張浩寬，郭盛，嚴(yán)輝，高松，李俊科，段金廒*

1.南京中醫(yī)藥大學(xué) 江蘇省中藥資源產(chǎn)業(yè)化過程協(xié)同創(chuàng)新中心/中藥資源產(chǎn)業(yè)化與方劑創(chuàng)新藥物國家地方聯(lián)合工程研究中心/國家中醫(yī)藥管理局中藥資源循環(huán)利用重點(diǎn)研究室，江蘇 南京 210023；

2.河南宛西制藥股份有限公司，河南 南陽 473000

山茱萸為山茱萸科山茱萸屬植物山茱萸Cornus officinalisSieb.et Zucc 的干燥成熟果肉。其味酸、澀，性微溫，入肝、腎兩經(jīng)，具有補(bǔ)益肝腎、澀精固脫之功，主要用于治療眩暈耳鳴、腰膝酸痛、陽痿遺精、內(nèi)熱消渴等[1]。山茱萸屬植物全球共4 種，分布于歐洲中部、南部，亞洲東部及北美東部[2]。我國有山茱萸和川鄂山茱萸C.chinensis2 種，其中，山茱萸為臨床常用中藥，主要分布于秦嶺山脈的巴山區(qū)、伏牛山區(qū)及天目山區(qū)等。

隨著大健康產(chǎn)業(yè)的蓬勃發(fā)展，市場對于藥食同源的山茱萸需求量劇增。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，2019 年全國山茱萸種植面積已超過40萬畝（1畝≈666.67 m2），年產(chǎn)量以干貨計(jì)約6 萬t。與此同時(shí)，其產(chǎn)地加工過程中產(chǎn)生的葉片、果核等非藥用部位產(chǎn)量遠(yuǎn)高于果肉。初步測算，果核年產(chǎn)量可達(dá)25 萬t。然而，山茱萸非藥用部位的應(yīng)用基礎(chǔ)和資源化利用研究較為薄弱，缺乏有效利用途徑，造成資源的巨大浪費(fèi)和生態(tài)環(huán)境污染加劇。鑒于此，本文對國內(nèi)外報(bào)道的山茱萸果核及葉片所含的化學(xué)成分、生物活性、開發(fā)利用等研究現(xiàn)狀進(jìn)行了較為系統(tǒng)的梳理分析，結(jié)合中藥資源化學(xué)研究思路與資源循環(huán)利用相關(guān)策略[3]，提出了山茱萸資源提質(zhì)增效與產(chǎn)業(yè)綠色發(fā)展的若干建議，以期為山茱萸傳統(tǒng)非藥用部位的資源化利用和產(chǎn)業(yè)的高質(zhì)量發(fā)展提供參考。

1 資源性化學(xué)成分研究進(jìn)展

目前，對山茱萸藥材的研究報(bào)道較多，已從中分離鑒定出300 余個(gè)化合物，包括環(huán)烯醚萜、鞣質(zhì)、三萜、黃酮等化合物，具有抗腫瘤、降血糖、抗氧化、保護(hù)肝臟、調(diào)節(jié)骨代謝等多種藥理作用[4]。也有學(xué)者從山茱萸果核及葉中分離鑒定出90 余個(gè)化合物（表1），包括3 個(gè)黃酮類、20 個(gè)鞣質(zhì)類化合物、10 個(gè)有機(jī)酸及酚酸類、46 個(gè)脂肪酸及其酯類、7個(gè)環(huán)烯醚萜類、9個(gè)三萜類和4個(gè)其他類化合物。

表1 山茱萸果核及葉中分離鑒定出的化學(xué)成分

續(xù)表1

續(xù)表1

1.1 山茱萸果核

1.1.1 油脂類成分 山茱萸果核中含有豐富的油脂類成分，有研究表明，其中油脂質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7%～8%，經(jīng)氣相色譜分離鑒定出6 個(gè)脂肪酸，分別是月桂酸、硬脂酸、棕櫚酸、油酸、亞油酸、亞麻酸。油脂中不飽和脂肪酸（油酸、亞油酸、亞麻酸）的含量較高，占脂肪酸總量的90.58%。其中，亞油酸相對質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)70%以上[19]。山茱萸果核由內(nèi)果皮和種子組成，內(nèi)果皮質(zhì)量分?jǐn)?shù)為86.5%，種子質(zhì)量分?jǐn)?shù)為13.5%。鄭玉麗等[20]對山茱萸核不同部位的脂肪油含量進(jìn)行了測定，結(jié)果顯示果核脂肪油的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7.89%；內(nèi)果皮中脂肪油質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.13%，種子中脂肪油質(zhì)量分?jǐn)?shù)為48.64%，遠(yuǎn)高于內(nèi)果皮。

