尋丹 胡嫻 楊沙沙

作者單位：湖南省職業(yè)病防治院檢驗(yàn)科，湖南 長沙 410000

在臨床檢驗(yàn)科室中標(biāo)本溶血現(xiàn)象較為普遍，由于臨床檢查標(biāo)本未及時(shí)送檢或者采集環(huán)節(jié)不規(guī)范等情況，均可能會(huì)造成出現(xiàn)標(biāo)本溶血情況[1]。有相關(guān)臨床表明，標(biāo)本溶血會(huì)導(dǎo)致最終檢測指標(biāo)發(fā)生一定程度的變化，并且在標(biāo)本溶血環(huán)節(jié)中相關(guān)因素（如繼發(fā)性理化）的影響，均會(huì)不同程度造成臨床檢測指標(biāo)出現(xiàn)異常波動(dòng)或者精確度較低[2-3]?，F(xiàn)階段對(duì)于標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響的相關(guān)研究資料較為豐富。但是其對(duì)于電解質(zhì)、心肌酶等生化檢測指標(biāo)的影響還未進(jìn)一步明確，同時(shí)局部指標(biāo)研究結(jié)果存在爭議性，為此還需開展研究進(jìn)一步證實(shí)[4]。鑒于此，文章通過研究分析標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)中相關(guān)指標(biāo)（電解質(zhì)、心肌酶）所帶來的臨床影響，旨在提供臨床檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，現(xiàn)內(nèi)容如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取湖南省職業(yè)病防治院2021 年4 月—2022 年4 月開展生化檢驗(yàn)的外周血液樣本（研究數(shù)量為150 份），將其視為本研究觀察對(duì)象。納入指標(biāo)：（1）外周血液樣本并未受到任何不良污染。（2）并未出現(xiàn)凝血塊等物質(zhì)。（3）在送檢過程中未發(fā)生溶血情況。排除指標(biāo)：（1）血液疾病者。（2）重要臟器功能障礙者。（3）患有器質(zhì)性疾病。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后才實(shí)施

1.2 方法

對(duì)全部送檢樣本進(jìn)行離心干預(yù)，轉(zhuǎn)速控制在1 000 r/min，離心時(shí)間為5 min，使用全自動(dòng)生化分析儀（日本日立公司，型號(hào)：760-020）對(duì)電解質(zhì)、肝功能以及血脂等相關(guān)生化指標(biāo)進(jìn)行檢測，采取免疫發(fā)光法對(duì)N 末端B 型腦鈉肽前體（N-terminal portion of pro-brain natriuretic peptide，NT-proBNP）和肌鈣蛋白Ⅰ（cardiac troponin Ⅰ，cTnⅠ）進(jìn)行檢測。溶血操作如下：對(duì)血塊進(jìn)行攪動(dòng)，促使血液樣本出現(xiàn)溶血情況，進(jìn)行離心干預(yù)（轉(zhuǎn)速控制在3 000 r/min，離心時(shí)間為10 min），當(dāng)肉眼能夠觀察到血清顏色為淡紅色時(shí)，則可使用血球分析儀器（日本SYSMEX（希森美康）公司，型號(hào)：XN-20AI，血常規(guī)型號(hào)：XN-1000）對(duì)血紅蛋白（hemoglobin，HGB）濃度水平進(jìn)行檢測，根據(jù)其溶血情況將其劃分為輕中度溶血組（即HGB 濃度水平小于4 g/L，n=116）以及重度溶血組（HGB 濃度水平大于4 g/L，n=34）。

1.3 觀察指標(biāo)

研究分析溶血前后以及溶血情況不同的檢測樣本在電解質(zhì)（K、Na、Cl、Ca）、心肌酶[肌酸激酶（creatine kinase，CK）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzyme，CK-MB）、前體N末端前腦利鈉肽（NT-proBNP）和肌鈣蛋白Ⅰ（cTnⅠ）]、血脂水平相關(guān)指標(biāo)[總膽固醇（serum total cholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（lowdensity lipoprotein cholesterol，LDL-C）]、肝功能相關(guān)指標(biāo)[丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransferase，AST）、總蛋白（total protein，TP）]的變化情況[5]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)均放置于SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行計(jì)算，計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)。以P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 電解質(zhì)相關(guān)指標(biāo)的變化情況

