張政，邰亮，王林，戚培培

摘 要：目的：對(duì)果蔬汁中殘留的甲拌磷農(nóng)殘用氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用法進(jìn)行定量分析。方法：樣品經(jīng)過(guò)QuEChERS前處理，濃縮定容后進(jìn)樣，利用GC-MS在MRM掃描模式下分析測(cè)定，利用目標(biāo)化合物特征離子呈現(xiàn)的相對(duì)豐度比及存留時(shí)間，用內(nèi)標(biāo)方法定量。結(jié)果：在甲拌磷標(biāo)液濃度范圍0.005～0.100 μg·mL-1，相關(guān)系數(shù)R2的值0.999 9，方法的檢出限為0.001 9 mg·kg-1，定量限為0.010 0 mg·kg-1，0.05～0.20 mg·kg-1添加水平時(shí)，平均回收率82.7%～94.9%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差1.04%～1.43%（n=6）。結(jié)論：該方法快速、高效、準(zhǔn)確，滿足測(cè)定果蔬汁中甲拌磷的要求。

關(guān)鍵詞：果蔬汁；甲拌磷；氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用；內(nèi)標(biāo)法測(cè)定

Determination of Phorate in Fruit and Vegetable Juices by Gas Chromatography-Triple Quadrupole Mass Spectrometry

ZHANG Zheng， TAI Liang， WANG Lin ， QI Peipei

（Baoying Comprehensive Inspection and Testing Center of Product Quality， Yangzhou 225800， China）

Abstract： Objective： To quantitatively analyze phorate residues in fruit and vegetable juice by gas chromatography triple quadrupole mass spectrometry. Method： The samples were pretreated by QuEChERS， concentrated and fixed volume before injection， analyzed and determined by GC-MS in MRM scanning mode， and quantified by internal standard method using the relative abundance ratio and retention time of target compound characteristic ions. Result： Concentration range of phorate standard solution is 0.005～0.100 μg·mL-1， the value of correlation coefficient R2 is 0.999 9， the detection limit of the method is 0.001 9 mg·kg-1， the limit of quantitation is 0.010 0 mg·kg-1， the average recovery is 82.7%～94.9%， and the relative standard deviation is 1.04%～1.43% （n=6） at the addition level of 0.05～0.20 mg·kg-1. Conclusion： The method is rapid， efficient and accurate， and can meet the requirements for the determination of phorate in fruit and vegetable juice.

Keywords： fruit and vegetable juices; phorate; gas chromatography-triple quadrupole mass spectrometer; internal standard determination

果蔬汁能為人體有效補(bǔ)充豐富的礦物質(zhì)以及多種維生素，增加膳食纖維，增強(qiáng)人體細(xì)胞活力。但是，作為原材料的蔬菜瓜果，在種植過(guò)程中不可避免地會(huì)接觸到各種農(nóng)藥，會(huì)對(duì)消費(fèi)者健康產(chǎn)生威脅，引發(fā)潛在的食品安全問(wèn)題[1]。甲拌磷[2]，化學(xué)名稱(chēng)O，O-二乙基-S-（乙硫基甲基）二硫代磷酸酯，是一種劇毒的有機(jī)化合物，廣泛用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中。為保障農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量以及人身健康安全，探索出一種準(zhǔn)確、高效的甲拌磷檢測(cè)方法十分必要。

根據(jù)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》（GB 23200.113—2018），氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用法在進(jìn)行目標(biāo)分析時(shí)具備出色的穩(wěn)定性、高性能和靈敏度，以氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用法為基礎(chǔ)建立甲拌磷的檢測(cè)、評(píng)定分析方法，可以得到滿意的結(jié)果[3]。

1 材料與方法

1.1 樣品、試劑耗材和儀器

樣品：果蔬汁，能力考核樣品（大連中食提供）。

試劑耗材：乙腈（分析純）；乙酸乙酯（色譜純）；丙酮（分析純）；萃取鹽包（4 g硫酸鎂+1 g氯化鈉+1 g檸檬酸鈉+0.5 g檸檬酸氫二納）；15 mL凈化管（885 mg硫酸鎂+150 mg PSA+15 mg GCB）；陶瓷均質(zhì)子和50 mL萃取管，其他實(shí)驗(yàn)室內(nèi)常用玻璃儀器及耗材。

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 μg·mL-1，證書(shū)編號(hào)BW900752-100-A，壇墨質(zhì)檢）；環(huán)氧七氯B標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 μg·mL-1，證書(shū)編號(hào)CDAA-S-411017-MA，安譜）。

儀器：氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀（設(shè)備編號(hào)US2029U301，規(guī)格型號(hào)8890/7000D，安捷倫），配有電子轟擊源（EI）；渦旋振蕩器（規(guī)格型號(hào)MS digtal，IKA）；快速冷凍離心機(jī)（規(guī)格型號(hào)BIOFUGE，賽默飛）；十萬(wàn)分之一分析天平、水浴氮?dú)獯蹈蓛x等實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)儀器。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品Q(chēng)uEChERS前處理

稱(chēng)取10 g果蔬汁能力驗(yàn)證的樣品，放入塑料萃取管里面（50 mL），移液管移取乙腈10 mL加入，再向管內(nèi)加入1份萃取鹽包后蓋上管蓋，猛烈振蕩后離心，離心機(jī)設(shè)定的速度為4 200 r·min-1，萃取管放入機(jī)器中5 min后取出。離心完畢后，吸取6 mL上清液加入15 mL凈化管內(nèi)，渦旋振蕩器上渦旋混勻

