王常瞵 高明周 郭英慧 孫亞 于小鈞 閆志 王杰瓊 喬明琦

摘要：分析大鼠口服蘆丁后血漿、尿液和糞便中的代謝產(chǎn)物并評價蘆丁在大鼠體內(nèi)的代謝途徑。大鼠灌胃給予250 mg/kg[JP]蘆丁后，采集血漿、尿液和糞便，以固相萃取法處理生物樣品，利用超高效液相色譜-四級桿-靜電場軌道阱質(zhì)譜，以0.05%甲酸水（A）-0.05%甲酸乙腈（B）為流動相梯度洗脫，分別在正、負離子模式下采集各樣品數(shù)據(jù)，通過高分辨提取離子流圖和平行反應監(jiān)測模式，結(jié)合色譜保留時間、質(zhì)量測量、診斷離子等確定蘆丁的代謝物并探究蘆丁在大鼠體內(nèi)的代謝途徑。在正、負離子模式下共檢測和鑒定了29種蘆丁代謝產(chǎn)物，其主要代謝途徑為甲基化、葡萄糖醛酸化、硫酸酯化及其復合反應等。建立了蘆丁的整體代謝圖譜，為其進一步的藥效學評價及開發(fā)利用提供了參考依據(jù)，同時也為藥物代謝鑒定研究提供了一種綜合研究方法。

關鍵詞：蘆??；超高效液相色譜-四級桿-靜電場軌道阱質(zhì)譜；代謝產(chǎn)物；代謝途徑

中圖分類號：R285?? 文獻標志碼：A?? 文章編號：1002-4026（2023）05-0009-08

Identification of rutin metabolites and analysis of rutin metabolic pathway in rats

WANG Changlina，GAO Mingzhoub， GUO Yinghuia， SUN Yab， YU Xiaojunc， YAN Zhic， WANG Jieqiongc*， QIAO Mingqia*

（a. School of Traditional Chinese Medicine; b. Institute of Traditional Chinese Medicine Innovation;c. School of Pharmacy，Shandong University of Traditional Chinese Medicine， Jinan 250355， China）

Abstract∶Herein， metabolites in plasma， urine and feces of rats were analyzed after oral administration of rutin and the metabolic pathway of rutin was evaluated. After intragastric administration of 250 mg/kg rutin， plasma， urine， and feces were collected and treated via solid phase extraction. Ultra-high performance liquid chromatography-Q Exactive hybrid quadrupole-orbitrapmass spectrometry （UPLC-Q-Orbitrap MS） was used with 0.05% formic acid water （A）-0.05% formic acid acetonitrile （B） as mobile phase gradient elution. The sample data were collected in positive- and negative-ion modes. The metabolites and metabolic pathway of rutin in rats were determined via high resolution extraction ion chromatography in the parallel reaction monitoring mode， combined with chromatographic retention time， accurate mass measurement and diagnostic ions.Twenty-nine rutin metabolites were detected and identified in positive and negative ion modes，and their main metabolic pathways were methylation， glucuronidation， sulfation and their compound reaction. The study provided the overall metabolic profile of rutin， which will provide a reference for further pharmacodynamic evaluation， development， and utilization in the future and offer a comprehensive research method for drug metabolism identification.

