呂南寧,張浩,馮驍驍,劉明明

(連云港市第二人民醫(yī)院骨科,江蘇 連云港 222000)

骨質(zhì)疏松癥是中老年人最常見的骨代謝性疾病,其特征是骨微結(jié)構(gòu)退化,骨量減少,并導(dǎo)致骨折風(fēng)險(xiǎn)大大增加[1],已經(jīng)成為威脅中老年人生活質(zhì)量的嚴(yán)重公共健康問題。然而現(xiàn)在對于骨質(zhì)疏松癥的治療,臨床上尚無統(tǒng)一明確的治療方式,主要的藥物治療方式是從促進(jìn)骨平衡的正向發(fā)展入手,比如通過抑制破骨細(xì)胞功能以減少骨吸收,或者作用于成骨細(xì)胞提高骨質(zhì)形成?，F(xiàn)在常用的藥物主要有骨吸收抑制劑和骨合成促進(jìn)劑。但是臨床研究發(fā)現(xiàn)在使用藥物治療骨質(zhì)疏松癥的過程中,大多數(shù)抗骨吸收劑和部分骨合成劑有較多的不良反應(yīng)[2]。例如,長期使用雙膦酸鹽后會產(chǎn)生上消化道出血、急性期反應(yīng)、低血鈣和繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)、肌肉骨骼疼痛、頜骨壞死等不良反應(yīng)[3]。降鈣素類藥物最常見的不良反應(yīng)是鼻刺激[4]。皮下注射特立帕肽和阿巴拉肽是目前美國食品和藥物管理局批準(zhǔn)用于骨質(zhì)疏松癥治療的甲狀旁腺激素類藥物,在強(qiáng)化骨骼和減少骨折方面療效較好,然而特立帕肽非常昂貴(大約每月850美元),并且動物實(shí)驗(yàn)證明特立帕肽有一定的致瘤潛力,所以一般不能連續(xù)使用超過2年[5]。同樣,阿巴拉肽存在骨肉瘤發(fā)病率的潛在風(fēng)險(xiǎn),特別是在易感人群中[6-7]。雖然目前的藥物治療有一定療效,但是由于其導(dǎo)致患者較多的不良反應(yīng)及并發(fā)癥,使得這些藥物不宜長期應(yīng)用,所以研發(fā)有效、安全的抗骨質(zhì)疏松新藥品迫在眉睫。

隨著近年來中藥治療骨質(zhì)疏松癥不斷取得的進(jìn)展,利用中草藥治療骨質(zhì)疏松癥被越來越多的研究者和臨床工作者所接受。越來越多的研究人員轉(zhuǎn)向中藥,尋找治療骨質(zhì)疏松癥的預(yù)防或替代療法。現(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)多種中藥對改善骨質(zhì)疏松具有較好的療效,其中應(yīng)用、研究較多的是淫羊藿,其具有降低骨質(zhì)流失和保持骨密度的治療潛力,有望成為新一代抗骨質(zhì)疏松癥的新藥品。淫羊藿的主要有效成分為黃酮類化合物,而其中的淫羊藿苷對于抗骨質(zhì)疏松具有良好的效果,它不僅能增加人成骨細(xì)胞的增殖能力,還能促進(jìn)成骨細(xì)胞的生成,同時還可以作用于前體破骨細(xì)胞,抑制其增殖能力,從而減少破骨細(xì)胞的產(chǎn)生。越來越多的證據(jù)表明淫羊藿苷通過刺激骨形成的同時還能抑制骨吸收,從而在骨健康中發(fā)揮雙重作用[8]。重要的是,淫羊藿苷可以穩(wěn)定地在局部釋放,因而可以當(dāng)作生物材料成為骨組織工程骨誘導(dǎo)候選物之一[9-11]。血管生成在骨再生中也起著重要作用,據(jù)報(bào)道淫羊藿苷可通過刺激內(nèi)皮細(xì)胞遷移、增殖和體內(nèi)小管生成來增加血管生成[12]。本文對淫羊藿苷在骨形成和骨吸收中的作用以及目前淫羊藿苷的臨床應(yīng)用現(xiàn)狀進(jìn)行了總結(jié)。

