趙秋語 陳 黎 胡 敏

弱視是兒童視力下降最常見的原因,常表現(xiàn)為單眼或雙眼最佳矯正視力下降。弱視在全球范圍內(nèi)的患病率為1%～2%[1],部分地區(qū)弱視發(fā)病率已接近5%[2]。弱視是由兒童時(shí)期的視網(wǎng)膜輸入異常引起的,其潛在的神經(jīng)缺陷主要存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng),慢性異常視網(wǎng)膜輸入會導(dǎo)致中樞結(jié)構(gòu)和功能的發(fā)育異常[3-4]。但在弱視形成過程中,視網(wǎng)膜和視神經(jīng)的結(jié)構(gòu)是否發(fā)生改變這一觀點(diǎn)是存在爭議的[5-8]。目前弱視的定義仍在強(qiáng)調(diào)眼部的臨床檢查無可見器質(zhì)性病變,但已有研究報(bào)告了黃斑和視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層厚度存在差異,具體機(jī)制尚不清楚[9-12]。本實(shí)驗(yàn)選擇與人類視覺系統(tǒng)高度相似的樹鼩作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物建立形覺剝奪性弱視模型,從形態(tài)學(xué)方面觀察弱視形成及恢復(fù)過程中視網(wǎng)膜的變化。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

本實(shí)驗(yàn)共選取30只出生后18 d尚未睜眼的樹鼩幼崽,體重約50 g,性別不限,由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所樹鼩種質(zhì)資源中心提供[SCXK(滇)K2018-0002]。入選樹鼩需進(jìn)行初步體檢以排除眼部疾患及全身異常。

分組:將30只樹鼩隨機(jī)分為6組,每組5只:弱視模型N1組(左眼眼瞼縫合2個(gè)月);弱視模型N2組(左眼眼瞼縫合1個(gè)月);弱視恢復(fù)模型N3組(左眼眼瞼縫合1個(gè)月后打開1個(gè)月);弱視恢復(fù)模型N4組(左眼眼瞼縫合1個(gè)月后打開,換縫合右眼眼瞼1個(gè)月);C1對照組(雙眼正常視物2個(gè)月);C2對照組(雙眼正常視物1個(gè)月)。樹鼩由專業(yè)人員飼養(yǎng),飼養(yǎng)條件符合規(guī)范。

1.2 方法

1.2.1 模型建立

樹鼩稱重后,使用30 g·L-1戊巴比妥(5 mL·kg-1)進(jìn)行腹腔注射麻醉。手術(shù)區(qū)域消毒好后,用眼科顯微剪剪去上下瞼緣1 mm皮膚組織,止血后從內(nèi)眥部開始行上下眼瞼皮膚的縫合。操作結(jié)束后樹鼩交由專業(yè)人員飼養(yǎng),各組樹鼩飼養(yǎng)條件相同。術(shù)后每天檢查樹鼩是否出現(xiàn)縫線脫落、縫合后眼部或全身感染等情況并及時(shí)處理,實(shí)驗(yàn)過程中淘汰不符合實(shí)驗(yàn)條件的樹鼩。樹鼩手術(shù)與實(shí)驗(yàn)操作均符合標(biāo)準(zhǔn)及規(guī)范,且通過了云南大學(xué)倫理道德委員會的審查。

1.2.2 HE染色

造模完成后,在對應(yīng)時(shí)間(弱視模型N1、N3、N4組和C1對照組:出生后2個(gè)月零18 d;弱視模型N2組和C2對照組:出生后1個(gè)月零18 d)對各組內(nèi)3只樹鼩使用戊巴比妥過量麻醉后行頸椎脫臼處死。處死后盡快摘除眼球,在角鞏膜緣后方進(jìn)行穿刺,隨后浸入組織固定液固定24 h,之后將標(biāo)本取出,去除角膜、晶狀體及玻璃體后將視網(wǎng)膜修剪為適合大小(保留視盤),然后組織脫水、石蠟包埋、切片后行HE染色,觀察視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)及感光細(xì)胞、雙極細(xì)胞和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)量變化。