1.1.2 有機(jī)酸和酚酸類成分 楊暉等[12]采用高效液相色譜法（HPLC）測定了山茱萸果核中5 個(gè)有機(jī)酸（草酸、酒石酸、DL-蘋果酸、檸檬酸和沒食子酸）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。結(jié)果顯示，草酸、酒石酸、DL-蘋果酸、檸檬酸和沒食子酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.36%、0.78%、1.82%、0.87% 和2.41%。唐凱等[13]采用HPLC測定了不同產(chǎn)地山茱萸果核中的沒食子酸、5-羥甲基糠醛、原兒茶酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，質(zhì)量分?jǐn)?shù)由高到低分別為沒食子酸、5-羥甲基糠醛、原兒茶酸；其中，漢中鎮(zhèn)巴縣樣品的沒食子酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高（2.671%），陜西漢中與寶雞所產(chǎn)山茱萸果核中這3個(gè)成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高。有研究采用Folin-Ciocalteu法，以沒食子酸為對照品，測得3 批山茱萸果核水溶性提取物中多酚的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為39.24%[21]。

1.1.3 鞣質(zhì)類成分 有研究表明，山茱萸果核中的鞣質(zhì)為混合型，且以水解型為主，采用絡(luò)合量法和高錳酸鉀法對山茱萸果核不同溶劑提取液中的鞣質(zhì)進(jìn)行含量測定，結(jié)果顯示鞣質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為16.28%～19.53%[22]。安莉等[23]采用干酪素法，以磷鉬戊酸為顯色劑、沒食子酸為對照品，比較了不同產(chǎn)區(qū)山茱萸果核中鞣質(zhì)的含量，結(jié)果顯示河南＞浙江＞陜西，其中河南產(chǎn)區(qū)山茱萸果核鞣質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)5.05%，且相對穩(wěn)定。有研究采用干酪素法測定山茱萸果核鞣質(zhì)含量，并通過響應(yīng)面法優(yōu)化了山茱萸果核鞣質(zhì)的提取工藝，結(jié)果表明，料液比1∶22、乙醇體積分?jǐn)?shù)42%、超聲溫度52 ℃、超聲時(shí)間71 min為最佳提取工藝，鞣質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)69.29 mg·g-1[24]。以上報(bào)道果核中鞣質(zhì)的含量差異較大，筆者認(rèn)為是測定方法不同所致。鞣質(zhì)為化學(xué)性質(zhì)復(fù)雜的多元酚，前者采用的是絡(luò)合量法及高錳酸鉀法，這2 種方法專屬性差，易導(dǎo)致測定結(jié)果偏高；而后者采用的干酪素法選擇性更高，但干酪素只與有生理活性的鞣質(zhì)產(chǎn)生沉淀，易導(dǎo)致測定結(jié)果偏低。綜合來看，山茱萸果核含有較為豐富的鞣質(zhì)資源。

1.1.4 五環(huán)三萜類成分 尚遂存等[18]從山茱萸果核中分離鑒定得到白樺脂酸。李軍等[25]建立了同時(shí)測定山茱萸果殼和果仁中白樺脂酸和熊果酸的方法，并對多個(gè)產(chǎn)地的樣品進(jìn)行了含量測定。結(jié)果顯示，果仁中熊果酸含量顯著高于果殼，兩者白樺脂酸的含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。山茱萸果殼中白樺脂酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.65～5.34 mg·g-1、熊果酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.87～1.72 mg·g-1，果仁中白樺脂酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.61～4.97 mg·g-1、熊果酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4.88～7.46 mg·g-1。

1.1.5 環(huán)烯醚萜類成分 李軍等[9]在山茱萸果核70%丙酮提取物中分離鑒定得到山茱萸新苷。有研究采用HPLC 測定了采自陜西、河北和山西的14 批山茱萸果核中莫諾苷的含量，結(jié)果表明14 批樣品中莫諾苷的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.737%，其中漢中寧強(qiáng)縣的樣品莫諾苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高，達(dá)1.233%[13]。

