羅 錚，郭智超，呂曉琳，梁 吉，曹馨元，王 興，尹洪娜△

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150006)

中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Central nervous system,CNS)疾病可見(jiàn)腦或脊髓發(fā)生神經(jīng)元不可逆損傷，是中樞神經(jīng)組織病變的總稱(chēng)。針灸作為中醫(yī)學(xué)治療疾病的傳統(tǒng)方法之一，有調(diào)理氣血、疏通經(jīng)脈的作用，現(xiàn)代研究表明針刺對(duì)機(jī)體進(jìn)行調(diào)節(jié)可通過(guò)多個(gè)信號(hào)通路來(lái)實(shí)現(xiàn)，其中就包括炎癥體介導(dǎo)細(xì)胞焦亡的信號(hào)通路[1]。近年來(lái)，隨著人們對(duì)CNS疾病損傷機(jī)制的不斷深入研究，發(fā)現(xiàn)其致病原因雖然有很多，但炎癥小體介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡卻一直是研究的重難點(diǎn)課題。本研究通過(guò)NLRP3炎癥小體的組成、結(jié)構(gòu)功能、激活機(jī)制及其介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡信號(hào)通路對(duì)其在CNS中的作用方式進(jìn)行了系統(tǒng)的歸納總結(jié)。這為探尋針刺治療CNS疾病做出了理論鋪墊，有利于促成針刺在炎癥方面治療CNS疾病的新進(jìn)展。

1 NLRP3炎癥小體

1.1 炎癥小體概述

炎癥小體(Inflammasome)由Tschopp研究組于2002年首次提出[2]，是由接頭蛋白(ASC)、效應(yīng)蛋白(Caspase-1)和受體蛋白(PRR)共同組成的高蛋白復(fù)合體[3]，其作為機(jī)體的第一道保護(hù)屏障[4]，發(fā)揮著識(shí)別危險(xiǎn)信號(hào)和抵抗外來(lái)病原體的作用，病原及損傷相關(guān)分子模式(PAMPs、DAMPs)經(jīng)過(guò)PRR識(shí)別后，隨即參與免疫應(yīng)答，激活相關(guān)通路，最終誘發(fā)炎癥反應(yīng)[5]。PRRs家族體十分龐大，由NOD樣受體(NLR)、Toll樣受體(TLR)等多名成員共同組成。NLRP3炎癥小體則作為先天免疫傳感器參與炎癥反應(yīng)，在NLRs家族中處于核心地位，其釋放眾多炎性相關(guān)因子從而介導(dǎo)細(xì)胞焦亡，在CNS疾病中發(fā)揮著重要作用，未來(lái)將是課題組持續(xù)研究的焦點(diǎn)話題。

1.2 NLRP3炎癥小體的結(jié)構(gòu)功能

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)于NLRP-家族成員中研究最為深入的是NLRP3炎癥小體[6]，其作為先天免疫傳感器，能快速識(shí)別外源性病原體和內(nèi)源性細(xì)胞內(nèi)容物，參與許多疾病的免疫代謝過(guò)程，最終誘發(fā)炎癥反應(yīng)[7]。深入了解NLRP3炎癥小體的結(jié)構(gòu)功能便于探究其在CNS疾病炎癥通路中的作用機(jī)制，這也有助于為針刺治療CNS疾病提供新的治療靶點(diǎn)。NLRP3炎癥小體是由C-末端識(shí)別配體結(jié)構(gòu)域(LRRs)、中間端分管自身寡聚化結(jié)構(gòu)域(NOD domin,NACHT)和N-末端起募集作用的結(jié)構(gòu)域(PYD)[8]3部分共同組成。ASC由補(bǔ)充結(jié)構(gòu)域(Caspase recruitment domain,CARD)和PYD構(gòu)成，在感受到外界的危險(xiǎn)信號(hào)后，NLRP3炎癥小體通過(guò)ASC的PYD與其N(xiāo)端的PYD結(jié)合，形成PYD-PYD作用模式，再由ASC形成CARD-CARD作用形式，通過(guò)募集并激活pro-Caspase-1，使之成為Caspase-1，負(fù)責(zé)將pro-IL-1β和pro-IL-18剪切為IL-1β和IL-18，并迅速分泌釋放出來(lái)，實(shí)現(xiàn)激活感染部位的免疫細(xì)胞且發(fā)揮對(duì)病原體的清除作用，參與炎癥反應(yīng)[9]。若Caspase-1的過(guò)度活化，不斷剪切出成熟IL-18及IL-1β，則會(huì)出現(xiàn)過(guò)度炎癥反應(yīng)，最終誘發(fā)一系列的炎癥疾病，為此，對(duì)NLRP3炎癥小體激活機(jī)制深入研究，可更好地探究與之相關(guān)的CNS疾病發(fā)病機(jī)制，以完善相應(yīng)的防治策略。

