郭 翱,顧進(jìn)華,王學(xué)偉,劉自揚(yáng),蘇富琴

(中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所,北京 100081)

中藥提取物在《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版一部凡例中有所規(guī)定,即提取物包括以水或醇為溶劑經(jīng)提取制成的流浸膏、浸膏或干浸膏、含有一類(lèi)或數(shù)類(lèi)有效成分的有效部位和含量達(dá)到90%以上的單一有效成分。通過(guò)對(duì)中藥材的提取,可以富集有效成分、去除中藥材中無(wú)效和有毒成分,降低用藥劑量。目前,中藥提取物在亞洲、歐洲得到比較廣泛的應(yīng)用,我國(guó)醫(yī)藥和畜牧獸醫(yī)領(lǐng)域也都對(duì)中藥提取物進(jìn)行了多年的研究探索[1]。

在畜禽養(yǎng)殖中,斷奶仔豬由于免疫系統(tǒng)、消化系統(tǒng)尚未發(fā)育完善,母源抗體水平和自身免疫水平都比較低,加上斷奶、轉(zhuǎn)群、環(huán)境、飼料變化等不同程度的應(yīng)激影響,易受到各種病原微生物的侵襲,容易出現(xiàn)采食量減少、生長(zhǎng)發(fā)育遲緩、腹瀉等問(wèn)題。藥效學(xué)研究表明,中藥提取物具有抗炎、抗菌、抗氧化、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫等生物學(xué)功能,在改善斷奶仔豬采食量減少、生長(zhǎng)發(fā)育遲緩、腹瀉等問(wèn)題上具有良好的效果。同時(shí),中藥提取物以資源豐富、不易產(chǎn)生耐藥性等特點(diǎn),在開(kāi)發(fā)獸用中藥提取物及其制劑方面受到廣泛關(guān)注。本文綜述了中藥提取物的生物學(xué)功能及其在斷奶仔豬中的試驗(yàn)性研究,為開(kāi)發(fā)利用獸用中藥提取物及其制劑提供參考。

1 中藥提取物的生物學(xué)功能

1.1 抗氧化作用 氧化應(yīng)激是指機(jī)體在遭受各種有害刺激時(shí),體內(nèi)高活性分子如活性氧(ROS)和活性氮(RNS)自由基產(chǎn)生過(guò)多,氧化程度超出氧化物清除能力,氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)動(dòng)態(tài)失衡,從而導(dǎo)致細(xì)胞和組織損傷[2]。機(jī)體在正常條件下,通過(guò)體內(nèi)氧化還原酶系統(tǒng)的調(diào)節(jié),細(xì)胞內(nèi)ROS水平保持較低水平,當(dāng)機(jī)體受到有害刺激,體內(nèi)產(chǎn)生自由基過(guò)多,超出體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)的清除能力,機(jī)體氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)失衡,易造成機(jī)體損傷[3]。體內(nèi)和體外研究表明,多種中藥提取物具有較強(qiáng)的抗氧化作用。1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、超氧陰離子和羥基自由基常被用于評(píng)價(jià)物質(zhì)的抗氧化活性。研究發(fā)現(xiàn),甘草黃酮對(duì)DPPH自由基、超氧陰離子和羥基自由基的清除率能力較強(qiáng)[4]。丙二醛(MDA)是脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的副產(chǎn)物,可用于評(píng)價(jià)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)。Lin X等[5]用H2O2誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激并評(píng)價(jià)了姜黃素的抗氧化能力,結(jié)果顯示姜黃素可以提高RAW264.7細(xì)胞過(guò)氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)等抗氧化酶活性,降低了MDA水平,從而降低細(xì)胞氧化損傷。核因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)是調(diào)控細(xì)胞氧化應(yīng)激反應(yīng)的重要轉(zhuǎn)錄因子,通過(guò)誘導(dǎo)調(diào)控一系列抗氧化酶的表達(dá),可以減輕活性氧和親電體引起的細(xì)胞損傷,使細(xì)胞處于穩(wěn)定狀態(tài),維持機(jī)體氧化還原動(dòng)態(tài)平衡[6]。王玉榮等[7]研究發(fā)現(xiàn),絞股藍(lán)黃酮通過(guò)激活Nrf2信號(hào)通路,增加下游抗氧化基因醌氧化還原酶1(NQO1),血紅素氧合酶-1(HO-1)的表達(dá)從而減輕人肺腺癌A549細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷。綜上所述,中藥提取物可通過(guò)清除自由基、提高抗氧化酶含量來(lái)發(fā)揮抗氧化功能。

