摘要 利用日立L-8800型氨基酸分析儀和Agilent 6890-5973N型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀分析新鮮細(xì)鱗鮭和細(xì)鱗鮭在-20 ℃冷凍12 h后肌肉氨基酸、脂肪酸含量，并對細(xì)鱗鮭肌肉冷凍后口感的影響程度進(jìn)行分析。結(jié)果表明，細(xì)鱗鮭在鮮活和冷凍2種條件下肌肉中大部分氨基酸、脂肪酸含量有顯著差異。冷凍會一定程度上減少肌肉的C18：1n-9、C16：1n-7、C17：1n-7等脂肪酸以及谷氨酸、甘氨酸等氨基酸，但仍是優(yōu)質(zhì)的氨基酸、脂肪酸來源。

關(guān)鍵詞 細(xì)鱗鮭；冷凍條件；肌肉；營養(yǎng)成分

中圖分類號 S 983 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 0517-6611（2024）16-0160-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2024.16.035

開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）：

Effect of Freezing Conditions on the Nutritional Composition of Brachymystax lenok Muscle

NING Ke-yuan，LI Yong-xiong，XUAN Yi-fan et al

（Key Laboratory of Applied Biology and Aquaculture of Northern Fish in Liaoning Province，Dalian Ocean University，Dalian，Liaoning 116023）

Abstract A daily L-8800 amino acid analyzer and an Agilent 6890-5973N gas chromatography-mass spectrometer were used to analyze the muscle amino acid and fatty acid content of fresh and frozen Brachymystax lenok at -20 ℃ for 12 hours. The effect of freezing on the taste of fine scale salmon muscle was analyzed. The results showed that there were significant differences in the content of muscle amino acids and fatty acids between fresh and frozen Brachymystax lenok.Freezing could to some extent reduce fatty acids such as C18：1n-9， C16：1n-7 and C17：1n-7 in muscles， as well as amino acids such as glutamic acid and glycine， but it was still a high-quality source of amino acids and fatty acids.

Key words Brachymystax lenok;Freezing condition;Muscle;Nutritional composition

基金項目 遼寧省教育廳服務(wù)地方項目（DL201703）。

作者簡介 寧可源（2000—），女，遼寧營口人，碩士研究生，研究方向：水產(chǎn)養(yǎng)殖學(xué)。

*通信作者，副教授，博士，碩士生導(dǎo)師，從事水產(chǎn)養(yǎng)殖學(xué)、魚類生理生態(tài)學(xué)研究。

收稿日期 2023-10-11；修回日期 2023-12-25

細(xì)鱗鮭［Brachymystax lenok（Pallas）］，別稱山細(xì)鱗，屬于鮭科鮭亞科（Salmoninae）細(xì)鱗鮭屬，主要分布在東北、西北、華北北部和新疆地區(qū)。由于生態(tài)環(huán)境破壞和人為濫捕等原因，細(xì)鱗鮭野生資源日益減少，因此被列為國家二級保護(hù)動物^［1］，在魚類學(xué)和動物地理學(xué)上具有重要的學(xué)術(shù)研究價值?，F(xiàn)階段有關(guān)魚類肌肉營養(yǎng)成分的研究很多^［2-4］，如徐革鋒等^［3］比較分析雌雄細(xì)鱗魚氨基酸等營養(yǎng)物質(zhì)發(fā)現(xiàn)，雌雄細(xì)鱗魚的必需氨基酸組成均較為合理，是一種富含優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)的魚類；鄭雪莉等^［4］分析秦嶺地區(qū)細(xì)鱗鮭肌肉營養(yǎng)成分發(fā)現(xiàn)，秦嶺細(xì)鱗鮭肌肉組織中含有豐富的必需氨基酸、多不飽和脂肪酸和人體所必需的多種微量元素。目前冷凍對肌肉營養(yǎng)成分影響的研究，尤其冷凍條件下細(xì)鱗鮭與鮮活的細(xì)鱗鮭之間營養(yǎng)成分的研究國內(nèi)鮮見報道，該試驗通過分析細(xì)鱗鮭鮮活和冷凍肌肉脂肪酸、氨基酸組成，評估冷凍過程對魚肉營養(yǎng)價值的影響，以期為細(xì)鱗鮭種質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)和冷凍保存提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

試驗用魚為遼寧祺鱗漁業(yè)有限公司本溪桓仁養(yǎng)殖場2齡細(xì)鱗鮭，體長（35.22±2.52）cm、體質(zhì)量（620.35±5.12）g，運回實驗室后暫養(yǎng)3 d，試驗用樣品選取魚體側(cè)線與背鰭起點之間的背部肌肉50 g，經(jīng)冷凍干燥，粉碎后置于-20 ℃冰箱存放待用。

