吳雙俊,趙亭,劉長江,尹彩霞

(山東方明藥業(yè)集團股份有限公司,山東 東明 274500)

吡拉西坦注射液,英文名為:Piracetam Injection,其主要成分為吡拉西坦,吡拉西坦的別名有:吡乙酰胺、酰胺吡酮、酰胺吡、咯烷酮、吡烷酮醋胺、腦復康、乙酰胺吡咯烷酮。吡拉西坦的分子式為C6H10N2O2,相對分子質量為142.16,其化學名為2-氧代-1-吡咯烷基乙酰胺,為白色或類白色的結晶性粉末;無臭,味苦,在水中易溶,在乙醇中略溶,在乙醚中幾乎不溶。吡拉西坦注射液適用于急、慢性腦血管病、腦外傷、各種中毒性腦病等多種原因所致的記憶減退癥狀及輕、中度腦功能障礙。也用于兒童智力發(fā)育遲緩等的功效。吡拉西坦注射液肌肉注射、靜脈注射、靜脈滴注均可,肌肉注射。每次1 g,一日2～3次。靜脈注射。每次4～6 g,一日2次。靜脈滴注。每次4～8 g,一日1次,用5%或10%葡萄糖注射液或氯化鈉注射液稀釋至250 mL后使用。

吡拉西坦注射液是國家醫(yī)保目錄乙類藥物,用藥方便、療效確切,臨床應用廣泛。吡拉西坦注射液參比制劑持證商為UCB Pharma,上市國家為土耳其。國內吡拉西坦注射液收載于中華人民共和國藥典2020年版二部578頁,有5 mL∶1 g,20 mL∶4 g,20 mL∶8 g等3個藥品規(guī)格,有效期為兩年。國內生產企業(yè)眾多,山東方明藥業(yè)集團股份有限公司是其中的一家。方明藥業(yè)是吡拉西坦注射液上市較早、銷售范圍較廣的生產企業(yè),積累了豐富的生產經驗。

為提升吡拉西坦注射液質量水平,根據(jù)國家質量和療效一致性評價要求,參照參比制劑進行研究。參照參比制劑制定處方,同時制備過程中嚴格控制制備工藝參數(shù),通過控制這些參數(shù),確保在得到質量安全、有效、穩(wěn)定、均一的產品的同時,在生產、使用和儲存過程中采用適當?shù)姆椒?保證臨床用藥安全。

參照參比制劑研究吡拉西坦注射液的處方及制備工藝,對提升我國在該產品生產過程中的質量控制水平,對維護百姓用藥安全及響應國家生物安全號召方面有較強的現(xiàn)實意義。

1 試驗用藥與儀器設備

1.1 試驗用藥

吡拉西坦(東北制藥集團股份有限公司);醋酸鈉(成都華邑藥用輔料制造有限責任公司);冰醋酸(成都華邑藥用輔料制造有限責任公司);活性炭(注射用)(上?；钚蕴繌S);注射用水(山東方明藥業(yè)集團股份有限公司)。

1.2 儀器設備

KCQ80安瓿超聲波清洗機(上海遠東機械設備總廠);JXSBSY251高效液相色譜儀(Agilent Technologies1260);JXSBSY62電子分析天平(賽多利斯科學儀器(北京)有限公司);JXSBBG68循環(huán)水式多用真空泵(河南省予華儀器有限公司);JXSBSY15電熱恒溫培養(yǎng)箱(山東濰坊精鷹醫(yī)療器械有限公司);ASM4.0安瓿水浴滅菌器(山東新華醫(yī)療器械股份有限公司);AGFS-8/1-20安瓿灌裝封口機(上海遠東機械設備總廠);Five Easy Plus pH計(梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司);酒精噴燈、不銹鋼桶、水環(huán)真空泵、鑷子等。

2 方法與結果

2.1 吡拉西坦注射液處方及制備工藝

參考吡拉西坦注射液原研產品處方:吡拉西坦為活性成分,醋酸鈉和冰醋酸為pH值調節(jié)劑和緩沖劑。為吸附雜質、脫色和除熱源加入適量的活性炭(供注射用),注射用水為溶劑。依照本品進口注冊標準及相關參考文獻,結合原輔料的性質初步擬定如下處方及制備工藝。

2.1.1 處方

處方包含:吡拉西坦、醋酸鈉、冰醋酸、活性炭(供注射用)、注射用水。

2.1.2 制備工藝

取處方量約70%的注射用水,加入冰醋酸、醋酸鈉,攪拌溶解,再加入吡拉西坦攪拌溶解,再加入活性炭(供注射用),攪拌吸附15 min,過濾、脫碳,檢測pH值應合格,否則用冰醋酸或10%醋酸鈉溶液調節(jié)pH值至合格,再補加注射用水至全量,攪拌均勻,灌裝,熔封(充氮氣),滅菌即得。

2.2 吡拉西坦注射液工藝的篩選

2.2.1 配制過程中注射用水初始水量和加料順序的選擇

根據(jù)工藝變更風險評估依據(jù),50%的初始水量能夠保證各物料的充分溶解,且對含量、有關物質、無菌和pH值的影響很小,故在初步確定制備工藝中確定的配制過程中初始水量控制在50%～60%是合適的,在此基礎上進行了投料順序的選擇,詳見表1、2。

表1 投料順序

表2 投料順序對制劑質量影響的檢測結果

結果顯示,投料順序對制劑的質量無明顯影響。過濾前后制劑的性狀、pH值、含量和有關物質無明顯區(qū)別,根據(jù)實際生產要求,初步確定的投料順序選擇:吡拉西坦、醋酸鈉、冰醋酸是合適的。

