摘要:植物CCD7基因參與合成獨(dú)腳金內(nèi)酯。為研究新麥草[Psathyrostachys juncea (Fisch.)Nevski]CCD7基因的功能,本研究以多分蘗型新麥草和少分蘗型新麥草的分蘗節(jié)為材料,通過RNA-seq及熒光定量PCR分析CCD7基因在新麥草中的表達(dá)量,通過構(gòu)建pcambia1300-cYFP-CCD7過表達(dá)載體,分析新麥草CCD7基因在煙草葉片中的亞細(xì)胞定位;通過生物信息學(xué)分析預(yù)測(cè)CCD7基因的基本功能。結(jié)果顯示,新麥草CCD7基因序列克隆全長(zhǎng)為1638 bp,亞細(xì)胞定位新麥草CCD7基因在煙草葉片細(xì)胞的葉綠體中表達(dá);表達(dá)量分析表明新麥草的分蘗數(shù)量與該基因的表達(dá)量呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)關(guān)系。預(yù)測(cè)新麥草CCD7保守結(jié)構(gòu)域的范圍是第13到第544個(gè)氨基酸,該基因在9個(gè)近緣物種中功能保守,編碼蛋白性質(zhì)相近,新麥草CCD7蛋白的絲氨酸磷酸化位點(diǎn)最有可能是蛋白發(fā)揮功能的磷酸化位點(diǎn)。
關(guān)鍵詞:新麥草;CCD7;過表達(dá)載體;亞細(xì)胞定位;基因克隆
中圖分類號(hào):S543.9" " " " 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A" " " " 文章編號(hào):1007-0435(2025)02-0382-09
Cloning and Expression Analysis of CCD7 Gene Related to Strigolactone Synthesis in Psathyrostachys juncea
AI Qian1, YUN Lan1,2*, REN Xiao-min1, YAO Na1
(1.College of Grassland Resource and Environment, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot, Inner Mongolia 010018, China;
2.Key Laboratory of Grassland Resources of Education Ministry, Hohhot, Inner Mongolia 010011, China)
Abstract:Plant CCD7 gene is involved in the synthesis of strigolactones. In order to study the function of CCD7 gene in Psathyrostachys juncea, the tillering nodes of multi-tillering Psathyrostachys juncea and less-tillering P. juncea were used as materials. The expression of CCD7 gene in P. juncea was analyzed by RNA-seq and fluorescence quantitative PCR. The subcellular localization of CCD7 gene in tobacco leaves was analyzed by constructing pcambia 1300-cYFP-CCD7 overexpression vector. The basic functions of CCD7 gene were predicted by bioinformatics analysis.The results showed that the full length of P. juncea CCD7 gene sequence was 1 638 bp, and the subcellular localization of P. juncea CCD7 gene test found it was expressed in the chloroplast of tobacco leaf cells. The expression analysis showed that the tiller number of P. juncea was negatively correlated with the high expression of the gene. It was predicted that the conserved domain of CCD7 in P. juncea ranged from 13 to 544 amino acids. The gene was conserved in 9 closely related species, and the protein properties were similar. The serine phosphorylation site of CCD7 protein in P. juncea was most likely to be the phosphorylation site of protein function.
