洪安瀾 林 彤

1中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院皮膚病醫(yī)院(研究所)激光科，江蘇南京，210042;2中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院皮膚病醫(yī)院(研究所)江蘇省皮膚病與性病分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇南京，210042

瞬時(shí)受體電位(transient receptor potential, TRP)通道超家族是廣泛表達(dá)于多種細(xì)胞膜的一類重要的非選擇性陽(yáng)離子通道，接受溫度、光、機(jī)械損傷、化學(xué)物質(zhì)、細(xì)胞因子、滲透壓和pH值改變等刺激，介導(dǎo)鈣離子為主的陽(yáng)離子內(nèi)流，發(fā)揮多種生理病理功能。TRP通道在皮膚多種細(xì)胞表達(dá)，包括感覺(jué)神經(jīng)細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞、黑素細(xì)胞和免疫炎癥細(xì)胞等，參與感覺(jué)、皮膚穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)、黑素合成、創(chuàng)面愈合等生理過(guò)程，也參與免疫炎癥、瘙癢疼痛、屏障受損和皮膚癌變等病理過(guò)程。TRP通道家族具有功能多樣性且有藥理學(xué)上可結(jié)合的位點(diǎn)，使其有望成為皮膚疾病的治療靶點(diǎn)[1]。近年來(lái)大量研究表明，TRP通道與玫瑰痤瘡、特應(yīng)性皮炎、銀屑病等炎癥性皮膚病的發(fā)生發(fā)展有密切聯(lián)系，現(xiàn)就TRP通道在多種炎癥性皮膚病中的作用研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 與炎癥性皮膚病密切相關(guān)的TRP通道

根據(jù)蛋白的氨基酸序列和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)差異，TRP通道在哺乳動(dòng)物中被分為六個(gè)亞家族: 經(jīng)典瞬時(shí)受體電位(TRP canonical, TRPC)、瞬時(shí)受體電位香草酸亞型(TRP vanilloid, TRPV)、瞬時(shí)受體電位錨蛋白(TRP ankyrin, TRPA)、M型瞬時(shí)受體電位(TRP melastatin, TRPM)、多囊蛋白類瞬時(shí)受體電位(TRP polycystin, TRPP)和黏脂質(zhì)類瞬時(shí)受體電位(TRP mucolipin, TRPML)[1]。

TRPV家族是能被香草醛、香草酸等激活的熱感受TRP通道，有6個(gè)成員，其中TRPV1-4是非選擇性陽(yáng)離子通道，在許多神經(jīng)元及非神經(jīng)元細(xì)胞均有表達(dá)，可感知并轉(zhuǎn)導(dǎo)傷害性信號(hào)。TRPV1被43攝氏度以上、辣椒素、酸、前列腺素和組胺等激活，在神經(jīng)元中常與TRPA1共表達(dá)整合傷害性刺激，誘發(fā)神經(jīng)源性炎癥；TRPV1與TRPA1也出現(xiàn)在角質(zhì)形成細(xì)胞、黑素細(xì)胞、肥大細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞中，起加強(qiáng)炎癥、調(diào)節(jié)表皮細(xì)胞生長(zhǎng)分化、促黑素生成等作用[2，3]。TRPV2在高于52℃、滲透壓刺激和機(jī)械拉伸時(shí)被激活，也參與炎癥反應(yīng)，但確切功能有待進(jìn)一步研究[4]。TRPV3在超過(guò)34攝氏度時(shí)被激活，也可被樟腦、前列腺素E2、三磷酸腺苷、緩激肽和組胺等激活，參與促炎信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、表皮屏障修復(fù)和毛發(fā)生成等作用[5，6]。TRPV4在高于27℃、機(jī)械刺激、低滲條件和花生四烯酸代謝產(chǎn)物等作用下被激活，與急慢性瘙癢有關(guān)[7]，角質(zhì)形成細(xì)胞的TRPV4亦參與皮膚屏障的形成和修復(fù)[8]。

TRPA1是哺乳動(dòng)物TRPA家族的唯一成員，低于17℃時(shí)被激活，還可由機(jī)械刺激、香料化合物及內(nèi)源性炎癥介質(zhì)等激活[9]。感覺(jué)神經(jīng)元的TRPA1介導(dǎo)神經(jīng)源性炎癥，非神經(jīng)元細(xì)胞的TRPA1也參與部分炎癥和瘙癢的誘導(dǎo)[10]。哺乳動(dòng)物TRPM家族有8名成員，TRPM8是冷覺(jué)的主要感受器，低于22攝氏度時(shí)被激活，是薄荷醇的受體[2]。TRPM8也同時(shí)存在于神經(jīng)元和角質(zhì)形成細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等非神經(jīng)元細(xì)胞，激活TRPM8可抑制皮膚炎癥、參與冷暖感覺(jué)、調(diào)節(jié)血管收縮、促進(jìn)皮膚屏障修復(fù)等[11]。

