張妍生，王雅楠 綜述，高 峰 審校

(1.甘肅省婦幼保健院乳腺一科，甘肅 蘭州 730050；2.甘肅省干細(xì)胞與基因藥物重點實驗室，甘肅 蘭州 730050；3.中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊第九四〇醫(yī)院結(jié)直腸肛門外科，甘肅 蘭州 730050)

結(jié)直腸癌(CRC)是最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率位居全球惡性腫瘤第3，病死率位居第2[1]。中國2020年新診斷CRC病例數(shù)占全球CRC新發(fā)病例數(shù)的28.8%，CRC相關(guān)死亡占全球CRC相關(guān)死亡的30.6%[2]。隨著經(jīng)濟(jì)和飲食習(xí)慣的改變，中國CRC的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年遞增趨勢。CRC的標(biāo)準(zhǔn)治療一直是手術(shù)、放療和化療方法聯(lián)合治療。但是，這些治療方法具有明顯的局限性，到目前為止，CRC的治療效果仍不能令人滿意，這也促使研究者將治療思路轉(zhuǎn)向探討更新的治療方法和更多的綜合治療，比如針對CRC腫瘤微環(huán)境的免疫療法等[3]。

巨噬細(xì)胞作為機體內(nèi)重要的免疫細(xì)胞之一，在機體先天性免疫和特異性免疫中具有不可替代的殺傷病原體的作用。而在腫瘤微環(huán)境中，巨噬細(xì)胞也稱作腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAMs)，是含量最豐富的免疫細(xì)胞之一，其在促進(jìn)腫瘤免疫逃逸及抑制機體免疫功能方面產(chǎn)生了不可或缺的作用[4]。目前，許多研究者嘗試通過調(diào)控巨噬細(xì)胞進(jìn)而抑制腫瘤的免疫逃逸，增加機體免疫原性進(jìn)而殺傷腫瘤細(xì)胞。其中靶向TAMs M1/M2型極化在調(diào)控CRC腫瘤微環(huán)境及增加臨床免疫治療療效方面展現(xiàn)出良好的治療前景。本文就M1/M2型巨噬細(xì)胞調(diào)控CRC腫瘤微環(huán)境的作用機制及基于TAMs治療CRC的研究現(xiàn)狀進(jìn)行綜述，以期為臨床治療CRC提供參考。

1 巨噬細(xì)胞

巨噬細(xì)胞作為機體內(nèi)重要的免疫細(xì)胞之一，其起源于骨髓干細(xì)胞并在各種刺激因子的刺激下分化而來。參與機體的先天性免疫和特異性免疫，在清楚機體內(nèi)病原微生物和組織修復(fù)中具有重要的作用[5]。有研究表明，巨噬細(xì)胞在體內(nèi)依據(jù)其功能及產(chǎn)生細(xì)胞因子的不同可分化為2種不同的細(xì)胞表型，即M1型經(jīng)典激活表型和M2型交替激活表型[6]。M1型巨噬細(xì)胞主要由γ-干擾素驅(qū)動激活，具有促炎作用，在腫瘤相關(guān)疾病中產(chǎn)生抗腫瘤活性，抑制腫瘤的生長。M2型巨噬細(xì)胞則主要由白細(xì)胞介素-4(IL-4)和IL-13驅(qū)動激活，具有抑炎作用，在腫瘤相關(guān)疾病中能夠促進(jìn)腫瘤血管的形成和抑制適應(yīng)性免疫反應(yīng)，促進(jìn)腫瘤的生長和逃逸[7]。由于巨噬細(xì)胞所具備的2種特殊激活表型且各自具有不同的作用，使巨噬細(xì)胞具有良好的可塑性，調(diào)控M2型巨噬細(xì)胞向M1型巨噬細(xì)胞的轉(zhuǎn)化已成為當(dāng)前靶向治療腫瘤疾病的新方向。