1.3 NLRP3炎癥小體的激活機(jī)制

NLRP3炎癥小體實(shí)現(xiàn)激活有兩個(gè)預(yù)警信號(hào)，其一是啟動(dòng)信號(hào):Toll樣受體(TLR)或別的識(shí)別受體遇到炎癥刺激之后，開(kāi)啟NF-κB通路，引起NLRP3、pro-IL-1β的表達(dá)和轉(zhuǎn)錄[10]；第二個(gè)是激活信號(hào)：受不同PAMPs或者DAMPs轉(zhuǎn)導(dǎo)，促進(jìn)NLRP3、ASC和pro-Caspase-1的活化，實(shí)現(xiàn)致炎因子的成熟分泌[11]。另外，NLRP3炎癥小體可被不同刺激激活，但一些激活機(jī)制尚未十分明確，現(xiàn)已被廣泛研究并被普遍認(rèn)同的幾種機(jī)制主要包括離子通道的作用[12-14]、線粒體功能損傷引起ROS產(chǎn)生[15]和溶酶體損傷[16-17]。見(jiàn)圖1[18]。

圖1 NLRP3炎癥小體的起始步驟與激活步驟

2 細(xì)胞焦亡

2.1 細(xì)胞焦亡的概述

細(xì)胞焦亡是一種新發(fā)現(xiàn)的促炎程序性死亡方式，1992年首次被發(fā)現(xiàn)在志賀菌感染的巨噬細(xì)胞中[19]，直到2001年才由Cookson等正式提出[20]。焦亡的標(biāo)志性特征是細(xì)胞質(zhì)膜完整性喪失，膜上孔道形成，細(xì)胞出現(xiàn)脹大破裂最終釋放出炎性物質(zhì)誘發(fā)炎癥反應(yīng)[21]。

2.2 細(xì)胞焦亡的途徑

細(xì)胞焦亡主要有經(jīng)典和非經(jīng)典焦亡兩種途徑。前者是由細(xì)胞內(nèi)的PRR識(shí)別PAMPs或DAMPs樣刺激信號(hào)，在其感知危險(xiǎn)后激活，經(jīng)ASC和pro-Caspase-1結(jié)合成炎癥小體，釋放Caspase-1后切割pro-IL-18、pro-IL-1β成IL-18、IL-1β,最終促發(fā)炎癥反應(yīng)。同時(shí)，Caspase-1會(huì)切割消化道皮膚素D(Gasdermin D,GSDMD)，使其N(xiāo)末端整合到細(xì)胞膜上出現(xiàn)穿孔，導(dǎo)致細(xì)胞腫脹破裂、內(nèi)容物流出從而引發(fā)焦亡[22]；非經(jīng)典途徑是由革蘭陰性菌的脂多糖(LPS)激活來(lái)自人的Caspase-4、5或來(lái)自鼠的Caspase-11，直接切割GSDMD成含有N端的肽段造成膜穿孔引起焦亡[23]。另一方面Caspase-4、5和11會(huì)使pannexin-1通道開(kāi)放，釋放K+，實(shí)現(xiàn)激活NLRP3炎癥小體，加大炎癥反應(yīng)[24]，此外，開(kāi)放的通道致使胞膜出現(xiàn)孔道也可導(dǎo)致焦亡發(fā)生[18]。

