〔摘要〕 目的 探討清脂固發(fā)酊對雄激素性脫發(fā)（AGA）小鼠模型毛發(fā)生長的影響及作用機制。方法 將70只SPF級C57BL/6小鼠隨機分為空白組、模型組、乙醇組、米諾地爾酊組及低、中、高濃度清脂固發(fā)酊組。除空白組外，其余各組連續(xù)4周皮下注射丙酸睪酮注射液5 mg/（kg·d），建立AGA小鼠模型。造模成功后在脫毛區(qū)繼續(xù)皮下注射等量丙酸睪酮注射液的同時涂抹相應藥物，其中空白組及模型組涂抹生理鹽水，米諾地爾酊組涂抹5%米諾地爾酊，乙醇組涂抹70%乙醇，低、中、高濃度清脂固發(fā)酊組分別涂抹0.1、0.2、0.4 g/mL清脂固發(fā)酊，各組均涂抹1 mL/次，每日1次，連續(xù)治療6周。肉眼觀察小鼠毛發(fā)生長情況;記錄脫毛區(qū)皮色變黑時間;用藥干預14、21、28、35、42 d隨機拔取新生毛發(fā)5根，測量其長度;HE染色觀察脫毛區(qū)毛囊形態(tài)，并計算毛囊數(shù)量及終毛/毳毛比值;ELISA檢測血清中睪酮（T）、雌二醇（E2）水平，并計算兩者比值。結果 與空白組比較，模型組毛發(fā)稀疏灰暗、毛囊密度稀疏，皮色變黑時間明顯升高（Plt;0.01），各個時間點新生毛發(fā)長度明顯縮短（Plt;0.01），毛囊數(shù)量和終毛/毳毛比值明顯降低（Plt;0.01），血清中T水平及T/E2比值顯著升高（Plt;0.01），E2水平顯著降低（Plt;0.01）。與模型組比較，低、中、高濃度清脂固發(fā)酊組毛發(fā)旺盛有光澤、毛囊密度較大，高濃度清脂固發(fā)酊組脫毛區(qū)皮色變黑時間明顯升高（Plt;0.01），低濃度清脂固發(fā)酊組在干預28、35、42 d時新生毛發(fā)長度增長（Plt;0.05，Plt;0.01），中、高濃度清脂固發(fā)酊組在各個時間點新生毛發(fā)長度明顯增長（Plt;0.01）、毛囊數(shù)量和終毛/毳毛比值明顯升高（Plt;0.01）、血清E2水平均顯著升高（Plt;0.01），低、中、高濃度清脂固發(fā)酊組T水平及T/E2比值均降低（Plt;0.05，Plt;0.01）。與低濃度清脂固發(fā)酊組比較，中、高濃度清脂固發(fā)酊組毛發(fā)更濃密黑亮、毛囊密度大，中濃度清脂固發(fā)酊組在干預35、42 d新生毛發(fā)長度明顯增長（Plt;0.01），高濃度清脂固發(fā)酊組在干預21、28、35、42 d新生毛發(fā)長度明顯增長（Plt;0.01），中、高濃度清脂固發(fā)酊組毛囊數(shù)量和終毛/毳毛比值升高（Plt;0.05，Plt;0.01）、T水平及T/E2比值顯著降低（Plt;0.01）、E2水平升高（Plt;0.05，Plt;0.01）。結論 清脂固發(fā)酊可以促使毛囊提前進入生長期，增加毛囊數(shù)量，改善毛囊微型化，加速毛發(fā)生長，其可能是通過調節(jié)激素水平以發(fā)揮作用。

〔關鍵詞〕 雄激素性脫發(fā);脂溢性脫發(fā);清脂固發(fā)酊;皮色變黑時間;新生毛發(fā)長度;毛囊數(shù)量;終毛/毳毛比值;激素水平

〔中圖分類號〕R285.5"""nbsp;"""" 〔文獻標志碼〕A""""""""" 〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2025.02.002

〔收稿日期〕2024-07-23

〔基金項目〕湖南省科技廳項目基金（2021SK51305）。

〔通信作者〕*向麗萍，女，博士，教授，主任醫(yī)師，E-mail：xlpxkj@126.com。

Effects of Qingzhi Gufa Tincture on hair growth in a mouse model of androgenetic alopecia