除以上化學(xué)成分外，山茱萸果核中還含有多糖類、皂苷類、黃酮類、氨基酸類等成分。此外，山茱萸果核中含有豐富的維生素B1、維生素C 和維生素E，富含蛋白質(zhì)、粗纖維及21個(gè)礦物元素等[26-28]。

1.2 山茱萸葉

1.2.1 揮發(fā)性成分 山茱萸葉中揮發(fā)性成分主要由醇類、萜烯類、酯類、醛酮類、酚酸類、烴類、呋喃類及其他類成分組成。馬亞榮等[29]采用靜態(tài)頂空進(jìn)樣技術(shù)（SHS）結(jié)合氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法（GCMS），對不同溫度（65、95、115 ℃）下山茱萸葉中揮發(fā)性成分進(jìn)行定性分析，結(jié)果顯示，在不同溫度條件下?lián)]發(fā)性成分的種類和質(zhì)量分?jǐn)?shù)存在差異，其共有成分為1-戊烯-3-醇、順式-2-戊烯醇、正己醛、反式-2-己烯醛、3-己烯-1-醇、順式-2-己烯-1-醇、苯甲醛、鄰-異丙基苯、D-檸檬烯、石竹烯和蛇麻烯。其中，反式-2-己烯醛和正己醛在山茱萸葉中質(zhì)量分?jǐn)?shù)相對較高。山茱萸葉中主要揮發(fā)性成分與果肉中所含揮發(fā)性成分有所不同。

1.2.2 環(huán)烯醚萜類成分 環(huán)烯醚萜類是山茱萸中含量較高的成分類群，被認(rèn)為是山茱萸中的特征性成分。Li等[16]在山茱萸葉的甲醇提取物中分離出4個(gè)環(huán)烯醚萜，其中包括3 個(gè)新的山茱萸醚萜素（山茱萸醚萜素A、山茱萸醚萜素 B、山茱萸醚萜素C）和呂宋莢蒾B。

1.2.3 黃酮類成分 有研究報(bào)道，在山茱萸葉中分離鑒定得到蘆丁、槲皮素和柚皮素[5-6]。孫建瑞等[30]通過響應(yīng)面法對豫西山茱萸葉黃酮的提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化，結(jié)果顯示，在料液比為1∶31、乙醇體積分?jǐn)?shù)為61%、超聲功率為290 W、提取時(shí)間為23 min的條件下，山茱萸葉黃酮得率最高，達(dá)6.31%。

1.2.4 多糖類成分 以500 g干燥山茱萸葉為原料，通過水提醇沉、過氧化氫除色素等步驟制得山茱萸葉多糖6.797 g，進(jìn)而采用比色法對山茱萸葉多糖理化性質(zhì)進(jìn)行了測定，并采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化HPLC 對山茱萸葉中多糖的單糖組成進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)山茱萸葉多糖中總糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為（612.76±1.72）mg·g-1、糖醛酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為（228.03±0.54）mg·g-1、可溶性蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為（9.53±0.38）mg·g-1、硫酸根質(zhì)量分?jǐn)?shù)為（25.21±0.19）mg·g-1；山茱萸葉多糖由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、巖藻糖7 種單糖構(gòu)成，采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行定量，得到其物質(zhì)的 量比為1.66∶3.20∶6.20∶5.00∶13.00∶14.10∶1.00[31]。

1.2.5 三萜類成分 朱登輝等[32]以齊墩果酸為對照品，采用紫外-可見分光光度法在546 nm 波長下測定了山茱萸葉中總?cè)频暮?，并通過響應(yīng)面法對山茱萸葉總?cè)频奶崛」に囘M(jìn)行了優(yōu)化，結(jié)果顯示，在料液比1∶38、乙醇體積分?jǐn)?shù)73%、加熱回流提取60 min的條件下，山茱萸葉總?cè)瀑|(zhì)量分?jǐn)?shù)最高為6.89%。

