焦子康，鐘代彬，張 闊，武 珊，馬洪玲，位壽朋

（1. 北京奶牛中心，北京 100192；2. 奶牛遺傳育種與繁殖北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100192；3. 河北錦坤動(dòng)物藥業(yè)有限公司，河北 石家莊 052300；4. 北京市延慶區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，北京 102100）

牛傳染性角膜結(jié)膜炎（infectious bovine keratoconjunctivitis，IBK）又稱紅眼病、新森林病[1]、傳染性眼炎等。牛摩拉氏菌（Moraxella bovis）是該病最常見的病原，存在于患牛的眼分泌物中。IBK多發(fā)于夏季飼養(yǎng)于室外的牛，夏季日照強(qiáng)烈，陽光中的紫外線可損傷角膜上皮細(xì)胞，也可激活康復(fù)牛眼結(jié)膜中非溶血性牛摩拉氏菌，進(jìn)而引發(fā)此病。蚊、蠅作為主要的傳播媒介，將感染牛眼鼻分泌物中的牛摩拉氏菌攜帶至未感染牛眼[2]，造成其他牛感染；或由疫病區(qū)傳至無疫病區(qū)，造成暴發(fā)式傳染。IBK病情發(fā)展迅速，由最初的潮紅、畏光流淚轉(zhuǎn)為眼瞼腫脹，角膜形成潰瘍，發(fā)展至角膜深層形成血管與肉芽組織，嚴(yán)重者角膜可能發(fā)生穿孔。患病牛眼睛疼痛，食欲下降或者廢絕。IBK可影響犢牛生長(zhǎng)發(fā)育，肉牛體重減輕，奶牛產(chǎn)奶量減少，種公牛精液質(zhì)量下降或無法采精，造成巨大損失。

IBK治療周期短則數(shù)周，長(zhǎng)則數(shù)月。治療周期延長(zhǎng)不僅增加治療難度，也增加治療成本。本文對(duì)IBK的危害及防治措施進(jìn)行梳理總結(jié)，以期為此病的相關(guān)研究和防治工作提供參考。

1 流行病學(xué)

1.1 病原

牛摩拉氏菌為革蘭氏陰性菌，長(zhǎng)1.5～2.0 μm，寬0.5～1.0 μm，雙鏈或短鏈，不運(yùn)動(dòng)，有莢膜，無芽孢。牛摩拉氏菌可根據(jù)致病力分為致病型和非致病型[3]。

致病型牛摩拉氏菌溶血，菌落粗糙，借助菌毛附著于角膜上皮，可產(chǎn)生a型或b型菌毛素，其中b型菌毛素與致病力有關(guān)。除菌毛外，牛致病型摩拉氏菌可產(chǎn)生溶血素，具有一定抵抗牛嗜中性粒細(xì)胞毒性的作用。非致病型牛摩拉氏菌不溶血，菌落平滑，無毒力。牛摩拉氏菌對(duì)常規(guī)消毒劑敏感，外界環(huán)境中可存活24 h[4]。

除牛摩拉氏菌外，支原體、牛皰疹病毒（BHV-1）以及衣原體、立克次體、寄生蟲和某些病毒等亦可致病[5]。有研究人員從患傳染性角膜結(jié)膜炎的病牛眼中分離得到一種皰疹病毒，能夠在牛肺細(xì)胞單層上培養(yǎng)且于72～96 h 內(nèi)具有細(xì)胞致病作用；將此病毒接種于結(jié)膜囊，能夠成功復(fù)制典型的角膜結(jié)膜炎[6-7]。研究人員從患有傳染性角膜結(jié)膜炎的病牛眼中分離得到衣原體，并將其通過豚鼠和雞胚傳代后接種于犢牛眼睛，引起了結(jié)膜炎，但未表現(xiàn)角膜炎癥狀[7]。有研究在牛羊患畜結(jié)膜上皮中發(fā)現(xiàn)了立克次氏體[6-7]，后稱其為結(jié)膜立克次氏體；結(jié)膜立克次氏體為圓盤形小體，具有多形性，吉姆薩染色后呈邊緣藍(lán)紫色、中央淡藍(lán)色，對(duì)外界抵抗力不強(qiáng)，但在康復(fù)動(dòng)物的結(jié)膜細(xì)胞內(nèi)可存活數(shù)月[8]，病原體可隨患畜眼鼻分泌物排出[9]。研究表明，將含結(jié)膜立克次氏體的懸液接種于孵化6 d 的雞胚卵黃囊中可成功培養(yǎng)；將培養(yǎng)物接種于眼前房，經(jīng)過一定潛伏期后可引起角膜結(jié)膜炎[7]。

