薛彥寧

（莒南縣農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，山東莒南 276600）

黃曲霉毒素主要是由黃曲霉產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，黃曲霉普遍存在于玉米、棉籽和花生等多種飼料原料中（Lai 等，2015）。有研究認(rèn)為，在黃曲霉產(chǎn)生的多種毒素中，黃曲霉毒素B1毒性最強(qiáng)（胡貴麗，2019）。體外試驗(yàn)結(jié)果表明，黃曲霉毒素B1具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，能?chē)?yán)重?fù)p傷DNA 的結(jié)構(gòu)和功能；此外，體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果表明，在黃曲霉毒素B1慢性中毒條件下，對(duì)畜禽肝臟有明顯的損傷作用，甚至導(dǎo)致肝癌（李力等，2013）。目前，大量研究結(jié)果表明，黃曲霉毒素B1嚴(yán)重危害畜禽的健康和生長(zhǎng)發(fā)育。Yunus 等（2011）研究發(fā)現(xiàn)，作為一類(lèi)致癌物質(zhì)，高劑量的黃曲霉毒素B1能直接導(dǎo)致動(dòng)物死亡，低劑量黃曲霉毒素B1會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物慢性中毒，嚴(yán)重影響動(dòng)物采食量和飼料轉(zhuǎn)化率。陳代文等（2012）使用黃曲霉毒素含量為216 μg/kg自然霉變玉米飼喂仔豬能顯著抑制仔豬采食和生長(zhǎng)發(fā)育。尹遜慧等（2010）在肉雞上的研究結(jié)果表明，日糧添加一定量的黃曲霉毒素B1能顯著降低肉雞的采食量和終末體重。此外，也有研究認(rèn)為，黃曲霉毒素B1可通過(guò)破壞腸道上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能抑制畜禽對(duì)多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收來(lái)抑制其生長(zhǎng)發(fā)育（Maresca 和Fantini，2010）。因此，本試驗(yàn)通過(guò)向日糧中梯度添加黃曲霉毒素B1，探究日糧黃曲霉毒素含量對(duì)肉雞生長(zhǎng)發(fā)育、血清生化及免疫的指標(biāo)的影響，為黃曲霉毒素B1的毒性研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 本試驗(yàn)所用黃曲霉毒素B1純度≥99%，購(gòu)置于山東某生物工程有限公司。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)將1000 只健康、生長(zhǎng)狀況良好的白羽肉雞隨機(jī)分為4 組，每組10 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)25 只。試驗(yàn)共計(jì)42 d?；A(chǔ)日糧為玉米- 豆粕型基礎(chǔ)日糧，其組成和營(yíng)養(yǎng)水平如表1所示。試驗(yàn)日糧分別向基礎(chǔ)日糧中添加0、40、80和160μg/kg 的黃曲霉毒素B1。按照養(yǎng)殖場(chǎng)日常管理規(guī)定進(jìn)行免疫接種和日常管理。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定 正式試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束前分別對(duì)所有肉仔雞進(jìn)行稱(chēng)重，試驗(yàn)期間每天統(tǒng)計(jì)采食，并分別統(tǒng)計(jì)平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和料重比（F/G）。

ADG=（初始體重-終末體重）/42 ；

ADFI=總采食量/42 ；

F/G=ADFI/ADG。

1.3.2 血清生化指標(biāo)的測(cè)定 每組選擇8 只肉雞頸動(dòng)脈取血并分離血清，保存于預(yù)冷的冰盒中帶回試驗(yàn)室。使用日立7020 型血清生化分析儀檢測(cè)所有樣本中總蛋白、白蛋白、球蛋白含量以及谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性。分別按試劑盒說(shuō)明檢測(cè)所有樣本中免疫球蛋白A、M 和G 以及血清淀粉樣蛋白A 含量。

1.3.3 免疫器官指數(shù)的測(cè)定 飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，每組選擇8 只肉仔雞屠宰，小心移去胸腺、脾臟和法氏囊上的結(jié)締組織后稱(chēng)重并計(jì)算免疫器官指數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 使用WPS 對(duì)所有原始數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理。使用SAS（9.4）進(jìn)行單因素方差分析和多重比較（Tukey test 法），其中P＜0.05表示組間差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 日糧添加黃曲霉毒素B1對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響 由表2 可知，在初始體重?zé)o顯著差異的前提下（P＞0.05），日糧添加80 和160μg/kg 黃曲霉毒素B1，肉仔雞終末體重分別顯著降低2.8% 和6.9%（P＜0.05）；日糧添加160μg/kg黃曲霉毒素B1，肉雞平均日增重顯著降低7.1%（P＜0.05），平均日采食量顯著降低5.2%（P＜0.05），料重比顯著提高1.7%（P＜0.05）。