2 巨噬細(xì)胞與CRC腫瘤微環(huán)境

在大多數(shù)實體瘤的早期階段，免疫系統(tǒng)通過激活T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞對腫瘤進(jìn)行殺傷，進(jìn)而清除腫瘤并降低癌癥的發(fā)生率。但當(dāng)腫瘤進(jìn)展超過這種早期階段，腫瘤免疫微環(huán)境會被修飾為支持腫瘤并促進(jìn)其進(jìn)展的腫瘤微環(huán)境。在腫瘤微環(huán)境被修飾的同時開始抑制機體免疫功能。有研究表明，在腫瘤微環(huán)境修飾過程中，TAMs在促進(jìn)腫瘤發(fā)展方面起著重要的調(diào)節(jié)作用[8]。

目前，已知TAMs在CRC腫瘤微環(huán)境中大量存在，TAMs能夠促成腫瘤細(xì)胞的增殖、免疫抑制和腫瘤內(nèi)血管的生成，是腫瘤進(jìn)展、轉(zhuǎn)移和抵抗治療的關(guān)鍵因素?？鼓[瘤的M1型TAMs與促腫瘤的M2型TAMs在腫瘤微環(huán)境中共同存在，這些M1/M2型TAMs之間的相互作用直接影響著CRC腫瘤的進(jìn)展及臨床治療策略[9]。在CRC腫瘤微環(huán)境中M2型TAMs相較于M1型TAMs占主導(dǎo)地位，產(chǎn)生促生長因子，以促進(jìn)愈合的方式刺激腫瘤生長。然而值得注意的是，將M2型TAMs調(diào)節(jié)為M1型TAMs時則可以顯著減緩腫瘤的進(jìn)展[10]。腫瘤免疫逃逸的機制之一就是腫瘤對TAMs代謝進(jìn)行重編程，防止M1型TAMs介導(dǎo)的炎性反應(yīng)增加對腫瘤細(xì)胞的殺傷。雖然CRC腫瘤微環(huán)境中的TAMs并不完全是M1和M2型，但通常以M2型TAMs細(xì)胞最多，通過M2型TAMs誘導(dǎo)免疫抑制進(jìn)而促進(jìn)腫瘤生長[11]。