3 NLRP3介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡

細(xì)胞焦亡的激活主要是由NLRP3炎癥小體所介導(dǎo)的，體現(xiàn)在焦亡的發(fā)生主要依賴(lài)于多蛋白復(fù)合炎癥體介導(dǎo)的Caspase-1的活化，而Caspase-1的成活是在NLRP3炎癥小體識(shí)別各種內(nèi)外界危險(xiǎn)信號(hào)后，由Caspase-1前體切割導(dǎo)致而成的,這個(gè)過(guò)程中，NLRP3炎癥小體發(fā)揮了至關(guān)重要的調(diào)節(jié)作用。然而，用不同方法激活Caspase-1的作用形式與細(xì)胞焦亡的發(fā)生也密切相關(guān)，由此可知，焦亡是炎癥小體活化的結(jié)果，而活化炎癥小體是焦亡發(fā)生的關(guān)鍵所在，同時(shí)NLRP3炎癥小體又是介導(dǎo)焦亡發(fā)生的重中之重。

4 NLRP3炎癥小體介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡與CNS疾病的關(guān)系

4.1 阿爾茲海默癥

阿爾茲海默癥(Alzheimer’s disease,AD)是以精神癥狀為表現(xiàn)的慢性神經(jīng)系統(tǒng)疾病，其典型特征為β淀粉樣蛋白(β-amyloid,Aβ)沉積。Aβ可激活NLRP3炎癥小體,誘導(dǎo)Caspase-1活化，從而加大Aβ炎癥反應(yīng)[25]。研究證明[26]NLRP3炎癥小體在AD發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮著重要作用，如在抑制NLRP3炎癥小體的AD小鼠模型中發(fā)現(xiàn)其Aβ沉積降低，這就說(shuō)明，NLRP3介導(dǎo)的焦亡反應(yīng)和AD相關(guān)的退行性疾病密切相關(guān)。

4.2 帕金森病

帕金森病(Parkinson disease,PD)是常見(jiàn)于中老年人的CNS疾病。PD有黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元死亡和α-突觸蛋白累積的表現(xiàn)[27]。α-突觸蛋白可使NLRP3炎癥小體活化，促使Caspase-1分泌IL-18引起焦亡[28]。NLRP3炎癥小體為神經(jīng)炎癥的關(guān)鍵調(diào)控位點(diǎn)，在PD病理過(guò)程中發(fā)揮主要調(diào)節(jié)作用，二者發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切，但仍需進(jìn)一步研究證實(shí)以明確其作用機(jī)制。

4.3 脊髓損傷疾病

脊髓損傷(Spinal cord injury,SCI)是神經(jīng)外科常見(jiàn)疾患。在無(wú)干預(yù)的損傷早期,神經(jīng)保護(hù)性免疫細(xì)胞不如損傷性免疫細(xì)胞發(fā)揮作用時(shí)間長(zhǎng)，初步弄清了SCI后局部免疫微環(huán)境的規(guī)律，但更深一步的機(jī)制仍需繼續(xù)挖掘。其中損害細(xì)胞包括：輔助性T淋巴細(xì)胞1型、17型(Th1型、Th17型)和M1型小膠質(zhì)細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞[29]，有研究表明NLRP3炎癥小體活化誘導(dǎo)的IL-1β和IL-18在SCI中發(fā)揮作用[30]，而IL-1β和IL-18聯(lián)合IL-3會(huì)致使Th17和γδT細(xì)胞IL-17的生成，還能促進(jìn)Th1、Th7極化產(chǎn)生自身免疫炎癥反應(yīng)[31-32]。根據(jù)現(xiàn)有研究認(rèn)為：活化的炎癥小體NLRP3是導(dǎo)致SCI局部免疫微環(huán)境不易恢復(fù)的重要原因。