表2 日糧添加黃曲霉毒素B1 對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響

2.2 日糧添加黃曲霉毒素B1對(duì)肉仔雞血清生化指標(biāo)的影響 由表3 可知，日糧添加80 和160μg/kg 的黃曲霉毒素B1可顯著降低肉仔雞血清總蛋白和白蛋白含量（P＜0.05）；日糧添加80 和160μg/kg 的黃曲霉毒素B1可顯著提高肉仔雞血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性（P＜0.05）；此外，日糧添加黃曲霉毒素B1對(duì)肉仔雞血清球蛋白含量無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

表3 日糧添加黃曲霉毒素B1 對(duì)肉仔雞血清生化指標(biāo)的影響

2.3 日糧添加黃曲霉毒素B1對(duì)肉仔雞血清免疫指標(biāo)的影響 由表4 可知，日糧添加80 和160μg/kg 的黃曲霉毒素B1可顯著降低肉仔雞血清IgA 和IgM 含量（P＜0.05）；此外，日糧添加黃曲霉毒素B1對(duì)肉仔雞血清IgG 和血清淀粉樣蛋白A 含量無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

表4 日糧添加黃曲霉毒素B1 對(duì)肉仔雞血清免疫指標(biāo)的影響

2.4 日糧添加黃曲霉毒素B1對(duì)肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響 由表5 可知，日糧添加160μg/kg的黃曲霉毒素B1可顯著降低肉仔雞的胸腺指數(shù)（P＜0.05），此外，日糧添加黃曲霉毒素B1對(duì)肉仔雞脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

表5 日糧添加黃曲霉毒素B1 對(duì)肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響 %

3 討論

鄧慶慶等（2016）研究表明，肉雞日糧中添加黃曲霉毒素B1不僅嚴(yán)重影響肉雞采食量，同時(shí)能顯著抑制肉雞生長(zhǎng)發(fā)育，降低肉雞飼料轉(zhuǎn)化率。此外，石達(dá)友等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，肉鴨日糧中添加黃曲霉毒素B1不僅能顯著影響肉鴨的生長(zhǎng)發(fā)育，同時(shí)，肉鴨死亡率與黃曲霉毒素B1添加量呈正相關(guān)。這些結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果基本一致，本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在初始體重?zé)o顯著差異的前提下，日糧添加160μg/kg 的黃曲霉毒素B1不僅顯著降低肉雞采食量，同時(shí)也顯著降低肉雞的終末體重和平均日增重并提高料重比。

前期研究表明，黃曲霉毒素B1對(duì)畜禽的免疫功能有明顯負(fù)向調(diào)控作用。不僅能破壞DNA和RNA 的結(jié)構(gòu)和功能，同時(shí)能抑制免疫細(xì)胞增殖和免疫細(xì)胞的蛋白質(zhì)分泌，特別是胸腺（胡貴麗，2019）。Mocchegiani 等（1998）研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加黃曲霉毒素B1可顯著降低胸腺的免疫活性，并導(dǎo)致后代仔豬胸腺早期退化。肉雞上的研究結(jié)果表明，日糧添加黃曲霉毒素B1能顯著降低肉雞免疫器官指數(shù)，其中，以胸腺和法氏囊指數(shù)變化最為顯著（Manafi 等，2012）。這與本試驗(yàn)觀察到肉仔雞的胸腺指數(shù)顯著降低一致，表明黃曲霉毒素B1對(duì)肉雞免疫器官發(fā)育的抑制作用。馮建蕾（2004）研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加一定量的黃曲霉毒素B1能顯著降低肉雞血清中免疫球蛋白含量，這與本試驗(yàn)結(jié)果基本一致。表明黃曲霉毒素B1不僅嚴(yán)重影響肉仔雞免疫器官的發(fā)育，同時(shí)對(duì)免疫器官的合成和分泌也有一定的負(fù)面影響。

轉(zhuǎn)氨酶活性是衡量動(dòng)物肝臟功能的重要指標(biāo)，有研究表明，轉(zhuǎn)氨酶活性的提高通常與肝功能異常和損傷有關(guān)（胡貴麗，2019）。本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧添加80 和160μg/kg 的黃曲霉毒素B1可顯著提高肉仔雞血清ALT 和AST 活性，這與陳靜等（2017）的研究結(jié)果基本一致。此外，本試驗(yàn)檢測(cè)到肉仔雞血清總蛋白和白蛋白含量降低，提示日糧添加黃曲霉毒素B1可降低肉雞蛋白質(zhì)代謝效率。

4 結(jié)論

總之，本試驗(yàn)結(jié)果表明，黃曲霉毒素B1通過(guò)對(duì)肉仔雞的血清生化和免疫力的負(fù)向調(diào)控作用抑制肉仔雞生長(zhǎng)發(fā)育。