3 TAMs在CRC腫瘤微環(huán)境的研究現(xiàn)狀

3.1TAMs促進(jìn)CRC腫瘤轉(zhuǎn)移及免疫抑制 由于巨噬細(xì)胞所具有的2種特殊極化表型，近年來，許多研究以巨噬細(xì)胞作為突破口探究巨噬細(xì)胞調(diào)控腫瘤免疫微環(huán)境的作用機制。在CRC腫瘤微環(huán)境中，公認(rèn)主要存在的是M2型TAMs。WEI等[12]研究發(fā)現(xiàn)，TAMs能夠通過調(diào)節(jié)JAK2/STAT3/miR-506-3p/FoxQ1信號通路，誘導(dǎo)上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化進(jìn)而促進(jìn)CRC的遷移、侵襲和循環(huán)腫瘤細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤轉(zhuǎn)移，進(jìn)而通過趨化因子配體2(CCL2)的招募作用促進(jìn)M2型TAMs的募集，完成腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移及免疫逃逸。該結(jié)果與鄭浩等[13]發(fā)現(xiàn)交替激活的M2型TAMs能夠促進(jìn)CRC腫瘤細(xì)胞的遷移和增殖具有一致性。有研究表明，CRC腫瘤微環(huán)境中TAMs的高度浸潤能夠上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶-2的表達(dá)，促進(jìn)CRC轉(zhuǎn)移[14]。張韜等[15]研究表明，肝再生磷酸酶-3同樣能夠激活TAMs進(jìn)而誘導(dǎo)上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化促進(jìn)CRC細(xì)胞的遷移。M2型TAMs除了促進(jìn)CRC腫瘤轉(zhuǎn)移之外，還能夠增加腫瘤對機體的免疫抑制，達(dá)到腫瘤免疫逃逸目的。LIU[16]等探究了TAMs產(chǎn)生的細(xì)胞因子在促進(jìn)CRC腫瘤免疫逃逸過程中的作用，結(jié)果證實TAMs產(chǎn)生的CCL5能夠通過調(diào)節(jié)細(xì)胞程序性死亡配體-1，促進(jìn)T細(xì)胞凋亡，進(jìn)而抑制T細(xì)胞對CRC腫瘤細(xì)胞的殺傷。WANG等[17]報道了TAMs通過分泌IL-10、轉(zhuǎn)化生長因子β、血管內(nèi)皮生長因子、細(xì)胞程序性死亡受體-1的表達(dá)和消耗精氨酸來抑制T細(xì)胞抗腫瘤功能，從而發(fā)揮促腫瘤和免疫抑制作用，促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移。表明在腫瘤微環(huán)境中，TAMs不僅通過分泌趨化因子抑制T細(xì)胞功能，實現(xiàn)免疫逃逸。而且通過調(diào)控血管內(nèi)皮生長因子及轉(zhuǎn)化生長因子β等細(xì)胞因子，促進(jìn)CRC腫瘤的轉(zhuǎn)移。另外，有研究表明，長鏈非編碼RNA介導(dǎo)的RPPH1能夠作用于β-Ⅲ微管蛋白阻止其泛素化，從而誘導(dǎo)CRC腫瘤細(xì)胞發(fā)生上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化；此外，CRC來源的外切體將RPPH1轉(zhuǎn)運至巨噬細(xì)胞內(nèi)，介導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M2型極化，促進(jìn)CRC的轉(zhuǎn)移和增殖[18]。LI等[19]報道了腸道微生物分泌的組織蛋白酶K能夠通過mTOR依賴途徑刺激TAMs向M2型極化，促進(jìn)CRC細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。組織蛋白酶K通常被認(rèn)為與腸道菌群失衡和腫瘤轉(zhuǎn)移有關(guān)，該研究結(jié)果也表明除了腫瘤微環(huán)境對免疫逃逸的直接作用外，腸道菌群同樣也能夠促進(jìn)腫瘤微環(huán)境內(nèi)M2型TAMs的浸潤，促進(jìn)腫瘤免疫逃逸。

3.2基于TAMs靶點的CRC耐藥作用機制 近年來，許多研究者以TAMs為靶點對CRC抗腫瘤耐藥及治療機制進(jìn)行了研究。在以TAMs為基礎(chǔ)的CRC耐藥方面，陸詩媛等[20]探討了具核梭桿菌基于TAMs對CRC耐藥的作用機制。研究發(fā)現(xiàn)，具核梭桿菌與CRC腫瘤微環(huán)境中的TAMs浸潤及患者的化療耐藥相關(guān)；當(dāng)具核梭桿菌相關(guān)細(xì)菌生物膜的陽性率越高時，CRC患者腫瘤微環(huán)境中M2型TAMs浸潤越高，并且患者耐藥復(fù)發(fā)率也隨之升高。表明具核梭桿菌能夠調(diào)控CRC腫瘤微環(huán)境，并且增加M2型TAMs在瘤內(nèi)浸潤。陳玉娟等[21]針對結(jié)腸癌CT-26細(xì)胞在氟尿嘧啶耐藥中的作用機制進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)氟尿嘧啶能夠?qū)AMs產(chǎn)生誘導(dǎo)，促使其對抑制P-JNK/Caspase-3凋亡通路，造成氟尿嘧啶治療的耐藥性。

3.3基于TAMs靶點的CRC治療研究現(xiàn)狀 由于TAMs所具備M1/M2 2種表型，并且2種表型之間具有相互轉(zhuǎn)化的特性，使其在臨床研究中具有很高的可塑性?；诖?，調(diào)節(jié)TAMs的M1/M2型極化就成為腫瘤治療的潛在靶點。由于M1型TAMs以腫瘤細(xì)胞為靶點，產(chǎn)生抗腫瘤的作用，許多研究者認(rèn)為可以利用M1型TAMs作為藥物載體，將藥物直接作用于腫瘤細(xì)胞。M2型TAMs所具備的促腫瘤特性，目前針對M2型TAMs為靶點的研究則主要是抑制巨噬細(xì)胞的募集、抑制M2型TAMs的生成及促使M2型TAMs向M1型TAMs轉(zhuǎn)化等[22]。

