非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)主要臨床病理特征為彌漫性肝細胞大泡性脂肪變，包括單純性脂肪肝(NAFL)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，可發(fā)展為肝纖維化、肝硬化，甚至肝癌。NAFLD起病隱匿，不易覺察，其中肝纖維化、肝硬化是影響NAFLD患者不良預后的重要因素，因此，及早診斷對患者的治療和預后有重要意義

。微小RNA(miRNA)是一類非編碼 RNA ，在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達，在細胞增殖、分化、凋亡、纖維化等過程發(fā)揮著重要作用，其表達異常與多種疾病有關。有研究表明miRNA是慢性肝損傷診斷和預后的標志物，與NAFLD的發(fā)展有關

。Toll樣受體(TLRs)屬于模式識別受體家族，在免疫反應中有重要作用，研究表明，TLRs 與肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展密切相關

。TLR2屬于TLRs家族，在多種慢性疾病所導致炎癥反應中發(fā)揮重要作用。miR-143、TLR2在NAFLD患者血清中的表達及與肝纖維化的關系尚不清楚，筆者檢測NAFLD患者血清miR-143、TLR2表達情況，并探討兩者與患者肝纖維化的相關性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2019年1月至2020年7月在本院治療的NAFLD患者121例，其中男73例，女48例，年齡21～74歲，平均(45.30±8.50)歲。根據(jù)NFS 評分將121例患者分為非進展性肝纖維化組(NFS≤0.676分，簡稱非進展組)68例和進展性肝纖維化組(NFS>0.676分，簡稱進展組)53例。

1.2 納入及排除標準 納入標準：①所有患者的診斷符合中華醫(yī)學會肝病學分會脂肪肝和酒精性肝病學組2010年制定的《非酒精性脂肪性肝病診療指南》中標準

；②無飲酒史或飲酒折合乙醇量小于140 g/周(女性小于70 g/周)；③影像學診斷為彌漫性脂肪肝；④患者知情并同意。排除標準:①重癥感染、血液疾病或患者處于自體免疫性疾病活動期；②病毒性肝炎、自身免疫性肝病、藥物性肝病等可導致脂肪肝的疾??；③臨床資料不全者。

選擇同期健康體檢人員100例作為對照組，其中男65例，女35例，年齡22～75歲，平均(46.10±8.70)歲。

工作人員傾聽、記錄群眾意見后，先在鍛煉對象中開展認領，超出能力權限的通過臨時黨支部交辦到所駐社區(qū)城市基層黨建聯(lián)建委員會，在駐區(qū)單位黨員、住區(qū)黨員中開展認領；對需要市委、市政府層面解決的，通過城市基層黨建街道共建委員會上交到城市基層黨建工作領導小組，上報到市委市政府，變成全市共同行動，讓黨及時聽到了群眾的“聲音”，為市委市政府決策提供了參考。

2.5 肝纖維化患者NFS評分與miR-143、TLR2等各指標的相關性分析 見表6。相關性分析顯示肝纖維化患者NFS評分與TLR2、ALT、AST、TC、TG、LDL-C、HbAlc呈正相關，與miR-143、HDL-C呈負相關(

<0.05)。

1.4.1 樣品采集及保存 血清樣品：采集NAFLD患者空腹靜脈血5 ml，室溫靜置15 min后，1 500 r/min離心20 min后收集血清，-80℃保存用于生化檢測。

這是一幅追求極致的肖像作品，它展現(xiàn)了在單一光源的情況下能夠得到怎樣的效果。Craig在拍攝中謹慎周全，這幅作品也充分體現(xiàn)出了他的用心，可以說是他當天最棒的作品。

1.4 方法

報道稱，雖然網(wǎng)上貿(mào)易持續(xù)增長，但這并不一定意味著在現(xiàn)實世界中實體零售生意的消亡。根據(jù)普華永道的統(tǒng)計，近60%的德國人每周至少會在實體零售店中掏一次錢包。實體店購物的人數(shù)甚至多于3年前，當時只有46%的人進入實體商店購物。報道稱，然而這種變化現(xiàn)在也出現(xiàn)逆轉(zhuǎn)：一些網(wǎng)上供貨商也冒險進入現(xiàn)實世界。亞馬遜現(xiàn)在也開始辦實體零售店。在美國已經(jīng)出現(xiàn)首批亞馬遜實體零售商店。