較之溶血前，外周血樣檢測樣本中電解質(zhì)（K、Cl 以及Ca）相關(guān)指標(biāo)水平均明顯增加，并且較之輕中度溶血組而言，重度溶血組上述電解質(zhì)指標(biāo)水平均更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；然而在溶血前、溶血后Na 指標(biāo)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 電解質(zhì)相關(guān)指標(biāo)水平的變化情況（mmol/L， ±s）

表1 電解質(zhì)相關(guān)指標(biāo)水平的變化情況（mmol/L， ±s）

注：t1、P1 值為輕中度溶血與溶血前對(duì)比的統(tǒng)計(jì)值，t2、P2 值為重度溶血與溶血前對(duì)比的統(tǒng)計(jì)值，t3、P3 值為重度溶血與輕中度溶血對(duì)比的統(tǒng)計(jì)值。

組別 K Na Cl Ca溶血前（n=150） 4.22±0.23 129.76±2.26 95.56±3.79 2.39±0.27輕中度組（n=116） 5.09±0.39 129.89±3.51 105.94±4.13 2.57±0.42重度組（n=34） 6.32±0.41 129.95±3.76 112.23±5.24 3.12±0.45 t1 值 22.697 0.366 21.298 4.238 P1 值 0.000 0.715 0.000 0.000 t2 值 40.701 0.385 21.452 12.378 P2 值 0.000 0.701 0.000 0.000 t3 值 15.986 0.086 7.327 6.607 P3 值 0.000 0.931 0.000 0.000

2.2 心肌酶

較之溶血前，外周血樣檢測樣本中心肌酶（CK、CK-MB、NT-proBNP 以及cTnⅠ）相關(guān)指標(biāo)水平均明顯增加，并且較之輕中度溶血組而言，重度溶血組上述電解質(zhì)指標(biāo)水平均更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 心肌酶相關(guān)指標(biāo)的變化情況（±s）

表2 心肌酶相關(guān)指標(biāo)的變化情況（±s）

注：t1、P1 值為輕中度溶血與溶血前對(duì)比的統(tǒng)計(jì)值，t2、P2 值為重度溶血與溶血前對(duì)比的統(tǒng)計(jì)值，t3、P3 值為重度溶血與輕中度溶血對(duì)比的統(tǒng)計(jì)值。

組別 CK（U/L） CK-MB（U/L） NT-proBNP（μg/L） cTnⅠ（μg/L）溶血前（n=150） 86.76±8.16 8.46±1.13 80.34±6.96 0.011±0.002輕中度組（n=116） 136.75±14.59 13.45±2.14 120.65±9.98 0.028±0.005重度組（n=34） 157.22±15.08 20.92±3.12 143.26±11.34 0.039±0.009 t1 值 35.419 24.491 38.766 37.919 P1 值 0.000 0.000 0.000 0.000 t2 值 37.911 39.130 41.743 34.783 P2 值 0.000 0.000 0.000 0.000 t3 值 7.140 16.003 11.257 9.213 P3 值 0.000 0.000 0.000 0.000

2.3 血脂水平相關(guān)指標(biāo)

較之溶血前，外周血樣檢測樣本中血脂（TC、LDL-C）相關(guān)指標(biāo)濃度水平均明顯增加，并且較之輕中度溶血組而言，重度溶血組上述電解質(zhì)指標(biāo)水平均更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；然而在溶血前、溶血后TG 指標(biāo)水平與HDL-C 指標(biāo)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表3。

表3 血脂水平相關(guān)指標(biāo)（mmol/L，±s）

表3 血脂水平相關(guān)指標(biāo)（mmol/L，±s）

注：t1、P1 值為輕中度溶血與溶血前對(duì)比的統(tǒng)計(jì)值，t2、P2 值為重度溶血與溶血前對(duì)比的統(tǒng)計(jì)值，t3、P3 值為重度溶血與輕中度溶血對(duì)比的統(tǒng)計(jì)值。

組別 TC TG HDL-C LDL-C溶血前（n=150） 7.96±1.13 1.44±0.43 2.38±0.22 0.89±0.23輕中度組（n=116） 8.99±1.13 1.45±0.49 2.37±0.24 1.13±0.32重度組（n=34） 9.83±1.22 1.47±0.55 2.42±0.29 1.31±0.43 t1 值 7.372 0.177 0.353 7.113 P1 值 0.000 0.860 0.724 0.000 t2 值 8.585 0.348 0.899 7.977 P2 值 0.000 0.728 0.370 0.000 t3 值 3.743 0.204 1.017 2.656 P3 值 0.000 0.839 0.311 0.001