1 淫羊藿苷刺激成骨細(xì)胞的生成及骨合成

淫羊藿苷可通過促進(jìn)骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(BMP-2)、骨形態(tài)發(fā)生蛋白9(BMP-9),激活BMP/Smads/Runx2/Osterix信號通路,進(jìn)而調(diào)控Runx2和Osterix基因的表達(dá),促進(jìn)骨髓間充質(zhì)細(xì)胞(BMSCs)的成骨轉(zhuǎn)化。骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMPs)是一個具有啟動成骨細(xì)胞分化能力的蛋白質(zhì)家族,可誘導(dǎo)BMSCs向成軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞分化,促進(jìn)成骨細(xì)胞功能等[13-16]。淫羊藿苷可以誘導(dǎo)BMP-2、BMP-9蛋白生成,通過Smads信號通路進(jìn)行傳導(dǎo),實(shí)現(xiàn)BMPs信號由細(xì)胞外經(jīng)細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核內(nèi)靶基因傳遞,進(jìn)而調(diào)節(jié)Runx2、Osterix等成骨基因的轉(zhuǎn)錄而發(fā)揮其成骨作用[17-19]。Runx2是成骨細(xì)胞分化的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子和特異性成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子,通過結(jié)合成骨細(xì)胞特異性激活元件,直接調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞特異性基因的表達(dá),包括骨鈣素、Ⅰ型膠原和骨橋蛋白,調(diào)控骨形成的多個過程。Osterix為成骨細(xì)胞的另一個特異性轉(zhuǎn)錄因子,是一個含鋅指結(jié)構(gòu)的蛋白,可以調(diào)控多種重要的成骨基因的表達(dá),如骨黏素、骨橋素、骨涎蛋白和Ⅰ型膠原蛋白等。Osterix與Runx2調(diào)控成骨細(xì)胞不同的分化階段,促進(jìn)BMSCs的成骨轉(zhuǎn)化。此外淫羊藿苷還可以通過抑制BMSCs向脂肪細(xì)胞分化,增加成熟成骨細(xì)胞的數(shù)量[20-21]。當(dāng)BMSCs用淫羊藿苷處理時,脂肪分化得到抑制導(dǎo)致成骨細(xì)胞進(jìn)一步分化。

淫羊藿苷促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖作用還與雌激素受體信號通路有關(guān),Song 等[22]發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷可作用于雌激素受體,引起細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)和 c-Jun 氨基末端激酶(JNK)信號激活,刺激小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞 MC3T3-E1 數(shù)量增加。朱曉峰等[23]發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖是由雌激素受體介導(dǎo),且有絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)信號通路參與,進(jìn)而發(fā)揮抗骨質(zhì)疏松作用。

2 淫羊藿苷抑制破骨細(xì)胞的生成及骨吸收

淫羊藿苷的抗骨質(zhì)疏松作用還與抑制破骨細(xì)胞的生成有關(guān)。呂明波等[24]研究發(fā)現(xiàn),淫羊藿苷可以抑制破骨細(xì)胞的生成以及骨吸收,并且濃度越高,作用越強(qiáng)。李偉娟等[25]研究發(fā)現(xiàn),淫羊藿苷能夠抑制BMSCs向破骨細(xì)胞的分化,減少破骨細(xì)胞的數(shù)量,以及抑制骨吸收活性。此外淫羊藿苷能夠直接作用于核因子κB受體活化因子配體(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)信號通路,減少造血細(xì)胞分化成破骨細(xì)胞[26]。同時,淫羊藿苷及其衍生物能增加堿性磷酸酶、骨鈣素、Ⅰ型膠原蛋白和骨保護(hù)素(osteoprotegerin,OPG)的成骨基因表達(dá),抑制原代成骨細(xì)胞中RANKL的表達(dá),間接抑制破骨細(xì)胞分化[27]。除了調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞分化,淫羊藿苷還可以誘導(dǎo)前體破骨細(xì)胞的細(xì)胞周期暫停,導(dǎo)致凋亡。何丹丹等[28]采用分子對接技術(shù)模擬并預(yù)測RANKL與淫羊藿的相互作用,并通過切除大鼠雙側(cè)卵巢制備骨質(zhì)疏松模型,評價(jià)淫羊藿對模型大鼠體質(zhì)量、骨吸收血清指標(biāo)堿性磷酸酶和抗酒石酸鹽酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)、骨密度以及骨組織形態(tài)的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)淫羊藿能通過與RANKL蛋白靶點(diǎn)結(jié)合,抑制破骨細(xì)胞分化并發(fā)揮抗骨質(zhì)疏松作用。