TANG Yuying1， DUAN Yuqian1， WANG Shi2， HE Ruolan1， TAN Shimiao1， ZOU Wenjuan1， XIANG Liping2*

1. Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410208， China; 2. The Second Hospital of Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410000， China

〔Abstract〕 Objective To investigate the effects and mechanism of action of Qingzhi Gufa Tincture （QZGFT） on hair growth in androgenic alopecia （AGA） mouse model. Methods Seventy SPF C57BL/6 mice were randomly divided into blank group， model group， ethanol group， minoxidil tincture group， and low-， medium-， and high-concentration QZGFT groups. Except for the blank group， the other groups were subcutaneously injected with testosterone propionate injection 5 mg/（kg·d） for four weeks to establish AGA mouse model. After successful modeling， while continuing to administer an equal amount of testosterone propionate subcutaneously in the depilation area， the corresponding medications were applied at the same time. The blank and model groups were treated with normal saline， the minoxidil tincture group with 5% minoxidil tincture， the ethanol group with 70% ethanol， and the low-， medium-， and high-concentration QZGFT groups with 0.1 g/mL， 0.2 g/mL， and 0.4 g/mL QZGFT， respectively. Each group received 1 mL per application， once daily for six consecutive weeks. The hair growth was observed macroscopically. The time for skin darkening in the depilation area was recorded. After 14， 21， 28， 35， and 42 days of drug intervention， five newly grown hairs were randomly plucked and their length was measured. HE staining was used to observe the morphology of hair follicles in the depilation area， and the number of hair follicles as well as the terminal to vellus hair ratio were calculated. ELISA was used to check the levels of testosterone （T） and estradiol （E2） in serum， and the ratio of the two was calculated. Results Compared with the blank group， the hair in the model group was sparse and gray， with small density of hair follicles. The time for skin darkening significantly increased （Plt;0.01）， the length of newly grown hairs was significantly shortened at each time point （Plt;0.01）， and the number of hair follicles and the terminal to vellus hair ratio were significantly lower （Plt;0.01）. The serum T level and T/E2 ratio were significantly elevated （Plt;0.01）， while the serum E2 level was significantly lower （Plt;0.01）. Compared with the model group， the low-， medium-， and high-concentration QZGFT groups had bright and shiny hair， with greater follicle density; the time for skin darking in the depilation area of the high-concentration QZGFT group was significantly higher （Plt;0.01）; the length of newly grown hairs in the low-concentration QZGFT group increased at 28， 35， and 42 days after intervention （Plt;0.05， Plt;0.01）. At each time point， the length of newly grown hairs （Plt;0.01）， the number of hair follicles and the terminal to vellus hair ratio were significantly higher （Plt;0.01）， and the serum E2 level was significantly higher （Plt;0.01） in the medium- and high- concentration QZGFT groups. The T level and T/E2 ratio of low-， medium-， and high-concentration QZGFT groups were decreased （Plt;0.05， Plt;0.01）. Compared with the low-concentration QZGFT group， the medium- and high-concentration QZGFT groups exhibited denser and shinier hair with greater follicle density..The length of newly grown hairs in the medium-concentration QZGFT group significantly increased on the 35 and 42 days of intervention （Plt;0.01）. At 21， 28， 35， and 42 days after intervention， the length of newly grown hairs in the high-concentration QZGFT group significantly increased （Plt;0.01）. The medium- and high-concentration QZGFT groups also had increased number of hair follicles and terminal to vellus hair ratio （Plt;0.05， Plt;0.01）， significantly reduced T levels and T/E2 ratio （Plt;0.01）， and elevated E2 level （Plt;0.05， Plt;0.01）. Conclusion QZGFT can promote the early entry of hair follicles into the growth phase， increase the number of hair follicles， improve hair follicle miniaturization， and accelerate hair growth， which may exert its effects by regulating hormone levels.

〔Keywords〕 androgenic alopecia; seborrheic alopecia; Qingzhi Gufa Tincture; time for skin darkening; length of newly grown hairs; number of hair follicles; terminal to vellus hair ratio; hormone levels

本文引用： 唐玉瑩， 段雨倩， 王" 適， 何若斕， 譚詩淼， 鄒文娟， 向麗萍. 清脂固發(fā)酊對雄激素性脫發(fā)小鼠模型毛發(fā)生長的影響[J]. 湖南中醫(yī)藥大學學報， 2025， 45（2）： 196-203.