Key words∶rutin; UPLC-Q-Orbitrap MS; metabolites; metabolic pathways

蘆丁又稱為蕓香苷，是一種天然的黃酮苷，廣泛分布于自然界，尤以豆科植物的槐米、蕓香科植物的蕓香草等含量較高，常作為提取蘆丁的原料[1]。蘆丁具抗氧化、止血、抗癌、抗炎、抗菌、神經(jīng)保護等多種藥理活性[2-3]，在治療糖尿病、低脂血癥和各種腫瘤方面也顯示出優(yōu)勢[4-5]。蘆丁在腸道中吸收較差，但口服后可被腸道菌群大量降解[6]?；谶@一事實，我們推測蘆丁在體內(nèi)代謝，主要以代謝物的形式產(chǎn)生多種生物活性。代謝物的某些活性可能高于母體化合物，如研究發(fā)現(xiàn)蘆丁代謝產(chǎn)物比母體化合物具有更強的抗血小板活性和細胞毒作用[7]?？梢钥隙ǖ氖?，代謝產(chǎn)物在發(fā)揮藥理作用中起著重要的作用。周鵬飛等[8]通過體外實驗觀察人腸道菌群對蘆丁代謝的情況，認為可能的代謝途徑有兩種： 一種是糖苷鍵斷裂轉(zhuǎn)化為槲皮素，槲皮素經(jīng)代謝轉(zhuǎn)化為其他成分；另一種是不經(jīng)槲皮素直接轉(zhuǎn)化為其他物質(zhì)，這不足以解釋蘆丁在體內(nèi)的全面代謝及其相應的代謝途徑研究。伍明江等[9]采用UPLC-Q-TOF-MS/MS，在負離子模式下從大鼠血液、尿液、糞便和膽汁中發(fā)現(xiàn)了一定數(shù)量的蘆丁代謝物，但缺乏樣品正離子模式的采集。而本研究采用超高效液相色譜-四級桿-靜電場軌道阱質(zhì)譜（UPLC-Q-Orbitrap MS）在正、負離子模式下對樣品進行采集，并使用4～5個診斷碎片對體內(nèi)代謝物進行鑒定，從而增加分析的準確性。在樣品處理方面，目前大多數(shù)研究采用有機溶劑沉淀法[10-11]，而本研究使用固相萃取柱分離純化樣品。研究表明固相萃取材料在用于去除污染物時是極好的[12]，樣品經(jīng)固相萃取柱分離后，可避免后續(xù)色譜柱堵塞和污染，能夠更好地保護色譜柱[13]。

近年來，超高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜聯(lián)用（UPLC-HRMS）技術(shù)成功地應用于對未知化合物的代謝研究[14]。與其他檢測儀器相比，UPLC-HRMS 具有分辨率高、質(zhì)量精度高、質(zhì)量范圍寬、動態(tài)范圍廣等特點，在梓醇、歐前胡素等中藥有效成分體內(nèi)代謝過程分析中發(fā)揮著重要的作用[15-16]。本文采用UPLC-Q-Orbitrap MS系統(tǒng)分析了大鼠血液、尿液和糞便中蘆丁的代謝產(chǎn)物，探究蘆丁在大鼠體內(nèi)的代謝途徑，以期擴大含蘆丁類藥物的開發(fā)利用，并為相關中藥的體內(nèi)代謝研究提供依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 實驗儀器

Ultimate3000-Q-Exactive靜電場軌道阱液質(zhì)聯(lián)用儀（美國Thermo Scientific公司）；TTL-DCI氮吹儀（北京同泰聯(lián)科技發(fā)展有限公司）；SPE C18固相萃取柱（67 mg/mL ，泰州市康之達實驗器材有限公司）；XS105十萬分之一電子天平（瑞士Mettler Toledo公司）。

1.2 實驗材料

蘆?。ㄅ朑R-137-202005，純度≥98.0%，南京廣潤生物制品有限公司）；乙腈和甲醇（質(zhì)譜級，美國ThermoFisher公司）；甲酸（色譜級，德國Merck公司）。

1.3 實驗動物

本研究所用動物為SPF級健康雄性SD大鼠，共8只，體質(zhì)量為180～220 g，由北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供，生產(chǎn)許可證號為SCXK（京）2021-0011。

2 實驗方法

2.1 溶液的制備

對照品溶液的制備：精密稱取蘆丁對照品2 mg于10 mL容量品中，加適量甲醇超聲使其溶解，甲醇定容至刻度，過 0.22 μm 微孔濾膜，即得。

給藥樣品溶液的制備：精密稱取蘆丁對照品250 mg，加入10 mL 0.5%的羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）溶液配置成混懸液，即得。

2.2 動物實驗

所有大鼠適應性喂養(yǎng)7 d后，將其隨機分為空白組和藥物組，每組4只。實驗前禁食12 h，自由飲水。藥物組大鼠按250 mg/kg劑量進行灌胃，空白組大鼠給予0.5%CMC-Na溶液（2mL）[15]。

2.3 樣品收集與制備

分別于給藥后0.5、1、2、4 h從大鼠眼眶靜脈叢取血0.5 mL，置于肝素鈉抗凝的EP管中，混合均勻，每個樣品以3 500 r/min離心15 min，各組分別合并不同時間點所得的上清液，即得血漿樣品。同時收集兩組大鼠0～24 h的尿樣，3 500 r/min 離心15 min后取上清液，即得尿液樣品；收集兩組大鼠0～24 h的糞便，自然晾干后碾碎，裝于離心管中，即得糞便樣品[17]。

