湯小康 肖可 王攀 邱禮國 周長征 唐成劍

〔摘要〕 目的 構(gòu)建大鼠寒濕阻滯型腰痛動物模型，評估獨活寄生湯對該模型的干預(yù)效果。方法 24只雄性SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后，隨機(jī)分為空白組、模型組和獨活寄生湯組。空白組僅腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉，模型組、獨活寄生湯組在腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉下行“腰椎后柱結(jié)構(gòu)部分切除術(shù)”，并在寒濕環(huán)境下飼養(yǎng)6周。造模2周后，空白組、模型組予等體積蒸餾水灌胃，獨活寄生湯組予獨活寄生湯18.6 g/（kg·d）灌胃，均連續(xù)灌胃4周。比較各組大鼠一般情況、自發(fā)性疼痛行為學(xué)評分和神經(jīng)功能評分，CT三維成像評估脊柱生理曲度形態(tài)改變情況，椎間盤組織病理切片評估椎間盤髓核病變程度。結(jié)果 造模后1周，與空白組比較，模型組、獨活寄生湯組開始出現(xiàn)少動、皮毛無光澤、嗜睡蜷縮、反應(yīng)遲鈍、大便稀溏表現(xiàn)，體質(zhì)量減輕（P＜0.05），自發(fā)性疼痛行為學(xué)評分和神經(jīng)功能評分升高（P＜0.05）；給藥后3周，與模型組比較，獨活寄生湯組疼痛行為學(xué)評分和神經(jīng)功能評分降低（P＜0.05）。給藥后4周，與模型組比較，獨活寄生湯組大鼠脊柱CT三維成像形態(tài)退變不明顯，椎間盤組織病理切片顯示，獨活寄生湯組椎間盤髓核病變不明顯。結(jié)論 “腰椎后柱結(jié)構(gòu)部分切除術(shù)+寒濕環(huán)境飼養(yǎng)”可成功構(gòu)建SD大鼠寒濕阻滯型腰痛動物模型，獨活寄生湯對該模型有較好的干預(yù)效果。

〔關(guān)鍵詞〕 腰痛；寒濕阻滯；獨活寄生湯；動物模型；腰椎間盤退變

〔中圖分類號〕R285.5? ? ? ? ?〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A? ? ? ? ? 〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674－070X.２０24.06.007

Experimental study on construction of rat model of lower back pain due to cold dampness stagnation and intervention effects of

Duhuo Jisheng Decoction

TANG Xiaokang， XIAO Ke， WANG Pan， QIU Liguo， ZHOU Changzheng， TANG Chengjian*

The First Hospital of Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410007， China

〔Ａｂｓｔｒａｃｔ〕 Objective To construct the rat model of lower back pain due to cold dampness stagnation， and to evaluate the intervention effects of Duhuo Jisheng Decoction （DHJSD） on this model. Methods After 7 d of adaptive feeding， 24 male SD rats were randomized into blank group， model group， and DHJSD group. The blank group was only anesthetized by intraperitoneal injection of pentobarbital sodium， while the model group and DHJSD group were anesthetized by intraperitoneal injection of pentobarbital sodium for "partial resection of posterior column structure of the lumbar spine" and were fed in a cold and humid environment for six weeks. After two weeks of modeling， the blank group and model group were given an equal volume of distilled water by gavage， while the DHJSD group was administered DHJSD 18.6 g/（kg·d） by gavage for four consecutive weeks. The general condition， spontaneous pain behavior score， and neurological function score of rats in each group were compared. CT three-dimensional imaging was used to evaluate the morphological changes of the spinal physiological curvature， and the pathological section of intervertebral disc tissue was used to evaluate the severity of intervertebral disc nucleus pulposus lesions. Results After one week of modeling， compared with the blank group， the model group and the DHJSD group began to exhibit less movement， dull fur， drowsiness and curling up， slow response， loose stool， weight loss （P<0.05）， and increased spontaneous pain behavior score and neurological function score （P<0.05）. After three weeks of administration， compared with the model group， the pain behavior score and neurological function score of the DHJSD group decreased （P<0.05）. After four weeks of administration， compared with the model group， the spinal CT three-dimensional imaging showed no significant morphological degeneration in the DHJSD group， and the pathological section of intervertebral disc tissue also showed no obvious intervertebral disc nucleus pulposus lesions in the DHJSD group. Conclusion The method of "partial resection of posterior column structure of the lumbar spine+feeding in a cold and humid environment" can successfully construct the SD rat model of low back pain due to cold dampness stagnation， and DHJSD has good intervention effects on this model.