2.2.2 是否充氮及配液溫度的選擇

配制兩組樣品,分別考察配制、灌裝過程是否充氮(控制殘氧量<3.0%)及配制溫度對產品質量的影響。試驗結果如表3所示。

表3 充氮工藝考察試驗結果

結果顯示,是否充氮對產品質量無影響,配液溫度在25～60 ℃范圍內對產品質量無影響,根據(jù)生產實際情況,產品配液溫度可嚴控至25～60 ℃。

2.2.3 活性炭(供注射用)濃度的選擇

按2.1配制2 000支樣品,按活性炭(供注射用)常用質量濃度0.10,0.05 g/mL配制注射液,考察活性炭(供注射用)對注射液性狀、pH值、含量的影響,以篩選活性炭(供注射用)的最佳用量,如表4所示。

表4 活性炭(供注射用)吸附試驗結果

由表4結果可知,0.10,0.05 g/mL的活性炭(供注射用)均可使注射液成為無色澄明液體,并且對性狀、pH值、含量無明顯影響,為保證產品質量,在工藝中選用0.10 g/mL的活性炭(供注射用)。

2.2.4 注射液pH值的選擇

按2.1配制注射液,用醋酸鈉溶液或冰醋酸調節(jié)pH值至4.9,5.4,5.9,分別灌入20 mL安瓿瓶中,熔封,滅菌,冷卻,觀察樣品性狀,測定其pH值、含量、有關物質。如表5所示。

表5 pH值對樣品的影響

由表5結果可知,本品在不同的pH值調整點,滅菌后產品的性狀、含量、有關物質均無明顯變化。因測得原研上市產品的pH值為5.6,為保證產品質量,把本品pH值控制在5.4～5.9。

2.2.5 滅菌參數(shù)的篩選

按2.1配制1 000支樣品,用4%的氫氧化鈉溶液調節(jié)pH值至5.6,灌裝于5 mL安瓿瓶中,分別選擇三種滅菌條件(121 ℃,12 min;121 ℃,15 min;115 ℃,30 min)進行考查。從性狀、有關物質、含量、無菌幾個方面進行檢測。對比不同滅菌參數(shù)對產品質量的影響,確定本品的滅菌參數(shù),結果如表6所示。

表6 滅菌參數(shù)考察試驗結果

結果顯示,121 ℃,15 min參數(shù)下有關物質水平最高但仍低于參比制劑,根據(jù)相關法規(guī)要求,確定本品滅菌參數(shù)為121 ℃,15 min。

根據(jù)以上篩選研究確定的處方及制備工藝為:取處方量約70%的注射用水(25～60 ℃),加入冰醋酸、醋酸鈉,攪拌溶解,再加入吡拉西坦攪拌溶解,再加入0.10 g/mL活性炭(供注射用),攪拌吸附15 min,過濾、脫碳,檢測pH值至5.4～5.9,否則用冰醋酸或10%醋酸鈉溶液調節(jié)pH值至合格,再補加注射用水至全量,攪拌均勻,灌裝,熔封(充氮氣),121 ℃、滅菌15 min。

2.2.6 處方工藝確認和重現(xiàn)

2.2.6.1 確定的小試處方工藝及重現(xiàn)性

1)小試批處方組成見表7。

表7 小試批處方組成

2)小試批制備工藝:向配制容器中加入約10 000 mL的注射用水(25～60 ℃);加入處方量的吡拉西坦、醋酸鈉和冰醋酸。加入活性炭(供注射用)吸附15 min,過濾,取樣檢測合格后,將藥液灌裝于20 mL硼硅安瓿瓶中(棕色),灌裝前后均充入氮氣,熔封。121 ℃,15 min滅菌。

3)小試三批考察結果見表8。

表8 小試三批考察結果

結果顯示,小試3批高溫60 d各項考察指標均符合規(guī)定,且與參比制劑無差異,故可以進行下一步的中試放大。

2.2.6.2 中試放大三批

1)處方及批量。批處方:吡拉西坦、醋酸鈉、冰醋酸、活性炭(供注射用)、注射用水。

2)中試放大批制備工藝:向配制罐中加入注射用水(25～60 ℃)至50%～60%處方量;加入處方量的吡拉西坦、醋酸鈉和冰醋酸;攪拌至完全溶解后加注射用水定容至全量并攪拌均勻。加入活性炭(供注射用)吸附15 min,過濾,取樣檢測合格后,灌裝(前后均充入氮氣),熔封。121 ℃,15 min滅菌。

3)實驗室放大樣品質量研究,中試放大研究樣品檢驗結果見表9。

表9 中試放大樣品檢測結果

結果顯示,中試放大產品的關鍵質量特性與參比制劑無顯著差異,中試放大工藝可行,經中試放大三批試驗確定的處方工藝能滿足工業(yè)化生產需要。

2.2.6.3 通過研究確定的處方及工藝

1)處方組成見表10。

表10 處方組成

2)包裝材料:本品直接接觸藥液的包材為中硼硅玻璃安瓿瓶(棕色)。

3)制備工藝:向配制罐中加入注射用水(25～60 ℃)至50%～60%處方量,加入處方量的吡拉西坦、醋酸鈉和冰醋酸;攪拌至完全溶解后加注射用水定容至全量并攪拌均勻。加入活性炭(供注射用)吸附15 min,過濾,取樣檢測合格后,灌裝(充氮氣),熔封。121 ℃,15 min滅菌。

3 結論

通過對參比制劑進行解析,研究了吡拉西坦注射液的處方和制備工藝,確定了吡拉西坦注射液最佳處方及制備工藝,并對其穩(wěn)定性進行了考察。結果表明,所研制的產品處方及制備工藝合理,質量穩(wěn)定,適合吡拉西坦注射液工業(yè)化生產。