1.2.6 鞣質(zhì)類成分 Lee 等[7]從山茱萸葉中分離得到了第1 個(gè)以七糖為核心的沒食子酸鞣質(zhì)1,7-二-O-沒食子?；?D-景天庚酮糖。此外，還分離得到了沒食子酰葡萄糖苷2,3-二-O-沒食子?；?D-吡喃葡萄糖、1,2-二-O-沒食子?；?β-D-吡喃葡萄糖、3,4,6-三-O-沒食子?；?D-吡喃葡萄糖、1,2,6-三-O-沒食子?；?β-D-吡喃葡萄糖、1,2,4,6-四-O-沒食子?；?β-D-吡喃葡萄糖、1,2,3,6-四-O-沒食子?；?β-D-吡喃葡萄糖3-O-沒食子?；?4,6-(S)-六羥基聯(lián)苯酚基-D-葡萄糖、2-O-沒食子酰基-4,6-(S)-六羥基聯(lián)苯酚基-D-葡萄糖、1-O-沒食子酰基-4,6-(S)-六羥基聯(lián)苯酚基-α-D-吡喃葡萄糖、1-O-沒食子?；?4,6-(S)-六羥基聯(lián)苯酚基-β-D-葡萄糖和日本馬桑素F。

2 生物活性研究進(jìn)展

2.1 果核生物活性

2.1.1 抑菌、抗炎活性 有研究比較了山茱萸果肉及果核對金黃色葡萄球菌和痢疾桿菌的抑制作用，發(fā)現(xiàn)果核、果肉具有相似的抑菌活性，并推測沒食子酸是其抑菌作用的主要活性成分[33]。張紅玉等[34]比較了山茱萸果肉及果核的抗炎作用，分別制備了小鼠棉球植入和大鼠二甲苯致耳腫脹2 種炎癥模型，對小鼠肉芽凈質(zhì)量和大鼠耳腫脹度進(jìn)行測量觀察以評價(jià)其抗炎活性，結(jié)果表明果肉和果核均具有一定的抗炎作用，但同濃度下果肉提取物的作用要強(qiáng)于果核提取物。Jang 等[17]從山茱萸果核乙醇提取物中分離出熊果酸，并對其抗炎活性進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示，熊果酸可能通過抑制脂多糖和Toll 樣受體4（TLR4）在免疫細(xì)胞上的結(jié)合從而調(diào)節(jié)核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）和絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號通路而發(fā)揮改善小鼠結(jié)腸炎的作用。

2.1.2 抗氧化活性 以維生素C 為對照，從羥自由基、超氧陰離子自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基的清除能力這3 個(gè)指標(biāo)評價(jià)了山茱萸果核石油醚、乙酸乙酯、無水乙醇、水提取物的體外抗氧化活性，結(jié)果表明，山茱萸果核不同提取物的抗氧化活性存在差異，其趨勢為水提取物＞無水乙醇提取物＞乙酸乙酯提取物＞石油醚提取物；其中水提取物清除DPPH 自由基的能力要強(qiáng)于陽性藥，表明其水提物具有較強(qiáng)的抗氧化活性[35]。李曉明等[36]以維生素C為陽性對照，從DPPH自由基、亞硝酸鹽自由基、羥自由基的清除率及總還原力4 個(gè)方面來評價(jià)山茱萸果核中的多酚類成分抗氧化活性，結(jié)果顯示，山茱萸果核多酚對羥自由基的清除率要低于維生素C，而在DPPH自由基、亞硝酸鹽自由基清除率和總還原力這3 個(gè)方面山茱萸果核多酚高于同濃度下維生素C 的效果，且均呈現(xiàn)出良好的量效關(guān)系。D-半乳糖在體內(nèi)代謝可產(chǎn)生過量的自由基，使腦組織抗氧化酶活性下降，脂質(zhì)過氧化反應(yīng)增強(qiáng)，這是導(dǎo)致機(jī)體衰老、認(rèn)知功能下降的一個(gè)重要機(jī)制。有研究表明，山茱萸果核醇提物能明顯改善D-半乳糖致衰老小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，并以超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性，總抗氧化能力（T-AOC），丙二醛（MDA）含量作為評價(jià)其抗氧化能力的指標(biāo)，結(jié)果表明，與模型組相比，山茱萸果核醇提物各劑量組小鼠腦組織的MDA含量明顯下降，SOD、T-AOC活性明顯升高，高、中劑量組的GSH-Px也明顯升高，表明山茱萸果核醇提物具有提高小鼠腦組織清除自由基的能力[37]。