1.2 流行特點(diǎn)

IBK 病原多樣，其中，牛摩拉氏菌是本病的常見病原[10]。牛摩拉氏菌多見于患病動(dòng)物的眼睛及鼻腔分泌物中，可于鼻腔中存在一年并持續(xù)感染[11-12]。患病牛及帶菌牛是牛摩拉氏菌的主要傳染源，通過直接接觸含有病原的媒介傳播[13]，蚊、蠅等是主要的傳播媒介，動(dòng)物間接觸、手以及設(shè)施設(shè)備等亦可傳播。冬季陽光不足，蚊、蠅數(shù)量較少，但該病仍時(shí)有發(fā)生，可能與病毒性結(jié)膜炎、牛病毒性腹瀉-黏膜病、病毒性上呼吸道感染并發(fā)，非致病型牛摩拉氏菌病的菌株轉(zhuǎn)化為致病株所致[14]。各年齡階段的犢牛、奶牛和公牛均可發(fā)病，以室外飼養(yǎng)的犢牛和青年母牛發(fā)病最多，多見于日照最強(qiáng)和蚊蠅最多的夏秋季節(jié)。紫外線強(qiáng)烈[15]、蚊蠅滋生及雜草、花粉或粉塵刺激眼部等可均加快該病的病程。

2 臨床癥狀及診斷

病初眼瞼及周圍組織腫脹、發(fā)紅，眼睛疼痛，眼瞼痙攣，畏光、大量流淚，眼分泌物為漿液至黏液膿性。2～6 d后角膜混濁，角膜周圍嚴(yán)重充血呈紫紅色，中心位置潰瘍，可見角膜水腫、角膜緣深部血管形成和瞳孔縮小，嚴(yán)重時(shí)可擴(kuò)展至整個(gè)眼睛；眼瞼痙攣引起眼瞼腫脹，呈半閉狀態(tài)。癥狀嚴(yán)重未及時(shí)治療可致角膜穿孔或失明。動(dòng)物局部升溫，因疼痛導(dǎo)致食欲減退或廢絕，日增重、奶牛產(chǎn)奶量和公牛精液質(zhì)量下降。牛傳染性角膜結(jié)膜炎潛伏期為2～7 d，一般發(fā)病3～5 d恢復(fù)，少數(shù)牛久治不愈或愈后復(fù)發(fā)，多數(shù)?？祻?fù)后角膜中央可見角膜翳或白斑，但對(duì)視力影響不大。

一般根據(jù)臨床癥狀和發(fā)病率即可初步診斷。采集感染牛的結(jié)膜囊或鼻腔分泌物，分別接種于巧克力瓊脂培養(yǎng)基和血液瓊脂培養(yǎng)基，37 ℃培養(yǎng)48 h，釣取典型菌落純培養(yǎng)，革蘭氏染色后顯微鏡觀察，同時(shí)進(jìn)行生化試驗(yàn)鑒定[16]。實(shí)時(shí)多重PCR作為快速、靈敏、高通量的檢測(cè)方法，可應(yīng)用于鑒別診斷此病[17]。