1.2 試驗方法

1.2.1 樣品處理。

測量細(xì)鱗鮭的體長、體質(zhì)量；剔取細(xì)鱗鮭脊椎兩側(cè)吻部到尾鰭基部的全部肌肉，清洗干凈后，烘干肌肉上的水分，或用濾紙將細(xì)鱗鮭肌肉的水分吸干，切成2～3 cm 肉片，用研缽研碎或小型絞肉機搗碎，標(biāo)記好待用。取部分細(xì)鱗鮭鮮樣，在冷凍干燥機中凍干后進(jìn)行測定。取部分細(xì)鱗鮭鮮樣于-20 ℃冰箱冷凍12 h，取部分樣品，置于冷凍干燥機中凍干后進(jìn)行測定。

1.2.2 脂肪酸的提取。

稱取處理好的細(xì)鱗鮭鮮樣3 g，破碎后置于20 mL離心管中，依次加入 3 mL 甲醇、 5 mL 氯仿，充分混勻后靜置，10 min后在4 ℃條件下抽提，3.5 h 后過濾?；厥諡V液至離心管中，加入 2 mL飽和 NaCl 溶液，充分振蕩后靜置，觀察到分層，棄除上層液，保留脂肪層。-20 ℃條件下冷凍12 h的細(xì)鱗鮭肌肉樣品處理同上，棄上層液，保留下層脂肪層。

1.2.3 脂肪酸的皂化與酯化。

將脂肪層轉(zhuǎn)移至20 mL水解管中，加入5 mL 0.5 mol/L KOH-CHOH溶液，混合搖勻，55 ℃ 水浴2 h后冷卻，并加入2 mL CH，搖勻，加入1 mL NaCl溶液后靜置，分層后保留上層有機相，經(jīng)0.22 μm 濾器和無水硫酸鈉過濾后進(jìn)行氣相色譜分析。冷凍樣品處理同上，每組3次重復(fù)，取平均值。

1.2.4 脂肪酸組成分析 。

1.2.4.1 分析儀器。AOC-12 自動進(jìn)樣器（日本島津公司）；GC2010 氣相色譜儀（日本島津公司）；SP-2560 氣相毛細(xì)管柱（美國 SUPELCO）。

1.2.4.2 分析條件。設(shè)置進(jìn)樣溫度為 260 ℃，載氣的純凈度為99.99% 氦，柱入的流通速度為1.8 mL/min，柱前壓力為357.4 kPa，柱起始溫度為140 ℃。1 μL 分流進(jìn)樣，90∶1的分流比。以脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)品（美國 SIGMA 公司）為對照，采用面積歸一法核算脂肪酸相對百分含量，每組樣品平行測定 3 次，取平均值。

1.2.5 氨基酸組成分析。采用日立L-8800型氨基酸分析儀（日立公司），依照GB/T 5009.124—2003、GB/T 15400—1994測定。

1.2.6 氨基酸評價方法。

根據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織/世界衛(wèi)生組織（FAO/WHO）建議的氨基酸評分標(biāo)準(zhǔn)模式^［5］，按照下列公式計算氨基酸評分（ASS）、化學(xué)評分（CS）^［6-7］。

ASS=m/m

CS=m/m

式中：m為待測樣品中氨基酸含量（%）;m為FAO/WHO評分標(biāo)準(zhǔn)模式中氨基酸含量（%）；m為全雞蛋蛋白質(zhì)中的同種氨基酸含量（%）。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

采用 SPSS 17.0 軟件對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，并進(jìn)行單因素方差分析和 Duncan’s 多重比較，當(dāng) P<0.05時，認(rèn)定為有顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 脂肪酸組成與含量分析

從鮮活和冷凍樣品中脂肪酸組成及含量（表1）可以看出，細(xì)鱗鮭肌肉中鮮活樣品的飽和脂肪酸（SFA）為10.04%，單不飽和脂肪酸（MUFA）為44.97%，多不飽和脂肪酸（PUFA）為44.99%；冷凍樣品的SFA為25.51%，MUFA為33.04%，PUFA為41.47%。在2組樣品中，n-6系脂肪酸有5種，分別為C18：2n-6、C18：3n-6、C20：2n-6、C20：3n-6、C20：4n-6；n-3系脂肪酸有4種，分別為C18：3n-3、C18：4n-3、C20：5n-3、C22：6n-3。

