黃曉春?劉琦?李珉?車寶泉?劉照振?劉祝月?劉海濤?寇晉萍?侯金鳳

摘要：目的 評價(jià)國產(chǎn)注射用乳糖酸紅霉素的質(zhì)量現(xiàn)狀。方法 采用法定標(biāo)準(zhǔn)對80批抽驗(yàn)樣品進(jìn)行檢驗(yàn)；結(jié)合注射劑一致性評價(jià)要求，利用參比制劑開展比較研究，通過對復(fù)溶時(shí)間、顆粒形貌、有關(guān)物質(zhì)及成鹽率等關(guān)鍵質(zhì)量屬性的考察，分析評價(jià)不同企業(yè)制劑的質(zhì)量差異及現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)的合理性。結(jié)果 法定檢驗(yàn)結(jié)果顯示80批注射用乳糖酸紅霉素合格率為100%?，F(xiàn)行法定標(biāo)準(zhǔn)無游離乳糖酸檢查項(xiàng)，有關(guān)物質(zhì)和含量測定方法及限度與參比制劑標(biāo)準(zhǔn)存在差異。國內(nèi)制劑的復(fù)溶時(shí)間約為參比制劑的2倍，粒徑分布及顆粒形貌與參比制劑存在差異。國內(nèi)制劑的成鹽率為0.93～1.08，批次間波動較大；參比制劑鈉離子含量（4.3 ppm）顯著低于國內(nèi)制劑（11.9～288.2 ppm）。新建有關(guān)物質(zhì)檢測HPLC方法在檢出雜質(zhì)種類及雜質(zhì)總量方面均優(yōu)于現(xiàn)行法定標(biāo)準(zhǔn)，國內(nèi)制劑與參比制劑雜質(zhì)譜相似，雜質(zhì)檢出差異可接受。探討利用HPLC方法測定的紅霉素組分含量估測其效價(jià)值，對各企業(yè)制劑的效價(jià)估測值與微生物檢定法的效價(jià)測定結(jié)果無顯著差異。結(jié)論 注射用乳糖酸紅霉素總體質(zhì)量較好，與參比制劑在一些質(zhì)量屬性方面存在差異，建議國內(nèi)企業(yè)優(yōu)化生產(chǎn)工藝尤其是冷凍干燥工藝流程以提升產(chǎn)品質(zhì)量；現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)可進(jìn)行提高。

關(guān)鍵詞：注射用乳糖酸紅霉素；評價(jià)性抽驗(yàn)；質(zhì)量評價(jià)；一致性評價(jià)；含量測定

中圖分類號：R978.1文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

Abstract Objective To evaluate the current quality of domestic erythromycin lactobionate for injection. Methods? ? The statutory standard methods combined with exploratory researches focused on quality consistency evaluation for injections were used to evaluate the quality of the 80 samples. Through the investigation of critical quality attributes such as redissolution， particle morphology， related substances， and the salt-forming rate， the quality differences of products from different manufactures and the rationality of the current statutory standard were analyzed and evaluated. Results? ? The qualified rate for the 80 samples was 100% showed by the statutory tests. Compared to the reference preparation standards， the statutory standard did not include the free lactobionic acid test and there were differences between the related substances， assay methods， and limits. The redissolution time of domestic preparations was about twice as long as that of the reference preparation. The particle size distribution and morphology of domestic preparations were different from those of the reference preparation. The salt-forming rate of domestic preparations was 0.93～1.08， with large fluctuations between batches. The sodium ion content of the reference preparation （4.3 ppm） was significantly lower than that of the domestic preparations （11.9～288.2 ppm）. The HPLC method for the detection of related substances was superior to the current statutory standard in terms of the types and total amount of impurities detected. The impurity spectra of domestic preparations were similar to those of the reference preparation， and the impurity contents were acceptable. The potency of erythromycin lactobionate for injection was calculated based on the contents of erythromycin components determined by the established HPLC method. There was no significant difference between the calculated potency and the tested potency determined by the microbial assay for the preparations of different manufactures. Conclusion? ? The overall quality of erythromycin lactobionate for injection was good， but some differences of quality attributes were found between the reference preparation and domestic preparations. In order to improve product quality， it is recommended that the production processes， especially the freeze-drying process should be optimized by domestic manufacturers; the current statutory standards should be further improved.