2.4 肝功能相關(guān)指標(biāo)

較之溶血前，外周血樣檢測樣本中肝功能（ALT、AST 以及TP）相關(guān)指標(biāo)濃度水平均明顯增加，并且較之輕中度溶血組而言，重度溶血組上述肝功能相關(guān)指標(biāo)水平均更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表4。

表4 肝功能相關(guān)指標(biāo)（±s）

表4 肝功能相關(guān)指標(biāo)（±s）

注：t1、P1 值為輕中度溶血與溶血前對(duì)比的統(tǒng)計(jì)值，t2、P2 值為重度溶血與溶血前對(duì)比的統(tǒng)計(jì)值，t3、P3 值為重度溶血與輕中度溶血對(duì)比的統(tǒng)計(jì)值。

組別 ALT（IU/L） AST（IU/L） TP（g/L）溶血前（n=150） 16.79±2.22 20.13±2.89 72.69±2.46輕中度組（n=116） 20.93±0.79 33.23±3.07 74.26±3.13重度組（n=34） 26.79±2.74 45.42±3.22 85.36±4.74 t1 值 19.162 35.677 4.581 P1 值 0.000 0.000 0.000 t2 值 22.664 45.095 22.200 P2 值 0.000 0.000 0.000 t3 值 20.450 20.137 16.021 P3 值 0.000 0.000 0.000

3 討論

標(biāo)本存放的具體時(shí)長或者所使用的采血管的不同均可能會(huì)對(duì)標(biāo)本采取環(huán)節(jié)中發(fā)生血細(xì)胞溶解等不良情況，從而造成血漿或者血清總血紅蛋白指標(biāo)濃度水平呈明顯的上升趨勢[6-7]。就血細(xì)胞溶解環(huán)節(jié)而言，通常情況下會(huì)隨著顯著理化因素的改變，細(xì)胞內(nèi)部不同離子物質(zhì)會(huì)逐漸釋放，從而進(jìn)入血液之中，病情細(xì)胞內(nèi)部的相關(guān)大分子結(jié)合物質(zhì)（例如肌鈣蛋白與線粒體代謝產(chǎn)物等）指標(biāo)水平均呈限制的上升趨勢。有相關(guān)臨床研究表明，通過研究分析一定數(shù)量的血液檢測樣本（數(shù)量為1 136 份），其中有部分血液樣本（數(shù)量為139 份）出現(xiàn)溶血情況，并且一些血樣檢測樣本溶血率已經(jīng)超過25%[8]。究其原因，其一，可能是因?yàn)檠簶颖静杉蟓h(huán)境穩(wěn)定具備不穩(wěn)定性；其二，可能是由于轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)長相對(duì)較久等因素的影響[9]。通過對(duì)出現(xiàn)溶血現(xiàn)象的血液樣本研究可知，溶血樣本檢測值波動(dòng)性相對(duì)較為明顯，指標(biāo)水平的精確度相對(duì)較低，以至于可靠性不高。