〔Ｋｅｙｗｏｒｄｓ〕 lower back pain; cold dampness stagnation; Duhuo Jisheng Decoction; animal model; intervertebral disc degeneration

腰痛是造成巨大社會負(fù)擔(dān)，嚴(yán)重影響人類生存質(zhì)量的重大問題[1]。腰椎間盤退變（intervertebral disk

degeneration，IDD）是臨床上腰痛疾病發(fā)生與發(fā)展的重要原因[2]。IDD引起的腰痛屬中醫(yī)學(xué)“腰痛”范疇，多因機(jī)體肝腎虧虛，風(fēng)寒濕邪雜至，致使人體氣血不通、骨節(jié)錯亂，是本虛標(biāo)實、虛實夾雜之證。獨活寄生湯出自《備急千金要方·卷八治諸風(fēng)方》，長于祛風(fēng)濕、止痹痛、補(bǔ)肝腎、益氣血，其在腰痛的治療上運(yùn)用較為普遍。本實驗通過“腰椎后柱結(jié)構(gòu)部分切除術(shù)+寒濕環(huán)境飼養(yǎng)”構(gòu)建SD大鼠寒濕阻滯型腰痛動物模型，并用獨活寄生湯對其進(jìn)行干預(yù)，以期為評估獨活寄生湯治療寒濕阻滯型腰痛療效提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1? 實驗動物

SPF級6周齡雄性SD大鼠24只，購自湖南斯萊克景達(dá)實驗動物有限公司，體質(zhì)量（160±20） g，動物許可證號：SCXK（湘）2020-0010，在湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院實驗中心適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d，每籠4只，標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料及飲用水飼養(yǎng)，室溫環(huán)境21～23 ℃，空氣相對濕度30%～40%，維持12 h晝/夜光線。連續(xù)觀察7 d，所有SD大鼠無疾病及異常后開始實驗。所有操作符合實驗動物倫理學(xué)要求，已通過湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院實驗動物倫理委員會審查，倫理審查編號：ZYFY20220221-09。

1.2? 實驗中藥

獨活寄生湯組成：獨活9 g，桑寄生6 g，秦艽6 g，防風(fēng)6 g，細(xì)辛6 g，川芎6 g，當(dāng)歸6 g，熟地黃6 g，白芍6 g，肉桂6 g，茯苓6 g，杜仲6 g，牛膝6 g，黨參6 g，甘草6 g。由湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院中藥房提供。煎煮2次，第1次加6倍量蒸餾水，浸泡20 min，煮沸后繼續(xù)煎煮30 min，過濾后取濾液，將藥渣再加4倍量蒸餾水，煮沸后繼續(xù)煎煮30 min，過濾后將2次藥液合并減壓，濃縮至2 g/mL備用。

1.3? 主要試劑及儀器

碘伏消毒液（山東消博士消毒科技股份有限公司，批號：Q/371402AXX022）；無水乙醇（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號：1000921）；戊巴比妥鈉（北京化學(xué)試劑公司，批號：020402）；青霉素（華北制藥股份有限公司，批號：F3117217）；多聚甲醛（廣州賽國生物科技有限公司，批號：70111800）；HE染液（寧波同盛生物科技有限公司，批號：20170032）。

電子天平（日本島津公司，型號：ATY224）；病理組織漂烘儀（常州派斯杰醫(yī)療設(shè)備有限公司，型號：PH60）；切片機(jī)（德國萊卡公司，型號：leica UC-7）；顯微鏡（德國Motic公司，型號：BA210T）；CT機(jī)（德國西門子公司，型號：SOMATOM go.Top）。