1.2.3 透射電鏡檢查

造模完成后,各組內(nèi)其余2只樹鼩在對應(yīng)時(shí)間使用戊巴比妥過量麻醉后行頸椎脫臼處死,取出眼球,用刀片切取視盤旁三分之一處約2 mm×2 mm大小的視網(wǎng)膜組織塊,迅速放入體積分?jǐn)?shù)3.5%戊二醛固定液中,隨后進(jìn)行電鏡標(biāo)本的制備、攝片,觀察視網(wǎng)膜各層細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)變化。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 組織學(xué)觀察結(jié)果

本實(shí)驗(yàn)選取樣本視盤旁三分之一處作為觀察范圍,固定光學(xué)顯微鏡放大倍數(shù)(×400)及圖片截取寬度后攝片,進(jìn)一步觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)和數(shù)量的改變(圖1)。

2.1.1 視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)改變

光學(xué)顯微鏡下可見,C1、C2對照組樹鼩視網(wǎng)膜由下至上可分為9層:視網(wǎng)膜色素上皮層、感光細(xì)胞層(視錐視桿細(xì)胞層)、外界膜、外核層、外叢狀層、內(nèi)核層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層。

與C2對照組相比,弱視模型N2組樹鼩視網(wǎng)膜中神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層厚度變薄,神經(jīng)纖維層質(zhì)地疏松,雙極細(xì)胞層細(xì)胞層數(shù)明顯減少,視錐視桿細(xì)胞內(nèi)外節(jié)層與色素上皮層分離間隙增大(圖2B黃色箭頭處),細(xì)胞體積縮小、形態(tài)不規(guī)則且細(xì)胞間間隙增大;縫合時(shí)間更長的弱視模型N1組樹鼩視網(wǎng)膜中神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層厚度進(jìn)一步降低,神經(jīng)纖維層萎縮(圖2A黃色箭頭),雙極細(xì)胞層厚度進(jìn)一步降低,細(xì)胞間隙擴(kuò)大,視錐、視桿細(xì)胞形態(tài)較弱視模型N2組有一定程度的恢復(fù);弱視恢復(fù)模型N3、N4組樹鼩視網(wǎng)膜在各層均表現(xiàn)出一定程度的恢復(fù),弱視恢復(fù)模型N3組樹鼩視網(wǎng)膜的視錐視桿細(xì)胞核層及內(nèi)外節(jié)層細(xì)胞間隙增大,排列紊亂(圖2C黃色箭頭),雙極細(xì)胞核層厚度明顯增加,細(xì)胞間隙增大;弱視恢復(fù)模型N4組樹鼩視網(wǎng)膜視錐視桿細(xì)胞層細(xì)胞形態(tài)出現(xiàn)一定程度的恢復(fù),但二者與C1對照組相比仍有差距(圖2)。

A:弱視模型N1組,黃色箭頭示神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層;B:弱視模型N2組,黃色箭頭示視錐視桿細(xì)胞內(nèi)外節(jié)層與色素上皮層間隙;C:弱視恢復(fù)模型N3組,黃色箭頭示視錐視桿細(xì)胞層及內(nèi)外節(jié)層;D:弱視恢復(fù)模型N4組;E:C1對照組,F:C2對照組。RGC:神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層;BC:雙極細(xì)胞層;Cone、Rod:視錐視桿細(xì)胞層。圖2 各分組視網(wǎng)膜切片HE染色圖(×400)

2.1.2 細(xì)胞數(shù)量的變化

感光細(xì)胞:除弱視模型N1與弱視恢復(fù)模型N4組、C1對照組與C2對照組間感光細(xì)胞數(shù)量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P>0.05)外,其余各組間感光細(xì)胞數(shù)量差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.001)(表1)。

雙極細(xì)胞:雙極細(xì)胞數(shù)量在C1、C2對照組中最多,其余各組的雙極細(xì)胞數(shù)量均低于C1、C2對照組(均為P<0.01);除弱視模型N1與弱視恢復(fù)模型N4組、C1對照組與C2對照組間雙極細(xì)胞數(shù)量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P>0.05)外,其余各組間雙極細(xì)胞數(shù)量差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.001)(表1)。