2 不同的炎癥性皮膚病中TRP通道的作用

2.1 TRP通道與玫瑰痤瘡 玫瑰痤瘡是一種常見(jiàn)的炎癥性皮膚病，表現(xiàn)為面部潮紅、毛細(xì)血管擴(kuò)張和面中部炎性丘疹膿皰、肥大增生，其誘因包括日曬、冷熱刺激、酒精、辛辣食物、運(yùn)動(dòng)等。玫瑰痤瘡發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，固有免疫異常、皮膚微生物群失衡、神經(jīng)血管失調(diào)等可能與之相關(guān)。

研究發(fā)現(xiàn)，玫瑰痤瘡患者皮損處感覺(jué)神經(jīng)元、角質(zhì)形成細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞及免疫細(xì)胞中TRP通道密度均較健康皮膚增加，引起玫瑰痤瘡患者面部敏感的溫度和化學(xué)刺激閾值降低[12]。玫瑰痤瘡皮損中高表達(dá)的TRPV1和TRPA1等受體被各種刺激激活后引起感覺(jué)神經(jīng)末梢釋放P物質(zhì)和降鈣素基因相關(guān)肽等介質(zhì)，誘發(fā)神經(jīng)源性炎癥，引起血管功能失調(diào)和傷害性感受[13]。在抗菌肽LL-37誘導(dǎo)的玫瑰痤瘡小鼠模型中，TRPV2和TRPV4也出現(xiàn)高表達(dá)，LL-37可激活蛋白偶聯(lián)受體Mas相關(guān)基因X2，其通過(guò)白喉毒素敏感的G蛋白受體激活TRPV2和TRPV4，使兩者在肥大細(xì)胞中表達(dá)增加，大量陽(yáng)離子內(nèi)流，誘發(fā)肥大細(xì)胞脫顆粒釋放炎癥和神經(jīng)介質(zhì)，抑制TRPV2和TRPV4則可抑制肥大細(xì)胞功能，減輕玫瑰痤瘡的炎癥和痛癢感覺(jué)[14]。TRPV3在玫瑰痤瘡所有亞型中表達(dá)均增加，通過(guò)調(diào)節(jié)角質(zhì)形成細(xì)胞和肥大細(xì)胞功能參與炎癥和傷害性感受，通過(guò)誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞的免疫反應(yīng)參與在肥大增生型玫瑰痤瘡的纖維化增生[12]。因此，TRPV1-4和TRPA1通道的失調(diào)均可能參與玫瑰痤瘡的發(fā)病機(jī)制，有望成為其治療的作用靶點(diǎn)。

2.2 TRP通道與特應(yīng)性皮炎 特應(yīng)性皮炎(atopic dermatitis, AD)是一種慢性復(fù)發(fā)性炎癥性皮膚病，臨床表現(xiàn)為皮膚干燥瘙癢及復(fù)發(fā)性濕疹樣皮損。AD病因尚未完全闡明，可能與遺傳、環(huán)境、皮膚屏障破壞和免疫異常等有關(guān)。

多種TRP通道均與AD發(fā)病機(jī)制相關(guān)。AD患者皮損中TRPA1和TRPV1表達(dá)明顯高于對(duì)照組[15]。在體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)中阻斷TRPV1，不僅加速皮膚屏障功能恢復(fù)，還可緩解多種皮炎表現(xiàn)，包括皮膚紅腫、小鼠搔抓行為、血清IgE升高和肥大細(xì)胞脫顆粒等[16]。另有研究發(fā)現(xiàn)，多種Th2細(xì)胞因子通過(guò)TRP通道介導(dǎo)AD：IL-13可增強(qiáng)TRPV1和TRPA1的表達(dá)引發(fā)小鼠搔抓；IL-31在AD皮損中顯著升高，通過(guò)激活TRPA1、TRPV1和TRPV3誘導(dǎo)瘙癢；胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素可激活A(yù)D患者皮膚感覺(jué)神經(jīng)元的TRPA1，增加其表達(dá)，提示干擾Th2免疫反應(yīng)對(duì)TRP通道的調(diào)控可能有助于治療AD[17]。葡糖鞘氨醇是一種內(nèi)源性鞘脂，在AD患者表皮中有大量積累，研究發(fā)現(xiàn)其可通過(guò)小鼠感覺(jué)神經(jīng)元中的5-羥色胺受體和TRPV4受體介導(dǎo)瘙癢[18]。