1.4? 實驗動物分組與造模

適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d后，將24只SD大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組和獨活寄生湯組，每組8只，每只大鼠常規(guī)稱質(zhì)量并記錄。大鼠予碘伏消毒液與75%乙醇交替消毒腹部，無菌條件下予戊巴比妥鈉（30 mg/kg）腹腔給藥麻醉。空白組不予特殊處理；模型組、獨活寄生湯組大鼠麻醉后，俯臥位置于手術(shù)臺上，剪去背部鼠毛，消毒，鋪無菌洞巾，沿背部正中線切開皮膚，逐層分離皮下組織、肌肉，暴露腰椎2～4節(jié)段，切除破壞腰椎2～4棘上韌帶、棘間韌帶及兩側(cè)上下關(guān)節(jié)突關(guān)節(jié)，壓迫止血后逐層縫合切口（見圖1）。術(shù)后3 d依據(jù)體質(zhì)量結(jié)果，按20 000 U/100 g劑量，臀部肌內(nèi)注射青霉素預(yù)防感染?？瞻捉M大鼠繼續(xù)飼養(yǎng)于標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境飼養(yǎng)籠，模型組、獨活寄生湯組大鼠飼養(yǎng)于模擬寒濕環(huán)境飼養(yǎng)箱中，每天6 h，溫度4～6 ℃，空氣相對濕度60%～75%，連續(xù)飼養(yǎng)6周。結(jié)合相關(guān)參考文獻(xiàn)及課題組經(jīng)驗，設(shè)定造模成功的標(biāo)準(zhǔn)：造模后大鼠宏觀表現(xiàn)為畏寒喜暖、形體少動、肢體倦怠、大便稀溏等寒濕證臨床特點[3]；微觀表現(xiàn)為CT三維成像出現(xiàn)腰椎曲度異常、椎體序列紊亂、椎間高度降低等脊柱病變；且椎間盤髓核組織HE染色出現(xiàn)髓核組織破壞、結(jié)構(gòu)紊亂、空泡樣改變、炎性細(xì)胞浸潤等椎間盤退變表現(xiàn)。

1.5? 實驗動物給藥

造模2周后，空白組、模型組大鼠予等體積蒸餾水灌胃處理；獨活寄生湯組大鼠按人-鼠等效劑量換算服藥量[4]，[大鼠劑量（mg/kg）=W×人劑量（mg/kg）]，按每只大鼠體質(zhì)量予以獨活寄生湯18.6 g/（kg·d）灌胃給藥，每天2次。連續(xù)給藥4周。

1.6? 觀察指標(biāo)與方法

1.6.1? 一般情況? 造模過程中，觀察各組大鼠的活動狀態(tài)、皮毛光澤度、精神狀態(tài)、反應(yīng)靈敏度、大便性狀、體質(zhì)量等。

1.6.2? 自發(fā)性疼痛行為學(xué)評分? 采用雙人獨立、雙盲觀察記錄。使大鼠適應(yīng)環(huán)境30 min后開始記錄，取平均值為得分。各組大鼠在造模前，造模后1、2周，給藥后1、2、3周進(jìn)行自發(fā)性疼痛行為學(xué)評分。動物自發(fā)性疼痛行為學(xué)評分標(biāo)準(zhǔn)：0分為運(yùn)動行為正常，后爪無畸形；1分為運(yùn)動行為基本正常，后爪明顯畸形，肢體舔咬≤2次；2分為運(yùn)動行為輕度異常，有跛行、垂足現(xiàn)象，肢體舔咬＞2次但≤4次；3分為運(yùn)動行為嚴(yán)重異常，后爪萎縮，有舔噬現(xiàn)象，舔咬肢體≥5次[5-6]。

1.6.3? 動物神經(jīng)功能評分? 采用雙人獨立、雙盲觀察記錄。使大鼠適應(yīng)環(huán)境30 min后開始記錄，取平均值為得分。各組大鼠在造模前，造模后1、2周，給藥后1、2、3周進(jìn)行神經(jīng)功能評分。動物神經(jīng)功能評分法判斷標(biāo)準(zhǔn)：0級為行為正常，計2分；1級為甩尾無力，計4分；2級為后肢無力，行走時輕度失穩(wěn)，計6分；3級為后肢無力，行走時明顯不穩(wěn)定，計8分；4級為站立不穩(wěn)，但后肢能夠移動，計10分；5級為癱瘓，后肢無自主移動，計12分[7-9]。