神經(jīng)節(jié)細(xì)胞:神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)量在C1、C2對照組中最多,兩組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),弱視恢復(fù)模型N3組與C2對照組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),其余各組間神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)量差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.001)(表1)。

表1 各組樹鼩視網(wǎng)膜不同類別細(xì)胞數(shù)量

2.2 電鏡觀察視網(wǎng)膜各層細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變

(1)C2對照組:視錐視桿細(xì)胞、雙極細(xì)胞、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞胞核圓潤飽滿,細(xì)胞膜完整、染色質(zhì)豐富、分布均勻;視錐視桿細(xì)胞外節(jié)膜盤疊狀結(jié)構(gòu)明顯且均勻,內(nèi)節(jié)線粒體嵴規(guī)則、無皺縮;神經(jīng)纖維分布均勻,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核糖體未見明顯異常(圖3)。

(2)弱視模型N2組:視錐視桿細(xì)胞核體積縮小、異染色質(zhì)增多、核不規(guī)則(圖4A紅色箭頭處),雙極細(xì)胞、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞可見線粒體腫脹、嵴溶解消失,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)池形成(圖4B、C紅色箭頭處),神經(jīng)纖維水腫(圖4D紅色箭頭處)、排列紊亂,視網(wǎng)膜細(xì)胞數(shù)較弱視模型N1組上升。

(3)弱視恢復(fù)模型N3組:視錐視桿細(xì)胞、雙極細(xì)胞數(shù)量明顯增多,細(xì)胞膜較完整,染色質(zhì)稍有邊集(圖5A、C),視錐視桿細(xì)胞外節(jié)膜盤間隙增大,局部出現(xiàn)空泡變(圖5B紅色圓圈內(nèi)),神經(jīng)節(jié)細(xì)胞胞核固縮、體積縮小、異染色質(zhì)增多、核不規(guī)則,細(xì)胞膜皺縮,細(xì)胞質(zhì)濃縮(圖5D),神經(jīng)纖維規(guī)則分布(圖5E)。

(4)弱視恢復(fù)模型N4組:視錐視桿細(xì)胞、雙極細(xì)胞、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)量正常(圖6A、C、D紅色箭頭處),細(xì)胞形狀稍不規(guī)則,染色質(zhì)邊集,部分可見線粒體腫脹,視錐視桿細(xì)胞外節(jié)膜盤間隙顯著增大,部分可見空泡化(圖6B紅色圓圈內(nèi)),神經(jīng)纖維形態(tài)稍不規(guī)則(圖6E紅色圓圈內(nèi))。

A:視錐視桿細(xì)胞層;B:雙極細(xì)胞層;C:神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層;D:神經(jīng)纖維層。圖3 C2對照組視網(wǎng)膜細(xì)胞透射電鏡圖

A:視錐視桿細(xì)胞層,紅色箭頭示核體積縮小、異染色質(zhì)增多、核不規(guī)則;B:雙極細(xì)胞層,紅色箭頭示內(nèi)質(zhì)網(wǎng)池形成;C:神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層,紅色箭頭示內(nèi)質(zhì)網(wǎng)池形成;D:神經(jīng)纖維層,紅色箭頭示神經(jīng)纖維水腫。圖4 弱視模型N2組視網(wǎng)膜細(xì)胞透視電鏡圖

A:視錐視桿細(xì)胞胞核層;B:視錐視桿細(xì)胞內(nèi)外節(jié)層,紅色圓圈示膜盤間隙增大,出現(xiàn)空泡化;C:雙極細(xì)胞層;D:神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層;E:神經(jīng)纖維層。圖5 弱視恢復(fù)模型N3組視網(wǎng)膜細(xì)胞透視電鏡圖

A:視錐視桿細(xì)胞胞核層,紅色箭頭示視錐視桿細(xì)胞;B:視錐視桿細(xì)胞內(nèi)外節(jié)層,紅色圓圈示膜盤空泡化;C:雙極細(xì)胞層,紅色箭頭示雙極細(xì)胞;D:神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層,紅色箭頭示神經(jīng)節(jié)細(xì)胞;E:神經(jīng)纖維層,紅色圓圈示神經(jīng)纖維形態(tài)不規(guī)則。圖6 弱視恢復(fù)模型N4組視網(wǎng)膜細(xì)胞透視電鏡圖