Key words:Psathyrostachys juncea;CCD7;Over expression vector;subcellular localization;Gene cloning
類胡蘿卜素裂解雙加氧酶家族(carotenoid cleavage dioxygenases,CCDs)是一個(gè)相對(duì)較小的基因家族,這個(gè)基因家族主要在植物的分枝中起作用,CCDs主要參與新型植物激素獨(dú)腳金內(nèi)酯(Strigolactone,SL)的合成。CCDs基因家族分為兩類,一類是CCD亞家族,另一個(gè)則是9-順式-環(huán)氧類胡蘿卜素雙加氧酶基因(9-cis epoxycarotenoid dioxygenases,NCEDs)亞家族[1]。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了12個(gè)CCD基因家族的成員,其中CCD亞家族有五個(gè)成員,NCED亞家族有七個(gè)成員[2]。近年來,通過對(duì)多種模式植物和作物多分支突變體的生理生化和基因組學(xué)深入研究,已經(jīng)克隆出了一些參與分枝調(diào)控的基因[3-5],并且這些基因已經(jīng)被證實(shí)參與了獨(dú)腳金內(nèi)酯的合成。目前報(bào)道的獨(dú)腳金內(nèi)酯生物合成基因包括擬南芥(Arabidopsis thaliana)多腋芽分枝MAX3(More axial branching 3)[6]和水稻(Oryza sativa)矮多分蘗HTD1/D17(High tillering dwarf 1)[7]。它們分別編碼CCD7,D10[8]和CCD8。前人大量研究表明,獨(dú)腳金內(nèi)酯是一種新的植物激素,主要在根內(nèi)合成,由下向上運(yùn)輸,抑制植物分蘗芽的生長(zhǎng)[9-10]。
新麥草[Psathyrostachys juncea (Fisch.)Nevski]是禾本科多年生異花授粉植物,原產(chǎn)于西伯利亞及中亞地區(qū),在我國(guó)的新疆也有分布[11]。新麥草具有抗逆性強(qiáng)、對(duì)寒冷干旱氣候適應(yīng)性好等優(yōu)點(diǎn)。同時(shí)新麥草具有返青早、青綠期長(zhǎng)、再生性強(qiáng)及適口性好的特點(diǎn),是一種刈割放牧兼用型的冷季牧草[12]。新麥草也是小麥等麥類作物的近緣物種,因此研究新麥草對(duì)我國(guó)牧草種質(zhì)資源的利用和麥類作物的遺傳改良有著重要的意義。
前期研究發(fā)現(xiàn),新麥草中獨(dú)腳金內(nèi)酯的合成會(huì)減少新麥草分蘗的數(shù)量。分蘗數(shù)直接影響著新麥草的飼草產(chǎn)量及種子產(chǎn)量,而CCD7是參與調(diào)控獨(dú)腳金內(nèi)酯合成的重要基因[13]。目前未見對(duì)于新麥草的CCD7基因的相關(guān)研究。因此,本研究通過qRT-PCR、生物信息學(xué)分析、亞細(xì)胞定位分析等,明確CCD7在新麥草及新麥草的近緣物種中的表達(dá)特性,為該基因在新麥草中功能驗(yàn)證和遺傳轉(zhuǎn)化提供理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 材料
材料取自內(nèi)蒙古自治區(qū)呼和浩特市內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)牧草資源圃的30株多分蘗型新麥草草單株(DT)和30株少分蘗型單株(ST),取其分蘗節(jié)提取RNA,利用q-PCR比較表達(dá)量,以生長(zhǎng)一個(gè)月左右的煙草幼苗為侵染材料。植物過表達(dá)載體為pcambia1300-cYFP,轉(zhuǎn)化菌株為Dh5α,侵染菌株為農(nóng)桿菌感受態(tài)GV3101,所用抗生素為卡那霉素(Kan)和利福平(Rif)。
1.2 方法