3 防治措施

目前國外已有市售疫苗，但免疫效果尚不理想[18]。因此，牛傳染性角膜結(jié)膜炎仍以早發(fā)現(xiàn)早治療為原則。發(fā)病動(dòng)物及時(shí)隔離飼養(yǎng)，避免日光照射，防止粉塵、蚊蠅的刺激。可選用多種抗生素治療。

發(fā)病初期，牛傳染性角膜結(jié)膜炎癥狀不明顯，病情往往被忽視?；寂Ｑ劢Y(jié)膜潮紅，局部升溫，眼瞼出現(xiàn)少量分泌物，此時(shí)可采用生理鹽水或2%～4%的硼酸液沖洗患眼，涂抹紅霉素軟膏或1%阿托品軟膏，每日2次，癥狀輕微者通過上述方法數(shù)日即可康復(fù)[19]。若經(jīng)4 d治療仍未得到改善，可配合使用青霉素類藥物增強(qiáng)治療效果，如卞星氯唑西林乳房注入劑（規(guī)格：每3.6 g 含600 mg 氯唑西林）每日涂抹患眼2次，可獲得較好療效。該制劑為長(zhǎng)效乳膏狀抗生素，具有長(zhǎng)效抑菌的作用。

大多數(shù)病例被發(fā)現(xiàn)時(shí)已經(jīng)進(jìn)入明顯期，癥狀多為眼結(jié)膜充血、紅腫、分泌物增多；角膜表面模糊不清，中間位置出現(xiàn)紅斑，有痛感，流淚增多，眼淚初期為漿液性物質(zhì)，常形成淚痕。此時(shí)可采用5 mL 生理鹽水稀釋160 萬單位青霉素，加入1 mg 地塞米松磷酸鈉，沖洗患眼，每日1～2 次，連續(xù)用藥7 d。此法操作簡(jiǎn)單，效果較顯著，若治療有效，患眼結(jié)膜分泌物逐漸減少，角膜紅斑逐漸消失。但地塞米松磷酸鈉為腎上腺皮質(zhì)激素類藥物，使用于局部或結(jié)膜下可能導(dǎo)致感染角膜的抵抗力降低，造成角膜穿孔[20]。因此，使用劑量較大時(shí)，地塞米松磷酸鈉用量應(yīng)逐日遞減，且孕牛慎用[21]。

若病情進(jìn)一步發(fā)展，即最嚴(yán)重的臨床癥狀，如角膜中部的紅斑逐漸向外周擴(kuò)張，直徑約為2～3 cm，色澤暗紅；或角膜中部多出現(xiàn)0.5 cm 大小白色潰瘍斑，視力嚴(yán)重下降；怕光、眼瞼常閉合，黏液膿性物質(zhì)附著于睫毛周圍；濕潤(rùn)的淚痕延伸至臉頰下部，淚痕經(jīng)過夜間變成干燥的淚痂；夏季常有蚊、蠅附著于眼周圍；病牛食欲減退，精神差。隨著時(shí)間延長(zhǎng)，潰瘍斑逐漸擴(kuò)大，常呈中央凹陷的火山口狀，病畜疼痛不安，進(jìn)行治療時(shí)常躲閃或眼睛緊閉，停止生產(chǎn)。此時(shí)應(yīng)采用全身治療結(jié)合局部治療的方法。席艾力·依明[22]研究發(fā)現(xiàn)，上下眼瞼（結(jié)膜下）注射20～50 mg慶大霉素或300 000 IU青霉素，每日一次，連續(xù)給藥3 d；或每日多次采用慶大霉素、青霉素、四環(huán)素軟膏或酒石酸泰樂菌素液（50 g/L）點(diǎn)眼，以160 萬單位青霉素、100 萬單位鏈霉素粉劑混合涂抹患眼，配合肌肉注射黃芪多糖液可取得較好療效[23]。彭炎森等[24]研究發(fā)現(xiàn)，采取自家血療法可獲得較好療效，頸靜脈取鮮血5 mL，注入牛睛明穴4 mL，剩余1 mL點(diǎn)眼，輕癥治療1 次即可，重癥治療2～5 次，間隔時(shí)間為2～3 d；研究顯示，采用此方法治療結(jié)膜炎的治愈率為100%，傳染性角膜結(jié)膜炎的治愈率為81%，表明自家血療法對(duì)治療牛非傳染性結(jié)膜炎療效更好。穴位注射法使自體血液在穴位中存留一段時(shí)間，可對(duì)穴位產(chǎn)生較持久的刺激，還可激活網(wǎng)狀巨噬細(xì)胞吞噬細(xì)菌，提高眼部代謝與修復(fù)能力[25]。有研究表明，也可采用肌肉注射20 mg/kg四環(huán)素的方法，每日2 次，連用5 d；但在臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)，四環(huán)素局部肌注刺激較大，易引起局部腫脹，不建議長(zhǎng)期應(yīng)用。呂望海[26]研究發(fā)現(xiàn)，按100 mg/kg 體重靜脈注射磺胺二甲嘧啶，每日1～2 次，連用3 d，可控制病情發(fā)展，減輕患病牦牛痛苦，結(jié)合局部治療取得了較好療效。