1 min。萃取管再次放入機(jī)器5 min后取出。離心完畢后，吸取2 mL上清液加入10 mL試管中，置于水浴氮?dú)獯蹈蓛x中，設(shè)定溫度40 ℃條件下氮?dú)獯抵两?。加?0 μL的內(nèi)標(biāo)環(huán)氧七氯溶液，加入1 mL乙酸乙酯再次溶解，混勻后過(guò)有機(jī)相濾膜，待進(jìn)樣。另取試劑空白，除不加試料，其他均按上述步驟平行操作[4]。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

環(huán)氧七氯B標(biāo)準(zhǔn)溶液（5 μg·mL-1）：準(zhǔn)確稱(chēng)取環(huán)氧七氯B固體10 mg，利用10 mL的容量瓶，加入乙酸乙酯稀釋成內(nèi)標(biāo)溶液（5 μg·mL-1）。

甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)中間液（100 μg·mL-1）：準(zhǔn)確移取甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1 000 μg·mL-1）1 mL于10 mL容量瓶中，乙酸乙酯定容；甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)溶液（10 μg·mL-1）：準(zhǔn)確移取甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)中間液（100 μg·mL-1）1 mL于1個(gè)10 mL容量瓶中，乙酸乙酯定容。

甲拌磷系列標(biāo)準(zhǔn)工作液：吸取甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)溶液（10 μg·mL-1）5 μL、10 μL、20 μL、50 μL、100 μL于10 mL容量瓶中，乙酸乙酯定容，配制成含甲拌磷濃度為0.005 μg·mL-1、0.010 μg·mL-1、0.020 μg·mL-1、0.050 μg·mL-1、0.100 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

空白基質(zhì)溶液氮吹至近干，加入20 μL內(nèi)標(biāo)液，分別加入1 mL甲拌磷系列標(biāo)準(zhǔn)工作液復(fù)溶，分別用一次性注射器過(guò)濾膜，配制成含有甲拌磷的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液[5]，等待進(jìn)入GC-MS測(cè)定。根據(jù)所測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程。

1.2.3 氣相色譜-質(zhì)譜條件設(shè)定

色譜柱：HP-5ms（15 m×0.250 mm，0.25 μm，產(chǎn)品序列號(hào)US0628013A）2根串聯(lián)；色譜柱程序升溫：柱溫40 ℃（1 min，40 ℃·min-1）→120 ℃（0 min，5 ℃·min-1）→240 ℃（0 min，12 ℃·min-1）→300 ℃（6 min）；載氣：氦氣濃度≥99.999%，氣體色譜柱內(nèi)流速1.0 mL·min-1；進(jìn)樣口：280 ℃；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣量：1 μL；離子加速器：280 ℃；離子傳輸線：280 ℃；EI：70 eV；甲拌磷定量離子對(duì)260.0、75.0，碰撞電壓5 V，定性離子對(duì)230.9、128.9，碰撞電壓25 V；環(huán)氧七氯B定量離子對(duì)352.8、262.9，碰撞電壓15 V，定性離子對(duì)354.8、264.9，碰撞電壓15 V。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)曲線性、方法檢出限和定量限

本次實(shí)驗(yàn)甲拌磷系列標(biāo)準(zhǔn)工作液為0.005 μg·mL-1、0.010 μg·mL-1、0.020 μg·mL-1、0.050 μg·mL-1、0.100 μg·mL-1，相關(guān)系數(shù)R2的值達(dá)到了0.999 9，線性良好，滿足線性要求。線性圖譜見(jiàn)圖1。

由信噪比計(jì)算公式S/N=3和S/N=10可分別得到方法的檢出限和定量限。經(jīng)過(guò)計(jì)算得出，當(dāng)稱(chēng)樣量為10.00 g，定容體積為1 mL時(shí)，該方法的檢出限為0.001 9 mg·kg-1，定量限為0.010 0 mg·kg-1。

2.2 精密度與回收率平行實(shí)驗(yàn)結(jié)果

通過(guò)向果蔬汁空白樣品中添加一定量的甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)溶液，以此來(lái)計(jì)算本方法的回收率與精密度。添加體積分別為0.05 mL、0.10 mL、0.20 mL的甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 μg·mL-1），添加水平分別為0.05 μg、0.10 μg、0.20 μg，按照本方法前處理重復(fù)6次平行實(shí)驗(yàn)，計(jì)算公式為

P=5C×V/（C0×V0）×100%（1）

式中：P為回收率，%；C為測(cè)得試樣中甲拌磷的含量，μg·mL-1；5為稀釋倍數(shù)；V為檢驗(yàn)樣品定容體積，mL；C0為加入標(biāo)液的濃度，μg·mL-1；V0為加入標(biāo)液的體積，mL。

測(cè)得甲拌磷在添加水平為0.05～0.20 mg·kg-1時(shí)，平均回收率在82.7%～94.9%，標(biāo)準(zhǔn)偏差系數(shù)，即精密度在1.04%～1.43%?；厥章实臄?shù)值和精確度的數(shù)值如表1所示。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)建立了果蔬汁中甲拌磷測(cè)定的氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)方法。多次實(shí)驗(yàn)表明，本方法快速、高效、準(zhǔn)確，對(duì)于果蔬汁試樣中甲拌磷提取效果較好，標(biāo)曲線性良好，定量限、檢出限、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差、回收率等技術(shù)指標(biāo)均達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求，滿足對(duì)甲拌磷分析檢測(cè)需要。

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