2.3 TRP通道與銀屑病 銀屑病是一種常見(jiàn)的慢性炎癥性皮膚病，典型表現(xiàn)為皮膚境界清楚的紅色斑塊上覆厚層銀白色鱗屑。其確切病因尚不清楚，可能由遺傳、內(nèi)外環(huán)境、免疫因素等相互作用所致。

多種TRP通道與銀屑病的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。TRPA1、TRPV1和TRPV3在銀屑病皮損中過(guò)表達(dá)且與瘙癢程度正相關(guān)，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)TRPV1敲除組和TRPA1敲除組相較對(duì)照組銀屑病小鼠的銀屑病臨床評(píng)分、經(jīng)表皮水分丟失評(píng)分、表皮增生程度、Munro微膿腫面積和血管增生均顯著降低，皮膚炎癥和屏障受損減輕；TRPV1敲除組和TRPA1敲除組皮損處CD45+白細(xì)胞、肥大細(xì)胞和CD3+T細(xì)胞浸潤(rùn)均減少，炎癥因子IL-1β、IL-6、IL-23表達(dá)水平降低[19，20]，提示TRPV1與TRPA1在銀屑病樣炎癥中發(fā)揮關(guān)鍵作用。但有研究發(fā)現(xiàn)相反的結(jié)果，在銀屑病小鼠中抑制TRPA1后銀屑病樣皮炎表型增加，提示TRPA1可能也介導(dǎo)銀屑病樣皮炎的保護(hù)作用[21]。TRPV3參與銀屑病的炎癥、瘙癢和皮膚屏障功能異常[5]。TRPV4也調(diào)節(jié)皮膚屏障功能，參與角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖分化，同樣參與了銀屑病的發(fā)病[8]。

2.4 TRP通道與其他炎癥性皮膚病 TRP通道還在其他多種炎癥性皮膚病中發(fā)揮重要作用。

TRP通道介導(dǎo)接觸性皮炎。氫醌在臨床上多用于美白，但易引起皮膚刺激，研究發(fā)現(xiàn)TRPA1是氫醌引起皮膚刺激的靶點(diǎn)[22]。類似的，甲苯、二甲苯、肉桂醛等也通過(guò)刺激TRPA1引起接觸性皮炎[23]。TRPA1在接觸性皮炎相關(guān)的炎癥反應(yīng)和瘙癢的免疫與神經(jīng)機(jī)制整合中起重要作用，抑制TRPA1可減輕皮炎的水腫和瘙癢疼痛。除TRPA1外，TRPV1也介導(dǎo)接觸性皮炎，兩者都可直接激活瘙癢受體引發(fā)搔抓[24]。但有趣的是，TRPV1也可通過(guò)調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞免疫抑制皮膚炎癥[25]。

凍傷是皮膚暴露于寒冷環(huán)境中長(zhǎng)期血管收縮導(dǎo)致的皮膚缺血和潛在不可逆損傷。皮膚微血管系統(tǒng)中的TRPA1和TRPM8可作為血管冷感受器調(diào)節(jié)血管收縮，參與皮膚凍傷的形成[26]。

卟啉癥患者暴露陽(yáng)光下會(huì)產(chǎn)生灼痛，接受光動(dòng)力治療的患者也會(huì)產(chǎn)生類似的疼痛而限制治療。研究發(fā)現(xiàn)，紫外線和藍(lán)光可激發(fā)卟啉或光敏藥物產(chǎn)生單線態(tài)氧，經(jīng)氧化的TRPA1和TRPV1光敏性顯著提高，導(dǎo)致TRP通道依賴的促炎神經(jīng)肽釋放，使用TRPA1或TRPV1拮抗劑可有效緩解灼痛[27]。