雄激素性脫發(fā)（androgenetic alopecia，AGA），又稱脂溢性脫發(fā)，屬于中醫(yī)學“發(fā)蛀脫發(fā)”“蛀發(fā)癬”范疇，主要表現(xiàn)為頭皮油膩多屑伴瘙癢，進而出現(xiàn)毛發(fā)稀疏脫落、毛囊萎縮等癥[1]。在我國AGA男性患病率約為21.3%，女性患病率約為6.0%[2]，且該病發(fā)病率逐年增加，呈現(xiàn)年輕化趨勢，對患者的生活、工作、心理都造成極大的負面影響[3]。因此，治療和預防AGA成為醫(yī)學上的研究熱點。

目前，AGA的發(fā)病機制尚不明確，可能與遺傳、雄激素水平、雄激素受體及5α-還原酶的異常表達、微炎癥、環(huán)境等因素相關[4]。目前，美國食品藥品監(jiān)督管理局對于治療本病的推薦藥物是非那雄胺和米諾地爾[5]，但以上兩種藥物毒副作用明顯;激光治療與手術治療雖可用于AGA，但費用較高，且對施術者技術有一定要求，推廣性較差。近年來，對于中草藥治療脫發(fā)的研究日益增多，中藥因其多靶點、多途徑特點可改善脫發(fā)癥狀得到廣泛關注。研究表明，與單純西醫(yī)治療相比，中藥輔助治療脫發(fā)總有效率更高，且安全性高[6]。

清脂固發(fā)酊是由側柏葉、透骨草、墨旱蓮、丹參等11味中藥浸泡于乙醇所制備而來，其直接作用于皮膚黏膜表面，直達病灶，具有高透過率、高吸收率、給藥量可控等特點[3]，且便于使用與攜帶，有利于提高患者依從性。本研究基于AGA小鼠模型探討清脂固發(fā)酊對AGA毛發(fā)生長、毛囊修復、激素水平等方面的影響，以期豐富AGA的治療方法，提高該病的治療效果。

1 實驗材料與方法

1.1" 實驗動物

6～8周齡SPF級C57BL/6小鼠70只，體質量（20±2） g，由實驗動物中心提供，實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK（遼）2020-0001。將70只健康的SPF級C57BL/6小鼠適應性喂養(yǎng)1周，室溫20～25 ℃，光線、通風良好，自由飲水、進食，分籠飼養(yǎng)。實驗通過湖南中醫(yī)藥大學醫(yī)學倫理委員會批準（倫理編號：LLBH-202303220001），所有實驗操作均嚴格遵循動物實驗倫理學原則。

1.2" 清脂固發(fā)酊制備

將側柏葉30 g、透骨草30 g、墨旱蓮20 g、丹參15 g等11味中藥藥材粉碎成粗粉，以上中藥由湖南中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院藥劑科提供，按照《中華人民共和國藥典2020年版四部》[7]酊劑項下的浸漬法，加70%乙醇浸泡2次，每次7 d。將此方法所得清脂固發(fā)酊作為中濃度清脂固發(fā)酊（0.2 g/mL），在此基礎上將生藥量減半，其余條件不變，作為低濃度清脂固發(fā)酊（0.1 g/mL），生藥量增加至2倍作為高濃度清脂固發(fā)酊（0.4 g/mL）[8-9]。

1.3" 主要儀器

石蠟切片機（德國徠卡儀器有限公司，型號：RM2235）;電熱恒溫鼓風干燥箱（上海精宏實驗設備有限公司，型號：QH01-9030A）;超純水系統(tǒng)（力康生物醫(yī)療科技控股有限公司，型號：NW10LVF）;顯微鏡型號、顯微鏡拍照系統(tǒng)（日本奧林巴斯株式會社，型號：BX53、DP73）;微量移液器、酶標儀（美國伯騰儀器有限公司，型號：Proline、ELX-800）;電熱恒溫培養(yǎng)箱（天津泰斯特儀器有限公司，型號：DH36001B）。