1.6.4? CT三維成像檢測? 灌胃4周結(jié)束后，在各組大鼠腹腔注射戊巴比妥鈉，麻醉條件下行CT檢測，獲取活體脊柱三維重建圖，評估各組大鼠脊柱生理曲度形態(tài)改變情況。

1.6.5? 組織病理學(xué)染色? 灌胃4周結(jié)束后，常規(guī)處死各組大鼠，解剖獲取腰椎2～4節(jié)段，用10%甲醛固定。經(jīng)過脫鈣、脫水后，嵌入石蠟中，然后切取腰椎2～4節(jié)段纖維環(huán)髓核組織蠟片，并用蘇木精和伊紅染色，再放入95%乙醇中脫水。置于顯微鏡下進(jìn)行觀察和拍照，比較各組大鼠髓核病變程度。

1.7? 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件處理分析，實驗數(shù)據(jù)用“ｘ±s”表示，組間差異采用兩樣本均數(shù)比較的t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1? 一般情況比較

造模前，各組大鼠一般情況正常，且基本一致，體質(zhì)量差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。造模后1周，與空白組比較，模型組、獨活寄生湯組大鼠見明顯少動、皮毛無光澤、嗜睡蜷縮、反應(yīng)遲鈍、大便稀溏表現(xiàn)，體質(zhì)量減輕（P＜0.05）。詳見表1。

2.2? 自發(fā)性疼痛行為學(xué)評分比較

造模前，各組大鼠自發(fā)性疼痛行為學(xué)評分差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。造模后1、2周及給藥后1、2、3周，與空白組比較，模型組和獨活寄生湯組自發(fā)性疼痛行為學(xué)評分升高（P＜0.05）。給藥后3周，與模型組比較，獨活寄生湯組自發(fā)疼痛行為學(xué)評分降低（P＜0.05）。與造模后1、2周及給藥后1、2周比較，給藥后3周獨活寄生湯組自發(fā)疼痛行為學(xué)評分降低（P＜0.05）。詳見表2。

2.3? 神經(jīng)功能評分比較

造模前，各組大鼠神經(jīng)功能評分正常，組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。造模后1、2周及給藥后1、2、3周，與空白組比較，模型組和獨活寄生湯組神經(jīng)功能評分升高（P＜0.05）。給藥后3周，與模型組比較，獨活寄生湯組神經(jīng)功能評分降低（P＜0.05）。與造模后1、2周及給藥后1、2周比較，給藥后3周獨活寄生湯組神經(jīng)功能評分降低（P＜0.05）。詳見表3。

2.4? CT三維成像檢測比較

給藥后4周，空白組大鼠腰椎曲度尚可，椎體序列基本正常，未見明顯鈣化，椎間高度正常。模型組、獨活寄生湯組大鼠均出現(xiàn)不同程度的腰椎曲度異常，可見增生骨贅，形態(tài)欠完整，椎體序列紊亂，有鈣化傾向，椎間高度降低。但與模型組比較，獨活寄生湯組影像學(xué)退變程度較輕。詳見圖2。

2.5? 組織病理學(xué)染色比較

空白組大鼠椎間盤髓核組織結(jié)構(gòu)形態(tài)基本正常，炎性細(xì)胞浸潤不明顯。模型組大鼠椎間盤髓核組織被破壞，結(jié)構(gòu)紊亂，空泡樣改變明顯，伴明顯炎性細(xì)胞浸潤。獨活寄生湯組大鼠椎間盤髓核組織見結(jié)構(gòu)部分修復(fù)，結(jié)構(gòu)稍紊亂，空泡樣改變不明顯，少許炎癥細(xì)胞浸潤。詳見圖3。