3 與炎癥性皮膚病相關(guān)的TRP通道激動(dòng)劑和抑制劑

3.1 TRP通道激動(dòng)劑 冷感覺(jué)可以減輕瘙癢，因此激活TRPA1和TRPM8有助于緩解瘙癢。研究發(fā)現(xiàn)，皮內(nèi)注射TRPA1激動(dòng)劑可顯著抑制內(nèi)皮素-1引起的小鼠搔抓[28]。U73122是一種磷脂酶C抑制劑，近來(lái)發(fā)現(xiàn)其也是一種TRPA1強(qiáng)效選擇性激動(dòng)劑，為TRPA1靶向藥物的開(kāi)發(fā)提供了新思路[29]。大麻類藥物可作用于TRP通道受體，調(diào)節(jié)皮膚炎癥、疼痛和瘙癢，使用大麻類藥物WIN 55,212-2處理大鼠三叉神經(jīng)節(jié)可激活神經(jīng)元中的TRPA1，引發(fā)細(xì)胞外鈣離子內(nèi)流，激活鈣調(diào)磷酸酶，導(dǎo)致TRPV1去磷酸化而脫敏，從而抑制炎癥性疼痛，提示大麻類藥物可通過(guò)激活TRPA1減輕神經(jīng)元性炎癥及組織損傷[30]。

TRPM8是由冷和薄荷醇激活的離子通道，激活TRPM8可同時(shí)抑制組胺依賴和非依賴的瘙癢通路[31]。他克莫司是一種大環(huán)內(nèi)酯類免疫抑制劑，研究發(fā)現(xiàn)其部分抗過(guò)敏和止癢作用是通過(guò)激活TRPM8實(shí)現(xiàn)的[32]。百里香酚也可通過(guò)激活TRPM8治療銀屑病小鼠，注射藥物后皮損處中性粒細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞和Th17細(xì)胞浸潤(rùn)減輕，促炎因子減少，銀屑病樣皮損及瘙癢癥狀緩解[33]。一種TRPM8激動(dòng)劑Cryosim-1的外用凝膠已進(jìn)入臨床試驗(yàn)，隨機(jī)雙盲對(duì)照試驗(yàn)提示該藥物可迅速控制患者瘙癢癥狀，給藥后10 min內(nèi)起效，2 h后仍有作用，對(duì)迅速緩解蕁麻疹等瘙癢性疾病十分有效[34]。

辣椒素是一種外用TRPV1激動(dòng)劑，可激活TRPV1并使其脫敏，長(zhǎng)期以來(lái)被用于治療各類皮膚炎癥、疼痛和瘙癢，但辣椒素激活TRPV1帶來(lái)的灼燒感降低了患者的依從性，且由于辣椒素消除能力差，在皮膚長(zhǎng)期積累可能誘發(fā)癌變[35]，目前越來(lái)越多靶向調(diào)節(jié)TRPV1的新藥正在研發(fā)中，發(fā)揮療效的同時(shí)減少辣椒素的不良反應(yīng)。

3.2 TRP通道抑制劑 TRPV1可接受多種刺激，是疼痛通路中的重要傳感分子，已有諸多關(guān)于TRPV1抑制劑的研究。AG1529是正在研究的辣椒素類似物外用軟膏，通過(guò)抑制TRPV1緩解皮膚炎癥及瘙癢，由于不產(chǎn)生熱效應(yīng)，且皮膚酯酶可使其失活從而避免皮膚積累，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也無(wú)明顯刺激反應(yīng)，因此對(duì)局部治療瘙癢性炎癥性皮膚病有良好的臨床潛力[35]。Resolvins D3也是一種TRPV1抑制劑，在銀屑病小鼠中，單次系統(tǒng)給藥特異地降低TRPV1依賴的急性疼痛和瘙癢，反復(fù)系統(tǒng)給藥顯著降低神經(jīng)元中降鈣素基因相關(guān)肽的表達(dá)，減少銀屑病樣炎癥[36]。目前有部分TRPV1拮抗劑已進(jìn)入臨床試驗(yàn)，如PAC-14028，可緩解皮膚瘙癢和炎癥，修復(fù)皮膚屏障，已完成局部治療皮膚瘙癢、玫瑰痤瘡和AD的II期臨床試驗(yàn)[16]。除化學(xué)藥物外，物理治療也可經(jīng)TRPV1通道發(fā)揮療效，射頻輻照在體內(nèi)體外的玫瑰痤瘡模型中均可減少TRPV1活化及神經(jīng)肽釋放，減輕神經(jīng)肽誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞活化和炎癥分子表達(dá)，從而減輕TRPV1相關(guān)的燒灼感[37]。雖然有大量關(guān)于TRPV1拮抗劑的研究，但多數(shù)因提高患者的熱疼痛閾值導(dǎo)致體溫過(guò)高而被終止，尋找沒(méi)有這種不良反應(yīng)的新分子是目前開(kāi)發(fā)新TRPV1靶向藥的核心。