Key words? ? Erythromycin lactobionate for injection; Evaluative testing; Quality evaluation; Consistency evaluation; Content determination

乳糖酸紅霉素（erythromycin lactobionate）是紅霉素和乳糖酸（1：1）的成鹽產(chǎn)物，屬第一代大環(huán)內(nèi)酯類抗生素[1]，主要通過抑制敏感微生物的蛋白質(zhì)合成產(chǎn)生抑菌作用。注射用乳糖酸紅霉素由Hospira公司于1964年上市，臨床用于青霉素過敏患者敏感菌感染的替代用藥以及敏感軍團(tuán)菌、衣原體屬、支原體屬微生物的感染治療等[1]。目前在多國藥典中均已收載該品種[2-3]。注射用乳糖酸紅霉素不良反應(yīng)有皮疹、嘔吐、瘙癢癥和肝功能異常等。

注射用乳糖酸紅霉素為國家基本藥物目錄品種，國內(nèi)現(xiàn)有19家生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)，存在30個(gè)批準(zhǔn)文號。注射用乳糖酸紅霉素為2021年國家評價(jià)性抽驗(yàn)品種，抽驗(yàn)涉及國內(nèi)23個(gè)省、自治區(qū)和直轄市的藥品生產(chǎn)、經(jīng)營和使用單位，共獲得80批次樣品。本文采用現(xiàn)行法定標(biāo)準(zhǔn)對全部抽檢樣品進(jìn)行檢驗(yàn)，依據(jù)發(fā)現(xiàn)的問題開展探索性研究；對當(dāng)前注射用乳糖酸紅霉素的質(zhì)量狀況進(jìn)行客觀評價(jià)和分析。

1 儀器及試藥

1.1 儀器

Waters e2695高效液相色譜儀；Thermo UltiMate 3000型超高效液相色譜儀；Thermo LTQ Orbitrap Velos Pro 質(zhì)譜儀；梅特勒托利多G20S電位滴定儀；PALL CASCADA I純水機(jī)；梅特勒托利多XS205電子天平；Thermo Nicolet 5700傅里葉紅外光譜儀；Malvern Mastersizer 2000激光粒度儀；MERLIN compact掃描電鏡儀； Ultima IV X射線衍射儀；ZY-300Ⅳ型抑菌圈測量儀；SPX-250B-Z型生化培養(yǎng)箱等。

1.2 試藥

80批次注射用乳糖酸紅霉素均為2021年度國家藥品評價(jià)性抽驗(yàn)樣品，涉及4個(gè)生產(chǎn)企業(yè)（A、B、C和D企業(yè)），兩種規(guī)格0.25g（25萬單位）和0.3g（30萬單位）；參比制劑為Hospira公司產(chǎn)品（批號：091053A）。

紅霉素標(biāo)準(zhǔn)品（批號：510140-201701） 來源于中國食品藥品檢定研究院；乳糖酸紅霉素對照品（貨號：001xV7，batch 1.0）、紅霉素A對照品（貨號：00516P，batch 3.2）、紅霉素B對照品（貨號：00TjNt，batch 5.0）、紅霉素C對照品（ 貨號：003azi，batch 5.0）、N-去甲基紅霉素A （雜質(zhì)B，貨號：005kq0，batch 3.2）及紅霉素系統(tǒng)適用性對照品（貨號：00p9A0，batch 2.0）來源于歐洲藥品質(zhì)量管理局（EMQD）；紅霉素E（雜質(zhì)C）、脫水紅霉素A（雜質(zhì)D）、紅霉素A烯醇醚（雜質(zhì)E）、表紅霉素A烯醇醚（雜質(zhì)F）及紅霉素A氮氧化物（雜質(zhì)H）由范德生物科技天津公司合成。

短小芽胞桿菌[CMCC（B）63202]，抗生素檢定用培養(yǎng)基Ⅰ號（北京路橋，批號：200511）。乙腈和氨水為色譜純，其他試劑為分析純，實(shí)驗(yàn)用水均為超純水。

2 試驗(yàn)方法

2.1 法定檢驗(yàn)

按照《中國藥典》2020年版標(biāo)準(zhǔn)對80批注射用乳糖酸紅霉素進(jìn)行檢驗(yàn)。主要檢驗(yàn)項(xiàng)目包括鑒別、有關(guān)物質(zhì)、紅霉素A、紅霉素B、紅霉素C組分及含量測定等。