3 討論

腰背部疼痛是腰痛的主要臨床特征，腰椎是腰背部重要的支撐結(jié)構(gòu)，其穩(wěn)定性主要依靠主動收縮系統(tǒng)、被動支持系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)間的協(xié)調(diào)平衡[10]。腰背部肌肉力量下降、腰椎小關(guān)節(jié)病變、IDD、腰背部神經(jīng)根及背根神經(jīng)節(jié)病變等均是腰痛發(fā)病的重要因素[11-14]。發(fā)病過程的追溯、疼痛學(xué)評定、軀體功能的測定、影像學(xué)檢查等是目前評價腰痛疾病的主要手段[15-17]。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，外感風(fēng)寒濕邪、跌仆閃挫，以及肝腎虧虛、氣血不榮均可誘發(fā)腰痛，而寒濕侵襲，經(jīng)絡(luò)痹阻不通，經(jīng)脈失于濡養(yǎng)，是腰痛的主要病因，故寒濕型腰痛是臨床腰痛的常見證型[18]。前期已有實驗研究運(yùn)用動物行為學(xué)觀察、神經(jīng)功能評分、影像學(xué)檢測及組織病理學(xué)染色等方法評價脊柱疾病動物模型[6，9，19-20]?；谝陨媳尘?，本研究嘗試通過SD大鼠“腰椎后柱結(jié)構(gòu)部分切除術(shù)+寒濕環(huán)境飼養(yǎng)”實驗方法，達(dá)到破壞脊柱力學(xué)穩(wěn)定、降低大鼠腰背肌力量及寒濕病因施加的目的，從而構(gòu)建穩(wěn)定、可靠的寒濕阻滯型腰痛大鼠動物模型，并嘗試通過大鼠一般情況觀察、疼痛行為學(xué)評分、動物神經(jīng)功能評分、CT三維成像檢測及組織病理學(xué)染色評價該腰痛疾病動物模型，以期為深入研究寒濕阻滯型腰痛提供基礎(chǔ)。實驗結(jié)果證實，“腰椎后柱結(jié)構(gòu)部分切除術(shù)+寒濕環(huán)境飼養(yǎng)”方法，能為研究腰痛發(fā)病機(jī)制及干預(yù)方法提供良好的動物模型。但由于實驗動物和實驗手段的局限性，暫未能實現(xiàn)對活體動物模型椎間盤結(jié)構(gòu)病變直接、動態(tài)的觀察，仍需今后深入探索與研究。

獨活寄生湯出自《備急千金要方·卷八治諸風(fēng)方》，方中獨活、桑寄生、秦艽、防風(fēng)、肉桂、細(xì)辛為辛溫之品，可解風(fēng)寒濕邪、止腰膝背痛；熟地黃、當(dāng)歸、川芎、白芍、杜仲、牛膝為滋陰養(yǎng)血之品，可滋補(bǔ)肝腎之陰；茯苓、黨參、甘草為益氣之品，以養(yǎng)諸臟之陽[21]。有研究證實，獨活寄生湯能發(fā)揮良好的鎮(zhèn)痛消炎作用，能減緩神經(jīng)根局部充血水腫，改善局部循環(huán)，促進(jìn)炎癥物質(zhì)的吸收，從而治療IDD[22]。前期有研究也證實，中、高劑量的獨活寄生湯可調(diào)控SD大鼠骨代謝水平，改善大鼠的骨關(guān)節(jié)退變[23-24]。本研究發(fā)現(xiàn)，獨活寄生湯在SD大鼠寒濕阻滯型腰痛發(fā)病早期，開始干預(yù)3周左右，可改善該動物模型疼痛行為學(xué)評分和神經(jīng)功能評分；CT三維重建見獨活寄生湯組大鼠腰椎曲度異常，椎體序列紊亂，椎間高度降低，較模型組更不顯著；椎間盤髓核組織HE染色提示，與模型組比較，獨活寄生湯組大鼠見椎間盤髓核組織部分修復(fù)，結(jié)構(gòu)稍紊亂，空泡樣改變不明顯，少許炎癥細(xì)胞浸潤。說明獨活寄生湯具有改善寒濕阻滯型腰痛大鼠動物模型脊柱病變的功效，其具體機(jī)制值得今后深入研究。

