孫生禎，趙全邦，游瀟倩，闞 威，馬艷萍，張茂華，張曉英，曾戰(zhàn)壕

（青海省動物疫病預防控制中心，青海 西寧 810000）

獸醫(yī)實驗室作為動物疫病防控體系中的重要組成部分，對動物疫病的檢測診斷具有重要的支撐作用[1]。實驗室能力驗證是為確保實驗室維持較高的檢測水平而對其能力進行考核、監(jiān)督和確認的一種活動[2]。在獸醫(yī)實驗室能力驗證中，實驗室檢測能力比對作為當前常用的驗證方法和體現(xiàn)實驗室綜合能力的重要技術(shù)手段 , 直觀地反映了獸醫(yī)實驗室的質(zhì)量管理和生物安全水平。定期開展獸醫(yī)實驗室檢測能力比對，評估各級獸醫(yī)實驗室檢測能力，對獸醫(yī)實驗室的建設、運行及管理可起到促進和警示作用[3-5]。

組織全省動物疫病預防控制系統(tǒng)的實驗室參加檢測能力比對，是農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳獸醫(yī)局多年堅持的一項常規(guī)工作。2021 年9 月，青海省動物疫病預防控制中心按照中國動物疫病預防控制中心關于印發(fā)《2021 年省級獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對實施方案》的通知（農(nóng)牧便函【2021】76 號）要求，制定下發(fā)了《2021 年青海省州縣級獸醫(yī)實驗室檢測能力比對工作實施方案的通知》（青疫控【2021】44 號）[6-7]，組織全省47 個獸醫(yī)實驗室開展了檢測能力比對工作，要求在規(guī)定時間內(nèi)報送檢測結(jié)果。比對試驗結(jié)果總體上客觀反映了青海省省獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室的檢測能力和技術(shù)水平。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 比對范圍 全省8 個市（州）、39 個縣（市）動物疫控中心獸醫(yī)實驗室全部參加了能力比對工作。

1.1.2 比對項目 根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局關于開展2021 年獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對工作通知的相關要求，本中心制定了2021 年青海省州縣級獸醫(yī)實驗室檢測能力比對工作實施方案，本次比對市（州）級實驗室共設置了3 個比對項目，分別為非洲豬瘟病毒核酸檢測、高致病性禽流感H5/H7 亞型鑒別診斷和口蹄疫病毒O型抗體檢測，其中非洲豬瘟病毒核酸檢測和高致病性禽流感H5/H7 亞型鑒別診斷這兩項實驗各市（州）級根據(jù)當?shù)匾卟”O(jiān)測實際情況任選一項?？h（市、區(qū)）級實驗室共設置了4 個比對項目，分別為口蹄疫病毒O 型抗體檢測、布魯氏菌抗體檢測、細菌染色鏡檢和非洲豬瘟病毒核酸檢測。

1.1.3 比對樣品 非洲豬瘟配套盲樣血清樣品由青島立見生物有限公司制備與標定，高致病性禽流感配套盲樣血清樣品由哈爾濱國生生物科技股份有限公司制備與標定 , 口蹄疫配套盲樣血清樣品由中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所制備與標定，布魯菌配套盲樣血清樣品和細菌染色鏡檢所用樣品由本中心制備，所有盲樣經(jīng)省中心驗證后，由省動物疫病預防控制中心負責完成樣品的分裝和編號，并將樣品在統(tǒng)一時間發(fā)放給參與比對的各個實驗室，每個試驗項目設置盲樣5 份。

1.2 方法

1.2.1 比對方法 5 個檢測能力比對項目所均采用相應的國家現(xiàn)行標 準、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公布或推薦的檢測方法進行比對，具體見表1。

表1 比對試驗的方法和參考標準

1.2.2 結(jié)果評判標準 結(jié)果判定標準詳見表2。

表2 檢測項目結(jié)果判定標準

2 結(jié)果與分析

2.1 總體結(jié)果

全省8 個市（州）、39 個縣（市）動物疫控中心獸醫(yī)實驗室全部參加了能力比對，共檢測盲樣700 份，檢測結(jié)果準確559 份，總準確率為79.86 %（559/700），其中準確率為100 % 的實驗室有12 個，占參與比對實驗室總數(shù)的25.53 %（12/47），詳見表3。

表3 2021 年青海省獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室能力比對結(jié)果

2.2 非洲豬瘟病毒核酸檢測能力比對結(jié)果

共檢測盲樣70 份，結(jié)果準確69 份，準確率為98.57 %。14 個參與比對的實驗室中5 份盲樣檢測結(jié)果均準確的有13 個，占參與比對實驗室總數(shù)的92.86 %。

2.3 高致病性禽流感H5 亞型和H7 亞型鑒別診斷能力比對結(jié)果

8 個市（州）級獸醫(yī)實驗室只有黃南州選擇了該比對項目，共檢測盲樣5 份，結(jié)果準確2份，準確率為40 %。

2.4 口蹄疫病毒O 型抗體檢測能力比對結(jié)果

共檢測盲樣235 份，結(jié)果準確208 份，準確率為88.51 %。47 個參與比對的實驗室中5 份盲樣檢測結(jié)果均準確的有32 個，占參與比對實驗室總數(shù)的68.09 %。