1.4" 主要試劑

5%米諾地爾酊（浙江萬晟醫(yī)藥有限公司，批號：20010714）;雌二醇ELISA試劑盒、睪酮ELISA試劑盒（武漢菲恩生物科技有限公司，批號：EU0390、EU0400）;無水乙醇（國藥集團醫(yī)藥股份有限公司，批號：10009218）;蘇木精染液（北京索萊寶科技有限公司，批號：H8070）;曙紅Y（醇溶）[生工生物工程（上海）股份有限公司，批號：A600190];二甲苯（上海阿拉丁生化科技股份有限公司，批號：1330-20-7）;丙酸睪酮注射液、三溴乙醇（上海麥克林生化科技股份有限公司，批號：T818615、T903147）。

1.5" 實驗分組

將70只小鼠適應性喂養(yǎng)1周后，按隨機數(shù)字表法分為空白組、模型組、乙醇組、米諾地爾酊組、低濃度清脂固發(fā)酊組、中濃度清脂固發(fā)酊組、高濃度清脂固發(fā)酊組，每組10只。

1.6" 造模方法

參照文獻[10-13]構建動物模型。在造模前1天用備皮刀將所有小鼠背部中央?yún)^(qū)域部分毛發(fā)剃除，每只小鼠的備皮面積約為2 cm×3 cm，然后按照脫毛膏的使用說明書對備皮區(qū)域進行徹底脫毛，以去除備皮后仍殘留的毛發(fā)。脫毛處理24 h后，除空白組外，其余60只小鼠背部皮下多點注射丙酸睪酮5 mg/（kg·d），每日1次。丙酸睪酮注射4周后，分別從空白組和模型組隨機抽取2只小鼠，用無菌組織剪取背部脫毛區(qū)皮膚約1 cm×1 cm，制作皮膚病理切片，HE染色觀察皮膚毛囊形態(tài)、數(shù)量，用于評價模型是否成功。造模成功標準[14]：（1）小鼠背部毛發(fā)生長稀疏，毛發(fā)顏色暗淡，背部皮膚可見皮脂溢出;（2）組織病理學上表現(xiàn)為毛囊數(shù)量減少，毛干色素變淺、直徑變小，毛囊微型化。造模成功后，再次用脫毛膏將每只實驗動物背部中央?yún)^(qū)域的部分毛發(fā)脫毛，然后開始用藥干預。

1.7" 治療方法

造模成功后，除空白組外其余各組繼續(xù)皮下注射丙酸睪酮5 mg/（kg·d）保持AGA模型，同時每日在脫毛區(qū)涂抹相應藥物。其中空白組及模型組涂抹生理鹽水;乙醇組涂抹70%乙醇;米諾地爾酊組涂抹5%米諾地爾酊;低、中、高清脂固發(fā)酊組涂抹相應濃度清脂固發(fā)酊。均為1 mL/d，每日1次，連續(xù)6周。

1.8" 樣本采集與處理

實驗10周后，禁食12 h，每組隨機抽取5只小鼠，使用三溴乙醇溶液對小鼠進行腹腔麻醉。小鼠麻醉后，通過摘眼球取血法采血，每只小鼠大約取1 mL血液，收集于無菌EP管中，在室溫放置20 min，待血液自然凝固后，4 ℃以12 000 r/min離心10 min（離心半徑：9 cm），仔細收集上清液，存于無菌EP管內(nèi)，在-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩２裳Y束后，用無菌組織剪取背部脫毛區(qū)皮膚組織約1 cm×1 cm，放置在EP管中，在濃度為10%的甲醛溶液中進行組織固定。另取一份皮片，存于EP管內(nèi)，在-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.9" 脫毛區(qū)皮色變化及毛發(fā)長度測定

造模成功開始用藥干預后，每日于固定時間（共計6周）觀察背部脫毛區(qū)的皮色變化，觀察并記錄脫毛區(qū)皮色變黑的時間，并且分別于第14、21、28、35、42日隨機拔取受試小鼠背部新生毛發(fā)5根，用游標卡尺測量毛發(fā)長度。整個過程需每日觀察并記錄小鼠背部脫毛區(qū)外用藥物后有無紅腫、滲液、潰爛、干燥起皮，生活及飲食習慣有無改變。

1.10" 脫毛區(qū)皮片病理學觀察

取出用10%的甲醛溶液固定的皮膚組織，石蠟包埋、切片、常規(guī)脫蠟、脫水，HE染色后脫水、透明、封片，于普通光學顯微鏡下觀察。主要觀察小鼠背部脫毛區(qū)皮片毛囊形態(tài)、數(shù)量，并計算終毛/毳毛比值。

