胡重重，李獲朋，劉天龍，佘銳萍，田紀(jì)景

(中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，北京 海淀 100193)

戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是一種重要的人獸共患病病原，在全球范圍內(nèi)廣泛流行。豬是HEV的重要自然宿主，自然感染率較高，通常為亞臨床感染或與其他病原混合感染。HEV主要通過(guò)糞口途徑在人和動(dòng)物之間傳播，國(guó)內(nèi)外均可見(jiàn)人群HEV聚集性感染的報(bào)道。由此可見(jiàn)，HEV的流行不僅對(duì)畜牧業(yè)生產(chǎn)造成威脅，還嚴(yán)重危害人類(lèi)的食品安全。因此，了解豬群HEV的流行情況和防控措施具有重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義。本文調(diào)研近年來(lái)HEV相關(guān)的研究進(jìn)展，對(duì)HEV在豬群中的流行情況、傳播方式、診斷和防控等方面展開(kāi)論述。

1 HEV發(fā)現(xiàn)史

關(guān)于HEV感染的最早記錄是1955—1956年發(fā)生在印度新德里的一場(chǎng)大規(guī)模流行的水源性非甲非乙型病毒肝炎[1]。直到1983年，科學(xué)家通過(guò)免疫電子顯微鏡技術(shù)首次在志愿者的糞便中觀察并鑒定到了病毒顆粒[2]。8年后，研究人員通過(guò)緬甸分離株測(cè)定到了該病毒的全基因序列，隨后將其命名為戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus，HEV)[3]。2004年，國(guó)際病毒學(xué)分類(lèi)委員會(huì)將其歸入戊肝病毒科(Hepeviridae)。該科包括正戊肝病毒屬(Orthohepevirus)和魚(yú)戊肝病毒屬(Piscihepevirus)，其中正戊肝病毒屬主要感染陸生脊椎動(dòng)物，包括A、B、C、D四個(gè)種，能夠感染人類(lèi)的HEV主要為HEV-A種，目前共發(fā)現(xiàn)8個(gè)基因型，即HEV1型～HEV8型。

1997年，Meng等[4]在美國(guó)的豬群中分離到了HEV毒株，這是首次從動(dòng)物上分離到HEV毒株的報(bào)道，同時(shí)，研究人員發(fā)現(xiàn)其與人源HEV具有極高的同源性，且可感染黑猩猩和恒河猴，從而首次證實(shí)了HEV跨種間傳播的可能性。此后，在豬養(yǎng)殖業(yè)比較發(fā)達(dá)的國(guó)家和地區(qū)都鑒定出了豬源HEV毒株，豬也成為公認(rèn)的HEV最重要的自然宿主，且豬源HEV已被證實(shí)可以傳播給人并引起人群戊型肝炎聚集性暴發(fā)[5]。研究顯示，病毒基因組上ORF1片段的變異可能會(huì)導(dǎo)致其宿主適應(yīng)性的改變[6]，但目前HEV跨物種傳播的具體機(jī)制尚不完全清楚。