角膜出現(xiàn)潰瘍時(shí)，可采用眼瞼暫時(shí)完全縫合術(shù)，以4～6號(hào)針結(jié)節(jié)水平褥狀縫合閉合上下眼瞼[27]。當(dāng)角膜嚴(yán)重感染即將發(fā)生穿孔時(shí)，可局部應(yīng)用1%硝酸銀[28]。硝酸銀根據(jù)不同濃度，可起到收斂、殺菌或腐蝕的作用，銀離子能夠有效殺死病菌，其濃溶液可腐蝕過度增生的肉芽組織，稀溶液可應(yīng)用于眼結(jié)膜炎的治療。楊倩等[29]研究發(fā)現(xiàn)，以棉簽蘸1%硝酸銀分別擦拭上下眼緣及眥部并采用氯霉素眼藥水滴眼治療眼緣炎、結(jié)膜炎，每日1～2次，3～7 d為一個(gè)療程；經(jīng)1～2個(gè)療程治療后，臨床癥狀基本消失。當(dāng)角膜發(fā)生穿孔或者形成嚴(yán)重圓錐形角膜并發(fā)眼內(nèi)炎或全眼球炎時(shí)，為防止疼痛、蒼蠅和眼分泌物刺激加劇病情進(jìn)而引起病牛生長(zhǎng)或產(chǎn)奶停止，需實(shí)施眼球摘除術(shù)[30]。

中醫(yī)辨證牛傳染性角膜結(jié)膜炎為目赤腫痛、睛生云翳，多因外感風(fēng)熱、肝經(jīng)積熱、熱邪上沖于眼所致。病初證可見頭低眼閉、眼瞼紅腫、畏光流淚，白睛充血、黑睛生翳；后期眼腫減退、白膜遮蔽瞳仁、眵盛難睜、視力障礙。中藥組方具有綠色、無殘留、無休藥期等優(yōu)點(diǎn)，尤其是對(duì)抗生素產(chǎn)生耐藥性的病例有較好療效。有研究選用復(fù)明蟬蛻散[31]加減，取蟬蛻35 g、龍膽35 g、生地黃25 g、菊花25 g、珍珠母50 g、決明子30 g、梔子25 g、黃芩40 g、白芷25 g、防風(fēng)25 g、蒼術(shù)25 g、蒺藜25 g、青葙子25 g、木賊35 g、旋覆花25 g，粉碎過40 目篩，混勻即得；以200～300 g/d 混入飼草中飼喂牛，每日1次。經(jīng)過7 d飼喂，患眼分泌物產(chǎn)出減少，淚痕消失，角膜薄翳逐漸消退，轉(zhuǎn)為紅色肉芽組織，視力逐漸恢復(fù)正常。組方中蟬蛻、菊花、決明子、蒺藜、珍珠母和青葙子有平肝潛陽、疏風(fēng)清熱，退翳明目的功效；蒼術(shù)、白芷、防風(fēng)、木賊能夠祛風(fēng)散熱、消腫排膿；梔子、黃芩和龍膽清實(shí)熱泄肝火；生地黃能夠滋陰生津；旋覆花可消痰行水。諸藥合用可起到清肝明目、退翳消腫之效。