2.2 探索性研究

2.2.1 復(fù)溶行為及復(fù)溶時(shí)間測定

不同企業(yè)注射用乳糖酸紅霉素各3支，（25℃±2℃）條件下按標(biāo)示量加入適量滅菌注射用水（按說明書配置，標(biāo)示量每0.25 g加水5 mL，用一次性注射器抽取加入），每隔5 min振搖30 s；觀察30 min內(nèi)樣品的溶解情況，并記錄樣品完全溶解的時(shí)間點(diǎn)，完全溶解需時(shí)的均值為各樣品的復(fù)溶時(shí)間。

2.2.2 粉末差異評價(jià)

利用粉末粒徑分布測定（干法空壓機(jī)噴射樣品直接進(jìn)樣測定）、偏光顯微鏡和掃描電鏡粉末成像分析（采用掃描電鏡儀，電壓設(shè)定為20 kV，樣品用雙面膠帶固定在銅板上，并用金噴射）、粉末吸濕性檢測、粉末X射線衍射分析、紅外光譜等多種方法檢測國產(chǎn)制劑與參比制劑的粉末特性，利用測定結(jié)果評估各制劑粉末的差異。

2.2.3 成鹽率[2]測定

利用電位滴定法，基于0.1 mol/L的氫氧化鈉滴定液和高氯酸滴定液分別滴定各兩份約0.5 g的注射用乳糖酸紅霉素粉末，依據(jù)平均消耗的滴定液體積折算1 g樣品消耗濃度為0.1 mol/L的高氯酸滴定液及氫氧化鈉滴定液體積（VHCLO及VNaOH），VNaOH與VHCLO的比值為樣品中乳糖酸與紅霉素摩爾數(shù)比值（即為乳糖酸紅霉素的成鹽率）。乳糖酸與紅霉素完全成鹽的摩爾數(shù)比值應(yīng)為1.0。

2.2.4 鈉離子含量測定

基于《中國藥典》2020版通則中原子吸收分光光度法第一法（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）測定注射用乳糖酸紅霉素樣品中鈉離子含量。

2.2.5 HPLC法測定有關(guān)物質(zhì)及含量

在現(xiàn)行各國藥典標(biāo)準(zhǔn)和文獻(xiàn)報(bào)道的有關(guān)物質(zhì)檢測方法[2-4]基礎(chǔ)上，以有效分離注射用乳糖酸紅霉素的主要已知雜質(zhì)為目標(biāo)，建立HPLC有關(guān)物質(zhì)及含量檢測方法。

色譜條件：Waters Xbridge C18色譜柱（4.6 mm×

100 mm，3.5 μm），以0.4%氨水溶液為流動相A，乙腈為流動B，按表1方式進(jìn)行線性梯度洗脫。流速為1.0 mL/min；柱溫為40℃；檢測波長215 nm；進(jìn)樣體積35 μL。樣品臨用新制，樣品室溫度4℃。

2.2.6 HPLC方法替代抗生素微生物檢定方法可行性考察

基于中檢院紅霉素標(biāo)準(zhǔn)品，采用《中國藥典》2020年版抗生素微生物檢定法進(jìn)行紅霉素A、B、C 3組分的各自效價(jià)值標(biāo)定。同法進(jìn)行不同配比的紅霉素A-紅霉素B（1：1）、紅霉素A-紅霉素C（1：3）、紅霉素B-紅霉素C（1：3）及紅霉素A、B、C組分（1：1：6）對照品混合物的效價(jià)測定，基于3組分對照品含量及各自標(biāo)定效價(jià)值計(jì)算混合對照品的估測效價(jià)值；比較效價(jià)測定值與估測值評估3組分間的相互作用。HPLC法測定21批不同來源的注射用乳糖酸紅霉素樣品中紅霉素A、B、C組分含量，通過量效轉(zhuǎn)換計(jì)算出效價(jià)估測值，并與抗生素微生物檢定法測定效價(jià)值進(jìn)行數(shù)據(jù)等效性驗(yàn)證。

3 結(jié)果與討論

3.1 法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)

按現(xiàn)行法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)，80批注射用乳糖酸紅霉素全部合格，合格率為100%。