1.2.1 CCD7基因表達(dá)量分析 基于Ge Norm,Norm Finder和Best Keeper三個(gè)內(nèi)參基因穩(wěn)定性評(píng)估軟件對(duì)RNA-seq數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,將表達(dá)穩(wěn)定的CCD7基因篩選出來,用NCBI(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)設(shè)計(jì)CCD7(SUB14441471 CCD7 PP789591)定量PCR引物(表1);通過SPASS Statistics 23對(duì)qPCR結(jié)果進(jìn)行分析,用 2-ΔΔCT 法計(jì)算CCD7在多分蘗型新麥草和少分蘗型新麥草中的表達(dá)量,并用GraphPad Prism軟件作圖。
1.2.2 CCD7基因克隆及過表達(dá)載體構(gòu)建 用snapgene設(shè)計(jì)RT-PCR引物及過表達(dá)載體1300連接和測(cè)序引物(表2)。取多分蘗型新麥草分蘗節(jié),用天根RNA提取試劑盒提取總RNA,微量核酸檢測(cè)儀測(cè)量RNA濃度,使用天根一步法去除基因組DNA(gDNA)試劑盒,將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA。以反轉(zhuǎn)錄的cDNA為模板,進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增。反應(yīng)結(jié)束后,PCR產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,用天根膠回收試劑盒對(duì)目的條帶進(jìn)行回收;用全式金B(yǎng)lunt基因克隆試劑盒將膠回收產(chǎn)物與克隆載體連接轉(zhuǎn)化并將菌液涂抹至LB培養(yǎng)基上過夜培養(yǎng);挑取培養(yǎng)基上的單菌落進(jìn)行菌落PCR,選取陽性菌液加入到5 mL的1×LB液體培養(yǎng)基(Kan 50 μg?mL-1)中37℃過夜搖菌。用天根質(zhì)粒小提試劑盒提取質(zhì)粒測(cè)量質(zhì)粒濃度,并選取濃度較高的質(zhì)粒送上海生工測(cè)序。選擇測(cè)序正確的CCD7質(zhì)粒為模板,將目的片段連接到載體后,送至上海生工測(cè)序。
1.2.3 pcambia1300-cYFP-CCD7過表達(dá)載體農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 將GV3101農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞分裝至1.5 mL離心管中,加入連接產(chǎn)物后混勻,冰上靜置20 min、冰浴1 min、37℃熱激5 min,將離心管取出在超凈臺(tái)中加入1 mL的1×LB(1×Luria-Bertani)后放入搖床內(nèi)30℃ 200 r?min-1復(fù)蘇2 h,離心30 min(4000 r?min-1)倒出部分上清液;將離心管內(nèi)的菌體重懸后涂抹至1×LB固體培養(yǎng)基(Kan、Rif)上30℃培養(yǎng)2 d。挑取菌落至5 mL的1×LB液體培養(yǎng)基(含Kan和Rif)內(nèi)搖菌(30℃,200 r?min-1)12h,離心10 min(4000 r?min-1),倒去上清液后加入2mL的侵染液(1 mol?L-1 MgCl2 500 μL,1 mol?L-1, MES 500 μL, 200 mmol?L-1乙酰丁香酮50 μL),重懸后調(diào)整菌液OD600值(0.5~0.6)。
1.2.4 煙草侵染及亞細(xì)胞定位 將調(diào)好OD600值的菌液吸入1 mL的注射器中,打入煙草的葉片背面,注射完的煙草在培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)一天后放到尼康A(chǔ)1R共聚焦顯微鏡下觀察載體熒光。