2 豬群HEV流行情況

世界范圍內(nèi)普遍存在于人群和豬群中的人獸共患型HEV主要是HEV-3型和HEV-4型。HEV-3型主要分布在歐洲(如英國(guó)、法國(guó)、新西蘭、西班牙、希臘、意大利)、美洲(如美國(guó)、阿根廷)、亞洲(如日本、中國(guó)、韓國(guó))、澳州(如澳大利亞)等國(guó)家和地區(qū)，而HEV-4型主要集中在中國(guó)、印度以及東亞的一些國(guó)家和地區(qū)。迄今為止，我國(guó)多個(gè)省份和地區(qū)都進(jìn)行了豬群HEV流行病學(xué)調(diào)查，結(jié)果顯示，HEV在我國(guó)豬群中呈普遍流行的趨勢(shì)[7-12]。葛勝祥等[12]對(duì)來(lái)自全國(guó)20個(gè)省共9 055只育成豬進(jìn)行抗-HEV抗體檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)的陽(yáng)性率差別較大，其中華東地區(qū)陽(yáng)性率最高(88.7%)，華中地區(qū)最低(77.2%)，東南地區(qū)主要檢出HEV-4型，HEV-3型檢出較少。目前研究一般認(rèn)為HEV-4型是我國(guó)豬場(chǎng)主要流行的基因型，研究人員對(duì)上海部分地區(qū)豬場(chǎng)進(jìn)行跟蹤調(diào)查后發(fā)現(xiàn)，受感染豬只HEV-3型的RNA陽(yáng)性率差異較大(4.0%～20.0%)，而HEV-4型則維持在較高水平(30.0%～44.0%)[13]，說(shuō)明不同基因型的HEV在豬中可能存在感染上的競(jìng)爭(zhēng)差異。Li等[7]首次在我國(guó)陜西省一養(yǎng)殖場(chǎng)的豬精液中檢測(cè)到了HEV的RNA，提示HEV可能通過(guò)人工授精在豬群中傳播。現(xiàn)有研究已證實(shí)HEV可以在豬場(chǎng)中持續(xù)存在，豬場(chǎng)的混批飼養(yǎng)模式、糞尿的不當(dāng)處理、畜舍及運(yùn)輸環(huán)境的污染、非商業(yè)化的自制飼料、嚙齒動(dòng)物的媒介作用等都可能是HEV在豬場(chǎng)中流行的重要風(fēng)險(xiǎn)因素[14]。

豬群HEV感染率與豬只年齡和生理狀態(tài)密切相關(guān)。由于母源抗體的保護(hù)，初生仔豬較少感染HEV，2～3月齡仔豬的HEV陽(yáng)性率較高，患病仔豬一般會(huì)表現(xiàn)出1～2周的病毒血癥，并在接下來(lái)的3～7周內(nèi)從糞便中大量排毒。而大部分育成豬雖然血清可能呈HEV-IgG陽(yáng)性，但并不排毒，這可能是由于HEV抗體在豬體內(nèi)可以長(zhǎng)期存在，且一個(gè)豬群在飼養(yǎng)過(guò)程中如果不斷有豬被感染，會(huì)使血清陽(yáng)性率存在累積升高的現(xiàn)象[10]。Li等[11]在四川省展開(kāi)研究，在其所調(diào)查的6個(gè)豬品種中，成華豬膽汁和糞便HEV RNA陽(yáng)性檢出率最高，但HEV感染率與豬品種的相關(guān)性仍需進(jìn)一步研究。此外，有報(bào)道發(fā)現(xiàn)，經(jīng)產(chǎn)母豬的HEV感染風(fēng)險(xiǎn)比預(yù)產(chǎn)期母豬高出約2.5倍[15]，這可能與分娩應(yīng)激或妊娠期間高類(lèi)固醇激素水平促進(jìn)HEV復(fù)制有關(guān)[16]，但仍需進(jìn)一步的研究加以證實(shí)。豬只自然感染HEV一般不表現(xiàn)明顯的臨床癥狀，病理組織學(xué)檢查可發(fā)現(xiàn)存在彌散性或局灶性的肝臟壞死，且免疫功能低下的病例可能呈現(xiàn)慢性感染。值得注意的是，有研究發(fā)現(xiàn)HEV和豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV)或豬圓環(huán)病毒2型(Porcine circovirus-2，PCV-2)共同感染時(shí)，病豬臨床癥狀會(huì)加重[17]，HEV是否是引起豬群其他疫病暴發(fā)的潛在因子亟待進(jìn)一步深入研究。飼養(yǎng)環(huán)境和飼養(yǎng)方式也是影響豬群HEV流行情況的重要因素。有調(diào)查顯示，普通養(yǎng)殖場(chǎng)豬HEV的感染率遠(yuǎn)高于SPF級(jí)豬養(yǎng)殖場(chǎng)，SPF級(jí)豬在普通養(yǎng)殖環(huán)境中飼養(yǎng)一段時(shí)間后亦會(huì)出現(xiàn)HEV感染[12]，提示我國(guó)部分養(yǎng)殖豬場(chǎng)現(xiàn)有的飼養(yǎng)方式和飼養(yǎng)環(huán)境可能易于HEV傳播。