2.5 布魯氏菌抗體檢測能力比對結(jié)果

共檢測盲樣195 份，結(jié)果準確127 份，準確率65.13 %。39 個參與比對的實驗室中5 份盲樣檢測結(jié)果均準確的有15 個，占參與比對實驗室總數(shù)的38.46 %。

2.6 細菌染色鏡檢能力比對結(jié)果

共檢測盲樣195 份，結(jié)果準確153 份，準確率78.46 %。39 個參與比對的實驗室中5 份盲樣檢測結(jié)果均準確的有21 個，占參與比對實驗室總數(shù)的53.85 %。

3 討論

3.1 比對項目設置緊貼本省實際

在比對項目設置上充分考慮重大動物疫病、人獸共患病與地方性流行疫病相結(jié)合；兼顧不同檢測方法的原則，既設置了口蹄疫病毒抗體檢測、布魯氏菌抗體檢測等傳統(tǒng)檢測項目，又按照當前疫情防控形勢設置了非洲豬瘟病毒核酸檢測和高致病性禽流感H5、H7 亞型鑒別診斷，同時根據(jù)各州級實驗室現(xiàn)有硬件設施情況，相同項目具體檢測方法也有所區(qū)別，對縣級實驗室設置了細菌染色鏡檢項目，以加強對基礎檢測方法的應用和能力提升。

3.2 市（州）級實驗室檢測準確率較高

比對結(jié)果顯示，8 個市（州）級實驗室總的檢測準確率達到了62.5 %，除3 個實驗室個別項目有偏差外，其余5 個實驗室準確率均達到100 %，表明本省市（州）級實驗室綜合檢測能力得到了持續(xù)提升。

3.3 縣級實驗室比對結(jié)果偏差較大

比對結(jié)果顯示，縣級實驗室準確率較低，39個實驗室準確率達到100 % 的只有7 個，尤其需要肉眼主觀判定的項目出現(xiàn)偏差較多，布魯氏菌病試管凝集實驗和細菌染色鏡檢項目準確率僅為65.13 % 和78.46 %，表明本省縣級實驗室檢測能力還普遍不高，這可能與人員技術(shù)水平提升慢、實際操作培訓工作滯后、部分實驗室硬件條件較差以及機構(gòu)改革所致的實驗室專業(yè)技術(shù)人員變動和崗位不足等因素有關。

3.4 重視程度和參與比對的積極性待進一步提高

個別實驗室未按通知要求按時領取檢測盲樣，雖然按時上報了比對結(jié)果，但個別實驗室在上報結(jié)果和檢測報告時出現(xiàn)馬虎和不規(guī)范現(xiàn)象，建議加強各級獸醫(yī)主管部門和動物疫控機構(gòu)對實驗室檢測能力比對工作的重視程度。

3.5 試劑的不統(tǒng)一對檢測能力比對有一定的影響

2022 年開始，能力比對的試劑由各參加比對的獸醫(yī)實驗室自行準備，各地采購的試劑生產(chǎn)廠家不一、判定方法、靈敏度、符合率都有一定的區(qū)別，對樣品檢測后結(jié)果的判定帶來一定的困難。

3.6 下一步工作建議

各地要結(jié)合近幾年來獸醫(yī)實驗室檢測能力比對情況，認真總結(jié)此次比對工作，深入分析，查找問題和不足，研究制定改進措施，狠抓落實，并建立健全實驗室體系文件，規(guī)范實驗室流程，進一步提升實驗室管理和運行水平。同時采取多種方式，注重實驗室質(zhì)量管理、生物安全管理、常見檢測技術(shù)和檢測結(jié)果分析等方面的培訓工作，保證人員技術(shù)和能力。各實驗室應高度重視實驗室檢測人員崗位設置工作，充實檢測隊伍，同時還要確保實驗室檢測人員的相對固定，確保實驗室工作的正常開展。

實驗室儀器設備陳舊老化，超期服役、靈敏性較差等現(xiàn)象在各級獸醫(yī)實驗室，尤其是縣級實驗室普遍存在，這也直接影響檢測的結(jié)果，只有把實驗室環(huán)境和硬件條件提升到能滿足各項試驗條件的前提下，才能得出準確科學的檢測結(jié)果。加強經(jīng)費投入。從近幾年考核、調(diào)研情況來看，各市（州）、縣（市）普遍缺少實驗室正常運轉(zhuǎn)經(jīng)費，實驗室水電暖、耗材、試劑購置、儀器設備更新、實驗室廢棄物無害化處理及人員培訓等運轉(zhuǎn)經(jīng)費都從省級轉(zhuǎn)移支付的動物防疫經(jīng)費中列支，加之近年來轉(zhuǎn)移支付持續(xù)減少，各地獸醫(yī)實驗室經(jīng)費缺乏，各地應加強向政府機構(gòu)、主管部門工作匯報、交流溝通，努力使實驗室正常運轉(zhuǎn)經(jīng)費從地方財政預算內(nèi)得到列支，并長期堅持，使之成為實驗室正常運轉(zhuǎn)的有效保證。