電解質(zhì)（如K、Cl 以及Ca 等）作為臨床診治過程中能夠清楚反映出患者實(shí)際衰竭或者代謝或者電解質(zhì)紊亂等情況中的主要評(píng)估指標(biāo)之一，其會(huì)在血細(xì)胞溶解過程中大規(guī)模地釋放與產(chǎn)生，能夠一定對(duì)有關(guān)電解質(zhì)波動(dòng)情況起到中和作用，所以臨床上對(duì)于電解質(zhì)相關(guān)臨床檢測指標(biāo)有無限制變化情況依舊存在著一定程度的爭議[10-11]。本研究結(jié)果顯示，在溶血后的外周血血液檢測樣本中電解質(zhì)相關(guān)指標(biāo)水平均顯著高于溶血前的水平。由此可見，檢測標(biāo)本中K、Ca 以及Cl 等電解質(zhì)指標(biāo)水平會(huì)一定程度上受到溶血影響，然而在本研究中沒有切實(shí)觀察到溶血后電解質(zhì)Na 指標(biāo)水平的變化情況，可能是因?yàn)榧?xì)胞外部Na 指標(biāo)水平相對(duì)較高，細(xì)胞內(nèi)部一些Na 指標(biāo)水平在發(fā)生外流后并不會(huì)受到Na 數(shù)量的變化。為此Na 水平具備一定程度穩(wěn)定性，并且K、Cl 等相關(guān)電解質(zhì)離子變化和細(xì)胞分解后細(xì)胞質(zhì)內(nèi)部或者內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)部有關(guān)離子的產(chǎn)生存在密切關(guān)聯(lián)性[12]。心肌酶（如CK、CK-MB 等）相關(guān)指標(biāo)水平是臨床表現(xiàn)心肌梗死或者其他心血管相關(guān)疾病的一項(xiàng)關(guān)鍵參考指標(biāo)，并且其所獲得的臨床檢測值存在較為突出的臨床意義[13-14]。本研究結(jié)果可知，心肌酶的變化情況比較限制。有相關(guān)臨床研究表明，在對(duì)溶血標(biāo)本進(jìn)行檢測時(shí)，溶血后的CK 與CK-MB 等相關(guān)心肌酶指標(biāo)水平均大約增加了25%、30%，并且伴隨著溶血時(shí)間不斷增加，溶血程度則會(huì)呈明顯的上升趨勢，并且上述心肌酶評(píng)估指標(biāo)水平的變化程度也會(huì)更加明顯[15-16]。就機(jī)制角度出現(xiàn)，此種情況可能和溶血時(shí)間較久而造成血漿之中有關(guān)心肌酶譜的積聚情況存在密切關(guān)聯(lián)性，同時(shí)也可能是由于溶血后血漿中相互結(jié)合情況的心肌酶譜釋放有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，溶血后血脂相關(guān)指標(biāo)（TC、LDL-C）水平產(chǎn)生顯著的改變，然而并沒有切實(shí)觀察到TG、HDL-C 的改變，在臨床檢測過程中HDL-C 與LDL-C 均能夠?qū)⑵湟暈樵u(píng)估心血管疾病的主要危險(xiǎn)影響因素。通過對(duì)HDL-C 與LDL-C 進(jìn)行檢測，其具備良好的穩(wěn)定性，能夠?qū)⑵湟暈榕R床溶血中比較可靠、準(zhǔn)確的評(píng)估參考依據(jù)[17-19]。本研究結(jié)果還表明，溶血后樣本肝功能相關(guān)指標(biāo)水平（如ALT、AST 以及TP）均呈顯著上升趨勢，就機(jī)制方面而言，溶血后肝功能相關(guān)指標(biāo)水平的明顯上升可能和下面因素存在密切關(guān)聯(lián)，具體如下：其一，肝功能相關(guān)指標(biāo)水平在血細(xì)胞內(nèi)部具備一定表達(dá)情況，溶血后因?yàn)榫€粒體膜組織的通透性提高，進(jìn)而導(dǎo)致肝功能相關(guān)指標(biāo)水平的產(chǎn)生與釋放[20]。其二，在實(shí)際溶血環(huán)節(jié)中，因?yàn)檠獫{（繼發(fā)性）中不同細(xì)胞成分的不斷積聚，能夠明顯推動(dòng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或者線粒體應(yīng)激反應(yīng)更加強(qiáng)烈，從而導(dǎo)致肝功能有關(guān)指標(biāo)水平波動(dòng)更加限制。

綜上，標(biāo)本溶血對(duì)于生化檢測結(jié)果之中電解質(zhì)（如K、Ca 等）、心肌酶（如CK、CK-MB 等）、肝功能相關(guān)指標(biāo)水平（ALT、AST 以及TP）以及血脂相關(guān)指標(biāo)水平（TC、LDL-C）均存在較為顯著的影響，然而在溶血后患者血清檢測樣本中HDL-C 與TG 等相關(guān)指標(biāo)水平的變化卻不太限制，為此應(yīng)該進(jìn)一步擴(kuò)大研究樣本數(shù)量，對(duì)上述相關(guān)指標(biāo)水平的具體機(jī)制進(jìn)一步深度研究與分析。此外，文章中體現(xiàn)了《溶血指數(shù)質(zhì)量指標(biāo)建立與標(biāo)本管理專家共識(shí)》[21]的臨床參考或執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)。