1.11" 血清激素含量測定

將凍存的血清樣本于-20 ℃、4 ℃梯度解凍后，平衡到室溫，嚴格按照ELISA試劑盒說明書步驟操作，測定小鼠血清中的睪酮（testosterone，T）、雌二醇（estradiol，E2）水平，并計算T/E2比值。

1.12" 統(tǒng)計學分析

采用統(tǒng)計軟件SPSS 25.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，采用Graph Pad Prism 8.0制作柱狀圖。計量資料符合正態(tài)分布用“x±s”描述，不符合正態(tài)分布用M（P25～P75）描述。若數(shù)據(jù)滿足正態(tài)分布及方差齊性，選用單因素方差分析并采用LSD檢驗進行兩兩比較;若數(shù)據(jù)不滿足正態(tài)分布，則使用非參數(shù)檢驗Kruskal-Wallis單因素ANOVA檢驗進行多組比較。不同時期毛發(fā)長度變化情況采用重復測量方差分析。以Plt;0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1" 各組小鼠毛發(fā)生長情況

干預7 d，空白組、米諾地爾酊組毛發(fā)生長明顯，低、中、高濃度清脂固發(fā)酊組毛發(fā)生長整體情況低于空白組及米諾地爾酊組，而模型組及乙醇組毛發(fā)生長稀疏。干預21 d，空白組小鼠脫毛區(qū)毛發(fā)幾乎完全覆蓋，毛色黑亮;米諾地爾酊組及中、高濃度清脂固發(fā)酊組毛發(fā)覆蓋率優(yōu)于低濃度清脂固發(fā)酊組，模型組、乙醇組小鼠毛發(fā)生長仍稀疏。干預42 d，空白組、米諾地爾酊組及高濃度清脂固發(fā)酊組小鼠脫毛區(qū)毛發(fā)基本完全覆蓋，毛發(fā)黑亮有光澤;低、中濃度清脂固發(fā)酊組仍有小部分區(qū)域毛發(fā)生長較稀疏;模型組、乙醇組小鼠整體毛發(fā)稀疏，毛色灰暗，部分區(qū)域無毛發(fā)生長。詳見圖1。

整個用藥干預期間空白組小鼠精神活躍，對外界刺激敏感;模型組、乙醇組小鼠較空白組興奮、好動，脾氣較暴躁;米諾地爾酊組及低、中、高濃度清脂固發(fā)酊組小鼠較模型組性情平和，相對安靜。實驗過程中個別小鼠背部脫毛區(qū)皮膚出現(xiàn)腫脹、鼓包，可自行恢復，考慮與注射手法不當相關，個別小鼠背部脫毛區(qū)皮膚出現(xiàn)抓痕、破潰，為小鼠間相互撕抓所致。

2.2" 各組小鼠脫毛區(qū)皮色變黑時間比較

與空白組比較，模型組皮色變黑時間明顯升高（Plt;0.01）;與模型組比較，米諾地爾酊組、高濃度清脂固發(fā)酊組皮色變黑時間均明顯升高（Plt;0.01）;與米諾地爾酊組比較，乙醇組、低濃度清脂固發(fā)酊組皮色變黑時間均升高（Plt;0.05，Plt;0.01）;與乙醇組比較，高濃度清脂固發(fā)酊組小鼠皮色變黑時間明顯降低（Plt;0.01）。詳見表1。