不同病例可采用上述不同的治療方法，進(jìn)行敏感試驗(yàn)對(duì)比，確定最有效的治療方案。經(jīng)3～5 w，多數(shù)病例潰瘍面逐漸吸收，形成暗紅色毛細(xì)血管組織或灰白色角膜翳，視力逐漸恢復(fù)。此時(shí)是IBK 的轉(zhuǎn)歸期，患眼基本無熱無痛，精神食欲正常，淚痕消失，不需藥物治療即可恢復(fù)正常生產(chǎn)。個(gè)別病例久治不愈或愈后復(fù)發(fā)，對(duì)一些治療方法產(chǎn)生耐受性，還需進(jìn)行進(jìn)一步的臨床試驗(yàn)與研究。

4 飼養(yǎng)管理

除及早發(fā)現(xiàn)治療外，加強(qiáng)環(huán)境及飼養(yǎng)管理對(duì)牛傳染性角膜結(jié)膜炎的防控同樣重要。日常注意避免陽光直射，飼養(yǎng)場(chǎng)周邊減少雜草、粉塵等刺激物[32]。供給充足的營養(yǎng)物質(zhì)，提高牛群抵抗力。獸醫(yī)查槽時(shí)，應(yīng)對(duì)牛群全身仔細(xì)觀察，如眼周有無分泌物、淚痕、腫脹等，不可因精神、食欲正常忽視病情。若發(fā)現(xiàn)異常，應(yīng)及時(shí)隔離治療，防止造成大面積傳播。

夏季定期采用氯菊酯、蠅毒磷等殺蟲劑噴灑圈舍與運(yùn)動(dòng)場(chǎng)，消滅傳播媒介。定期刷拭水槽，清除雜草，糞便集中堆積發(fā)酵，污水集中收集處理，保持牛場(chǎng)清潔衛(wèi)生，控制蚊蠅滋生與幼蟲繁殖?？刹捎?%的火堿或0.1%二氯異氰尿酸鈉對(duì)圈舍、用具、欄桿、頸枷等消毒，防止疫病傳播。此外，應(yīng)注意不從疫區(qū)引進(jìn)牛及飼草等，新引進(jìn)的牛隔離飼養(yǎng)觀察，做好各項(xiàng)傳染病監(jiān)測(cè)，確認(rèn)健康后方可引入。

5 結(jié)論

IBK 發(fā)病快、傳染性強(qiáng)。室外飼養(yǎng)的犢牛及2 歲以下青年牛發(fā)病率高于成年牛，夏季較其他季節(jié)多發(fā)；常一側(cè)眼先發(fā)病，另一側(cè)眼相繼被感染，發(fā)病率可達(dá)60%～80%，對(duì)養(yǎng)殖業(yè)造成巨大影響。目前，IBK的治療原則仍是早發(fā)現(xiàn)早治療；養(yǎng)殖場(chǎng)日常應(yīng)做好IBK 的預(yù)防工作，發(fā)病及時(shí)有效采取措施隔離治療，應(yīng)定期殺滅蚊、蠅等傳染媒介；新引進(jìn)牛群應(yīng)隔離飼養(yǎng)觀察，防止疾病傳播帶來嚴(yán)重影響，此病可得到有效控制，保障生產(chǎn)活動(dòng)。