4.4 腦卒中

腦卒中分缺血性(Ischmic stroke)和出血性腦卒中(Intracerebral hemorrhage,ICH)。缺血性腦卒中是由大腦供血障礙所致，并且細(xì)胞內(nèi)許多炎性因子如IL-1β的釋放也會(huì)導(dǎo)致腦組織受損，而炎癥小體在收到危險(xiǎn)信號(hào)后激活Caspase-1和IL-18誘導(dǎo)出現(xiàn)細(xì)胞焦亡，會(huì)加快缺血性腦損傷的進(jìn)程[33]。ICH是由于高血壓或動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致的腦出血，ICH后腦組織遭到破壞會(huì)繼發(fā)性出現(xiàn)腦損傷。ICH中NLRP3炎癥小體會(huì)促進(jìn)炎癥反應(yīng)，而抑制其表達(dá)能減少I(mǎi)CH后炎癥反應(yīng)的發(fā)生，起到神經(jīng)保護(hù)作用。

5 針刺的作用

5.1 針刺調(diào)節(jié)NLRP3炎癥小體介導(dǎo)的焦亡通路對(duì)AD的影響

眾多研究證實(shí)，以NLRP3炎癥小體為代表的神經(jīng)炎癥被認(rèn)為是促進(jìn)AD神經(jīng)退行性病變的重要機(jī)制之一。同時(shí)電針或針刺干預(yù)作為一種補(bǔ)充和替代療法，已被廣泛應(yīng)用于治療AD、癡呆等具有認(rèn)知障礙特點(diǎn)的神經(jīng)退行性疾病。AD動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床實(shí)踐結(jié)果均可證明針刺能夠起到修復(fù)機(jī)體認(rèn)知障礙的作用，同時(shí)表明針刺在改善AD患者日常生活能力方面比藥物更有效。在中醫(yī)理論中，以經(jīng)絡(luò)腧穴為基礎(chǔ)的針刺療法在AD的臨床治療中發(fā)揮了積極作用，特別是許多臨床和實(shí)驗(yàn)研究表明，針刺具有安全、方便與副作用小的優(yōu)點(diǎn)，在AD防治中發(fā)揮著十分重要的作用。

何川等[34]為觀察針刺調(diào)節(jié)AD海馬體中NLRP3炎癥小體介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)相關(guān)蛋白表達(dá)情況，選取36只SD大鼠分為空白組、模型組和電針組建立AD大鼠模型。造模成功后，對(duì)電針組給予足三里穴和百會(huì)穴針刺治療，通過(guò)對(duì)比觀察發(fā)現(xiàn)AD大鼠模型的海馬組織中NLRP3、IL-1β與Caspase-1蛋白表達(dá)相應(yīng)增加，但通過(guò)針刺干預(yù)可以使其表達(dá)下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)證實(shí)了模型組增強(qiáng)了神經(jīng)炎性反應(yīng)，而針刺則可通過(guò)降低NLRP3炎癥小體相關(guān)蛋白含量來(lái)實(shí)現(xiàn)降低神經(jīng)炎性反應(yīng)，說(shuō)明針刺防治AD的機(jī)制可能與抑制NLRP3小體相關(guān)蛋白有關(guān)。

蔣靖等[35]將實(shí)驗(yàn)分為AD組、電針組和對(duì)照組，每組隨機(jī)選取4只7.5月齡加速衰老且易感的小鼠作為AD模型，其中電針組選取水溝、百會(huì)與印堂穴進(jìn)行周期15 d電針治療，觀察AD小鼠海馬體中NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β的含量變化。結(jié)果表明電針組較模型組相應(yīng)蛋白含量明顯降低，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。丁寧等[36]也通過(guò)選取水溝、百會(huì)和印堂穴證實(shí)針刺可以有效減少AD小鼠海馬體中Caspase-1、IL-1β等焦亡相關(guān)因子的表達(dá)。Xie L等[37]選取20只SD大鼠隨機(jī)分為電針組、生理鹽水組、AD組和對(duì)照組。電針組給予百會(huì)穴針灸治療6 d，持續(xù)時(shí)間共3周，為揭示電針治療AD抗神經(jīng)炎癥作用的機(jī)制。使用水迷宮法評(píng)估大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，免疫熒光法檢測(cè)促炎因子表達(dá)量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示電針組較其他組促炎因子降低顯著，AD大鼠識(shí)別記憶能力較強(qiáng)。這提示電針降低了AD大鼠神經(jīng)膠質(zhì)促炎因子表達(dá)，增加了抗炎因子的表達(dá)。結(jié)合以上研究得出，電針治療會(huì)影響炎癥因子介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡通路，以控制AD中小膠質(zhì)細(xì)胞的極化和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的炎癥過(guò)程。