3 討論

3.1 建立形覺剝奪性弱視模型的物種選擇

過去60年間對于各種動(dòng)物弱視模型的研究為我們探索弱視的發(fā)病機(jī)制和治療方法提供了多種途徑。形覺剝奪性弱視是唯一一種可以在所有物種中建模的弱視類型,目前應(yīng)用于形覺剝奪性弱視研究的動(dòng)物主要有貓、大鼠、豚鼠、松鼠、雞、樹鼩、恒河猴等,研究顯示,單眼剝奪所導(dǎo)致的視力下降在不同物種之間存在顯著差異[13-16]。

考慮到人類弱視的復(fù)雜性和多樣性,以及視覺通路組織上存在的物種差異,某些動(dòng)物模型其實(shí)并不能完美地模擬人類弱視的臨床表現(xiàn)。不同的物種之間光柵靈敏度存在著巨大的差異,而這種差異可能反映了各個(gè)物種在視網(wǎng)膜解剖學(xué)上的根本差異(例如缺少中央凹以及視網(wǎng)膜中央錐體密度的差異)。

在不同物種之間,單眼剝奪后視力下降的程度也有很大差異。在進(jìn)行單眼剝奪操作后,獼猴的弱視眼是徹底失明的[17],貓的弱視眼也是失明的,但一段時(shí)間后會有一定程度的恢復(fù)[18],而嚙齒動(dòng)物模型的弱視眼光柵靈敏度僅降低了一個(gè)八度。這些差異是源于物種間視覺通路組織解剖或生理上的差異,還是源于物種間神經(jīng)回路可塑性的差異,目前還沒有達(dá)成一致意見。

樹鼩視覺發(fā)達(dá),具有一些靈長類動(dòng)物的視覺特征(已初步具有雙眼視覺或立體視覺),并且已經(jīng)完成了全基因組的測序[19],在神經(jīng)和免疫系統(tǒng)方面與人類高度同源,與靈長類相比,實(shí)驗(yàn)成本更低且更易獲取。盡管樹鼩的視網(wǎng)膜厚度與人類相比較薄,但其視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)及主要組成細(xì)胞與人類極為相似[20]。本課題組前期已建立形覺剝奪性弱視的樹鼩模型[21],視覺誘發(fā)電位檢測也已證實(shí)此模型建立成功[22]。因此,本實(shí)驗(yàn)選取樹鼩作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物建立形覺剝奪性弱視模型以探究弱視形成及恢復(fù)過程中視網(wǎng)膜的變化特征。

3.2 單眼形覺剝奪樹鼩視網(wǎng)膜組織學(xué)及超微結(jié)構(gòu)

在既往研究中,關(guān)于弱視形成過程中視網(wǎng)膜和視神經(jīng)的結(jié)構(gòu)是否出現(xiàn)改變這一觀點(diǎn)是存在爭論的。一些研究報(bào)道了黃斑和視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層厚度存在顯著差異[23-26],然而其他一些研究表示沒有發(fā)現(xiàn)明顯的視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)差異[27-28]。早期的Meta分析表明弱視視網(wǎng)膜黃斑厚度增加[29], 然而近幾年的報(bào)道回顧了弱視中OCT結(jié)果后,認(rèn)為在弱視中黃斑和視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層變化的證據(jù)仍然是存在爭議的[5]。