1.2.5 CCD7基因生物信息學(xué)分析 以克隆出的CCD7序列為模板,在NCBI上進(jìn)行同源比對(duì)分析及保守結(jié)構(gòu)域預(yù)測(cè)(https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi),在GSDS上預(yù)測(cè)新麥草CCD7基因的內(nèi)含子及外顯子(https://gsds.gao-lab.org/),用DNAMAN對(duì)新麥草CCD7基因及其近緣物種多序列比對(duì),利用MEGA11軟件繪制新麥草及其近緣物種CCD7基因的系統(tǒng)發(fā)育樹,用ExPASy(https: //web.expasy.org/protparam/)預(yù)測(cè)新麥草及其近緣物種CCD7基因的等電點(diǎn)(Isoelectric point)、氨基酸數(shù)量(Number of amino acids)、分子量(Molecular weight)、親水系數(shù)及不穩(wěn)定系數(shù)。
2 結(jié)果與分析
2.1 新麥草CCD7基因在不同時(shí)期的表達(dá)量及轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析
多分蘗型新麥草DT在三年中每年增加的分蘗數(shù)均多于少分蘗型新麥草,且兩者之間存在顯著差異(Plt;0.05),RNA-seq分析結(jié)果顯示DT中CCD7基因的表達(dá)量要顯著低于ST(圖1)。獨(dú)腳金內(nèi)酯和生長(zhǎng)素抑制分蘗芽的形成,細(xì)胞分裂素促進(jìn)分蘗芽的形成,因此比較了獨(dú)腳金內(nèi)酯的合成途徑。研究發(fā)現(xiàn)(圖2),首先,香葉基香葉基焦磷酸(Geranylgeranyl pyrophosphate)通過15-順式植物烯合成酶(15-cis-Phytoene synthase)的作用轉(zhuǎn)化為植物烯;然后,植物烯通過15-順式植物烯去飽和酶(15-cis-Phytoene Synthase)、ζ-胡蘿卜素去飽和酶(ζ-carotene desaturase)和ζ-胡蘿卜素異構(gòu)酶(ζ-carotene isomerase)的作用轉(zhuǎn)化為番茄紅素,番茄紅素通過番茄紅素β環(huán)化酶(Lycopene β-cyclase)的作用轉(zhuǎn)化為β-胡蘿卜素,最后通過β-胡蘿卜素異構(gòu)酶(DWARF27)、9-順式-β-胡蘿卜素9′、10′-裂解雙加氧酶(Carotenoid dioxygenase 7)、類胡蘿卜素裂解雙加氧酶8 (Carotenoid dioxygenase 8)等3種酶4步轉(zhuǎn)化為獨(dú)腳金內(nèi)酯。其中編碼15-順式植物烯合成酶(15-cis-Phytoene Synthase)、ζ-胡蘿卜素去飽和酶(ζ-carotene desaturase)、ζ-胡蘿卜素異構(gòu)酶(ζ-carotene isomerase)和番茄紅素β -環(huán)化酶(lycopene beta-cyclase)的差異表達(dá)基因在DT中被上調(diào);編碼β-胡蘿卜素異構(gòu)酶(DWARF27)、9-順式-β-胡蘿卜素9′、10′-裂解雙加氧酶(CCD7)和類胡蘿卜素裂解雙加氧酶8 (CCD8)的差異表達(dá)基因在DT中被下調(diào)。
2.2 新麥草CCD7基因序列分析及克隆
用MEGA11軟件繪制新麥草CCD7基因及其近緣物種的系統(tǒng)發(fā)育樹(圖3)。結(jié)果顯示CCD基因編碼蛋白分為兩類,野生稻為一類,其余8個(gè)物種的CCD7基因編碼的蛋白則為另一類;8個(gè)物種的CCD7基因編碼的蛋白可分為兩個(gè)亞類,新麥草與大麥亞種、節(jié)節(jié)麥、小麥和二粒小麥親緣關(guān)系最近。新麥草CCD7基因沒有內(nèi)含子,用NCBI對(duì)新麥草CCD7基因的保守結(jié)構(gòu)域進(jìn)行預(yù)測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn)新麥草的CCD7基因?qū)儆赗PE65超級(jí)基因家族。用DNAMAN比對(duì)了新麥草及其它8個(gè)物種的氨基酸序列,發(fā)現(xiàn)雖然他們的保守結(jié)構(gòu)域起始位置不同,但是他們之間的保守結(jié)構(gòu)域均為類胡蘿卜素裂解雙加氧酶結(jié)構(gòu)域(PLN02491)(圖4),這說明在這些近緣物種中的CCD7基因的功能與新麥草中CCD7基因的功能相近。