在以TAMs為靶點的抗CRC方面，楊榮嬌等[23]研究發(fā)現(xiàn)，利用巨噬細(xì)胞移動抑制因子的小干擾RNA作為治療靶點，能夠顯著下調(diào)血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)，抑制CRC的肝轉(zhuǎn)移。徐張巍等[24]發(fā)現(xiàn)利用巨噬細(xì)胞金屬彈性蛋白酶能夠抑制CRC的生長，并且降低血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)。除了抑制血管的生成之外，張廉君等[25]的一項研究發(fā)現(xiàn)，使用集落刺激因子-1受體抑制劑能夠顯著降低CRC腫瘤組織中M2型TAMs的表達(dá)，同時顯著增加M1型TAMs的表達(dá)。李曉婷等[26]探討了另一種集落刺激因子抑制劑吡西達(dá)替尼對CRC腫瘤微環(huán)境的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)吡西達(dá)替尼能夠顯著降低CRC腫瘤微環(huán)境內(nèi)TAMs的數(shù)量并降低M2型TAMs的生成。以上結(jié)果表明，集落刺激因子-1受體抑制劑不但能夠抑制TAMs向CRC腫瘤微環(huán)境的募集，同時能夠清楚CRC腫瘤微環(huán)境內(nèi)TAMs的浸潤及促使M2型TAMs向M1型TAMs轉(zhuǎn)化，不僅降低CRC腫瘤微環(huán)境中TAMs介導(dǎo)的腫瘤免疫逃逸，而且能夠增加M1型TAMs的抗腫瘤作用。

3.4基于TAMs判斷CRC患者預(yù)后 腫瘤微環(huán)境中浸潤的TAMs不僅能夠反映腫瘤進(jìn)展和抗腫瘤治療效果，而且在一定程度上能夠反映患者臨床預(yù)后。有研究表明，TAMs在CRC腫瘤微環(huán)境中的浸潤部位與預(yù)后之間存在一定的關(guān)聯(lián)，M1型TAMs的高度浸潤與良好的臨床預(yù)后相關(guān)，腫瘤微環(huán)境內(nèi)CD163+/CD68+的比值升高與CRC患者較差的生存率相關(guān)，以及M2/M1型TAMs的比例升高與CRC的肝轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)[27-29]?？傊?dāng)CRC腫瘤微環(huán)境中浸潤的M2型TAMs數(shù)量越多，患者預(yù)后越差。

4 小結(jié)與展望

巨噬細(xì)胞作為機體內(nèi)重要的免疫細(xì)胞之一，在機體免疫清除病原體方面起著極其重要的作用，而TAMs作為腫瘤微環(huán)境中數(shù)量最多的免疫細(xì)胞，在腫瘤進(jìn)展和侵襲過程中扮演著重要角色。本文就基于TAMs在CRC腫瘤微環(huán)境中的耐藥性、治療現(xiàn)狀及臨床預(yù)后等方面進(jìn)行簡要概述。TAMs的M1/M2型極化為腫瘤的治療提供了理想的作用靶點，近年來研究者在腫瘤微環(huán)境內(nèi)M2型TAMs的清除、M2型TAMs向M1型轉(zhuǎn)化及抑制腫瘤微環(huán)境對M2型TAMs的募集方面進(jìn)行了諸多研究探索，為靶向M2型TAMs提供了一定的理論依據(jù)。但基于M1型TAMs為載體的藥物輸送或其他抗腫瘤方式仍需進(jìn)一步探索。CRC腫瘤微環(huán)境是一個復(fù)雜的整體，要想達(dá)到良好的免疫治療抗腫瘤目的，必須多種途徑綜合調(diào)控。相信隨著對CRC腫瘤微環(huán)境的深入研究，人們能夠更加清晰地發(fā)現(xiàn)CRC腫瘤微環(huán)境中關(guān)于TAMs錯綜復(fù)雜的作用機制，進(jìn)而得到很好的免疫治療策略。