本研究主要觀察感光細(xì)胞、雙極細(xì)胞、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的改變,發(fā)現(xiàn)單眼形覺剝奪會對樹鼩視網(wǎng)膜各層細(xì)胞產(chǎn)生不同程度的損害。在光學(xué)顯微鏡下觀察剝奪眼視網(wǎng)膜HE染色發(fā)現(xiàn):神經(jīng)節(jié)細(xì)胞核層細(xì)胞減少,厚度變薄,雙極細(xì)胞核層細(xì)胞層數(shù)明顯減少,厚度變薄,視錐視桿細(xì)胞內(nèi)外節(jié)層以及細(xì)胞核層細(xì)胞體積縮小、形態(tài)不規(guī)則且細(xì)胞間間隙增大,細(xì)胞數(shù)量減少。在縫合時(shí)間更長的組中,除上述變化外,神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和雙極細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)一步減少,神經(jīng)纖維層出現(xiàn)明顯萎縮,推測隨著剝奪時(shí)間的延長,視網(wǎng)膜損傷加重,弱視嚴(yán)重程度也隨之加深。通過透射電鏡觀察到剝奪眼視網(wǎng)膜出現(xiàn)了細(xì)胞核體積縮小、核不規(guī)則、異染色質(zhì)增多、線粒體腫脹、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)池形成等損傷表現(xiàn)。

關(guān)于視網(wǎng)膜功能是否存在損害這一問題,目前尚無定論。一些研究小組報(bào)道了視網(wǎng)膜電圖的振幅降低和延遲[30-32],但也有其他研究稱屈光參差性斜視受試者的視網(wǎng)膜反應(yīng)沒有差異[33],出現(xiàn)這樣的結(jié)果可能是由于其他疾病被誤診為弱視或是疾病與弱視同時(shí)存在。由于視神經(jīng)發(fā)育不全是單眼弱視的基礎(chǔ),所以當(dāng)這些原因同時(shí)存在的時(shí)候,通常很難確定視網(wǎng)膜異常是弱視直接導(dǎo)致的,還是基于其他原因出現(xiàn)的損傷。視網(wǎng)膜損傷可能是弱視的原因,也可能是進(jìn)一步的神經(jīng)損傷引起的代償機(jī)制?？傊?弱視與視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)和功能之間的確切關(guān)系仍不清楚。雖然某些視網(wǎng)膜變化可能與弱視有關(guān),但尚不清楚這些變化可能會導(dǎo)致什么樣的病理結(jié)果,究竟是視網(wǎng)膜的損傷導(dǎo)致了弱視,還是視覺通路上的神經(jīng)損傷導(dǎo)致了視網(wǎng)膜的代償,這個(gè)問題還有待探究。

3.3 弱視的治療

本研究分別模擬了兩種不同的弱視治療方式:去除剝奪后自然恢復(fù)和去除剝奪后遮蓋優(yōu)勢眼。在光學(xué)顯微鏡下觀察兩組弱視恢復(fù)樹鼩模型的視網(wǎng)膜HE染色發(fā)現(xiàn):縫合左眼1個(gè)月后打開1個(gè)月,視錐視桿細(xì)胞胞核層及內(nèi)外節(jié)層細(xì)胞間隙增大,排列紊亂,數(shù)量增多,雙極細(xì)胞核層細(xì)胞數(shù)目減少,細(xì)胞間隙增大?？p合左眼1個(gè)月后打開換縫右眼1月,視錐視桿細(xì)胞、雙極細(xì)胞、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)量均有明顯減少。兩個(gè)弱視恢復(fù)模型的透射電鏡結(jié)果顯示:兩組樹鼩視網(wǎng)膜中均存在不同程度的細(xì)胞損傷,包括染色質(zhì)邊集、外節(jié)膜盤間隙增大、線粒體腫脹等,而當(dāng)去除損害因素后視網(wǎng)膜細(xì)胞出現(xiàn)不同程度的恢復(fù),說明其具有可塑性。