2.1.3 降血糖活性 張夙夙[38]以阿卡波糖為陽性對照，探究山茱萸核鞣質(zhì)對α-葡萄糖苷酶的抑制作用與作用類型，結(jié)果表明山茱萸核鞣質(zhì)對α-葡萄糖苷酶具有較好的抑制作用，其半數(shù)抑制濃度（IC50）為1076 mg·L-1，與陽性藥組相當(dāng)；進(jìn)一步研究表明其對α-葡萄糖苷酶的抑制屬于可逆性抑制，且屬于非競爭性抑制。安莉[24]采用高脂高糖飼料聯(lián)合低劑量鏈脲佐菌素（30 mg·kg-1）制備了2 型糖尿病小鼠模型，考察山茱萸果核鞣質(zhì)對2型糖尿病小鼠空腹血糖、糖耐量（OGTT）、三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）等血脂指標(biāo)的影響，結(jié)果表明，中（200 mg·kg-1）、高（400 mg·kg-1）劑量組、陽性藥組與模型組在空腹血糖及各種生化指標(biāo)方面差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），且呈劑量依賴性，說明山茱萸果核鞣質(zhì)對2 型糖尿病小鼠有較好的降糖作用。

2.1.4 抗腫瘤活性 余平等[39]比較了山茱萸果肉與果核抗ICR小鼠腹水瘤的作用，結(jié)果顯示，山茱萸果肉組（2 g·kg-1）和山茱萸果核高劑量組（6 g·kg-1）小鼠的存活時(shí)間與0.9%氯化鈉溶液組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），對腹水瘤小鼠的生命延長率分別為69.60%和50.98%。山茱萸果核醇提物具有一定的抗腫瘤活性，以不同濃度果核醇提物處理肝癌細(xì)胞HepG2 24 h，使用噻唑藍(lán)（MTT）比色法測定其抑制率，結(jié)果表明山茱萸果核醇提物在不同濃度下均能抑制肝癌細(xì)胞HepG2 的增殖，且呈濃度依賴性；進(jìn)一步采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）檢測胱天蛋白酶-3（Caspase-3）、B 細(xì)胞淋巴瘤-2（Bcl-2）mRNA的表達(dá)，采用蛋白質(zhì)印跡法（Western blot）檢測Caspase-3、Bcl-2 蛋白的表達(dá)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測山茱萸果核醇提物是通過上調(diào)Caspase-3、下調(diào)Bcl-2表達(dá)，誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞HepG2的凋亡[40]。

2.1.5 保肝活性 有研究通過觀察小鼠肝臟組織切片病理學(xué)變化，測定小鼠血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、MDA 水平，肝組織中SOD、GSH-Px 水平，用于評價(jià)山茱萸不同部位（果肉、果核、全果）提取物對醋氨酚致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用。結(jié)果表明，與模型組比較，山茱萸果核、全果、果肉提取物的中、高劑量組小鼠的肝組織病變均有不同程度改善，肝細(xì)胞壞死明顯減輕，其中山茱萸果核提取物中、高劑量組和山茱萸全果提取物高劑量組小鼠未見肝細(xì)胞片狀壞死，肝小葉結(jié)構(gòu)基本完整，效果優(yōu)于果肉中、高劑量組；山茱萸果核提取物和山茱萸全果提取物均能顯著降低肝損傷小鼠血清中ALT、AST 水平，且變化較果肉提取物組更明顯；此外，中劑量的山茱萸果肉提取物，中、高劑量的山茱萸全果提取物及各劑量山茱萸果核提取物均能顯著升高肝損傷小鼠肝組織中GSH-Px、SOD 水平，顯著降低肝組織中MDA 水平[41]。提示山茱萸果核具有開發(fā)為保肝藥物的潛力。

2.1.6 其他作用 此外，山茱萸果核還具有降血壓、抗疲勞、治療佐劑性關(guān)節(jié)炎、改善心臟功能、舒張血管及抗實(shí)驗(yàn)性心律失常等作用[42-45]。

2.2 葉生物活性

2.2.1 抑菌活性 有研究采用濾紙片法測試山茱萸葉黃酮類組分對6種細(xì)菌、3種真菌的抑菌活性，結(jié)果顯示山茱萸葉黃酮類組分對細(xì)菌和真菌均有一定的抑菌效果，其中對沙門菌的抑制作用最強(qiáng)，抑菌圈直徑達(dá)12.04 mm，整體上看，山茱萸葉黃酮類組分對細(xì)菌的抑菌效果要強(qiáng)于對真菌的抑菌效果；其對革蘭陰性菌的抑菌效果強(qiáng)于革蘭陽性菌[30]。