3.2 法定檢驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的問題

本次抽驗(yàn)法定檢驗(yàn)的過程中發(fā)現(xiàn)以下問題：①B、C、D企業(yè)制劑與原研參比制劑采用冷凍干燥工藝，A企業(yè)制劑采用噴霧干燥工藝；不同企業(yè)制劑的性狀及復(fù)溶行為有差異；②現(xiàn)行有關(guān)物質(zhì)檢查方法檢出已知雜質(zhì)種類少，已知雜質(zhì)檢出量在雜質(zhì)總量中占比低；③本品的各國藥典標(biāo)準(zhǔn)有差異，與歐洲藥典（EP）10.0標(biāo)準(zhǔn)[2]相比，我國現(xiàn)行法定標(biāo)準(zhǔn)的有關(guān)物質(zhì)檢查方法有待改進(jìn)、無乳糖酸含量的檢查項(xiàng)目，含量測定方法采用抗生素微生物檢定法耗時(shí)且效率低；④國內(nèi)制劑膠塞外表面均有不同數(shù)量的制劑粉末殘留，提示制劑生產(chǎn)工藝尤其灌裝工藝方面的不足。

3.3 探索性研究

3.3.1 復(fù)溶行為及復(fù)溶時(shí)間

注射用粉末類注射劑的復(fù)溶時(shí)間常與臨床療效密切相關(guān)，是注射用粉針劑的關(guān)鍵質(zhì)量屬性[5-6]。注射用乳糖酸紅霉素國內(nèi)制劑的復(fù)溶時(shí)間（11.0～12.5 min）是參比制劑復(fù)溶時(shí)間（5.5 min）的一倍余。國內(nèi)制劑溶解過程中少量團(tuán)塊和/或絮狀的未溶物，漂浮和/或貼于安瓿瓶底導(dǎo)致粉末全部溶解需時(shí)長于參比制劑。采用冷凍干燥工藝（參比及B、C、D企業(yè)的制劑）與采用噴霧干燥工藝（A企業(yè)制劑）的產(chǎn)品間復(fù)溶行為差異明顯，A企業(yè)制劑形成粉液混合物，貼安瓿瓶壁部分粉末易為液膜包被。冷凍干燥工藝生產(chǎn)的制劑，粉末團(tuán)塊加入注射用水后即消融；參比制劑全溶前僅安瓿瓶底可見濕潤冰渣樣未溶物不同與企業(yè)B、C、D的制劑。參比制劑的標(biāo)示量與安瓿品體積折算后與國內(nèi)制劑相仿。粉末復(fù)溶行為及復(fù)溶時(shí)間的差異提示各制劑粉末物化參數(shù)的差異[7]，尤其是制劑粉末晶型、粒徑分布及顆粒形貌[8]等的差異。

3.3.2 粉末差異評價(jià)

含參比制劑在內(nèi)的5種注射用乳糖酸紅霉素的粒徑分布測定結(jié)果見圖1。國內(nèi)制劑粒徑分布d（0.1）、d（0.5）和d（0.9）值均略大于參比制劑的1.65、8.38及25.1 μm；除C企業(yè)制劑外，A、B及D企業(yè)制劑粉末均含有大于100 μm的顆粒。采用噴霧干燥工藝的A企業(yè)制劑與采用冷凍干燥工藝的制劑（參比制劑和B、C、D企業(yè)制劑）粒徑分布差異明顯。

含參比制劑在內(nèi)的5種注射用乳糖酸紅霉素粉末的顆粒形貌比較見圖2。冷凍干燥工藝的參比制劑和B、C、D企業(yè)制劑以含微孔結(jié)構(gòu)的團(tuán)塊狀微粒為主，而采用噴霧干燥工藝的A企業(yè)制劑為無微孔的、表面光滑的多棱面微粒。與參比制劑相比，B、C企業(yè)制劑的孔隙小而密，而D企業(yè)制劑的孔隙相對較少。

各企業(yè)制劑與參比制劑的粉末X衍射圖譜顯示所有制劑粉末均為無定型粉末，X衍射圖譜基本一致。各企業(yè)制劑粉末吸濕性檢測、紅外光譜及熱重法測試的結(jié)果亦無明顯差異。

制劑粉末粒徑分布與顆粒形貌的差異與制劑生產(chǎn)工藝相關(guān)[7-8]，是導(dǎo)致國內(nèi)制劑復(fù)溶行為、復(fù)溶時(shí)間與參比制劑差異的因素。