1.2 抗菌作用 體內(nèi)和體外研究表明,多種中藥提取物具有顯著的抗菌活性。王靜慧等[8]研究發(fā)現(xiàn),博落回提取物血根堿的抗菌譜廣,對(duì)沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌和大腸埃希氏菌等病原菌有較強(qiáng)的抑菌作用。劉明[9]在體內(nèi)和體外試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),大黃素具有顯著的抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌作用且不易誘導(dǎo)其產(chǎn)生耐藥性。楊天鳴等[10]研究表明,柴胡水提物對(duì)金黃色葡萄球菌、傷寒桿菌有顯著的抑制作用,并明顯降低由傷寒桿菌引起的小鼠急性腹腔感染的死亡率。王宏軍等[11]研究發(fā)現(xiàn),連翹酯苷對(duì)引發(fā)奶牛乳房炎的主要致病菌金黃色葡萄球菌、停乳鏈球菌、無(wú)乳鏈球菌均有較好的抑制作用。綜上所述,中藥提取物對(duì)體內(nèi)和體外的多種革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌都有顯著的抑制作用。

1.3 抗炎作用 炎癥是機(jī)體對(duì)致炎物質(zhì)刺激產(chǎn)生的防御反應(yīng),適度的炎癥使機(jī)體更好的抵抗病原體以及調(diào)節(jié)新陳代謝,但過(guò)度的炎癥則會(huì)對(duì)機(jī)體造成損傷[12]。NF-κB作為一種重要的核轉(zhuǎn)錄因子,在炎癥反應(yīng)的調(diào)控中起著重要作用[13]。Chao H等[14]利用脂多糖(LPS)刺激巨噬細(xì)胞,建立炎癥細(xì)胞模型,研究丹參多糖對(duì)炎癥的影響,結(jié)果表明丹參多糖下調(diào)NF-κB的激活和核轉(zhuǎn)移,并降低炎癥相關(guān)基因和炎癥介質(zhì)的表達(dá)。Yan F等[15]研究了小檗堿對(duì)結(jié)腸炎小鼠的治療作用,結(jié)果表明小檗堿能抑制小鼠結(jié)腸巨噬細(xì)胞和上皮細(xì)胞促炎細(xì)胞因子產(chǎn)生,改善小鼠結(jié)腸炎癥狀。Cheng P等[16]研究表明,黃芩苷能夠減輕LPS誘導(dǎo)的雞肝臟炎癥,其抗炎活性與抑制NF-κB信號(hào)通路激活有關(guān)。由此可見(jiàn),中藥提取物可通過(guò)抑制NF-κB信號(hào)通路激活來(lái)發(fā)揮抗炎作用。

1.4 免疫調(diào)節(jié) 免疫是機(jī)體的一種生理性功能,通過(guò)識(shí)別和排除抗原性異物維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的平衡。免疫系統(tǒng)的功能下降或受損,機(jī)體的防御能力降低,易導(dǎo)致多種疾病發(fā)生。研究表明,多種中藥提取物具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫的功能。Ren Z等[17]研究表明,大葉貫眾多糖能顯著提高免疫抑制小鼠的胸腺和脾臟指數(shù)、增強(qiáng)淋巴細(xì)胞增殖活性和巨噬細(xì)胞功能、提高免疫球蛋白和細(xì)胞因子水平。王偉等[18]研究發(fā)現(xiàn),金銀花提取物可通過(guò)提高小鼠NK細(xì)胞活性、恢復(fù)T淋巴細(xì)胞亞群之間的平衡、抑制脾細(xì)胞凋亡來(lái)提高免疫抑制小鼠的免疫功能。陳福星等[19]研究發(fā)現(xiàn)蒲公英多糖顯著提高小鼠免疫器官指數(shù),促進(jìn)免疫器官發(fā)育。樹(shù)突狀細(xì)胞是最有效的抗原呈遞細(xì)胞,具有連接先天免疫和適應(yīng)性免疫的能力。Li X等[20]研究發(fā)現(xiàn),甘草多糖能夠誘導(dǎo)樹(shù)突狀細(xì)胞成熟。由此可見(jiàn),中藥提取物可通過(guò)作用于免疫器官、免疫細(xì)胞、免疫分子來(lái)發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。