鮮活樣品中含飽和脂肪酸8種，含量最高的為C18：0（6.01%），其次為C14：0（3.15%），含量最低的為C12：0（0.03%）；冷凍樣品中含飽和脂肪酸7種，含量最高的為C16：0（22.42%），其次為C14：0（2.41%），含量最低的為C22：0（0.06%），其中，C12：0未在冷凍樣品中檢測出。

鮮活樣品中含單不飽和脂肪酸6種，含量最高的為C18：1n-9（35.61%），其次為C16：1n-7（6.44%），含量最低的為C17：1n-7（0.11%）；冷凍樣品中含單不飽和脂肪酸5種，含量最高的為C18：1n-9（26.10%），其次為C16：1n-7（4.84%），含量最低的為C17：1n-7（0.12%）；其中，C18：1n-7 和C20：1未在冷凍樣品中檢測出，C20：1n-9未在鮮活樣品中檢測出。

鮮活樣品中含多不飽和脂肪酸7種，含量最高的為C18：2n-6（34.59%），其次為C22：6n-3（6.24%），含量最低的為C18：3n-6（0.25%）；冷凍樣品中含多不飽和脂肪酸8種，含量最高的為C18：2n-6（27.29%），其次為C22：6n-3（9.02%），含量最低的為C18：3n-3（0.27%）；其中，C20：4n-6未在冷凍樣品中檢測出，C20：3n-6和C18：3n-3未在鮮活樣品中檢測出。

2.2 氨基酸組成與含量分析

鮮活與冷凍細(xì)鱗鮭肌肉的氨基酸組成與含量見表2，試驗共測出17種常見氨基酸，冷凍細(xì)鱗鮭肌肉樣品中，含量最高的氨基酸為谷氨酸（8.82%），其次為天冬氨酸（6.14%）、賴氨酸（6.04%），含量最少的氨基酸為胱氨酸（0.18%），冷凍細(xì)鱗鮭肌肉樣品中氨基酸總量（TAA）為58.34%，必需氨基酸（EAA）含量為23.93%，呈味氨基酸（DAA）含量為23.80%，非必需氨基酸（NEAA）含量為34.41%。

鮮活細(xì)鱗鮭肌肉樣品中，含量最高的氨基酸為谷氨酸（9.72%），其次為賴氨酸（6.76%）、天冬氨酸（6.72%），含量最少的氨基酸為胱氨酸（0.18%），鮮活細(xì)鱗鮭肌肉樣品中氨基酸總量（TAA）為64.28%，必需氨基酸（EAA）含量為26.34%，呈味氨基酸（DAA）含量為26.31%，非必需氨基酸（NEAA）含量為37.94%。

2.3 氨基酸品質(zhì)評價

以氨基酸評分（ASS）進(jìn)行評價，結(jié)果顯示（表3），細(xì)鱗鮭肌肉鮮活樣品中評分最高的為賴氨酸，其次為苯丙氨酸+酪氨酸；評分最低的為蛋氨酸+胱氨酸，其次為纈氨酸。冷凍樣品中評分最高的為賴氨酸，其次為苯丙氨酸+酪氨酸；評分最低的為蛋氨酸+胱氨酸，其次為纈氨酸。因此從ASS來看，細(xì)鱗鮭的第一限制氨基酸為蛋氨酸+胱氨酸，第二限制氨基酸為纈氨酸。

以化學(xué)評分（CS）進(jìn)行評價，結(jié)果顯示（表3），細(xì)鱗鮭肌肉鮮活樣品中評分最高的為賴氨酸，其次為蘇氨酸和亮氨酸；評分最低的為蛋氨酸+胱氨酸，其次為纈氨酸。冷凍樣品中評分最高的為賴氨酸，其次為蘇氨酸和亮氨酸；評分最低的為蛋氨酸+胱氨酸，其次為纈氨酸。因此從CS來看，細(xì)鱗鮭的第一限制氨基酸為蛋氨酸+胱氨酸，第二限制氨基酸為纈氨酸。

3 討論

3.1 脂肪酸含量分析

食用海鮮對人體的營養(yǎng)和健康有很大的幫助，魚和其他海產(chǎn)品被認(rèn)為是必需氨基酸、多不飽和脂肪酸、維生素和礦物質(zhì)的良好來源^［8］，從脂肪酸組成來看，肌肉營養(yǎng)成分的脂肪酸組成及其含量會對其制品中的揮發(fā)性物質(zhì)種類以及含量造成影響，飽和脂肪酸含量高的魚類，其制品揮發(fā)性物質(zhì)中的醛類含量也會相對較高，食物中飽和脂肪酸過高會導(dǎo)致人易患心腦血管疾病，但細(xì)鱗鮭肌肉在冷凍和鮮活條件下飽和脂肪酸含量適中，皆利于人體攝入，是優(yōu)質(zhì)的脂肪酸來源；亞油酸含量高的魚類，其制品揮發(fā)性物質(zhì)中亞油酸氧化產(chǎn)物的含量也會較高^［9］。