3.3.3 成鹽率考察

成鹽率是影響注射用乳糖酸紅霉素制劑澄清度、酸堿度和復(fù)溶時(shí)間等關(guān)鍵質(zhì)量屬性的關(guān)鍵因素之一[6]。抽檢的80批樣品中乳糖酸紅霉素的成鹽率在0.93～1.08之間，均值為1.00（標(biāo)準(zhǔn)差為0.03，n=80）。國內(nèi)A、C、D 3家企業(yè)制劑多批次成鹽率分布的箱體圖見圖3。A企業(yè)為0.95～1.08之間，均值1.03（標(biāo)準(zhǔn)差為0.03，n=30）；C企業(yè)為0.93～1.05之間，均值0.98（標(biāo)準(zhǔn)差為0.03，n=31）；D企業(yè)為0.99～1.07之間，均值1.03（標(biāo)準(zhǔn)差為0.03，n=18）。參比制劑和B企業(yè)各1批次的成鹽率分別為1.01和1.00。國內(nèi)3家企業(yè)多批次制劑的成鹽率波動明顯，其中D企業(yè)制劑乳糖酸紅霉素的成鹽率整體優(yōu)于A企業(yè)和C企業(yè)。乳糖酸紅霉素的成鹽率與調(diào)研資料中各企業(yè)提供的制備乳糖酸紅霉素反應(yīng)終止時(shí)藥液的pH值參數(shù)范圍相關(guān)。紅霉素A是pKa為8.6的弱堿，其在溶液中的成鹽或游離與溶液pH值直接相關(guān)[9]。成鹽率的測定能反應(yīng)各企業(yè)生產(chǎn)工藝控制水平，乳糖酸紅霉素制備反應(yīng)終止的pH值是關(guān)鍵工藝參數(shù)。

3.3.4 鈉離子含量測定

注射用乳糖酸紅霉素制劑中鈉離子含量與生產(chǎn)工藝、玻璃包材相關(guān)，參比制劑說明書及文獻(xiàn)[10]均提示鈉離子的存在影響制劑的復(fù)溶過程。參比制劑的鈉離子含量僅為4.3 ppm，國內(nèi)制劑的鈉含量依次為A企業(yè)（11.9 ppm）、B企業(yè)（83.5 ppm）、D企業(yè)（245.6 ppm）及C企業(yè)（288.2 ppm）。結(jié)合國內(nèi)制劑生產(chǎn)工藝，分析鈉離子可能源于乳糖酸鈉經(jīng)離子交換制備乳糖酸工藝及冷凍干燥過程可能的鈉鈣玻璃包材的轉(zhuǎn)移。參比制劑包材采用中硼硅玻璃，企業(yè)A和C采用鈉鈣玻璃，企業(yè)B和D采用低硼硅玻璃。按注射劑一致性評價(jià)技術(shù)要求及玻璃包材對極冷耐受性考量[11]，建議采用冷凍干燥生產(chǎn)工藝的B、C、D 3家企業(yè)檢查制備的乳糖酸藥液中鈉離子含量，酌情采用中硼硅玻璃包材。

3.3.5 HPLC法測定有關(guān)物質(zhì)

目前注射用乳糖酸紅霉素的有關(guān)物質(zhì)譜主要涉及13種已知雜質(zhì)[2，12]。基于文獻(xiàn)和現(xiàn)有的標(biāo)準(zhǔn)方法，優(yōu)化建立了新的有關(guān)物質(zhì)測定方法（見“2.2.5”），典型的系統(tǒng)適用性圖譜見圖4。包括參比制劑在內(nèi)的5種制劑的有關(guān)物質(zhì)檢測結(jié)果見圖5。各制劑雜質(zhì)總量檢出范圍為2.24%～3.29%，由低到高依次為C企業(yè)、D企業(yè)、參比制劑、A企業(yè)、B企業(yè)。國內(nèi)制劑的雜質(zhì)譜主要涉及雜質(zhì)A、B、C、D、E及F，主要雜質(zhì)為前三者。雜質(zhì)E的檢出量A企業(yè)制劑最高（0.85%），顯著高于參比制劑（0.05%）、C企業(yè)（0.06%）、D企業(yè)（0.10%）及B企業(yè)（0.21%）。與參比制劑比較，國內(nèi)制劑有關(guān)物質(zhì)總量、已知雜質(zhì)含量、未知雜質(zhì)含量都符合現(xiàn)行EP10.0標(biāo)準(zhǔn)[2]的限度要求。新建HPLC方法對已知雜質(zhì)檢出由2種增加至6種，已知、未知及雜質(zhì)總量檢出值均高于現(xiàn)行法定標(biāo)準(zhǔn)。

