趙春光，周晨，潘宏濤

(1.杭州龜鱉研究所，浙江 杭州 311201；2.杭州天辰水產(chǎn)有限公司，浙江 杭州 311200；3.艾杰斯生物科技有限公司，浙江 杭州 311200)

我國(guó)人工養(yǎng)殖和食用龜鱉已有上千年的歷史，養(yǎng)殖龜鱉不但是滿足民眾美好生活的市場(chǎng)需求，也是我國(guó)發(fā)展鄉(xiāng)村經(jīng)濟(jì)的特色高效項(xiàng)目之一。為了生產(chǎn)出高質(zhì)量的龜鱉產(chǎn)品，在人工養(yǎng)殖過程中，特別是疾病防治時(shí)就要做到無藥物殘留，需要有新產(chǎn)品、新方法來改變傳統(tǒng)的做法。為此，筆者介紹一種既能達(dá)到高效無害，又操作簡(jiǎn)便的方法，即在龜鱉健康養(yǎng)殖中應(yīng)用溶菌酶，以供養(yǎng)殖企業(yè)參考應(yīng)用。

一、溶解酶的優(yōu)點(diǎn)

1.性狀穩(wěn)定，環(huán)境要求低

溶菌酶作用的適宜溫度35～50℃、pH 5.3～7.4，其水溶液在pH 1.2～11.3穩(wěn)定。溶菌酶具有較強(qiáng)的熱穩(wěn)定性，在pH 4～7時(shí)，80℃條件下處理5分鐘、100℃條件下處理1分鐘，酶活仍然保持90%以上。溶菌酶為一種堿性蛋白質(zhì)，常與氯離子結(jié)合成為溶菌酶氯化物，不會(huì)因?yàn)橛袡C(jī)溶劑的處理而失活，不易被胃酸分解，性狀穩(wěn)定。

2.聯(lián)用性廣，安全環(huán)保

溶菌酶具有良好的生物相容性，是乳酸菌、雙歧桿菌等體內(nèi)有益菌的增殖因子，與動(dòng)物體內(nèi)多元生物物質(zhì)聯(lián)合作用，可增強(qiáng)免疫、抑殺多種病原菌。溶菌酶對(duì)于耐藥性細(xì)菌有確切抑殺效果。

3.操作簡(jiǎn)單，應(yīng)用成本低

無論作為促進(jìn)生長(zhǎng)的內(nèi)服添加，還是防治疾病的外部應(yīng)用，都非常簡(jiǎn)單易行。一般養(yǎng)殖戶只要經(jīng)過1次培訓(xùn)和實(shí)地操作，就能基本學(xué)會(huì)操作。溶菌酶的應(yīng)用成本也很低，如寧波某水產(chǎn)養(yǎng)殖公司在養(yǎng)殖有機(jī)甲魚過程中，應(yīng)用溶菌酶進(jìn)行防病，用藥成本比過去傳統(tǒng)方法降低12%。

二、溶菌酶的基本功能

有關(guān)研究和實(shí)踐表明，溶菌酶具有以下基本功能。

1.抗菌、消炎功能

溶菌酶主要通過破壞細(xì)胞壁的β-1,4糖苷鍵，導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂、內(nèi)容物逸出而使細(xì)菌死亡，對(duì)革蘭氏陽性菌、耐輻射微球菌均具有良好的分解作用，對(duì)大腸桿菌、巴氏桿菌、沙門氏菌、結(jié)核分枝桿菌和副血性弧菌等致病菌也具有明顯溶解作用。

2.抗病毒功能

溶菌酶在酸堿度中性環(huán)境下帶有正電荷，可與帶負(fù)電荷的病毒蛋白直接作用，使侵入體內(nèi)的病毒失活；可以抑制流感病毒和腺病毒生長(zhǎng)，阻止皰疹病毒感染。

3.增強(qiáng)免疫力

溶菌酶參與機(jī)體多種免疫反應(yīng)，保持生理平衡；能誘導(dǎo)Ⅱ型T輔助細(xì)胞反應(yīng)，減少外來抗原的刺激，提高抗病力和生產(chǎn)性能。

4.修復(fù)創(chuàng)傷組織

溶菌酶具有激活血小板、改善血液循環(huán)、分解膿液、修復(fù)創(chuàng)傷組織的功能，對(duì)動(dòng)物生殖系統(tǒng)的修復(fù)及腸道黏膜修復(fù)等有較好的效果。

三、溶菌酶在龜鱉健康養(yǎng)殖中的應(yīng)用現(xiàn)狀

目前，我國(guó)在醫(yī)學(xué)、食品、生物工程等領(lǐng)域?qū)θ芫高M(jìn)行了深入的應(yīng)用開發(fā)，并普及到陸生動(dòng)物和水生動(dòng)物的健康養(yǎng)殖中，取得了很好的效果。因種種原因，據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，在龜鱉的健康養(yǎng)殖中應(yīng)用率只有22%，且長(zhǎng)期應(yīng)用率不到10%，造成這種現(xiàn)狀的主要原因有以下幾點(diǎn)。