2.2.2 抗氧化活性 有研究以2,6-二叔丁基對甲酚（BHT）作為陽性對照，從DPPH 自由基清除能力和羥自由基清除能力2 個(gè)指標(biāo)來評價(jià)豫西山茱萸葉黃酮類組分的抗氧化活性，結(jié)果表明，山茱萸葉黃酮類組分能明顯清除DPPH 自由基和羥自由基，其中清除羥自由基的能力強(qiáng)于BHT，并且兩者的清除率隨山茱萸葉黃酮濃度的升高而增強(qiáng)，說明山茱萸葉黃酮類組分的抗氧化能力較強(qiáng)[30]。李玥彤等[31]評價(jià)了山茱萸葉多糖對DPPH 自由基和羥自由基清除能力、亞鐵離子絡(luò)合能力及其對H2O2誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞活力的影響，發(fā)現(xiàn)山茱萸葉多糖對DPPH 自由基的IC50為0.13 mg·mL-1，對羥自由基的IC50為0.56 mg·mL-1，其抗氧化能力與維生素C 相當(dāng)；不同質(zhì)量濃度山茱萸葉多糖均可提高氧化損傷HepG2細(xì)胞的相對存活率，當(dāng)其質(zhì)量濃度為0.4 mg·mL-1時(shí)，細(xì)胞內(nèi)MDA 和活性氧（ROS）含量均顯著降低。

2.2.3 抗腫瘤活性 Forman 等[46]對5 種山茱萸科植物葉的水提物抗乳腺癌細(xì)胞增殖活性進(jìn)行了比較，其中包括歐洲山茱萸C.mas、紅瑞木C.alba、金枝梾木C.flaviramea、日本四照花C.kousa和山茱萸，研究結(jié)果顯示，所有受試提取物對人乳腺癌MCF-7細(xì)胞均具有抗增殖活性，且均呈劑量和時(shí)間依賴性。5 種提取物中山茱萸葉的活性最好，其72 h 后細(xì)胞存活率為10.3%；此外該研究還將5 種葉中總黃酮（以金絲桃苷表示）、總羥基肉桂酸衍生物（以迷迭香酸表示）、總多酚及鞣質(zhì)類（以鄰苯三酚表示）物質(zhì)的含量與抗增殖活性做了相關(guān)性分析，認(rèn)為其抑制效果與葉中所含總多酚和鞣質(zhì)類物質(zhì)的含量呈正相關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)，山茱萸葉丙酮提取物能抑制BALB/c 小鼠黑色素瘤移植瘤的生長和糖酵解，降低血清中炎癥因子白細(xì)胞介素-6（IL-6）、IL-17A、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和γ-干擾素（IFN-γ）的水平，通過抑制信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子與轉(zhuǎn)錄激活子3（STAT3）信號通路中抗細(xì)胞凋亡蛋白Bcl-2、髓細(xì)胞白血病因子-1（Mcl-1）等的表達(dá)和STAT3 蛋白的磷酸化，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，并減少腫瘤血管生成，從而發(fā)揮抗黑色素瘤作用。此外還發(fā)現(xiàn)山茱萸葉50%丙酮提取物中的馬錢苷、穿心莛子藨醚萜C 和穿心莛子藨醚萜D、蘆丁能顯著抑制人黑色素瘤A375 細(xì)胞增殖和遷移，并抑制STAT3的磷酸化和核轉(zhuǎn)位。HPLC分析結(jié)果表明，提取物中馬錢苷、穿心莛子藨醚萜C、穿心莛子藨醚萜D 和蘆丁的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.75%、0.22%、0.48%和0.19%[4]。

3 資源化利用策略及展望

通過對中藥資源產(chǎn)業(yè)化過程資源價(jià)值創(chuàng)新、資源化利用及產(chǎn)業(yè)化開發(fā)等進(jìn)行系統(tǒng)研究與實(shí)踐，從而節(jié)約資源、保護(hù)環(huán)境，推動(dòng)我國中藥資源循環(huán)經(jīng)濟(jì)和綠色產(chǎn)業(yè)發(fā)展。本文基于山茱萸果核及葉中含有的活性組分及同屬植物資源化利用報(bào)道提出其分級利用策略（圖1）。