腰痛已成為全球致殘前10位的危險因素，其危險性已高于心理疾病與糖尿病等[25]。有報道指出，50%以上的成年人都曾罹患腰痛，全球每年因腰痛而產(chǎn)生的誤工費(fèi)、治療費(fèi)及殘疾費(fèi)等費(fèi)用已超過其他運(yùn)動系統(tǒng)疾病，甚至有患者因腰痛導(dǎo)致勞動能力和經(jīng)濟(jì)收入下降而致貧[26]。在腰痛研究中，要獲得人退變椎間盤組織相對困難，也很難獲得正常人椎間盤組織作為對照，動物模型仍然是實驗研究的主要方式[27]。寒濕誘發(fā)的腰痛疾病，往往表現(xiàn)為神疲乏力、形體疼痛、肢體倦怠、大便稀溏等[28]，建立與臨床寒濕表現(xiàn)類似的動物模型，是深入研究寒濕誘發(fā)疾病本質(zhì)的必要條件[29]。目前，對于IDD所誘發(fā)腰痛疾病的用藥也相對局限，臨床多以糖皮質(zhì)激素、非甾體抗炎藥等藥物為主，其具有抗炎、鎮(zhèn)痛、消水腫等作用，但長期運(yùn)用糖皮質(zhì)激素易誘發(fā)骨質(zhì)疏松、向心性肥胖等不良反應(yīng)，而非甾體抗炎藥可誘發(fā)心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)不良反應(yīng)[30-31]。中醫(yī)藥安全、高效治療腰痛的社會價值日益為人們所重視。本研究針對寒濕阻滯型腰痛動物模型的構(gòu)建及獨活寄生湯干預(yù)效果進(jìn)行探索實驗，將為科學(xué)構(gòu)建寒濕阻滯型腰痛動物模型提供有益參考，為深入評價獨活寄生湯治療腰痛療效及機(jī)制奠定基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)

[1] ASANO H， PLONKA D， WEEGER J. Effectiveness of acupuncture for nonspecific chronic low back pain： A systematic review and meta-analysis[J]. Medical Acupuncture， 2022， 34（2）： 96-106.

[2] WANG S Z， RUI Y F， LU J， et al. Cell and molecular biology of intervertebral disc degeneration： Current understanding and implications for potential therapeutic strategies[J]. Cell Proliferation， 2014， 47（5）： 381-390.

[3] 丁子桐， 熊海霞， 高琴琴， 等. 膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎病/證模型大鼠血清細(xì)胞因子表達(dá)譜的初步研究[J]. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志， 2019， 29（4）： 28-33.

[4] 魏? 偉， 吳希美， 李元建. 藥理實驗方法學(xué)[M]. 4版. 北京： 人民衛(wèi)生出版社， 2010： 71-72.

[5] AKINTOLA T， RAVER C， STUDLACK P， et al. The grimace scale reliably assesses chronic pain in a rodent model of trigeminal neuropathic pain[J]. Neurobiology of Pain， 2017， 2： 13-17.

[6] 張?zhí)忑垼?趙繼榮， 陳祁青， 等. 杜仲腰痛丸對腰椎間盤突出癥慢性下肢痛模型大鼠疼痛行為學(xué)影響[J]. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報， 2022， 24（2）： 20-24.

[7] SIEGAL T， SIEGAL T， SHAPIRA Y， et al. Indomethacin and dexamethasone treatment in experimental neoplastic spinal cord compression： Part 1. Effect on water content and specific gravity[J]. Neurosurgery， 1988， 22（2）： 328-333.

[8] 趙彩萍， 朱美玲， 王婷婷， 等. 化學(xué)神經(jīng)根炎癥模型大鼠的制備及評價[J]. 中國組織工程研究， 2019， 23（7）： 1030-1034.

[9] 尹晨東， 仇湘中. 補(bǔ)肝健腰方對腰椎間盤突出大鼠血清代謝組學(xué)的影響研究[J]. 中國中醫(yī)骨傷科雜志， 2023， 31（9）： 7-14.

[10] KNEZEVIC NN， CANDIDO KD， VLAEYEN JWS， et al. Low back pain[J]. Lancet， 2021， 398（10294）： 78-92.

[11] 龔? 迪. 不同形式核心穩(wěn)定訓(xùn)練對核心肌肉激活程度的影響[D]. 上海： 上海體育學(xué)院， 2019.

[12] 李? 濤. 慢性非特異性下腰痛與腰椎活動度的相關(guān)性研究[D]. 成都： 成都中醫(yī)藥大學(xué)， 2017.

[13] PARK H J， CHOI J Y， LEE W M， et al. Prevalence of chronic low back pain and its associated factors in the general population of South Korea： A cross-sectional study using the National Health and Nutrition Examination Surveys[J]. Journal of Orthopaedic Surgery and Research， 2023， 18（1）： 29.