研究人員對(duì)屠宰場(chǎng)豬HEV進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，英國(guó)有21%的豬在屠宰時(shí)HEV RNA檢測(cè)呈陽(yáng)性[18]，新加坡在進(jìn)口的活豬血清樣本和屠宰豬的肝臟樣品中也檢測(cè)到了病毒核酸[19]，提示存在豬源HEV通過(guò)豬肉產(chǎn)品流向人類(lèi)的風(fēng)險(xiǎn)。雖然HEV本身對(duì)外界的抵抗力不強(qiáng)，但屠宰場(chǎng)豬肉儲(chǔ)存和運(yùn)輸時(shí)常用的冷鏈系統(tǒng)在一定程度上有助于延長(zhǎng)豬肉中病毒的存活時(shí)間，可能造成攜帶HEV的肉產(chǎn)品流入消費(fèi)市場(chǎng)，導(dǎo)致人群暴發(fā)戊型肝炎[20]。已有研究報(bào)道從市場(chǎng)銷(xiāo)售的豬產(chǎn)品中檢測(cè)到了HEV，且不同豬產(chǎn)品中HEV RNA檢出率有一定差異，生豬肝和肝臟制品的檢出率最高，而豬肉及其制品則相對(duì)較低[21]。目前有關(guān)我國(guó)消費(fèi)市場(chǎng)中豬產(chǎn)品HEV攜帶率的研究較少。我國(guó)是一個(gè)豬肉消費(fèi)大國(guó)，地域廣泛，飲食習(xí)慣多樣，全面深入地調(diào)查國(guó)內(nèi)消費(fèi)市場(chǎng)豬產(chǎn)品HEV的流行情況將有利于提高動(dòng)物性食品安全監(jiān)管水平，并為制定相應(yīng)的公共衛(wèi)生政策提供科學(xué)依據(jù)。

3 國(guó)際貿(mào)易對(duì)HEV在全球范圍內(nèi)傳播的影響

隨著經(jīng)濟(jì)貿(mào)易全球化，疫病的傳播也呈現(xiàn)全球化態(tài)勢(shì)。一項(xiàng)關(guān)于HEV-4型在全球擴(kuò)散歷史的研究顯示，HEV-4型最初起源于日本，隨后擴(kuò)散至我國(guó)，并進(jìn)一步傳播至亞洲其他國(guó)家和歐洲部分地區(qū)，提示HEV在全球的擴(kuò)散可能與豬貿(mào)易與運(yùn)輸行業(yè)的發(fā)展有關(guān)[22]。多項(xiàng)研究表明，豬群HEV感染在全球范圍內(nèi)均呈現(xiàn)較高的趨勢(shì)，我國(guó)豬群HEV IgG血清陽(yáng)性率為48.0%(39.6%～56.9%)，HEV RNA陽(yáng)性率為14.4%(10.7%～18.5%)[23]；法國(guó)豬群HEV IgG血清陽(yáng)性率高達(dá)65.0%(57.0%～74.0%)，肝臟中HEV RNA 陽(yáng)性率為4.0%(2.0%～6.0%)[24]；對(duì)美國(guó)2017—2019年間屠宰場(chǎng)豬HEV的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，HEV RNA和血清IgG陽(yáng)性率分別為6.3%和40.0%[25]。那么，如何在進(jìn)出口貿(mào)易中避免HEV跨地區(qū)和國(guó)家傳播也正成為全球性的公共衛(wèi)生問(wèn)題。

4 HEV傳播方式

HEV主要經(jīng)糞口途徑或食源性傳播。1986年在新疆維吾爾自治區(qū)暴發(fā)的疫情中，被病毒污染的水即為HEV傳染源。有報(bào)道稱(chēng)在野外種植的草莓中曾檢測(cè)到了豬源HEV-3型，而灌溉用水被確認(rèn)為潛在的傳染源[26]。2018年我國(guó)青島某工廠發(fā)生的戊肝聚集性暴發(fā)就與該工廠食堂的豬內(nèi)臟菜品未煮熟有關(guān)[27]，其他國(guó)家也有因食用生的或未徹底加熱的豬肉而導(dǎo)致食源性HEV感染的類(lèi)似報(bào)告，包括英國(guó)、澳大利亞[18,28]等國(guó)家。