李坤等[38]為觀察電針能否治療AD因神經(jīng)炎癥引起的認(rèn)知功能損害，將實(shí)驗(yàn)小鼠分為對(duì)照組、模型組、電針組與抑制劑組4組，電針組選取神庭穴、百會(huì)穴進(jìn)行針刺治療。實(shí)現(xiàn)結(jié)果顯示：電針治療顯著降低了NLRP3炎癥小體介導(dǎo)的焦亡通路相關(guān)因子表達(dá)。研究還發(fā)現(xiàn)電針組與抑制劑組相比，對(duì)NLRP3炎癥小體和神經(jīng)炎癥反應(yīng)的影響相似。這進(jìn)一步證實(shí)了電針可以抑制NLRP3炎癥小體，并改善AD小鼠認(rèn)知功能障礙，這可能與電針阻斷海馬NLRP3炎癥小體信號(hào)通路的抗神經(jīng)炎癥作用有關(guān)，同時(shí)提示電針干預(yù)神庭穴和百會(huì)穴是神經(jīng)炎癥介導(dǎo)所致的神經(jīng)退行性疾病中的一種有效治療策略。

5.2 針刺調(diào)節(jié)NLRP3炎癥小體介導(dǎo)的焦亡通路對(duì)SCI的影響

SCI后，導(dǎo)致其出現(xiàn)一系列并發(fā)癥的主要因素為局部炎癥反應(yīng)，研究證實(shí)NLRP3炎癥小體在SCI炎癥反應(yīng)中發(fā)揮著重要作用，而針刺具有抑制炎癥相關(guān)因子表達(dá)量的作用。由此得知，針刺對(duì)SCI的神經(jīng)保護(hù)作用可能是抑制炎癥因子的激活而介導(dǎo)的。通常臨床治療及科研實(shí)驗(yàn)中多選用電針或針灸的方法對(duì)SCI實(shí)施干預(yù)，針灸施術(shù)部位常選取夾脊穴及督脈循行的穴位，并結(jié)合調(diào)整針刺角度、電針強(qiáng)度和實(shí)施不同的進(jìn)針手法等多種方式配合治療，但不同的操作手法及針灸干預(yù)的持續(xù)時(shí)間對(duì)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是否有影響還需為此深入探究，這也對(duì)改善SCI后針灸治療方案有很大的臨床意義。

吳磊[39]為明確電針是否可通過(guò)抑制NLRP3炎癥小體活化，實(shí)現(xiàn)降低SCI后的炎癥反應(yīng)，將實(shí)驗(yàn)對(duì)象分為假手術(shù)組、模型組和夾脊電針組，夾脊電針組選取T9和T11節(jié)段夾脊穴進(jìn)行干預(yù)治療，結(jié)果為夾脊電針能明顯抑制NLRP3炎癥小體活化，降低IL-1β、IL-18表達(dá)，實(shí)現(xiàn)抑制炎癥發(fā)生，減少神經(jīng)元死亡，起到恢復(fù)運(yùn)動(dòng)功能的作用。李曉寧等[40]同樣選取電針干預(yù)T9和T11節(jié)段夾脊穴，證實(shí)夾脊電針治療SCI大鼠，會(huì)顯著提高BBB評(píng)分且降低NLRP3炎性表達(dá)，減緩細(xì)胞焦亡程度，改善SCI炎癥損傷，增強(qiáng)大鼠肢體活動(dòng)能力。還有研究[41]通過(guò)實(shí)驗(yàn)觀察SCI大鼠，發(fā)現(xiàn)NLRP3炎癥小體在小膠質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)升高，得出電針可抑制P2X7R激活和降低NLRP3含量，可下調(diào)NLRP3 mRNA表達(dá)，改善SCI大鼠炎性損傷，減少炎癥反應(yīng)。這些研究為夾脊電針治療SCI提供了新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