2 中藥提取物在斷奶仔豬中的試驗(yàn)性研究

2.1 中藥提取物對(duì)斷奶仔豬抗氧化水平的影響 在養(yǎng)殖中,高溫、日糧改變、斷奶、轉(zhuǎn)群等因素都會(huì)導(dǎo)致斷奶仔豬產(chǎn)生應(yīng)激。應(yīng)激狀態(tài)下動(dòng)物的抗氧化防御系統(tǒng)易造成破壞,自由基產(chǎn)生過(guò)多,造成氧化損傷,使動(dòng)物生長(zhǎng)性能下降、免疫功能受損[21]。研究表明,多種中藥提取物具有提高斷奶仔豬抗氧化水平的作用。洪奇華等[22]研究發(fā)現(xiàn),在斷奶仔豬日糧中添加200 mg/kg姜黃素能顯著增加仔豬小腸中SOD、T-AOC和GSH-Px抗氧化酶的活性、提高斷奶仔豬日增重、同時(shí)降低料重比。Yang M等[23]研究表明,飼料中添加200 mg/kg迷迭香提取物能夠提高斷奶仔豬血清和肝臟中SOD和GSH-Px活性,降低MDA的含量并降低仔豬腹瀉率。費(fèi)楓等[24]研究發(fā)現(xiàn),在仔豬日糧中添加100 mg/kg薄荷提取物能改善熱應(yīng)激條件下斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、提高仔豬抗氧化水平。李建房[25]研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加100 mg/kg甘草多糖能顯著提高仔豬血清中T-AOC活性,降低MDA含量,提高斷奶仔豬的抗氧化水平。綜上所述,在斷奶仔豬日糧中添加適量的中藥提取物能夠提高斷奶仔豬的抗氧化水平。

2.2 中藥提取物對(duì)斷奶仔豬腸道健康的影響 腸道不僅是斷奶仔豬營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的重要場(chǎng)所,而且還是重要的免疫器官。斷奶會(huì)影響仔豬腸道形態(tài),損傷腸道黏膜,使腸道上皮細(xì)胞間的通透性增加[26]。洪奇華等[22]研究發(fā)現(xiàn),日糧中添加200 mg/kg姜黃素對(duì)保護(hù)斷奶仔豬腸道屏障功能、保持腸黏膜結(jié)構(gòu)完整具有積極作用。免疫球蛋白(尤其是SIgA)在保護(hù)腸道黏膜免受病原侵襲和抑制病毒增殖等方面發(fā)揮著十分重要的作用[27]。尤婷[28]研究表明,在斷奶仔豬日糧中添加150 mg/kg甘草提取物能增加斷奶仔豬十二指腸、空腸及回腸的腸道黏膜SIgA含量。胃腸道正常微生物菌群在抑制病原微生物定植和宿主免疫系統(tǒng)發(fā)育等方面發(fā)揮重要作用。當(dāng)豬胃腸道菌群失衡時(shí),病原微生物通過(guò)產(chǎn)生毒素、利用宿主動(dòng)物體內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及抑制合成維生素或其他生長(zhǎng)因子,從而降低豬的生長(zhǎng)速度和健康狀況[29]。乳酸桿菌是仔豬腸道內(nèi)的主要優(yōu)勢(shì)菌群,也是豬腸道內(nèi)有益菌之一[30]。湯文杰等[31]研究發(fā)現(xiàn),在斷奶仔豬日糧中添加600 mg/kg山楂提取物能顯著提高結(jié)腸乳酸桿菌數(shù)量,降低大腸桿菌數(shù)量。陳凌鋒等[32]研究發(fā)現(xiàn),在斷奶仔豬基礎(chǔ)飼糧中添加1000 mg/kg太子參莖葉多糖能夠降低盲腸大腸桿菌的數(shù)量并提高乳酸桿菌數(shù)量。綜上所述,中藥提取物通過(guò)保護(hù)仔豬腸道黏膜完整、提高SIgA含量、增加益生菌數(shù)量來(lái)改善斷奶仔豬腸道健康。

