黃 波 福建省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗(yàn)檢測中心 福州 350003

氨基甲酸酯類農(nóng)藥具有選擇性強(qiáng)、高效、廣譜、對人畜低毒、易分解和殘毒少的特點(diǎn)，在農(nóng)業(yè)、林業(yè)和畜牧業(yè)等方面得到廣泛應(yīng)用。經(jīng)食物鏈傳播及獸藥中非法添加農(nóng)藥，動物源食品中也存在嚴(yán)重的殘留現(xiàn)象。研究表明，氨基甲酸酯農(nóng)藥在胃內(nèi)酸性條件下容易與食物中的亞硝酸鹽生成亞硝基化合物而呈現(xiàn)誘變性、致突、致畸和致癌作用，嚴(yán)重影響人類的健康。

食品安全規(guī)定生鮮乳中涕滅威、涕滅威砜、涕滅威亞砜、甲萘威、霜霉威和滅多威六種氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留限量為（MRL）10.0～50.0 μg/kg[1-4]。生鮮乳中氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留檢測比較常用的方法是固相萃取法，該方法處理過程比較繁瑣、耗費(fèi)的試劑比較多。QuECHERS前處理法具有操作簡便、靈敏度高、定性定量準(zhǔn)確、試劑用量少等優(yōu)點(diǎn)[5-6]。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 牛乳（市購澳牛鮮牛乳）；超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀（UPLC-MS/MS），Waters公司；電子天平（奧豪斯儀器（常州）有限公司）；高速離心機(jī)（湖南湘儀）；渦旋混合器（IKA）；QuECHERS前處理包（艾杰爾科技有限公司）。涕滅威、涕滅威砜、涕滅威亞砜、甲萘威、霜霉威和滅多威農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液對照品（農(nóng)業(yè)部天津環(huán)保所）；甲醇（默克）、乙腈（默克）、氯化鈉（國藥）、純凈水（屈臣氏）、甲酸（阿拉?。?、乙酸銨（阿拉?。?/p>

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 準(zhǔn)確吸取100 μg/mL六種氨基甲酸酯農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲備液1 mL至10 mL容量瓶中，用甲醇定容。試樣上機(jī)時再配制成質(zhì)量濃度為2.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL、20.0 ng/mL、50.0 ng/mL、100.0 ng/mL的標(biāo)樣曲線工作溶液。

1.3 色譜條件 色譜柱C18（100 mm×2.1 mm，內(nèi)徑1.7 μm）；流動相：A相-色譜級甲醇，B相-甲酸乙酸銨溶液（10 mmol/L），梯度洗脫條件見表1。流動相流動速度：0.3 mL/min；色譜柱溫度：40℃；試樣進(jìn)樣體積：1 μL。離子源類型：電噴霧（ESI＋）；毛細(xì)管電壓：1.0 kV；離子源溫度：150℃；霧化氣：0.345 MPa；輔助加熱器：0.345 MPa；碰撞氣體類型：氬氣；采集類型：MRM。多反應(yīng)監(jiān)測相關(guān)農(nóng)藥離子對及其錐孔電壓和碰撞能量條件見表2。

表1 流動相洗脫程序

表2 六種農(nóng)藥的質(zhì)譜參數(shù)

1.4 試樣分析步驟 稱量10 g（精確到0.01 g）新鮮牛乳于50 mL離心管中（塑料），準(zhǔn)確加入20 mL乙腈溶液，渦旋震蕩5 min，加入5 g氯化鈉，蓋好蓋子后用力振搖3 min，7 500 r/min高速離心5 min。取5 mL上清液于10 mL塑料離心管中，加入QuECHERS前處理包（內(nèi)含0.75 g無水硫酸鎂、125 mg PSA、25 mg GCB及125 mg C18）渦旋1 min后，7 500 r/min高速離心5 min，取上清液過0.2 μm微孔有機(jī)濾膜于1.5 mL進(jìn)樣瓶中，供超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定。

1.5 檢出限與定量限測定 在空白牛乳中添加六種標(biāo)準(zhǔn)品的方法，以特征離子色譜峰的S/N＞3倍信噪比為方法檢出限，以S/N＞10信噪比為方法定量限。牛乳中六種氨基甲酸酯農(nóng)藥檢出限均為2 μg/kg，定量限均為4 μg/kg。10 μg/kg空白牛乳添加六種農(nóng)藥的特征離子質(zhì)量色譜圖見圖1。

圖1 10 μg/kg空白牛乳添加六種農(nóng)藥的特征離子質(zhì)量色譜圖

2 結(jié)果與討論

QuECHERS方法是在樣品提取液中直接加入固相吸附劑，吸附及凈化樣品的干擾物。PSA吸附糖類和酸類物質(zhì)，C18吸附脂肪，GCB吸附色素、甾醇物質(zhì)。結(jié)果表明，本分析方法重復(fù)性好、結(jié)果準(zhǔn)確，六種氨基甲酸酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品在2～100 μg/kg具有良好線性相關(guān)性。線性相關(guān)系數(shù)均在R2=0.995以上，加標(biāo)回收率在78.67%～104.12%，見表3。表明該方法具有簡便、快捷、靈敏度高、定性定量準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，可滿足畜產(chǎn)品安全檢測相關(guān)法規(guī)的要求。

表3 牛乳中六種氨基甲酸酯農(nóng)藥的回歸方程、相關(guān)系數(shù)、添加回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）