2.3" 各組小鼠新生毛發(fā)長度比較

與空白組比較，模型組在各個時間點新生毛發(fā)長度明顯縮短（Plt;0.01）;與模型組比較，米諾地爾酊組及中、高濃度清脂固發(fā)酊組在各個時間點新生毛發(fā)長度明顯增長（Plt;0.01），低濃度清脂固發(fā)酊組在干預28、35、42 d時新生毛發(fā)長度增長（Plt;0.05，Plt;0.01）;與米諾地爾酊組比較，乙醇組、低濃度清脂固發(fā)酊組在各個時間點新生毛發(fā)長度明顯縮短（Plt;0.01），中濃度清脂固發(fā)酊組在干預21、28、35、42 d時新生毛發(fā)長度明顯縮短（Plt;0.01），高濃度清脂固發(fā)酊組在干預28、35 d時新生毛發(fā)長度縮短（Plt;0.05，Plt;0.01）;與乙醇組比較，低濃度清脂固發(fā)酊組在干預28、35、42 d時新生毛發(fā)長度增長（Plt;0.05，Plt;0.01），中、高濃度清脂固發(fā)酊組在各個時間點新生毛發(fā)長度增長（Plt;0.05，Plt;0.01）;與低濃度清脂固發(fā)酊組比較，中濃度清脂固發(fā)酊組在干預35、42 d時新生毛發(fā)長度明顯增長（Plt;0.01），高濃度清脂固發(fā)酊組在干預21、28、35、42 d時新生毛發(fā)長度明顯增長（Plt;0.01）;與中濃度清脂固發(fā)酊組比較，高濃度清脂固發(fā)酊組在干預21、35、42 d時新生毛發(fā)長度明顯增長（Plt;0.01）。與干預14 d比較，干預21、28、35、42 d時各組新生毛發(fā)長度明顯增長（Plt;0.01）;與干預21 d比較，干預28、35、42 d時各組新生毛發(fā)長度明顯增長（Plt;0.01）;與干預28 d比較，干預35、42 d時各組新生毛發(fā)長度明顯增長（Plt;0.01）;與干預35 d比較，干預42 d時各組新生毛發(fā)長度明顯增長（Plt;0.01）。詳見表2。

2.4" 各組小鼠毛囊形態(tài)比較

空白組可見毛囊密度大，毛干色素深;模型組、乙醇組毛囊密度小，毛干色素淺或無，毛囊微型化;與模型組相比，米諾地爾酊組及中、高濃度清脂固發(fā)酊組毛囊密度較大，毛干黑色素形成明顯，毛囊微型化改善，而低濃度清脂固發(fā)酊組毛囊整體改善情況較差。詳見圖2。

2.5" 各組小鼠毛囊數(shù)量及終毛/毳毛比值比較

與空白組比較，模型組的毛囊數(shù)量和終毛/毳毛比值明顯降低（Plt;0.01）;與模型組比較，米諾地爾酊組及中、高濃度清脂固發(fā)酊組的毛囊數(shù)量和終毛/毳毛比值明顯升高（Plt;0.01）;與米諾地爾酊組比較，乙醇組及低、中、高濃度清脂固發(fā)酊組毛囊數(shù)量和終毛/毳毛比值明顯降低（Plt;0.01）;與乙醇組、低濃度清脂固發(fā)酊組比較，中、高濃度清脂固發(fā)酊組毛囊數(shù)量和終毛/毳毛比值升高（Plt;0.05，Plt;0.01）。詳見表3。

2.6" 各組小鼠血清中T、E2水平及T/E2比值比較

與空白組比較，模型組小鼠血清中T水平、T/E2比值均升高（Plt;0.01），E2水平顯著降低（Plt;0.01）;與模型組比較，米諾地爾酊組及低、中、高濃度清脂固發(fā)酊組T水平、T/E2比值均降低（Plt;0.05，Plt;0.01），米諾地爾酊組及中、高濃度清脂固發(fā)酊組E2水平均顯著升高（Plt;0.01）;與米諾地爾酊組比較，乙醇組及低、中濃度清脂固發(fā)酊組T水平、T/E2比值均顯著升高（Plt;0.01），E2水平顯著降低（Plt;0.01）;與乙醇組比較，低、中、高濃度清脂固發(fā)酊組T水平、T/E2比值均降低（Plt;0.05，Plt;0.01），中、高濃度清脂固發(fā)酊組E2水平均顯著升高（Plt;0.01）;與低濃度清脂固發(fā)酊組比較，中、高濃度清脂固發(fā)酊組T水平、T/E2比值均顯著降低（Plt;0.01），E2水平均升高（Plt;0.05，Plt;0.01）;與中濃度清脂固發(fā)酊組比較，高濃度清脂固發(fā)酊組T水平、T/E2比值均降低（Plt;0.05，Plt;0.01），E2水平顯著升高（Plt;0.01）。詳見表4。