2.3 中藥提取物對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的影響 多項(xiàng)研究表明,在斷奶仔豬日糧中添加中藥提取物,能夠提高斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能。茍昌勇等[33]研究發(fā)現(xiàn),在斷奶仔豬飼糧中添加1700 mg/kg五倍子單寧酸能降低仔豬腹瀉發(fā)生率、提高仔豬生長(zhǎng)性能。梅華迪等[34]研究表明,飼糧中添加400 mg/kg槲皮素可提高斷奶仔豬平均日增重并降低仔豬腹瀉率。黃其春等[35]研究表明,日糧中添加0.2%銀杏提取物能夠提高斷奶仔豬對(duì)粗蛋白、粗脂肪消化率,從而促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)發(fā)育。李建房等[25]研究發(fā)現(xiàn),在斷奶仔豬飼糧中添加1000 mg/kg甘草多糖,可以顯著提高斷奶仔豬的平均日增重并顯著降低料重比,提高生長(zhǎng)性能。何夏陽(yáng)[36]研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加0.5 mg/kg血根堿可顯著提高斷奶仔豬平均日增重,明顯降低料重比和腹瀉率。綜上所述,中藥提取物可通過(guò)增加斷奶仔豬采食量、提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收率、降低仔豬腹瀉發(fā)生率來(lái)提高仔豬的生長(zhǎng)性能。

3 討 論

中藥提取物在斷奶仔豬中的藥效學(xué)探索性試驗(yàn)表明,多種中藥提取物具有提高斷奶仔豬的抗氧化水平、改善斷奶仔豬腸道健康、提高斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能等作用,同時(shí)能夠降低斷奶仔豬的發(fā)病率(表1)。中藥提取物可作為開(kāi)發(fā)獸用中藥制劑的重要原料,但是不能直接在獸醫(yī)臨床上使用,需要制成制劑?！东F藥管理?xiàng)l例》第四十一條規(guī)定“經(jīng)批準(zhǔn)可以在飼料中添加的獸藥,應(yīng)當(dāng)由獸藥生產(chǎn)企業(yè)制成藥物飼料添加劑后方可添加。禁止將原料藥直接添加到飼料及動(dòng)物飲用水中或者直接飼喂動(dòng)物”。

表1 常見(jiàn)中藥提取物在斷奶仔豬試驗(yàn)性研究中的添加劑量及主要作用Tab 1 Dosage and main effects of common Chinese herbal extracts in experimental study of weaned piglets

在申報(bào)獸用中藥提取物及其制劑,《獸藥注冊(cè)分類(lèi)及注冊(cè)資料要求》(農(nóng)業(yè)部公告第442號(hào))適用獸用中藥提取物及其制劑注冊(cè)的情形有兩種:一是第一類(lèi)1,即從中藥、天然藥物中提取的有效成份及其制劑,是指獸藥國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中未收載的從中藥、天然藥物中得到的未經(jīng)化學(xué)修飾的單一成份及其制劑,其單一成分的含量應(yīng)當(dāng)占總提取物的90%以上;二是第二類(lèi)2,即從中藥、天然藥物中提取的有效部位制成的制劑,是指從中藥、天然藥物中提取的一類(lèi)或數(shù)類(lèi)成份制成的制劑。現(xiàn)已批準(zhǔn)的獸用中藥提取物及其制劑有博落回提取物及博落回散、白頭翁皂苷提取物及白頭翁皂苷提取物注射液等。博落回散具有抗菌消炎,開(kāi)胃的功能,可作為藥用飼料添加劑使用,用于促進(jìn)豬、雞生長(zhǎng),對(duì)于豬、雞的健康生長(zhǎng)和減少抗菌藥使用具有重要意義。目前,開(kāi)展中藥提取物在畜禽中的藥效學(xué)探索性研究較多,但開(kāi)發(fā)為獸用中藥提取物及其制劑的產(chǎn)品相對(duì)較少,未來(lái)應(yīng)加大研發(fā)和利用力度以滿足養(yǎng)殖業(yè)實(shí)際用藥需求。