采用固相萃取法對所有生物樣品進行前處理。血漿和尿液樣品分別加入預先使用甲醇和去離子水處理過的固相萃取柱中，然后用去離子水（3 mL）和甲醇（3 mL）依次洗滌固相萃取柱（Solid Phase Extraction Column，簡稱SPE柱），收集甲醇洗脫液，在氮氣中室溫干燥。殘留物用80 μL 10%乙腈重新渦旋溶解，離心30 min（13 500 r/min，4 ℃），將得到的上清液用于后續(xù)分析。與此同時，取已干燥粉碎的糞便樣品1.0 g，用去離子水（5.0 mL）超聲提取15 min后過濾，將上清液加入經(jīng)過處理的固相萃取柱中，然后進行上述相同的操作，得到的上清液用于進一步的儀器分析[18]。

2.4 液質(zhì)聯(lián)用分析條件

色譜條件：Waters ACQUITY UPLC BEHC18色譜柱（100 mm×2.1 mm， 1.7 μm），流速0.3 mL/min，柱溫35 ℃；進樣量5 μL。流動相為含0.05%甲酸的水（A）和含0.05%甲酸的乙腈（B），梯度洗脫條件為：0～1 min，5% B；1～3 min，5%～40% B；3～13 min，40%～65% B；13～19 min，65%～95% B；19～21 min，95% B；21～23 min，95%～5% B。

質(zhì)譜條件：檢測模式為正離子和負離子模式；離子源參數(shù)為氮氣（純度≥99.99%）分別作為鞘氣和輔助氣體，流速分別為45、10，輔助氣流量10 mL/min，裂解電壓為3.00 kV；毛細管溫度350 ℃，離子傳輸管溫度為320 ℃，輔助器溫度為350 ℃；掃描模式：Full MS/dd-MS2；Full MS分辨率為70 000，dd-MS2分辨率17 500；質(zhì)譜質(zhì)量掃描范圍m/z 80～1 200；碰撞能10、30、50 eV。

2.5 數(shù)據(jù)處理

收集的數(shù)據(jù)集由Thermo Xcalbur 2.2工作站記錄和處理。為了獲得盡可能多的碎片離子，我們選擇強度在10 000以上的信號峰來鑒定代謝物。通過設置參數(shù)：C[0-30]，H[0-35]，O[0-20]，S[0-5]和環(huán)不飽和雙鍵數(shù)（RDB）[0-15]，用公式預測器計算了選定峰的所有母離子的化學式的準確質(zhì)量。準確的質(zhì)量測量設置在（-5～5）×10-6的質(zhì)量誤差內(nèi)。

3 實驗結(jié)果

3.1 分析策略的建立

本研究建立了一套系統(tǒng)有效的方法，用于快速分析SD大鼠口服給藥后尿液、血漿和糞便中蘆丁的代謝譜。當分辨率為70 000時，首先進行全質(zhì)量掃描。然后將高分辨提取離子流圖（HREIC）與平行反應監(jiān)測模式（PRM）相結(jié)合，在正、負離子模式下捕獲原始數(shù)據(jù)中的蘆丁代謝物。根據(jù)色譜保留時間、準確的質(zhì)量測量、診斷離子（DPIs）等確定了蘆丁的代謝物。最后，根據(jù)已鑒定的代謝物提出了蘆丁的代謝途徑[16]。整個分析過程以簡明的示意圖顯示在圖1中。

3.2 蘆丁的裂解規(guī)律分析

蘆丁為黃酮苷類化合物，已有文獻報道了該類化合物的質(zhì)譜裂解規(guī)律[19-20]。其主要質(zhì)譜裂解途徑為糖基的中性丟失形成苷元離子[21]以及苷元離子丟失CO和發(fā)生C環(huán)的RDA裂解[22]。在負離子模式下，蘆丁的準分子離子峰為m/z 609.146 48 [M-H]-，二級質(zhì)譜圖中可檢測到碎片離子m/z 301，m/z 273，m/z 179，m/z 151，m/z 107，見圖2。蘆丁可能的裂解途徑見圖3。蘆丁的特征碎片離子為m/z 301，其產(chǎn)生主要源于蕓香糖基（C12H20O9）的中性丟失。m/z 301進一步的碎片裂解途徑主要包括丟失CO和RDA裂解，從而產(chǎn)生m/z 273 [M-H-C12H20O9-CO]-、m/z 179[C8H3O5]-、m/z 151[C7H3O4]-、m/z 107[C6H3O2]-等一系列碎片離子[23]。