新麥草CCD7基因表達(dá)量分析(圖5)顯示,在新麥草ST植株的根、葉和分蘗節(jié)中CCD7基因的表達(dá)量顯著高于新麥草DT植株。以DT新麥草的分蘗節(jié)為材料提取總RNA后將其反轉(zhuǎn)錄為cDNA,以cDNA為模板克隆,瓊脂糖凝膠電泳顯示在1000~2000 bp區(qū)域成功克隆出了目的片段,經(jīng)測(cè)序新麥草CCD7基因大小為1638 bp,與轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果一致,以測(cè)序后的質(zhì)粒為模板,構(gòu)建了pcambia1300-cYFP-CCD7過表達(dá)載體。
2.3 新麥草CCD7基因編碼蛋白磷酸化位點(diǎn)預(yù)測(cè)
磷酸化位點(diǎn)分析結(jié)果顯示(圖6),CCD7蛋白共有60個(gè)磷酸化位點(diǎn),其中絲氨酸有27個(gè),蘇氨酸有22個(gè),酪氨酸有11個(gè)。絲氨酸的磷酸化位點(diǎn)最有可能是潛在的磷酸化位點(diǎn),它們的值遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于臨界值0.5,表明該蛋白可能通過調(diào)控相應(yīng)的磷酸化位點(diǎn)發(fā)揮功能。
2.4 新麥草近緣物種CCD7基因蛋白理化性質(zhì)分析
9個(gè)近緣物種蛋白序列最短的含有545個(gè)氨基酸,最長(zhǎng)則為551個(gè),蛋白質(zhì)分子量為61.32~61.97 KD,且均為酸性蛋白。表中各物種的CCD7基因的親水系數(shù)均為負(fù)數(shù),這表明9個(gè)物種的CCD7蛋白均為親水蛋白。新麥草及其近緣物種的CCD7基因蛋白的不穩(wěn)定系數(shù)均小于40,都是不穩(wěn)定蛋白(表3)。
2.5 新麥草pcambia1300-cYFP-CCD7亞細(xì)胞定位
將構(gòu)建成功的pcambia1300-cYFP-CCD7過表達(dá)載體和pcambia1300-cYFP空載打入GV3101農(nóng)桿菌感受態(tài)中轉(zhuǎn)化,用針管將菌液注射進(jìn)煙草葉片中,用尼康A(chǔ)1R共聚焦顯微鏡觀察新麥草CCD7基因的表達(dá)情況,結(jié)果顯示pcambia1300-cYFP空載在煙草葉片細(xì)胞中可以正常表達(dá),新麥草CCD7基因主要在煙草葉片細(xì)胞中葉綠體內(nèi)表達(dá)(圖7)。
3 討論
植物的分蘗是一個(gè)非常復(fù)雜的過程,受到多種內(nèi)部因素和外部因素的影響,分蘗芽的生長(zhǎng)與營(yíng)養(yǎng)密切相關(guān)。當(dāng)植物營(yíng)養(yǎng)充足時(shí),能促進(jìn)分蘗芽的生長(zhǎng),其中氮能調(diào)節(jié)分蘗數(shù)[14]。
本文用PCR法克隆出了新麥草CCD7基因,并進(jìn)行同源比對(duì)及保守結(jié)構(gòu)域分析,發(fā)現(xiàn)新麥草的CCD7基因?qū)儆赗PE65超級(jí)基因家族,保守結(jié)構(gòu)域?yàn)轭惡}卜素裂解雙加氧酶結(jié)構(gòu)域(PLN02491),這與新麥草的幾個(gè)近緣物種CCD7基因的保守結(jié)構(gòu)域相同。在系統(tǒng)進(jìn)化樹分析中發(fā)現(xiàn),新麥草CCD7基因與許多禾本科牧草及作物親緣關(guān)系較近,且在蛋白理化性質(zhì)上新麥草CCD7基因蛋白理化性質(zhì)也與其他禾本科植物相近,這表明了他們的基因功能相同。徐慶華等[15] 發(fā)現(xiàn)RPE65蛋白和植物中的NCED蛋白都隸屬CCD蛋白家族,因此推測(cè)新麥草的CCD7蛋白也屬于CCDs蛋白家族。在一些研究中發(fā)現(xiàn)毛楊果、紅皮柳和擬南芥等植物的CCD7基因與新麥草的CCD7基因都具有REP65基因家族的典型特征。但這些基因之間也存在一些差異。CCD7基因的第一個(gè)結(jié)構(gòu)域在草本植物中是缺失的,而在木本植物中則存在。這種差異可能意味著該結(jié)構(gòu)域是木本植物特有的[16]。一些研究認(rèn)為,生長(zhǎng)素(IAA)、獨(dú)腳金內(nèi)酯(SLs)和脫落酸(ABA)可抑制分蘗芽的生長(zhǎng)發(fā)育[17-19],而細(xì)胞分裂素(CTK)可促進(jìn)分蘗芽的生長(zhǎng)[20]。