基于乳糖酸紅霉素對照品的酸、堿、氧化、高溫、光照等因素強(qiáng)制降解實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，乳糖酸紅霉素主要對酸、堿、高溫不穩(wěn)定。酸性破壞條件雜質(zhì)E、雜質(zhì)D增大最明顯，雜質(zhì)F、雜質(zhì)D在堿性破壞條件下增大最明顯，高溫破壞導(dǎo)致雜質(zhì)E增加。文獻(xiàn)報(bào)道雜質(zhì)A、B、C主要為紅霉素原料來源，降解雜質(zhì)D、E和F可作為注射用乳糖酸紅霉素生產(chǎn)工藝優(yōu)化的質(zhì)控指標(biāo)[12-13]。

結(jié)合各企業(yè)制劑有關(guān)物質(zhì)的檢出結(jié)果及可獲得的工藝參數(shù)，采用噴霧干燥工藝生產(chǎn)的A企業(yè)制劑中雜質(zhì)E含量顯著高于采用冷凍干燥工藝企業(yè)的制劑，分析與噴霧干燥工藝溫度≥65℃的高溫因素相關(guān)，雜質(zhì)E含量的測定可用于A企業(yè)生產(chǎn)工藝的改進(jìn)。

3.3.6 HPLC法測定含量

紅霉素A、紅霉素B、紅霉素C對照品效價(jià)標(biāo)定結(jié)果和混合對照品效價(jià)測定及估測結(jié)果見表2。紅霉素A、紅霉素B組分效價(jià)值約為紅霉素C組分的3倍。假設(shè)紅霉素A、紅霉素B及紅霉素C 3組分對短小芽胞桿菌的抗菌活性無交互作用，3組分混合對照品的效價(jià)測定值與按組分間無相互作用的理論計(jì)算值比較，可基本確認(rèn)3組分的抗菌活性無交互作用。因而，基于紅霉素A、紅霉素B、紅霉素C的理論效價(jià)（純品效價(jià)）1002.9、985.5和303.7紅霉素單位/毫克，可利用3組分含量測值進(jìn)行樣品效價(jià)值的估測。

基于新建HPLC方法，采用對照品溶液利用外標(biāo)法按峰面積計(jì)算供試品溶液中紅霉素A、B及C 3組分含量（mg/mL）。包括參比制劑在內(nèi)的共21批次樣品中紅霉素A、B及C組分含量（%）利用公式1計(jì)算的結(jié)果見表3。

供試品紅霉素組分含量（%）=紅霉素組分含量（mg/mL）×供試品稀釋倍數(shù)×折算系數(shù)×[1-供試品水分（%）]×100/供試品稱樣量（mg）（1）

其中，紅霉素A、B及C 3組分對應(yīng)的折算系數(shù)為1.4877、1.4986及1.4972[2]。

依據(jù)各組分標(biāo)定效價(jià)值及HPLC方法測定含量值計(jì)算注射用乳糖酸紅霉素樣品的估測效價(jià)值，計(jì)算公式為：

估測效價(jià)（紅霉素單位/毫克）=紅霉素A理論效價(jià)×紅霉素A含量（%）+紅霉素B理論效價(jià)×紅霉素B含量（%）+紅霉素C理論效價(jià)×紅霉素C含量（%）? ? ? ? ? ? ? ?（2）

樣品的估測效價(jià)值與依據(jù)抗生素微生物檢定法測定的效價(jià)值結(jié)果比較見表4。樣品效價(jià)實(shí)測值為（641±9）紅霉素單位/毫克（n=21），估測效價(jià)值（637±10）紅霉素單位/毫克（n=21）。統(tǒng)計(jì)學(xué)配對t檢驗(yàn)結(jié)果t值為1.30，雙側(cè)P值為0.20，單側(cè)為0.10，均大于0.05；提示樣品效價(jià)實(shí)測值與基于含量測定結(jié)果的估測值無顯著差異，新建HPLC方法進(jìn)行含量測定可行[14-15]。