1.3 主要儀器與試劑 RNA提取試劑盒、反轉(zhuǎn)錄試劑盒、qRT-PCR試劑盒購自寶生物工程(大連)有限公司，miR-143、U6引物由南京金斯瑞生物科技股份有限公司合成，人Toll樣受體2(TLR2)采用ELISA檢測試劑盒，購自美國eBioscience公司。

2.1 NAFLD患者和對照組人員miR-143、TLR2檢測結(jié)果 見表2。

建筑企業(yè)工程管理模式的創(chuàng)新受到該企業(yè)生產(chǎn)力的直接影響，生產(chǎn)力水平的高低造就了企業(yè)不同的工程管理模式。首先，提高生產(chǎn)力水平的核心因素是勞動者，勞動者在企業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮至關重要的實質(zhì)性作用，對日后的工程質(zhì)量與企業(yè)的效益獲得影響頗大。應該加強對勞動者的選用與管理工作，切合實際地將高效率的勞資管理工作落實到實處。其次，建筑企業(yè)生存與發(fā)展的主要推動力是勞動對象，勞動對象的獲得必須通過較為激烈的市場競爭，通過企業(yè)自身優(yōu)勢獲得。因此，通過勞動者與勞動對象而提高企業(yè)生產(chǎn)力水平，進而逐漸加強了企業(yè)工程管理模式的創(chuàng)新速度與規(guī)模[3]。

從概念表征過程來看，是否正確理解“基因”概念，不僅需要準確提取概念中的關鍵詞，如是有、遺傳效應、DNA片段，而且還需要理解關鍵詞的正確含義，進而能夠運用已有的認知結(jié)構，抽象概念的內(nèi)涵。本研究以表征理論為基礎，以人教版高中生物《必修2·遺傳與進化》教材的相關內(nèi)容為素材，編制了“基因概念表征調(diào)查問卷”，在征求學科專家意見的基礎上，進行了問卷試驗，其效度和信度經(jīng)檢驗，均達到要求。問卷設計細目表見表2。其中“有氧呼吸”概念表征問卷細目表及編制具體參見張素燕等人撰寫的《不同智力類型學生“有氧呼吸”概念表征的研究》。

2.3 NAFLD患者和對照組人員血脂檢測結(jié)果 見表4。

2 結(jié)果

1.4.2 miR-143的檢測 采用實時熒光定量PCR(qRT-PCR)法檢測miR-143。使用試劑盒提取RNA和反轉(zhuǎn)錄合成cDNA后，使用qRT-PCR試劑盒測miR-143水平，引物序列根據(jù)miRbase數(shù)據(jù)庫公布的序列，由南京金斯瑞生物科技股份有限公司設計并合成，見表1，反應總體系20 μl，PCR反應條件：95℃，120 s；95℃，75 s；65℃，60 s；72℃，30 s，38個循環(huán)。用U6作為內(nèi)參照，采用2

法對外周血miR-143表達水平進行定量分析。

2.2 NAFLD患者和對照組人員肝腎功能檢測結(jié)果 見表3。

1.4.4 檢測肝腎功能血脂計算體重指數(shù) 肝功能包括[丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)，天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)]、白蛋白(Alb)、乳酸脫氫酶(LDH)、血紅蛋白(Hb)、總膽紅素(TBil)、肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)；血脂包括總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、糖化血紅蛋白(HbA1c)。計算體重指數(shù)BMI=體重(公斤)/身高(米)

。

1.4.3 檢測血清TLR2水平 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清TLR2水平，具體操作步驟按照試劑盒說明書進行操作。

2.4 非進展組和進展組患者血清miR-143、TLR2檢測結(jié)果 見表5。

本研究經(jīng)過本院倫理委員會批準，患者均知情同意并簽署知情同意書。

3 討論

研究資料表明，NAFLD發(fā)病率逐年增加，是肥胖等疾病的并發(fā)癥之一，NAFLD 患者發(fā)病初期可無任何臨床癥狀，若不及時治療，易發(fā)生肝細胞變性、肝纖維化等，最終導致肝硬化。研究證實，肝纖維化是一個可逆的過程，若能早期診斷與治療，可減輕、阻斷肝纖維化進展