鄭雪莉等^［4］研究發(fā)現(xiàn)細(xì)鱗鮭主要含有C14～C22的9種飽和、不飽和脂肪酸，其中飽和脂肪酸3種，單不飽和脂肪酸2種，多不飽和脂肪酸4種。徐革鋒等^［3］研究發(fā)現(xiàn)細(xì)鱗魚肌肉中含有34種脂肪酸，補充了細(xì)鱗魚肌肉中的脂肪酸種類。該試驗在鮮活和冷凍樣品中共測出24種脂肪酸，與鄭雪莉等和徐革鋒等研究的結(jié)果對比發(fā)現(xiàn)，鮮活和冷凍條件下細(xì)鱗魚肌肉中均未檢出亞油酸（C18：2n-6）。

魚類的體脂含量因不同種類的魚及同一種魚的不同來源、不同年齡、不同發(fā)育階段及不同組織而異^［10］。飽和脂肪酸（SFA）和單不飽和脂肪酸（MUFA）被認(rèn)為是優(yōu)先被分解為機體提供能量的脂肪酸^［11］。MUFA中均以 C18：1n-9為主，其作為主要的供能物質(zhì)，與性腺發(fā)育、基礎(chǔ)代謝和運動關(guān)系密切^［12］。C18：1n-9在鮮活和冷凍樣品中皆為含量最高的氨基酸。綜合來看，細(xì)鱗鮭2種樣品肌肉中豐富的C20：5n-3和C22：6n-3含量，積累豐富的脂類及合理的必需脂肪酸營養(yǎng)，不僅在細(xì)鱗鮭發(fā)育過程中為其提供了豐富的營養(yǎng)，也證明了細(xì)鱗鮭肌肉對人體來說可以提供大量有效蛋白質(zhì)^［13］。

3.2 氨基酸含量分析

從氨基酸組成來看，谷氨酸是最重要的調(diào)味氨基酸，是味精的主要成分，該試驗中，在鮮活樣品和冷凍樣品中皆為含量最高的氨基酸，其他呈味氨基酸包括甘氨酸、丙氨酸等^［14］皆在2種樣品中檢測出，但冷凍樣品中呈味氨基酸的含量顯著低于鮮活樣品，說明冷凍會一定程度上減少呈味氨基酸的含量，但并不會影響魚的風(fēng)味。賴氨酸對于提高鈣的吸收和在體內(nèi)的積累具有積極作用，還可以增進(jìn)食欲，促進(jìn)幼魚生長與發(fā)育^［15］，該試驗中2種樣品的賴氨酸含量有顯著差異，是主要的氨基酸組成成分。鄭雪莉等^［4］的研究中細(xì)鱗鮭肌肉氨基酸總量與該試驗細(xì)鱗鮭肌肉氨基酸總量相差不大。

冷凍和鮮活細(xì)鱗鮭肌肉中的EAA/TAA分別為41.02%和40.98%，EAA/NEAA分別為 69.54%和69.43%。FAO/WHO的理想模式表明，當(dāng)組成蛋白質(zhì)的氨基酸EAA/TAA為40%左右、EAA/NEAA在60%以上時，該蛋白質(zhì)的質(zhì)量較好^［16］。由此可知，無論是冷凍樣品還是新鮮樣品中的氨基酸比例合理，營養(yǎng)均衡，都是優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)來源。

4 結(jié)論

通過對細(xì)鱗鮭肌肉鮮活和冷凍條件下營養(yǎng)成分的檢測，數(shù)據(jù)比對分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)-20 ℃下冷凍12 h的細(xì)鱗鮭和鮮活狀態(tài)下的細(xì)鱗鮭肌肉中大部分氨基酸、脂肪酸的含量和成分有顯著差異，通過分析發(fā)現(xiàn)，冷凍會一定程度上減少魚類肌肉的營養(yǎng)價值，但仍是優(yōu)質(zhì)的氨基酸、脂肪酸來源。該研究為細(xì)鱗鮭的短期保存、運輸、經(jīng)濟方面提供數(shù)據(jù)支撐，在未來解決冷凍條件下進(jìn)一步保護(hù)細(xì)鱗鮭肌肉營養(yǎng)價值這一問題，可以帶動未來細(xì)鱗鮭產(chǎn)業(yè)的經(jīng)濟發(fā)展。

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