圖1 山茱萸采收加工過程副產(chǎn)物資源化利用多元途徑

3.1 基于傳統(tǒng)記載及近緣植物民間應(yīng)用習(xí)慣的資源化利用策略

據(jù)記載，歐洲山茱萸的葉片可用于治療胃病、高血糖、高血壓和傷口愈合，且在土耳其民間也將其用作茶飲[47-49]；同屬植物毛梾C.walteri的葉片可用于治療漆毒引起的皮膚炎癥或膿腫[50]，在韓國醫(yī)學(xué)中也被用作止瀉藥[51]。這提示可以山茱萸葉為主要原料，在前期相關(guān)生物活性研究的基礎(chǔ)上，開展具有降血糖、降血壓、止瀉等功能的醫(yī)藥產(chǎn)品及功能食品開發(fā)。此外，民間有利用山茱萸果核飼喂牲畜的習(xí)慣。有研究顯示，在奶山羊飼糧中添加山茱萸果核，可提高奶山羊的產(chǎn)奶量，且對乳脂率有顯著抑制作用；山茱萸果核可通過促進(jìn)羊奶中短、中鏈脂肪酸的合成，調(diào)控乳腺中乙酰輔酶A 羧化酶（ACC）、硬脂酰輔酶A 去飽和酶（SCD1）和TG水解酶（ATGL）的表達(dá)，改善奶山羊乳品質(zhì)[52]，提示山茱萸果核可用于功能性飼料開發(fā)，可按照飼料標(biāo)準(zhǔn)對山茱萸葉、果核等非藥用部位進(jìn)行飼用價(jià)值分析及飼用功能評價(jià)，開發(fā)為相關(guān)飼用產(chǎn)品或飼料添加劑。

3.2 基于化學(xué)組分生物活性發(fā)現(xiàn)的精細(xì)化利用策略

山茱萸果核中酚類成分具有抗氧化、降壓和保肝等功效，可用于制備治療相關(guān)疾病的藥物[53-55]。含有山茱萸果核提取物的食品保鮮劑對肉類食品有較好的保鮮效果，可有效減緩肉的腐敗變質(zhì)[56]。山茱萸果核中還含有熊果酸、白樺脂酸、β-谷甾醇等成分，提取富集后可作為醫(yī)藥原料[57-59]。果核中的鞣質(zhì)類資源可用來提取栲膠用于皮革行業(yè)[60]。山茱萸果核中的油脂經(jīng)提取富集后可用于開發(fā)植物油或醫(yī)藥原料等[61]。經(jīng)蒸餾后得到的山茱萸果核提取物含有60 余種香味物質(zhì)，精油酸值17.5～18.8，味道獨(dú)特，且皮膚無不良反應(yīng)，可用于日化用品及食品添加劑的開發(fā)[62]。山茱萸葉中黃酮類和多糖類組分均具有較好的抗氧化活性，提示其在化妝品、保健食品和生物藥品領(lǐng)域具有開發(fā)前景[30-31,63]。綜上所述，基于資源性成分系統(tǒng)分析與資源價(jià)值發(fā)現(xiàn)等基礎(chǔ)研究，構(gòu)建山茱萸果核及葉片黃酮類、鞣質(zhì)類、多糖類等資源性物質(zhì)分離純化、富集制備技術(shù)體系，結(jié)合生物活性研究將其開發(fā)制備為相關(guān)功能產(chǎn)品或醫(yī)用原料等。

3.3 基于化學(xué)/生物轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)化增效利用策略

基于本課題組前期構(gòu)建的中藥廢棄物及副產(chǎn)物轉(zhuǎn)化增效資源化利用模式[64]，結(jié)合山茱萸果核的理化特性，可在已有報(bào)道[65]的基礎(chǔ)上，采用熱解炭化工藝，將山茱萸果核熱解形成生物炭、木醋液、可燃?xì)獾荣Y源性產(chǎn)品。其中，生物炭可進(jìn)一步活化形成活性炭產(chǎn)品；木醋液可依據(jù)其活性物質(zhì)組成開發(fā)形成具有抑菌斂瘡作用的醫(yī)藥產(chǎn)品或洗消用品、具有促進(jìn)飼料轉(zhuǎn)化利用的飼用替抗產(chǎn)品，以及葉面肥等資源性產(chǎn)品。此外，采用生物轉(zhuǎn)化的方法對提取后的山茱萸果核及葉片殘?jiān)蛇M(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)酶，轉(zhuǎn)化為纖維素酶、木糖醇、生物乙醇等轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，最終實(shí)現(xiàn)物盡其用、變廢為寶，延伸山茱萸資源產(chǎn)業(yè)鏈，提升資源利用效率及效益。