TRPA1拮抗劑在研發(fā)中尚未發(fā)現(xiàn)重大安全問(wèn)題，逐漸受到關(guān)注。GRC 17536是一種高效且可口服利用的TRPA1拮抗劑，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)了其緩解炎癥性和神經(jīng)性疼痛的作用，已進(jìn)入II期臨床試驗(yàn)。此外，還有多種TRPA1拮抗劑已申請(qǐng)專利并進(jìn)入臨床試驗(yàn)，包括ODM-108、HX-100、GDC-0334和CB-625等，然而由于以TRPA1為靶點(diǎn)的藥物開(kāi)發(fā)存在諸多藥物和藥代動(dòng)力學(xué)并發(fā)癥，許多研發(fā)都已停止，因此對(duì)于具有良好藥代動(dòng)力學(xué)的TRPA1拮抗劑還需進(jìn)一步研究[38]。

目前，靶向TRPV3的拮抗劑也受到越來(lái)越多關(guān)注。香豆素蛇床子素是蛇床子屬植物的主要活性成分，常用于治療皮膚炎癥瘙癢，研究發(fā)現(xiàn)蛇床子素通過(guò)選擇性抑制TRPV3發(fā)揮作用[39]。最近發(fā)現(xiàn)一種天然化合物連翹酯苷B，體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)都證實(shí)其能夠特異地抑制過(guò)度活躍的TRPV3，具有治療慢性瘙癢癥、皮膚過(guò)敏或炎癥相關(guān)皮膚病的潛力[40]。Han等[41]純化鑒定了一種吖啶酮生物堿citrusinine-II，是TRPV3的選擇性強(qiáng)抑制劑，對(duì)急慢性瘙癢均有緩解作用，小鼠皮內(nèi)注射幾乎完全抑制瘙癢行為，同時(shí)具有鎮(zhèn)痛作用，未發(fā)現(xiàn)明顯副作用，該研究目前已申請(qǐng)專利。

此外，關(guān)于TRPV4通道的靶向藥物也有一些研究?？肆_米通是一種常用的止癢劑，研究發(fā)現(xiàn)其止癢作用是通過(guò)抑制TRPV4實(shí)現(xiàn)的[42]。升麻素是一種中藥常用的止癢劑，呈劑量依賴地特異性抑制TRPV4相關(guān)的急性瘙癢，減輕銀屑病小鼠搔抓行為[43]。

另還有一些非選擇性TRP通道抑制劑。檸檬醛對(duì)TRPV1-3和TRPM8具有持久抑制效果，同時(shí)可暫時(shí)阻斷TRPV4和TRPA1[44]。釕紅是一種水溶性聚陽(yáng)離子染料，也是一種非選擇性TRP拮抗劑[45]。但目前這些非特異性通道阻滯劑已逐漸被更具選擇性的TRP拮抗劑所取代。

4 小結(jié)

炎癥性皮膚病在人群中發(fā)病率高，由于長(zhǎng)期反復(fù)且伴有痛癢的特點(diǎn)，嚴(yán)重影響人們的生活質(zhì)量。研究這類疾病的發(fā)病機(jī)制及開(kāi)發(fā)相應(yīng)治療藥物十分有意義。TRP通道在人類皮膚的多種細(xì)胞均有表達(dá)，通過(guò)引起細(xì)胞外鈣離子為主的陽(yáng)離子內(nèi)流廣泛參與皮膚生理病理過(guò)程，調(diào)控玫瑰痤瘡、銀屑病、AD、接觸性皮炎等炎癥性皮膚病的發(fā)生發(fā)展。

近年來(lái)靶向TRP通道的藥物研究正逐漸增多，可據(jù)此開(kāi)發(fā)抗炎止癢藥物、研究相關(guān)的離子通道疾病，具有廣闊前景。但由于目前TRP通道在皮膚中的具體作用機(jī)制尚未完全明確，靶向激活或抑制TRP通道的藥物在緩解炎癥瘙癢的同時(shí)常出現(xiàn)諸多藥物不良反應(yīng)和藥代動(dòng)力學(xué)并發(fā)癥。未來(lái)還需對(duì)TRP通道各亞型在皮膚不同類型細(xì)胞中的調(diào)控機(jī)制、TRP通道靶向藥物在疾病模型與實(shí)際臨床疾病中應(yīng)用的差異、系統(tǒng)應(yīng)用TRP通道調(diào)節(jié)劑時(shí)對(duì)其他組織的影響等問(wèn)題進(jìn)行更加深入的研究。