曾麗金 莆田市城廂區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 福建 莆田 351100

口蹄疫是由口蹄疫病毒引發(fā)的一種高傳染性人畜共患一類傳染病，主要發(fā)生在豬、牛、羊等偶蹄動(dòng)物，仔豬的發(fā)病率和病死率較高，病毒通過(guò)接觸帶毒及被病毒污染的動(dòng)物產(chǎn)品傳染給人，嚴(yán)重影響畜牧業(yè)生產(chǎn)和人類健康。做好口蹄疫防控工作、提高畜牧業(yè)生產(chǎn)效益，除了要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理、制定一系列管理制度、定期清理消毒豬舍等生物安全措施，還要根據(jù)豬場(chǎng)的實(shí)際養(yǎng)殖情況制定適合本豬場(chǎng)的免疫程序，通過(guò)免疫接種提高豬群口蹄疫抗體水平，才能從根本上提高豬群的抗病能力，有效防控口蹄疫的發(fā)生。近年來(lái)，規(guī)?；i場(chǎng)使用政府統(tǒng)一供應(yīng)的豬口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗，按規(guī)劃進(jìn)行春秋兩季強(qiáng)制免疫。免費(fèi)的疫苗極大造福了養(yǎng)殖業(yè)，但有部分養(yǎng)殖者心存疑慮，想知道疫苗的質(zhì)量如何？免疫多久后抗體能保護(hù)豬群健康？基此，筆者對(duì)豬口蹄疫O型免疫后不同時(shí)間的抗體水平進(jìn)行檢測(cè)試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與分組 選取4個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)（用A、B、C、D表示）精神狀態(tài)良好60日齡左右的仔豬各30頭，分兩組進(jìn)行試驗(yàn)(均另設(shè)欄飼養(yǎng))，首免日齡均為60日齡左右。試驗(yàn)分組及免疫方案見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)分組及免疫方案

1.2 血樣采集 第1組分別在第一次免疫（首免）后第28 d、35 d、42 d進(jìn)行采血。第2組分別在加強(qiáng)免疫后第14 d、28 d、42 d、90 d、120 d進(jìn)行采血。

1.3 抗體檢測(cè) 使用北京某生物有限公司生產(chǎn)的口蹄疫（FMD）O型抗體ELISA檢測(cè)試劑盒對(duì)所采血清進(jìn)行口蹄疫O型抗體檢測(cè)。

1.4 標(biāo)樣測(cè)定與結(jié)果判定 在450 nm波長(zhǎng)讀取OD值，陽(yáng)性對(duì)照分別是0.1607、0.1842，陰性對(duì)照分別是0.8108、0.8314，計(jì)算得陰性對(duì)照OD平均值＞0.7，陽(yáng)性對(duì)照S/N平均值＜0.3，本試驗(yàn)成立。

計(jì)算方法：NC OD均值=（NC1＋NC2）/2=0.8211；樣品S/N=樣品OD值/NC OD均值。

判定標(biāo)準(zhǔn)：S/N≤0.5為陽(yáng)性，S/N＞0.5為陰性。計(jì)算得免疫保護(hù)臨界值S/0.8211=0.4105，即樣品S/N≤0.5，判為陽(yáng)性。

2 結(jié) 果

第1組仔豬首免后不同時(shí)間抗體檢測(cè)結(jié)果顯示（見(jiàn)表2），豬口蹄疫O型首免后28 d，抗體合格率為73.33%，隨著時(shí)間推移，抗體合格率急劇下降，首免后第42 d，抗體合格率低至3.33%。

表2 第1組仔豬首免后不同時(shí)間抗體情況

第2組仔豬首免28 d后進(jìn)行加強(qiáng)免疫，加強(qiáng)免疫后不同時(shí)間抗體檢測(cè)結(jié)果顯示（見(jiàn)表3），豬口蹄疫O型二免后第14 d、28 d、42 d抗體高且合格率均為100%，二免后第90 d、120 d抗體合格率還在70%以上，可以有效保護(hù)豬群健康。

表3 第2組仔豬二免后不同時(shí)間抗體情況

3 分析與討論

1）第1組仔豬僅用口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗免疫一次，樣品OD平均值接近免疫保護(hù)臨界值，抗體保護(hù)的時(shí)間短暫，首免28 d后抗體水平衰減快，在42 d基本消失，豬群沒(méi)有抵抗疫病能力，萬(wàn)一被口蹄疫病毒侵襲，后果不堪設(shè)想。必須對(duì)已完成3次抽血檢測(cè)的試驗(yàn)仔豬馬上進(jìn)行第二次免疫，免疫劑量均為2 mL/頭，二免后30 d左右進(jìn)行三免，根據(jù)豬只健康情況和體重確定免疫劑量。

2）第2組仔豬二免后3個(gè)月內(nèi)樣品OD平均值明顯小于免疫保護(hù)臨界值，產(chǎn)生抗體強(qiáng)且持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，可見(jiàn)加強(qiáng)免疫在免疫接種中是一個(gè)不可缺少的程序。

3）動(dòng)物免疫抗體水平受多種因素的影響。首免后28 d口蹄疫O型抗體平均水平不甚理想，分析其原因：（1）本次試驗(yàn)太倉(cāng)促，免疫前未采血檢測(cè)仔豬的母源抗體，首免時(shí)間安排不妥而影響免疫效果。有條件時(shí)要進(jìn)行母源抗體檢測(cè)，以便科學(xué)安排首免時(shí)間。（2）同一時(shí)段接種了其他疫苗，造成相互干擾而使免疫抗體減弱。（3）口蹄疫滅活疫苗經(jīng)由上級(jí)部門調(diào)撥、運(yùn)輸、發(fā)放，如果在達(dá)不到2～8℃儲(chǔ)運(yùn)條件下的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)影響疫苗質(zhì)量，免疫抗體水平不能達(dá)到預(yù)期效果。

4 結(jié) 語(yǔ)

1）政府部門供應(yīng)的口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗二免后120 d抗體合格率還能達(dá)到76.67%，表明通過(guò)二免能有效預(yù)防豬O型口蹄疫，能夠?qū)ωi群提供良好的保護(hù)，免疫效果良好，政府部門供應(yīng)的疫苗可以放心使用。

2）二免后第120 d，樣品OD平均值（0.3926）接近免疫保護(hù)臨界值（0.4105），有條件的場(chǎng)、受威脅的場(chǎng)、前期發(fā)生過(guò)免疫抑制性疾病的場(chǎng)或飼養(yǎng)大豬（體重150 kg以上）的場(chǎng)，建議二免3個(gè)月后使用政府疫苗進(jìn)行三免，可以更有效保護(hù)豬群免受口蹄疫侵襲。

3）血清學(xué)檢測(cè)是當(dāng)前規(guī)?；i場(chǎng)檢驗(yàn)免疫效果的手段。定期對(duì)豬場(chǎng)進(jìn)行抽血采樣檢測(cè)，了解豬群免疫水平，可以避免動(dòng)物疫病防控的盲目性，為科學(xué)防控提供參考依據(jù)。