3.3 蘆丁體內(nèi)代謝產(chǎn)物分析

采用Xcalibur軟件分析空白組和給藥組大鼠血漿、尿液、糞便中蘆丁的代謝產(chǎn)物，通過兩組間的數(shù)據(jù)對比，初步明確蘆丁代謝物。根據(jù)化合物的實驗分子量和理論分子量的誤差（（-5～5）×10-6）以及色譜保留時間，確定代謝產(chǎn)物的存在。同時，診斷離子可以從上述蘆丁對照品的裂解模式中推斷出來。例如，根據(jù)蘆丁質(zhì)譜圖中的m/z 609 [M-H]-、m/z 301[M-H-C12H20O9]-等位置的片段離子，推導出m/z 689 [m/z 609+SO3]-、[JP4]m/z 381[m/z 343.08+SO3]-位置診斷離子的出現(xiàn)，初步證實了蘆丁硫酸酯化產(chǎn)物的身份。m/z 301[M-H-C12H20O9]-[JP]和RDA裂解片段m/z 179[C8H3O5]-、m/z 151[C7H3O4]-可以用來進一步識別蘆丁硫酸酯化產(chǎn)物。因此，在m/z 609±x，m/z 301±x，m/z 301，m/z 151，m/z 179（x為O（16），CH2 （14），SO3（80）等取代基分子量）處的產(chǎn)物離子可用于代謝物的鑒定。基于上述篩選和鑒別的研究思路，共鑒定了包括原型在內(nèi)的 29個代謝產(chǎn)物，其中在血漿、尿液、糞便中分別檢測到 11、26、8個代謝產(chǎn)物，部分代謝產(chǎn)物見表1和表2（全表見OSID科學數(shù)據(jù)與內(nèi)容附表1～2）。

M7在正離子模式下產(chǎn)生準分子離子m/z 625.177 29，保留時間為4.00 min，推測其分子式為C28H33O16，誤差為0.452 ×10-6。其分子式與蘆丁相比多了一個亞甲基，在正離子模式下產(chǎn)生[JP]m/z 317[M+H-C12H20O9]+的碎片，與蘆丁丟失一個蕓香糖基（C12H20O9）產(chǎn)生槲皮素的過程相同，推測M7為蘆丁的甲基化產(chǎn)物。在此基礎上，M26在負離子模式下的準分子離子分別為 m/z 637.177 16，推測其分子式為 C29H33O16，誤差分別為0.428×10-6，其分子式與蘆丁相比多了兩個亞甲基。碎片離子m/z 329 [M-H-C12H20O9]-為丟失一個蕓香糖基所致，結(jié)合黃酮類化合物RDA裂解碎片m/z 179 [C7H3O4+2CH2]-和m/z 207 [C8H3O5+2CH2]-，推測該化合物為二甲基蘆丁且兩個甲基均結(jié)合在A環(huán)上。

M2、M17和M19在負離子模式下準分子離子分別為m/z 689.103 58、m/z 689.192 08 和m/z 689.193 48，保留時間分別為3.52、4.72和5.04 min。推測可能的分子式為C27H29O19S，三者誤差分別為1.015×10-6、0.396×10-6和0.811 ×10-6。與M0蘆丁相比，三者均多了SO3，根據(jù)碎片離子m/z 381[M-H-C12H20O9]-、m/z 301[M-H-C12H20O9-SO3]-及RDA裂解特征碎片離子m/z 179[C8H3O5]-和m/z 151[C7H3O4]-，推測三者為蘆丁的硫酸酯化產(chǎn)物。

M15在正、負離子模式下分別在m/z 303.049 92 （C15H11O7，誤差≤5×10-6）和m/z 301.03427 （C15H9O7，誤差≤5×10-6）下具有相同的理論[M+H]+/[M-H]-離子。[JP]根據(jù)碎片離子m/z 275[M+H-CO]+、m/z 273[M-H-CO]-及RDA裂解特征碎片離子m/z 179[C8H3O5]-和m/z 151[C7H3O4]-，推測其為槲皮素。