4 結(jié)論

本次國家評價(jià)性抽驗(yàn)采用前期調(diào)研、文獻(xiàn)檢索、法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)結(jié)合探索性研究的方式對注射用乳糖酸紅霉素的質(zhì)量現(xiàn)狀進(jìn)行評價(jià)和分析。按照法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)，80批次樣品均合格，合格率為100%，國產(chǎn)注射用乳糖酸紅霉素總體質(zhì)量較好。

在探索性研究中，發(fā)現(xiàn)國內(nèi)仿制制劑與原研參比制劑在復(fù)溶時(shí)間、粒徑分布、顆粒形貌、成鹽率及有關(guān)物質(zhì)等關(guān)鍵質(zhì)量屬性方面存在差異。原研參比制劑的復(fù)溶時(shí)間低于國內(nèi)仿制制劑，國內(nèi)仿制制劑多批次產(chǎn)品間成鹽率值波動大。此外鈉離子含量參比制劑顯著低于國內(nèi)制劑。采用噴霧干燥工藝的A企業(yè)制劑雜質(zhì)E顯著高于采用冷凍干燥工藝的制劑。上述質(zhì)量屬性差異提示，國內(nèi)企業(yè)需進(jìn)一步優(yōu)化生產(chǎn)工藝以提升產(chǎn)品質(zhì)量。

現(xiàn)行注射用乳糖酸紅霉素《中國藥典》標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)物質(zhì)檢測方法需要提升，含量測定方法可以用HPLC方法測定紅霉素A、紅霉素B及紅霉素C組分替代抗生素微生物檢定法。

參 考 文 獻(xiàn)

李大魁， 金有豫， 湯光， 等譯. Sweetman S C 主編. 馬丁代爾藥物大典（原著第37版）[S]. 北京： 化學(xué)工業(yè)出版社， 2014， 256-260.

The European Pharmacopoeia Commission. European Pharmacopoeia10.0[S]. 2020： 2533-2536.

The United States Pharmacopeial Convention. United States Pharmacopeia[S]. 42th Edition. 2019： 1668.

Bosschea L V， Lodib A， Schaarc J， et al. An interlaboratory study on the suitability of a gradient LC-UV method as a compendial method for the determination of erythromycin and its related substances[J]. J Pharmaceut Biomed， 2010， 53： 109-112.

國家藥品監(jiān)督管理總局. 化學(xué)藥品注射劑仿制藥質(zhì)量和療效一致性評價(jià)技術(shù)要求[S]. 2019.

胡昌勤. 對抗生素注射劑一致性評價(jià)/再評價(jià)的思考[J]. 中國抗生素雜志， 2019， 44（3）： 281-288.

Hiwale P， Amin A， Kumar L， et al. Variables affecting reconstitution time of dry powder for injection[J]. Pharm Tech， 2008， 32（7）： 62-68.

蓋榮銀， 趙同新， 姚勁挺， 等. 注射用粉末劑型仿制藥一致性評價(jià)關(guān)鍵技術(shù)要點(diǎn)解析[J]. 中國醫(yī)藥工業(yè)雜志， 2019， 50（2）： 226-228.

劉昌勝， 鄔行彥. 紅霉素在幾種緩沖液中的溶解度[J]. 中國抗生素雜志， 1995， 20（1）： 17-19.

王新宇， 蔣睿， 張艷仙. 乳糖酸紅霉素溶媒選擇分析[J]. 中國處方藥， 2021， 19（1）： 42-43.

陳婧， 希迪·莫蘇拉， 楊宗蕊. 中性硼硅玻璃與藥物相容性研究進(jìn)展[J]. 包裝工程， 2021， 42（10）： 37-43.

劉聰. 紅霉素類抗生素相關(guān)物的制備及有關(guān)反應(yīng)方法學(xué)的研究[D]. 北京理工大學(xué)， 2014： 5-7.

武建卓， 李雪， 張蔚， 等. 國產(chǎn)紅霉素腸溶片的質(zhì)量分析[J]. 中國抗生素雜志， 2019， 44（3）： 308-312.

趙述強(qiáng)， 趙衛(wèi)， 史孫亮， 等. 改進(jìn)高效液相色譜法測定硫酸奈替米星注射液含量[J]. 中國抗生素雜志， 2018， 43（10）： 1217-1221.

黃敏文， 侯玉榮， 張倩， 等. 高效液相色譜-脈沖安培電化學(xué)檢測器法替代微生物檢定法測定硫酸新霉素效價(jià)的研究[J]. 中國藥學(xué)雜志， 2020， 55（2）： 133-140.