1.宣傳推廣力度不夠，認(rèn)知差

雖然我國(guó)是全球最大的龜鱉養(yǎng)殖生產(chǎn)國(guó)，綜合養(yǎng)殖技術(shù)也走在世界前列。但大多數(shù)養(yǎng)殖模式和生產(chǎn)方式還秉承改革開放以來的慣用規(guī)程和措施，加之對(duì)新產(chǎn)品、新技術(shù)的宣傳力度不夠，產(chǎn)品不為人知是主要原因。特別是行業(yè)內(nèi)的一些交流會(huì)議，本來是最好的宣傳機(jī)會(huì)，但開會(huì)時(shí)各種與養(yǎng)殖有關(guān)的生產(chǎn)資料，如飼料、添加劑、生物制品和藥物充滿會(huì)場(chǎng)，即使有人宣傳溶菌酶，也被繁雜的各種產(chǎn)品搞得無所適從。而那些本來養(yǎng)得不錯(cuò)、自我感覺很好的養(yǎng)殖企業(yè)和養(yǎng)殖戶，就更難接受新觀念、新技術(shù)與新產(chǎn)品了。

2.生產(chǎn)試驗(yàn)缺乏，說服力差

一項(xiàng)新產(chǎn)品從發(fā)明到應(yīng)用，必須呈現(xiàn)從實(shí)驗(yàn)室到生產(chǎn)試驗(yàn)的每一步研究驗(yàn)證數(shù)據(jù)，推廣才有說服力。特別是不同的養(yǎng)殖動(dòng)物都有著不同的生物學(xué)特性，所以產(chǎn)生的應(yīng)用效果也會(huì)存在差異。據(jù)了解，溶菌酶產(chǎn)品在推廣宣傳過程中，當(dāng)龜鱉養(yǎng)殖戶提到龜鱉試驗(yàn)數(shù)據(jù)時(shí)，推廣者都拿不出來，或拿出一些陸生動(dòng)物的試驗(yàn)數(shù)據(jù)來說明效果，養(yǎng)殖戶不信服也在情理之中了。

3.效果評(píng)估依據(jù)少，吸引力差

養(yǎng)殖者對(duì)產(chǎn)品的直觀要求是3點(diǎn)，一是能促進(jìn)多少生長(zhǎng)，二是防治疾病的實(shí)際效果如何，三是能增多少效益。如果對(duì)這3點(diǎn)作用不大甚至沒有作用，養(yǎng)殖者就不會(huì)去考慮應(yīng)用。但到目前為止，推廣人員對(duì)產(chǎn)品的優(yōu)勢(shì)、概念宣傳較多，直接或間接效益評(píng)估很少，甚至到最后連推廣者自己也不知道到底應(yīng)用該產(chǎn)品能產(chǎn)生多大效果。在龜鱉養(yǎng)殖過程中，由于影響其生長(zhǎng)的因素很多，所以必須要有產(chǎn)品單因子影響的程度和增效之間的直接關(guān)系，并有增效數(shù)據(jù)證明，應(yīng)用者才會(huì)接受。產(chǎn)品的增效試驗(yàn)與研究評(píng)估缺乏，就降低了溶菌酶產(chǎn)品對(duì)龜鱉養(yǎng)殖企業(yè)的吸引力。

四、溶菌酶在龜鱉健康養(yǎng)殖中的使用方法

市場(chǎng)上溶菌酶的應(yīng)用制品很多，在龜鱉健康養(yǎng)殖中，筆者的經(jīng)驗(yàn)是應(yīng)用獸用和魚用原粉、制品比較好。原粉通常為溶菌酶650萬單位/克，制品通常為溶菌酶50萬單位/克。在應(yīng)用過程中，可根據(jù)龜鱉的不同生長(zhǎng)階段和應(yīng)用目標(biāo)進(jìn)行靈活配制，根據(jù)溶菌酶的功能特性和龜鱉生態(tài)生物學(xué)特性，筆者將其分為促進(jìn)健康生長(zhǎng)、預(yù)防疾病和治療疾病3個(gè)方面作用。

1.促進(jìn)龜鱉健康生長(zhǎng)

通過添加溶菌酶，調(diào)節(jié)龜鱉腸道菌群平衡、保持機(jī)體生理平衡、減少外來抗原的刺激，從而提高抗病力和生產(chǎn)性能，促進(jìn)龜鱉健康生長(zhǎng)。采用日糧添加口服法，飼料中添加50萬單位/克的口服制成品，按實(shí)際需要量投喂。