M21和M27在正離子模式下準分子離子分別為m/z 317.065 57、m/z 317.065 57，保留時間為5.17 min和6.64 min，推測其可能的分子式為C16H13O7 （誤差分別為-2.962 ×10-6和-3.057 ×10-6）；M28在負離子模式下準分子離子為m/z 315.051 39，推測其可能的分子式為C16H15O7（誤差為4.637 ×10-6，保留時間為8.87 min）。[JP]根據(jù)正離子模式m/z 303 [M+H-CH2]+和負離子模式m/z 301 [M-H-CH2]-碎片以及RDA裂解特征碎片離子m/z 181[C8H5O5]+、179[C8H3O5]-和m/z 153[C7H5O4]+、151[C7H3O4]-，推測三者為甲基槲皮素。

M11在負離子模式下的準分子離子為m/z 329.063 40，推測其可能的分子式為C17H13O7，誤差為-4.650 ×10-6，其分子式與槲皮素M15相比多了兩個亞甲基。負離子模式下，根據(jù)RDA裂解碎片m/z 165 [C7H3O4+CH2]-、m/z 121 [C6H3O2+CH2]-等碎片離子可推測M11為二甲基槲皮素并且一個甲基結(jié)合在A環(huán)上。

M16在負離子模式下的準分子離子為m/z 343.082 85，推測其可能的分子式為C18H15O7，誤差為3.468 ×10-6，[JP]其分子式與槲皮素M15相比多了三個亞甲基。在其二級質(zhì)譜圖中，根據(jù)碎片離子m/z 313[M-H-CH2O]-和m/z 299[M-H-CH2O-CH2]-以及RDA裂解碎片m/z 165 [C7H3O4+CH2]-、m/z 121 [C6H3O2+CH2]-等可推測M16為三甲基槲皮素并且一個甲基結(jié)合在A環(huán)上。

M6在負離子模式下準分子離子為m/z 477.067 32，推測其可能的分子式為C21H17O13（誤差為1.998×10-6），負離子模式下，m/z 301與m/z 477相比丟失m/z 176，證明該結(jié)構(gòu)中存在葡萄糖醛酸，同時根據(jù)m/z 273以及RDA裂解碎片離子m/z 151、m/z 179等推測M6為槲皮素葡萄糖醛酸。在此基礎上，M4在負離子模式下的準分子離子分別為m/z 653.099 61，推測其分子式為C27H25O19，誤差為3.275 ×10-6。負離子模式下，從m/z 653到m/z 477再到m/z 301連續(xù)丟失m/z 176，證明該結(jié)構(gòu)中存在2個葡萄糖醛酸，同時根據(jù)m/z 151、m/z 179等RDA裂解碎片離子推測M4為槲皮素二葡萄糖醛酸。

M13與M24在負離子模式下的準分子離子分別為m/z 380.992 13和m/z 380.992 00，推測其可能的分子式為C15H9O10S，二者誤差分別為2.720 ×10-6、2.379 ×10-6，保留時間分別為4.47和5.61 min。負離子模式下，m/z 301與m/z 381相比相對分子質(zhì)量減少m/z 80，提示該結(jié)構(gòu)中磺酸基團的存在，結(jié)合m/z 273以及m/z 151、m/z 179、m/z 107等RDA裂解碎片離子等推測其為槲皮素硫酸酯。

M8、M9、M10在負離子模式下準分子離子分別為m/z 491.082 09、m/z 491.084 16和m/z 491.083 28，推測可能的分子式為C22H19O13，三者誤差分別為0.149 ×10-6、4.382×10-6和2.572 ×10-6。負離子模式下，m/z 315與m/z 491相比丟失m/z 176，證明該結(jié)構(gòu)中存在葡萄糖醛酸，同時m/z 301與m/z 315相比丟失m/z 14，證明該分子中存在甲基；在正離子模式下，M8準分子離子為m/z 493.098 24，推測可能的分子式為C22H21O13，誤差為1.162 ×10-6，存在與上述相同的裂解方式，產(chǎn)生m/z 317、m/z 303等碎片離子，由此推測三者均為甲基槲皮素葡萄糖醛酸。

M1、M3、M23在負離子模式下準分子離子分別為m/z 667.115 42、m/z 667.115 66 和m/z 667.114 99，推測可能的分子式為C28H27O19，三者誤差分別為2.783 ×10-6、4.295 ×10-6和1.392 ×10-6，保留時間分別為3.49、3.66和5.27 min。與M8、M9、M10相比，增加了m/z 176，證明了比其增加了一個葡萄糖糖醛酸。負離子模式下，從m/z 667到m/z 491再到m/z 315連續(xù)丟失m/z 176，證明該結(jié)構(gòu)中存在2個葡萄糖醛酸；同時m/z 301與m/z 315相比丟失m/z 14，證明該分子中存在甲基；結(jié)合RDA裂解碎片m/z 179和m/z 151推測三者均為甲基槲皮素二葡萄糖醛酸。

