低密度灶相關(guān)。EEG中重度異?；純?CSF和血清中 S-100 b蛋白含量均高于輕度(P＜0.01);本組 EEG全部異常,病情愈重,EEG改變愈明顯,CSF和血清中 S-100 b蛋白水平愈高。本研究中,2例死亡患兒 CSF和血清中 S-100 b蛋白含量明顯高于存活者,且腦電圖重度異常,頭顱 CT顯示腦實(shí)質(zhì)和腦干大片低密度灶;昏迷組 13例存活患兒 6個(gè)月后復(fù)查,有 10例遺留后遺癥?；仡櫺苑治霭l(fā)現(xiàn),有后遺癥患兒急性期 CSF中 S-100 b蛋白含量明顯高于無(wú)后遺癥者(P＜0.01),表明急性期 CSF和血清中 S-100 b蛋白含量明顯升高的患兒預(yù)后多不良。

研究發(fā)現(xiàn),病毒性腦炎患兒腦脊液和血清中 S-100 b蛋白的表達(dá)水平明顯相關(guān)[9,10]。本組資料顯示,觀察組 CSF中 S-100 b蛋白含量與其血清含量呈正相關(guān)(r=0.746,P=0.05)。檢測(cè)病毒性腦炎患兒 CSF和血清中 S-100 b蛋白的含量不僅可以反映腦損害程度、判斷病情,而且作為腦損傷后的化學(xué)標(biāo)志物,可以評(píng)估預(yù)后。由于中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染在小兒疾病中占有重要的地位、尤其病毒性腦炎發(fā)病率高,有時(shí)臨床表現(xiàn)不典型,再加上腰穿操作困難、不易接受等原因,使得血清 S-100 b的檢測(cè)更具有實(shí)際的意義,能夠及時(shí)動(dòng)態(tài)判斷病情、評(píng)估預(yù)后,具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值,值得推廣應(yīng)用。

[1] 吳瑞萍,胡亞美,江載芳.諸福棠實(shí)用兒科學(xué)[M].第 7版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:759-926.

[2] Fano G,Biocca S,fulle S,et al.The S-100:a protein fam ily in search of a function[J].Prog Neurobiol,1995,46(1):71-82.

[3] 王國(guó)卿,封麗芳,夏作理.S100 B蛋白生物學(xué)功能及在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中應(yīng)用[J].中國(guó)臨床康復(fù),2004,28(8):6166-6167.

[4] Moore Bw.Brain-specific protein:sloo protein 14-3-2 protein and glial fibrillary protein[J].Adv Neurocbem,1975,1:137-155.

[5] 李守霞,鄧群穎,趙瑞月,等.S-100B蛋白檢測(cè)對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)損傷早期診斷臨床應(yīng)用進(jìn)展[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志,2002,2(8):1156-1158.

[6] Nygaard O,Langbakk B,Romner B.Age-and sex related changes of S-100 protein concentrations in cereprospinal fluid and serum in patients with no preious history of neurological disorder[J].Clinical Chemistzy,1997,43:541-548.

[7] Matsui T,Mori T,Tateishi N,et al.Astrocytic activation and delayed infarct expansion after permanent focal is chem ia in rats.Part I:enhanced astrocytic synthesis of s-100beta in the per infarct area precedes delayed infarct expansion[J].J Cereb Blood Flow Metab,2002,22:711-722.

[8] Kim JS,Yoon SS,Kim YH,et al.Serial measurement of inter leukin-6,transforming growth factor-beta,and S-100 protien in patients with acute stroke[J].Stroke,1996,27(9):1553-1557.

[9] 趙剛,楊毅寧,栗秀初,等.單純皰疹病毒性腦炎患者腦脊液和血清 S-100B蛋白及NSE的測(cè)定[J].中國(guó)神經(jīng)精神疾病雜志,2002,28(2):99-101.

[10] 劉冬青,劉俊英,王俊萍,等.S-100 b蛋白檢測(cè)對(duì)小兒化膿性腦膜炎與病毒性腦炎的鑒別診斷價(jià)值[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)藥雜志,2007,9(11):51-53.

The value o f S-100 b protein in children with viral encephalitis in determining state of illness and in evaluating prognosis

MA Lianmei WANG Baohong WU Fuling FU Zhenrong HU Yan
Department of Pediatrics,Affiliated Hospital of Binzhou Medical University,Binzhou 256603

ObjectiveTo investigate cerebrospinal fluid and serum S-100b protein levels in children with viralencephalitis to discuss their values in determining state of illness and in evaluating prognosis.Methods46 cases with viral encephalitis were collected as observe group and 20 cases patients with operation were collected as control group.46 children with viral encephalitis were divided into two groups according to the severity of disease:coma group(15 cases)and non-coma group(31 cases).The double-antibodies sandwich ELISA was used to detect S-100b protein concentrations in CSFand serum in these 46 patients and 20 controls.Results①CSF and serum S-100b level of observed group were higher than control group(P＜0.01).② CSF and serum S-100 b level of coma group were higher than those in non-coma group(P＜0.01).③patients with acute viralencephalitis has a significantly higher concentration of S-100 b protein of CSFand serum than recovery(P＜0.01).④CSFS-100 b correlated with their serum concentrations(r=0.746,P=0.05).ConclusionThe concentration of S-100b protein of CSF and serum in patients with acute viral encephalitis is relative with brain-tissue damage of viral encephalitis.There are important clinical values in determining state of illness and in evaluating prognosis.

S-100b protein,viral encephalitis,cerebrospinal fluid,serum

R725

A

1001-9510(2010)01-0018-03

2009-09-28)