[14] 岳壽偉. 腰痛的評估與康復(fù)治療進(jìn)展[J]. 中國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志， 2017， 32（2）： 136-139.

[15] DE BLAISER C， DE RIDDER R， WILLEMS T， et al. Reliability and validity of trunk flexor and trunk extensor strength measurements using handheld dynamometry in a healthy athletic population[J]. Physical Therapy in Sport， 2018， 34： 180-186.

[16] YAO M， WANG Q， LI Z， et al. A systematic review of cross-cultural adaptation of the oswestry disability index[J]. Spine， 2016， 41（24）： E1470-E1478.

[17] 岳壽偉. 腰痛的康復(fù)評估與治療[J]. 康復(fù)學(xué)報， 2023， 33（4）： 287-294.

[18] 修奇志， 譚貴紅， 黃? 強(qiáng)， 等. 薏苡仁湯聯(lián)合中藥封包治療寒濕腰痛的臨床觀察[J]. 中國中醫(yī)急癥， 2023， 32（10）： 1814-1816.

[19] 郭德華， 劉小舟， 吳成林， 等. 補(bǔ)陽還五湯對脊髓外傷性截癱的治療作用及Jak2/Jak3通路的影響[J]. 時珍國醫(yī)國藥， 2022， 33（12）： 2905-2908.

[20] 李沅騁， 宋子琪， 萬成雨， 等. 長期低頭位與寒濕刺激建立頸型頸椎病動物模型的研究[J]. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊， 2022， 40（10）： 210-215， 279-282.

[21] 蘇志超， 杜? 鑫， 閆華瓊， 等. 獨活寄生湯聯(lián)合膏摩法治療膝骨性關(guān)節(jié)炎風(fēng)寒濕痹兼肝腎虧虛證35例臨床觀察[J]. 中醫(yī)雜志， 2020， 61（3）： 217-221.

[22] 孫? 鵬， 張潔瑛， 沙明波， 等. 電針夾脊穴結(jié)合獨活寄生湯治療腰椎間盤突出癥臨床觀察[J]. 遼寧中醫(yī)雜志， 2018， 45（6）： 1263-1266.

[23] 費(fèi)? 熙， 殷? 靜， 范? 偉， 等. 獨活寄生湯對骨質(zhì)疏松老齡大鼠骨密度、骨代謝的影響及作用機(jī)制[J]. 中國老年學(xué)雜志， 2023， 43（23）： 5834-5838.

[24] 陳振沅， 陳? 俊， 鄭若曦， 等. 獨活寄生湯對白細(xì)胞介素-1β誘導(dǎo)的大鼠退變軟骨細(xì)胞外基質(zhì)代謝的影響[J]. 中華中醫(yī)藥雜志， 2022， 37（8）： 4433-4437.

[25] MURRAY C J， EZZATI M， FLAXMAN A D， et al. GBD 2010： Design， definitions， and metrics[J]. Lancet， 2012， 380（9859）： 2063-2066.

[26] SCHOFIELD D J， CALLANDER E J， SHRESTHA R N， et al. Labor force participation and the influence of having back problems on income poverty in Australia[J]. Spine， 2012， 37（13）： 1156-1163.

[27] 師振予， 郭亦杰， 曾? 嶸， 等. 腰椎間盤突出癥大鼠模型的建立及病理動態(tài)研究[J]. 湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報， 2020， 40（1）： 28-33.

[28] 劉蔚翔， 鞏? 勛， 姜? 泉， 等. 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎濕熱與寒濕證候的病情特點分析[J]. 中華中醫(yī)藥雜志， 2021， 36（2）： 1088-1091.

[29] 孟? 巖， 李威瑩， 吳? 威， 等. 寒濕證動物模型的研究現(xiàn)狀與評述[J]. 世界科學(xué)技術(shù)： 中醫(yī)藥現(xiàn)代化， 2022， 24（7）： 2579-2587.

[30] 郝? 沖， 金? 毅. 硬膜外注射治療腰椎間盤源性根性痛的機(jī)制及臨床應(yīng)用[J]. 中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志， 2023， 29（2）： 133-137， 143.

[31] 韋忠娜， 鄒? 弢， 邱? 智， 等. 非甾體抗炎藥不良反應(yīng)報告43例分析[J]. 臨床合理用藥， 2023， 16（24）： 158-160.