3 淫羊藿苷的臨床應(yīng)用研究

目前臨床上應(yīng)用淫羊藿治療骨質(zhì)疏松的研究也較多。馮宜蒀等[29]通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法探究“淫羊藿-熟地黃”治療骨質(zhì)疏松癥的分子機(jī)制,通過“淫羊藿-熟地黃”中的蛋白靶點(diǎn)與骨質(zhì)疏松相關(guān)基因映射,獲得共有靶點(diǎn)57個,蛋白互作網(wǎng)絡(luò)分析顯示前列腺素內(nèi)過氧化物合酶、雄激素受體、雌激素受體等可能是“淫羊藿-熟地黃”治療骨質(zhì)疏松的核心靶點(diǎn),并通過KEGG通路富集分析獲得包括cAMP信號通路、神經(jīng)活性配體-受體相互作用、類固醇激素的合成等11條相關(guān)信號通路。因此他認(rèn)為“淫羊藿-熟地黃”配伍通過多途徑、多靶點(diǎn)發(fā)揮治療骨質(zhì)疏松的作用。曾雪等[30]通過予單味中藥淫羊藿和予骨化三醇軟膠囊治療骨質(zhì)疏松對比研究,3個療程后發(fā)現(xiàn)淫羊藿組患者的腰椎、橈骨遠(yuǎn)端、股骨頸骨密度大于骨化三醇軟膠囊組。劉海燕[31]將122例骨質(zhì)疏松癥患者分為口服中藥淫羊藿提取物和口服碳酸鈣D3組,進(jìn)行隨機(jī)對照研究,治療12周后發(fā)現(xiàn)淫羊藿提取物組腰椎L2-4、髖關(guān)節(jié)、股骨頸的骨密度均顯著高于碳酸鈣D3組(P<0.05),認(rèn)為中藥淫羊藿治療骨質(zhì)疏松癥的臨床療效較好。

骨缺損的修復(fù)一直是臨床中的治療難點(diǎn),隨著骨組織工程技術(shù)與再生醫(yī)學(xué)的發(fā)展,近年來負(fù)載淫羊藿苷的骨缺損修復(fù)支架材料在修復(fù)骨缺損方面取得了重大進(jìn)展,為臨床治療骨缺損提供了新的治療方法。3D打印技術(shù)制備的聚磷酸鈣/淫羊藿苷支架和p-磷酸鈣/淫羊藿苷支架,對骨缺損的修復(fù)有明顯促進(jìn)作用,同時支架具有良好的骨誘導(dǎo)性和生物相容性,其降解產(chǎn)物多為鈣、磷離子和鈣鹽、磷酸鹽,不引起局部反應(yīng)[32-33]。納米羥基磷灰石/聚乳酸(nHA/PLGA)復(fù)合支架是一種高分子支架材料,具有優(yōu)良的生物相容性、降解性以及超強(qiáng)的吸附與滲透能力。王德欣等[34]將不同濃度的淫羊藿苷加載于nHA/PLGA上,發(fā)現(xiàn)其促進(jìn)BMSCs增殖和分化活性具有濃度依賴性。Liu等[35]將淫羊藿苷加載于中間層含有聚多巴胺(polydopamine,PDA)的靜電紡絲聚丙交酯(PLLA)纖維膜中,然后將成骨細(xì)胞接種于纖維膜上,發(fā)現(xiàn)纖維膜對成骨細(xì)胞的黏附、增殖以及成骨性分化更為有利。同時發(fā)現(xiàn)低濃度淫羊藿苷更有利于成骨細(xì)胞的黏附和增殖,而高濃度的淫羊藿苷可顯著促進(jìn)成骨細(xì)胞分化,增加堿性磷酸酶活性以及鈣沉積。

4 結(jié)論與展望

淫羊藿苷是一種骨誘導(dǎo)黃酮類化合物,具有雌激素的模擬特性,可誘導(dǎo)骨形成并抑制骨吸收,但對淫羊藿苷治療骨質(zhì)疏松的研究以基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)為主,缺乏大樣本、多中心的臨床對照研究,同時對于淫羊藿治療的機(jī)制目前尚不能完全闡明,這提示我們在今后應(yīng)加強(qiáng)淫羊藿及其衍生物在人體內(nèi)的藥理作用和藥代動力學(xué)特性的持續(xù)研究,充分探索淫羊藿治療骨質(zhì)疏松的機(jī)制,為骨質(zhì)疏松的治療提供安全高效的中藥。