郭蜜等[42]觀察電針督脈對(duì)SCI大鼠損傷區(qū)NLRP3炎癥小體介導(dǎo)的焦亡通路中相關(guān)因子表達(dá)的變化，將實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為電針組、模型組和假手術(shù)組，其中針灸選穴為至陽(yáng)穴、脊中穴，觀察兩個(gè)不同時(shí)間亞組7 d和14 d大鼠模型中NLRP3、ASC和Caspase-1因子水平。結(jié)果表明與模型組相比，電針組可抑制NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白表達(dá)，針刺至陽(yáng)穴、脊中穴配合電針治療可降低SCI炎癥小體的活性，差異具有顯著意義(P<0.01)。

Choi DC等[43]為研究針刺是否可以通過(guò)抑制神經(jīng)生長(zhǎng)因子、促炎癥因子Caspase-1及IL-1β等的激活實(shí)現(xiàn)對(duì)SCI的神經(jīng)保護(hù)作用，將實(shí)驗(yàn)大鼠按照針刺的不同穴位分為三陰交、委中、懸鐘、水溝、陽(yáng)陵泉、昆侖、足三里和對(duì)照組共8組，每個(gè)亞組各5只SD大鼠，觀察體內(nèi)炎癥因子的表達(dá)情況。結(jié)果針刺水溝和陽(yáng)陵泉兩個(gè)特定穴可明顯抑制Caspase-1、IL-1β的激活，減少SCI空洞面積，減輕神經(jīng)元的焦亡，SCI功能恢復(fù)較好。

5.3 針刺調(diào)節(jié)NLRP3炎癥小體介導(dǎo)的焦亡通路對(duì)腦卒中的影響

NLRP3炎癥小體介導(dǎo)的焦亡通路中的炎性細(xì)胞因子與腦卒中大鼠的神經(jīng)損傷表現(xiàn)密切相關(guān)，而在實(shí)驗(yàn)中則印證了這一說(shuō)法，即針刺干預(yù)可以抑制腦卒中大鼠腦組織中炎性蛋白表達(dá)量，達(dá)到實(shí)現(xiàn)神經(jīng)恢復(fù)的作用。針刺的抗炎作用在其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)中也同樣得到證實(shí)。這說(shuō)明針刺的抗炎作用在CNS疾病治療過(guò)程中十分重要，可有效地改善CNS疾病的臨床表現(xiàn)，作用實(shí)質(zhì)可能是通過(guò)對(duì)神經(jīng)炎癥因子的抑制而發(fā)揮良性調(diào)整作用。

劉昊等[44]研究ICH大鼠中NLRP3、IL-1β和IL-18通過(guò)針灸治療后含量的變化，實(shí)驗(yàn)大鼠分為假手術(shù)組、模型組與針灸組各10只，針灸組大鼠通過(guò)曲鬢穴及百會(huì)穴進(jìn)行干預(yù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)不僅Bederson評(píng)分下降，且缺血側(cè)皮層小膠質(zhì)細(xì)胞含量、NLRP3的mRNA表達(dá)、IL-1β和IL-18的相對(duì)蛋白表達(dá)水平均有所降低(P<0.01)，說(shuō)明針灸在減少小膠質(zhì)細(xì)胞活化、抑制NLRP3炎癥反應(yīng)中起到神經(jīng)保護(hù)作用。王磊[45]研究針刺干預(yù)ICH對(duì)不同再灌注時(shí)間炎癥因子的抑制作用，將實(shí)驗(yàn)大鼠分為假手術(shù)組、模型組和電針組，電針組采用電針百會(huì)穴、人中穴的干預(yù)方法，分別觀察再灌注0 min、6 h、24 h各時(shí)間節(jié)點(diǎn)血清IL-18和IL-1β的含量變化。結(jié)果顯示：ICH大鼠經(jīng)再灌注6 h后IL-18和IL-1β含量顯著降低，且電針治療后其在血清中的含量均同樣減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