通過對比兩個(gè)弱視恢復(fù)模型的組織學(xué)及透射電鏡結(jié)果后發(fā)現(xiàn),去除剝奪組中視網(wǎng)膜各層細(xì)胞的數(shù)量和形態(tài)較去除剝奪前均有一定程度的恢復(fù),其中以視錐視桿細(xì)胞的數(shù)量增多最為明顯。HE染色結(jié)果顯示,視錐視桿細(xì)胞胞核層及內(nèi)外節(jié)層呈現(xiàn)出多層結(jié)構(gòu),細(xì)胞間隙增大,內(nèi)外節(jié)層排列紊亂,電鏡結(jié)果也顯示同樣的多層結(jié)構(gòu)。但既往研究表明,樹鼩的視網(wǎng)膜感光細(xì)胞為單排排列結(jié)構(gòu)[34-35],這是樹鼩感光細(xì)胞的特征。在對此組進(jìn)行多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)之后,基本可以排除在切片過程中有各層細(xì)胞錯(cuò)位這一可能,我們更傾向于認(rèn)為是在去除剝奪后某些信號通路被激活,從而引起了視網(wǎng)膜感光細(xì)胞的快速增生。但究竟有哪些信號通路參與了這一過程,這樣快速增生的細(xì)胞是否存在功能缺陷,或者細(xì)胞間間隙增大及排列紊亂是否會導(dǎo)致細(xì)胞間信號傳遞的延遲,后續(xù)還需進(jìn)一步探究。

同時(shí)我們也觀察到,在弱視恢復(fù)模型N4組中視網(wǎng)膜各層細(xì)胞出現(xiàn)了新的損害。既往研究發(fā)現(xiàn),弱視的影響并不僅局限于弱視眼,非弱視眼在一定程度上受到弱視眼的抑制[36],其在空間、位置和運(yùn)動(dòng)敏感性方面也存在損害[37]。樹鼩的嬰兒期是從出生到出生后30 d[38],而我們開始反轉(zhuǎn)縫合的時(shí)間是在樹鼩出生后48 d左右,仍處于樹鼩視覺發(fā)育的關(guān)鍵期內(nèi)。所以我們推測此時(shí)的樹鼩仍對形覺剝奪敏感,可能是反轉(zhuǎn)縫合后對側(cè)眼對原弱視眼的抑制引起了新的損害,也可能是最初的單眼剝奪引起的損害尚未恢復(fù),亦或是兩種原因同時(shí)存在。究竟是什么原因所致,還需要后期進(jìn)一步研究加以證實(shí)。

由于目前弱視發(fā)病機(jī)制尚未明確定論,許多弱視治療效果不理想。目前國內(nèi)外針對弱視的治療多為遮蓋優(yōu)勢眼、屈光矯正及視覺訓(xùn)練。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,壓抑優(yōu)勢眼對弱視的治療效果與關(guān)鍵期相關(guān)。在獼猴中,從出生到大約10周的關(guān)鍵期內(nèi),單眼剝奪顯著干擾了條紋皮質(zhì)中典型的眼部優(yōu)勢柱的發(fā)育,具體表現(xiàn)為早期視覺皮質(zhì)中雙眼反應(yīng)細(xì)胞數(shù)量減少,對空間頻率的敏感性改變[17]。為了評估從這種剝奪中恢復(fù)的可能性,研究者對一部分動(dòng)物進(jìn)行了反向縫合。當(dāng)在6周左右進(jìn)行反向縫合時(shí),眼優(yōu)勢柱結(jié)構(gòu)是有可能恢復(fù)正常的。然而在1歲時(shí)進(jìn)行反向縫合時(shí),幾乎是不可能恢復(fù)的,這再次說明早期發(fā)育后可塑性降低。多項(xiàng)研究表明,相較于單純的遮蓋治療,視覺訓(xùn)練可以顯著改善青少年和弱視成人的視敏度和視覺空間能[39-41]?，F(xiàn)階段,應(yīng)用于臨床弱視治療的藥物仍以左旋多巴和胞苷二磷酸膽堿為主[42-43],但隨著對弱視致病機(jī)制認(rèn)知的深入,針對視神經(jīng)通路可塑性的研究也在逐步開展。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明,在樹鼩形覺剝奪性弱視模型中,樹鼩視網(wǎng)膜各層細(xì)胞均有明顯改變,并且具有一定的可塑性。雖然目前弱視的定義仍認(rèn)為眼部無器質(zhì)性病變,本研究結(jié)果明確顯示弱視眼視網(wǎng)膜部位存在損傷,只是可能這種損傷處于細(xì)胞水平,目前臨床上的常規(guī)檢查無法探測到。本研究可能為形覺剝奪性弱視的發(fā)病機(jī)制及治療提供新的思路。