3 討論

AGA是臨床最常見的脫發(fā)類型之一，嚴重影響患者的心理及生活質量。中醫(yī)學認為AGA的發(fā)生與氣血失調、五臟失衡關系密切，其中以肝腎虧虛、氣血不足為本，以濕、熱、瘀、風為標，臨床上常分為濕熱蘊結證、血熱風燥證、氣郁血瘀證、氣血不足證、肝腎虧虛證，故治療時多以清熱祛濕、疏風潤燥、行氣活血、益氣養(yǎng)血、補益肝腎為主[15-16]。

西醫(yī)多認為AGA的發(fā)病因素眾多，其中雄激素占有決定性因素，其機制為T在5α-還原酶的作用下被還原成二氫睪酮，其進一步與雄激素受體結合形成復合物，進入細胞核控制毛發(fā)生長基因的表達，導致頭發(fā)正常的生長期縮短，毛囊微小化甚至萎縮，進而出現(xiàn)頭發(fā)變細甚至脫發(fā)[4，17]。而體內(nèi)雌激素的主要存在形式為E2，其大部分由雄激素在芳香化酶的作用下轉化而來，不僅可以促使毛囊提前進入生長期，也可以促進胰島素樣生長因子-1、血管內(nèi)皮生長因子等分泌，從而刺激毛囊增殖、改善局部微循環(huán)以促進毛發(fā)生長[18]。研究發(fā)現(xiàn)，在毛囊中可檢測到芳香酶活性，其主要在生長期表達[19]。故當T與E2處于相對平衡狀態(tài)時毛發(fā)可正常生長，當二者平衡失調時，尤其是當T水平明顯上升時，使得毛囊生長期縮短，毛囊持續(xù)進行性微型化，最終導致脫發(fā)。多項研究證明，AGA患者血清中T含量顯著升高[20-21]。

清脂固發(fā)酊由側柏葉、透骨草、墨旱蓮、丹參等11味中藥組成，具有清熱除濕、涼血祛風、生發(fā)固發(fā)之功，其中側柏葉可清熱涼血、生發(fā)烏發(fā);透骨草可祛風除濕、活血解毒;墨旱蓮既可滋補肝腎精血以生發(fā)，又可入血分以清熱涼血;丹參可清熱涼血活血。研究發(fā)現(xiàn)，側柏葉中富含側柏葉揮發(fā)油、黃酮類物質等，可有效刺激毛囊轉換至生長期、抑制5α-還原酶活性[22-23];透骨草可降低T及E2水平、抑制毛囊細胞凋亡[24];墨旱蓮可降低雄激素水平，同時促進毛囊黑色素形成[25];丹參主要有效成分丹參酮具有雌激素樣活性，通過拮抗雄激素發(fā)揮治療AGA作用，同時亦可以通過調節(jié)毛囊生長周期、改善微循環(huán)從而促進毛發(fā)生長[26-27]。而本次實驗結果表明，與模型組比較，高濃度清脂固發(fā)酊組小鼠脫毛區(qū)皮色變黑時間提前，提示清脂固發(fā)酊具有緩解丙酸睪酮抑制毛發(fā)生長的作用，促使毛囊提前進入生長期。與模型組相比，中、高濃度清脂固發(fā)酊組在各個時間點新生毛發(fā)長度明顯增長，毛囊數(shù)量增多，終毛/毳毛比值增大，毛干黑色素形成明顯，毛囊微型化改善，提示清脂固發(fā)酊能發(fā)揮增加毛囊數(shù)量、改善毛囊微型化、促進毛發(fā)生長的作用。與模型組比較，低、中、高濃度清脂固發(fā)酊組T水平、T/E2比值均降低，且中、高濃度清脂固發(fā)酊組E2水平均升高，提示清脂固發(fā)酊可能是通過調節(jié)激素水平從而發(fā)揮治療AGA的作用。

本次研究清脂固發(fā)酊對AGA小鼠毛發(fā)生長的影響并對其作用機制進行了初步探討，體外實驗尚未完善，促毛發(fā)生長作用的相關機制尚未完全闡明，未來可進一步圍繞細胞因子、信號通路、基因檢測等方向深入研究和探討清脂固發(fā)酊治療AGA的相關機制，為其治療AGA提供全面客觀依據(jù)。此外，中醫(yī)藥可通過多成分、多靶點、多途徑發(fā)揮作用，而清脂固發(fā)酊由多味藥物組成，其成分復雜，未來可以針對其化學成分進行更精準細化的研究，篩選出有效成分并探索其最佳濃度。

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（本文編輯" 田夢妍）