Sha R等[46]為探究電針對(duì)腦卒中的神經(jīng)保護(hù)作用是否與抗炎機(jī)制相關(guān)，將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為5組，其中電針組選取大鼠左肢上的外關(guān)穴與足三里穴進(jìn)行電針治療30 min，于1 d、3 d、5 d與7 d觀察大鼠炎癥相關(guān)因子的表達(dá)情況。根據(jù)Nissl染色評(píng)估焦亡神經(jīng)元死亡情況，采用蛋白印跡分析和PCR方法檢測(cè)NLRP3炎癥小體和Caspase-1表達(dá)水平，ELISA法評(píng)估梗死周?chē)又械腎L-18和IL-1β水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：電針組較其他組別而言，大大降低了NLRP3、Caspase-1、IL-18和IL-1β水平，抑制了相關(guān)因子在大鼠皮層中的表達(dá)。這些結(jié)果表明，電針抑制炎癥相關(guān)因子的能力至關(guān)重要，能夠增加大鼠存活率，減輕神經(jīng)功能障礙，實(shí)現(xiàn)神經(jīng)保護(hù)的目的。

鄧寒冰等[47]將48只大鼠分為申脈+照海組、陽(yáng)陵泉+配穴組、關(guān)元組與模型組，并予以相應(yīng)的穴位進(jìn)行電針刺激，應(yīng)用尼氏染色法檢測(cè)腦卒中大鼠腦損傷組織中NLRP3、Caspase-1及pro-Caspase-1表達(dá)情況，結(jié)果顯示電針刺激后申脈+照海組、陽(yáng)陵泉+配穴組、關(guān)元組較模型組NLRP3與Caspase-1蛋白水平降低(P<0.05)。江濤等[48]研究NLRP3炎癥小體的抑制作用是否與電針刺激的神經(jīng)保護(hù)有關(guān)，選取局灶性腦缺血損傷SD大鼠，采用蛋白質(zhì)免疫印跡法和免疫熒光染色法，評(píng)估再灌注后腦組織中NLRP3炎癥小體的表達(dá)含量。得出NLRP3炎癥小體的含量經(jīng)腦缺血再灌注后逐漸增加，而炎癥小體介導(dǎo)的炎性反應(yīng)通過(guò)電針刺激后程度減弱，并調(diào)節(jié)了抗炎與促炎因子之間的平衡。NLRP3炎癥小體則被證明在腦缺血以及再灌注損傷的神經(jīng)元死亡和行為缺陷中具有重要作用。

6 總結(jié)

綜上所述，本研究通過(guò)對(duì)NLRP3炎癥小體介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡機(jī)制進(jìn)行總結(jié)，分析并論述了針刺干預(yù)該信號(hào)通路對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的重要影響，可以肯定的是針刺通過(guò)調(diào)節(jié)炎癥信號(hào)通路對(duì)治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病方面發(fā)揮著卓著的療效,能夠起到一定的神經(jīng)修復(fù)作用。但中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，筆者僅從針刺干預(yù)NLRP3炎癥小體介導(dǎo)的焦亡通路這一方面進(jìn)行了探討，尚未對(duì)其他作用機(jī)制展開(kāi)研究。為此，今后將以NLRP3炎癥小體為重心，進(jìn)一步深化其介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡內(nèi)在機(jī)理，結(jié)合其他影響機(jī)制，將探究的方向側(cè)重于各機(jī)制彼此之間的聯(lián)系，同時(shí)為明確其作用方式，需進(jìn)行大量實(shí)驗(yàn)證實(shí)，為臨床治療提供更充分的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，這有助于為針刺防治中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病尋求新的干預(yù)靶點(diǎn)。