CCD7將9-順式-β-胡蘿卜素裂解為9-順式-β-apo-100 -胡蘿卜素,形成內(nèi)酯,然后由細(xì)胞色素P450加氧酶MAX1催化生成獨(dú)腳金內(nèi)酯(SLs)[21- 24]。因此,CCD7通過控制獨(dú)腳金內(nèi)酯的生物合成抑制腋芽的生長(zhǎng)并抑制分蘗[6,25]。CCD7作為獨(dú)腳金內(nèi)酯生物合成的關(guān)鍵酶,已在擬南芥[20]、豌豆(P. sativum L.)[26]、水稻[24]、矮牽牛[27]等多種植物中被研究,CCD7基因的缺失會(huì)導(dǎo)致分枝增加。Vogel等發(fā)現(xiàn),SlCCD7反義番茄(Solanum lycopersicum L.)品系由于SLs水平降低而表現(xiàn)出分枝大量增加的情況[23]。Wang等發(fā)現(xiàn),編碼CCD7的HTD1部分功能缺失等位基因(HTD1HZ)可以增加水稻分蘗數(shù)和提高種子產(chǎn)量[28]。孫倩發(fā)現(xiàn)通過CRISPR/cas9基因編輯獲得的番茄CCD7突變體具有側(cè)枝增加和植株矮化的表型[29]。Galili等人也發(fā)現(xiàn)了CCD7M14編碼蛋白,導(dǎo)致鷹嘴豆出現(xiàn)典型的獨(dú)腳金內(nèi)酯缺陷表型,分支增加,株高降低[30]。以上研究均表明了CCD7基因通過影響?yīng)毮_金內(nèi)酯的合成來影響植株分蘗性狀。
在有機(jī)體中,磷酸化是蛋白翻譯后修飾中最廣泛的共價(jià)形式,同時(shí)也是原核生物和真核生物中最重要的調(diào)控修飾形式。新麥草的CCD7基因磷酸化的修飾位點(diǎn)主要是絲氨酸磷酸化位點(diǎn)。Agrawal等[31]對(duì)油菜花的磷酸化蛋白質(zhì)進(jìn)行了大規(guī)模的定量分析發(fā)現(xiàn)了已鑒定的磷酸化蛋白中有44%以上的酶參與了各種代謝途徑。這說明了CCD7蛋白磷酸化可能對(duì)獨(dú)腳金內(nèi)酯的形成起到調(diào)控作用,從而影響新麥草的分蘗性狀。RNA-seq結(jié)果顯示,多分蘗型新麥草中CCD7基因的表達(dá)量要顯著少于少分蘗型新麥草,這與后續(xù)的qPCR結(jié)果一致。
亞細(xì)胞定位可以直觀地反映基因位于細(xì)胞的表達(dá)位置,這與其生物學(xué)功能具有很強(qiáng)的相關(guān)性,研究新麥草的CCD7基因的亞細(xì)胞定位為后續(xù)CCD7基因功能的深入研究提供很大的幫助。本研究在煙草瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的葉片中觀察到CCD7基因主要在葉綠體中表達(dá),這與一些在線網(wǎng)站的預(yù)測(cè)結(jié)果一致,也與前人研究植物CCD7基因并將其定位于葉綠體中的預(yù)測(cè)一致[32-33]。本研究CCD7是調(diào)控獨(dú)腳金內(nèi)酯合成通路下游的關(guān)鍵基因,即通過9-順式- β-胡蘿卜素-9′、10′-裂解雙加氧酶催化β-胡蘿卜素轉(zhuǎn)化為獨(dú)腳金內(nèi)酯前體物質(zhì),而β-胡蘿卜素一般存在于葉綠體的類囊體薄膜上,故推測(cè)獨(dú)腳金內(nèi)酯的合成部位與葉綠體有關(guān)。
4 結(jié)論
前人報(bào)道類胡蘿卜素裂解雙加氧酶基因CCD參與獨(dú)腳金內(nèi)酯合成并可能調(diào)控植物分枝。本研究成功克隆出了新麥草CCD7基因,基因大小為1638 bp。表達(dá)量分析表明新麥草的分蘗數(shù)量與該基因的表達(dá)量呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)關(guān)系。亞細(xì)胞定位觀察到新麥草CCD7基因在煙草葉片細(xì)胞中葉綠體內(nèi)表達(dá)。預(yù)測(cè)新麥草CCD7保守結(jié)構(gòu)域的范圍是第13到第544個(gè)氨基酸,該基因在9個(gè)近緣物種中功能保守,編碼蛋白性質(zhì)相近。該基因的克隆為后續(xù)研究CCD7基因調(diào)控新麥草分蘗的機(jī)理及新麥草分蘗性狀的改良奠定理論基礎(chǔ)。
參 考 文 獻(xiàn)
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(責(zé)任編輯" 閔芝智)