M12、M14、M18和M20在負離子模式的下準分子離子分別為m/z 395.007 54、m/z 395.007 66、m/z 395.007 78和m/z 395.007 75，推測其可能的分子式為 C16H11O10S（誤差分別為2.016×10-6、2.320×10-6、2.624×10-6、2.548 ×10-6，保留時間分別為4.46、4.64、4.82、5.04 min）。負離子模式下，m/z 315與m/z 395相比丟失m/z 80，證明該結(jié)構(gòu)中存在磺酸基團，同時m/z 301與m/z 315相比丟失m/z 14，證明該分子中存在甲基；結(jié)合RDA裂解碎片m/z 151推測上述化合物均為甲基槲皮素硫酸酯。

M5、M22、M25在負離子模式下準分子離子分別為m/z 557.023 80、m/z 557.024 17和m/z 557.024 23，推測可能的分子式為C21H17O16S，三者誤差分別為0.873 ×10-6、2.639 ×10-6和 2.814 ×10-6，保留時間分別為3.79、5.23和5.83 min。與M7相比增加1個SO3，推測相比M7增加一個磺酸基團。負離子模式下，m/z 301與m/z 477相比丟失m/z 176，證明該分子中存在葡萄糖醛酸，結(jié)合RDA裂解碎片m/z 179和m/z 151推測三者均為槲皮素葡萄糖醛酸的硫酸酯化產(chǎn)物。

3.4 蘆丁體內(nèi)代謝途徑分析

蘆丁在大鼠體內(nèi)存在多途徑代謝，其主要代謝途徑見圖4，其中槲皮素及槲皮素的葡萄糖醛酸結(jié)合、甲基結(jié)合等代謝途徑已得到相關文獻的佐證[8-9]。圖中揭示了蘆丁苷元槲皮素首先是由母體藥物經(jīng)過Ⅰ相代謝反應水解生成的，隨后發(fā)生了一系列的Ⅱ相代謝反應包括葡萄糖醛酸化、甲基化、硫酸酯化等。此外，還發(fā)現(xiàn)了大量的復合反應，其中以Ⅱ相代謝反應為主。此外，在大鼠糞便中發(fā)現(xiàn)和檢測到了豐富的代謝物，這表明腸道中存在腸道微生物區(qū)系，腸道可能是蘆丁的主要代謝器官之一。

4 結(jié)論

本研究采用SD大鼠一次性口服蘆丁的方法，研究了蘆丁在正負離子模式下的尿液、血漿和糞便中的代謝規(guī)律。根據(jù)碎裂模式、準確的質(zhì)量測定、色譜保留時間和相關藥物生物轉(zhuǎn)化知識，共發(fā)現(xiàn)包括原型藥物在內(nèi)的29種代謝物，并對其進行了表征。蘆丁進入大鼠體內(nèi)后，在血漿中檢測到11種代謝產(chǎn)物，在尿液中檢測到26種代謝產(chǎn)物，在糞便中檢測到8種代謝產(chǎn)物，提示蘆丁主要從尿液中進行排泄，尿液樣本可能是鑒定蘆丁代謝物的有力指標。藥物進入機體后能夠水解為槲皮素發(fā)生Ⅰ相代謝反應，Ⅱ相代謝反應產(chǎn)物以蘆丁和槲皮素的甲基化產(chǎn)物、葡萄糖醛酸結(jié)合產(chǎn)物、硫酸酯化產(chǎn)物及復合反應產(chǎn)物為主。蘆丁進入體內(nèi)進行代謝的過程中，在血漿、尿液和糞便中均檢測到蘆丁原型，與文獻報道一致[9]。

目前大多數(shù)的研究主要集中在蘆丁本身的藥理活性和作用機制中，對其體內(nèi)代謝產(chǎn)物的藥理活性研究較少。隨著越來越多的藥物代謝產(chǎn)物被鑒定和表征，可以對其進行合成并加強相應藥理活性的研究，為臨床安全性和擴大已知藥物的應用范圍提供指導，也為新藥的開發(fā)提供參考。此外，對已證實的代謝產(chǎn)物進行藥代動力學研究，提供其吸收、分布、代謝和排泄的信息，能夠為臨床應用提供新的治療方案。

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