職業(yè)暴露也是HEV常見(jiàn)的傳播途徑，獸醫(yī)、養(yǎng)豬場(chǎng)和屠宰場(chǎng)從業(yè)人員感染人獸共患型HEV的風(fēng)險(xiǎn)會(huì)相對(duì)升高。研究發(fā)現(xiàn)，在普通人群、職業(yè)暴露人群和豬群中，HEV-IgG的血清陽(yáng)性率有較大差異，分別為27.3%、47.4%和66.4%[29]。普通人群直接接觸受感染動(dòng)物也會(huì)導(dǎo)致受感染的風(fēng)險(xiǎn)增加[30]。此外，HEV也可垂直傳播、血源性傳播和器官移植傳播等[20,31]。

5 HEV的診斷方法

目前，HEV的診斷主要基于血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)和分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)。在HEV被發(fā)現(xiàn)早期，研究人員通過(guò)免疫電子顯微鏡和免疫熒光顯微鏡對(duì)臨床樣本中的病毒顆粒或類(lèi)病毒顆粒進(jìn)行檢測(cè)，該檢測(cè)方法因準(zhǔn)確性較高，曾一度成為診斷HEV感染的金標(biāo)準(zhǔn)，但由于其操作復(fù)雜、靈敏度不高，現(xiàn)在已經(jīng)很少被采用。1990年Reyes等[3]首次應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(Reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)在實(shí)驗(yàn)獼猴的膽汁中檢測(cè)到了HEV RNA，由于RT-PCR具備敏感性高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，因此，這項(xiàng)技術(shù)在HEV的診斷中逐漸得到廣泛的應(yīng)用。此后，實(shí)時(shí)熒光定量PCR法(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)由于操作簡(jiǎn)便、特異性和靈敏度高，被廣泛應(yīng)用于病毒載量較低樣本的檢測(cè)[32-33]。相較于分子生物學(xué)檢測(cè)方法，血清抗原和抗HEV IgM/IgG的檢測(cè)在實(shí)際生產(chǎn)中的應(yīng)用更加廣泛，其具備操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，而且抗原還可以作為區(qū)分急慢性感染的指標(biāo)，并可以評(píng)估戊型肝炎的預(yù)后，實(shí)現(xiàn)HEV的簡(jiǎn)單分型，其應(yīng)用對(duì)于診斷的重要性不可忽視[34]。HEV的檢測(cè)技術(shù)不斷更新，HEV診斷和防控的效率也不斷提高，但不同技術(shù)各有其利弊，目前尚無(wú)公認(rèn)的HEV檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)。

6 展望

豬是HEV最為重要的自然宿主和傳染源，我國(guó)作為一個(gè)養(yǎng)豬和豬產(chǎn)品消費(fèi)大國(guó)，監(jiān)測(cè)HEV在豬群的流行規(guī)律并制定相應(yīng)的防控措施，對(duì)保證食品安全、保障人類(lèi)健康具有非常重要的公共衛(wèi)生意義。做好豬場(chǎng)日常飼養(yǎng)管理工作，提高豬群動(dòng)物福利水平，做到防病于未然，是避免豬群HEV等流行和暴發(fā)的重要措施，同時(shí)，也應(yīng)考慮全球豬貿(mào)易與運(yùn)輸行業(yè)的發(fā)展所帶來(lái)的HEV跨地區(qū)擴(kuò)散的傳播風(fēng)險(xiǎn)。

目前臨床尚無(wú)特異且適合推廣的對(duì)抗HEV感染的治療方法，通過(guò)各種綜合防治手段消除傳染源、切斷傳播途徑是防止豬HEV傳播給人類(lèi)的關(guān)鍵措施。因此，在養(yǎng)殖過(guò)程中應(yīng)注重畜舍、管理和運(yùn)輸工具、糞尿等的消毒和無(wú)害化處理，并加強(qiáng)外購(gòu)豬的檢疫，盡量采取“全進(jìn)全出”策略，以有效切斷HEV的傳播途徑。同時(shí)，應(yīng)做好養(yǎng)殖場(chǎng)和屠宰場(chǎng)工作人員的健康監(jiān)測(cè)，加強(qiáng)疫苗和治療手段的研發(fā)，以便防范和控制HEV的聚集性暴發(fā)。