(1)龜鱉苗種培育階段。一般分為兩期，第1期龜鱉規(guī)格在5～250克/只的小苗期間，每千克飼料添加1克溶菌酶，一直添加到250克/只時(shí)開始分養(yǎng)。第2期為龜鱉規(guī)格在251～400克/只的幼種期間，每千克飼料添加1克溶菌酶，每月添加2次，每次7天，添加時(shí)間在月初與月中。

(2)養(yǎng)成階段。龜鱉規(guī)格在400～750克/只的商品養(yǎng)成期間，每千克飼料添加1克溶菌酶，每月投喂7天，時(shí)間在月初。

(3)繁育階段。龜鱉規(guī)格在750克/只以上的親本產(chǎn)卵期間，每千克飼料添加1.2克溶菌酶，每月投喂7天，時(shí)間在月初。

為提高效果，可在添加溶菌酶的基礎(chǔ)上添加一些多糖、多維類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。值得注意的是，添加時(shí)應(yīng)避開高溫膨化或熟化加工工藝，在操作時(shí)應(yīng)先溶于水，再吸附到已加工好的飼料上(圖1)。

圖1 添加時(shí)應(yīng)避開高溫膨化或熟化加工工藝

浙江湖州某甲魚養(yǎng)殖戶從2006年開始使用溶菌酶，直到2017年拆遷。10年內(nèi)養(yǎng)殖全程不用抗生素，每年養(yǎng)殖225天，每萬只鱉苗產(chǎn)量平均達(dá)到3 800千克，最高達(dá)4 000千克，取得了很好的經(jīng)濟(jì)效益。同樣，山東濟(jì)寧某中華鱉良種場(chǎng)用中華鱉黃河品系，在控溫溫室養(yǎng)鱉，放養(yǎng)密度為60只/米2，養(yǎng)到3個(gè)月，比往年不用溶菌酶增產(chǎn)15%左右。后來通過測(cè)定和因素分析，認(rèn)為主要是溶菌酶改善了消化道環(huán)境，促進(jìn)了鱉的生長(zhǎng)。

2.預(yù)防龜鱉疾病

溶菌酶預(yù)防龜鱉疾病分為預(yù)防體內(nèi)疾病和體表疾病。體內(nèi)疾病預(yù)防可參照日糧添加口服法的添加量和操作方法，體表疾病可用浸泡法和藥浴法。浸泡法是指在龜鱉轉(zhuǎn)塘或運(yùn)輸后下池前的龜鱉體表消毒，這項(xiàng)工序?qū)τ陬A(yù)防龜鱉體表疾病十分重要。

(1)龜鱉苗(10克/只以內(nèi))下池前，用溶菌酶原粉1克加水20千克，在光滑的大盆中浸泡10分鐘。

(2)龜鱉幼種(250～400克/只)，用溶菌酶原料粉1.5克加水30千克的溶液中浸泡10分鐘。

(3)龜鱉成體(含繁育親本)，用溶菌酶原料粉2克加水30千克的溶液中浸泡10分鐘。

龜鱉在浸泡時(shí)，盆中水位沒過體背即可，不用太多。一般每盆可浸泡3次，第3次浸泡后可把龜鱉連水一起倒入放養(yǎng)池中(圖2)。

圖2 放養(yǎng)前鱉體用溶菌酶浸泡消毒

3.治療龜鱉疾病

有龜鱉疾病發(fā)生的養(yǎng)殖企業(yè)，如發(fā)現(xiàn)有腸炎或內(nèi)臟有炎癥但還能吃食時(shí)，可用溶菌酶聯(lián)合抗生素及時(shí)治療。方法為每千克飼料添加溶菌酶制品2克(50萬單位/克)，同時(shí)添加適量的抗生素制成藥餌投喂1周即可。

如是治療體表損傷感染疾病，可用聯(lián)合療法進(jìn)行藥浴治療。方法為溶菌酶原粉10克加氟本尼考5毫克/升藥浴發(fā)病龜鱉20分鐘。浸泡水深以沒過龜鱉背為宜，一般每盆藥水浸泡3次，3次后將龜鱉連同藥水一起倒入池中，效果顯著(圖3)。

圖3 用溶菌酶給龜體定期消毒

杭州某生態(tài)鱉養(yǎng)殖場(chǎng)，2017年開始用上述方法防治中華草龜疾病，連續(xù)3年沒發(fā)生過因病死亡的情況。寧波某水產(chǎn)養(yǎng)殖公司從1998年開始在龜鱉養(yǎng)殖中應(yīng)用溶菌酶，不用任何抗生素，產(chǎn)品順利獲得有機(jī)認(rèn)證。有機(jī)產(chǎn)品在市場(chǎng)的售價(jià)高出普通產(chǎn)品好幾倍，取得了很好的經(jīng)濟(jì)效益。