。

miRNA參與多種肝臟疾病的病理過程，在抑制肝纖維化進展中發(fā)揮重要作用

。Tu等

研究表明，在肝抗原S100與脂多糖誘導的自身免疫性肝炎與肝細胞損傷小鼠模型中，miRNA-143-3p通過調(diào)節(jié)TAK1磷酸化，減弱肝纖維化進程。Zheng等

研究表明，miR-143通過下調(diào)NF-κB p65蛋白表達，引發(fā)了NF-κB信號轉(zhuǎn)導通路誘導肝癌細胞凋亡。本研究結(jié)果顯示，與對照組比較，NAFLD患者血清miR-143表達水平降低，與非進展組比較，進展組患者血清miR-143表達水平也降低，提示miR-143表達量減少可能與NAFLD患者肝纖維化發(fā)生有關。

TLRs為天然免疫分子，主要分布在巨噬細胞、成纖維細胞、中性粒細胞等免疫細胞表面，在機體免疫應答過程中發(fā)揮重要作用，在肝臟TLRs主要在肝星狀細胞、肝細胞和 Kupffer 細胞表面表達，TLR2為TLRs家族成員，其高表達在重癥肝損傷、慢性化病毒感染等方面起重要作用

。邵麗春等

研究表明，慢性乙型肝炎患者外周血單核細胞中TLR2表達水平顯著升高，與慢性乙型肝炎的發(fā)病、發(fā)展及預后密切相關。研究表明，在D-氨基半乳糖聯(lián)合脂多糖(LPS)誘導的急性肝衰竭大鼠肝組織中TLR2水平升高，解毒化瘀顆?？梢燥@著改善肝組織壞死和炎性細胞浸潤，使肝組織中TLR2水平明顯降低

。本研究結(jié)果顯示，NAFLD患者血清TLR2水平顯著升高，且進展組患者血清TLR2表達水平較非進展組患者明顯升高，提示TLR2可能促進NAFLD患者肝纖維化進程。

關于公司，鄭斌董事長又一次強調(diào)“精益求精”四個字，恰如精密達一直專注于印后。智能化是公司發(fā)展的方向，鄭斌董事長對此也有自己的理解：于精密達而言，智能化是一個“在路上”的過程，企業(yè)要一直進步和創(chuàng)新。精密達成立的24年里，正是在不斷調(diào)整中順應趨勢，經(jīng)歷必然的發(fā)展過程。印刷設備要實現(xiàn)智能化，前提是機械化和自動化。如今，機械化已經(jīng)實現(xiàn)，自動化正在實現(xiàn)，具有選擇性能的智能化正在努力實現(xiàn)，而在智能化的基礎上還要再實現(xiàn)“互聯(lián)網(wǎng)+”，遠程控制等。

肝纖維化發(fā)生受多種因素影響，研究表明，脂質(zhì)代謝紊亂是NAFLD發(fā)病重要因素之一，糖脂代謝狀態(tài)的紊亂可促進肝纖維化的進程，脂質(zhì)過氧化可進一步加重肝臟炎癥反應，從而導致肝細胞壞死、肝臟纖維化

。本研究結(jié)果顯示，NAFLD患者血清TC、TG、LDL-C、HbA1c水平顯著升高，HDL-C水平顯著降低，說明患者體內(nèi)存在糖脂代謝異常。另外NAFLD組患者血清ALT、AST水平升高說明患者存在一定肝損傷。肝纖維化是慢性肝炎、肝癌等肝臟疾病發(fā)生發(fā)展的中間環(huán)節(jié)，由各種致病因素引起肝臟慢性損傷和炎癥，大量細胞因子激活，導致大量外基質(zhì)(ECM)釋放，致使ECM 過度沉積引起肝纖維化

。肝纖維化與慢性炎性反應密切相關，TLRs作為炎性反應的觸發(fā)器，在肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。本研究結(jié)果提示miR-143表達降低與TLR2表達升高與NAFLD患者肝纖維化發(fā)生有關，但二者具體作用機制尚不清楚。Liu等

研究表明，肝癌組織中miR-143表達下降，TLR2表達增加從而促進肝癌細胞的增殖與侵襲，表明二者可能存在負向調(diào)控關系。

綜上所述，在NAFLD肝纖維化患者血清中miR-143低表達和TLR2高表達與肝纖維化有關，可能作為預測NAFLD患者肝纖維化潛在的標志物。但二者的具體作用機制仍需做進一步研究。

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