李思潼，薛婉瑩，李紅鑫，孫常勝，吳婧楠，邱旖，吳雪純，蔣巧萍，宇泉霖，孫騰躍，張欣悅，張金玲，蔡程科*，王洪飛*（.北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京 0488；.北京量子高科制藥科技有限公司，北京 000）

凍干口崩片（lyophilised orally disintegrating tablets）是指將特制配方溶液通過冷凍干燥技術(shù)制備得到的一種新劑型，與傳統(tǒng)壓片法制備的口崩片相比，其具有高孔隙率、崩解迅速、輔料用量少、生物利用度高的特點(diǎn)。服用時僅通過唾液即可在口腔中快速崩解，無需用水送服。其活性成分可直接通過口腔黏膜快速吸收，避免肝臟首過效應(yīng)，特別適用于老人、兒童、精神類疾病以及吞咽困難的患者，可以極大地提高這些人群的服藥依從性。

凍干口崩片始載于2015年版《中國藥典》，2020年版《中國藥典》對其要求為：“除冷凍干燥法制備的口崩片外，口崩片應(yīng)進(jìn)行崩解時限檢查（通則0921）。采用冷凍干燥法制備的口崩片可不進(jìn)行脆碎度檢查”。凍干口崩片在國內(nèi)正處于快速發(fā)展階段，然而對其進(jìn)行質(zhì)量評價(jià)的研究較少，其質(zhì)量較輕，具有疏松多孔的骨架結(jié)構(gòu)，現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)研究中用于經(jīng)典片劑的質(zhì)量評價(jià)方法并不完全適用于凍干口崩片。

本研究選取了10 種具有代表性的凍干口崩片（包含化藥類、中藥類、蛋白類等），對其進(jìn)行多角度的質(zhì)量評價(jià)研究，并找出合適的評價(jià)方法，為凍干口崩片及其相關(guān)劑型藥物的質(zhì)量表征與評價(jià)提供有效可行的新模式和新方法，也為口腔崩解片相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂提供參考。建立凍干口崩片的質(zhì)量評價(jià)體系，可以科學(xué)、規(guī)范地評價(jià)產(chǎn)品的質(zhì)量水平，更能在生產(chǎn)中準(zhǔn)確把控產(chǎn)品的質(zhì)量，切實(shí)引導(dǎo)市場選擇導(dǎo)向，為這一新劑型的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 試藥

透明質(zhì)酸鈉凍干泡騰片（批號：20210531，規(guī)格：15 mg）、膠原蛋白肽透明質(zhì)酸鈉凍干含化糖（批號：20220107，規(guī)格：50 mg）、百荷凍干含化糖（批號：20210913，規(guī)格：50 mg）、地龍蛋白含化糖（批號：20200805，規(guī)格：30 mg）、氯雷他定口崩片（批號：ZS2101002，規(guī)格：10 mg）（陜西量子高科藥業(yè)有限公司）；對乙酰氨基酚口崩片（自制，批號：20210810，規(guī)格：100 mg）；霍山石斛口崩片（批號：20210428，規(guī)格：20 mg，自制）；桑葚口崩片（批號：20210823，規(guī)格：60 mg）、他達(dá)拉非口崩片（批號：20210818，規(guī)格：20 mg）、銀杏葉凍干口崩片（批號：20210928，規(guī)格：40 mg）（北京量子制藥科技有限公司）。

氯雷他定對照品（批號：100615-201103，純度：99.8%，中國食品藥品檢定研究院）；乙腈、甲醇（色譜純，F(xiàn)isher Scientific 公司）；磷酸（分析純，無錫市亞泰聯(lián)合化工有限公司）；二乙胺（分析純，天津市大茂化學(xué)試劑廠）；卡爾費(fèi)休試劑（國家化學(xué)試劑質(zhì)檢中心）；無水甲醇（分析純，天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司）；純凈水（杭州娃哈哈集團(tuán)有限公司）。

1.2 儀器

電子天平（BT25s，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；口崩片崩解儀（KB-1，天津市天大天發(fā)科技有限公司）；卡爾費(fèi)休水分測定儀（MA-1，上海本昂科學(xué)儀器有限公司）；藥品穩(wěn)定性試驗(yàn)箱（Labone-300CGS，北京蘭貝石恒溫技術(shù)有限公司）；高性能全自動壓汞儀[AutoPore V9605，麥克默瑞提克（上海）儀器有限公司]；全自動真密度分析儀（Ultrapyc 5000）、全自動比表面積和孔徑分析儀（Autosorb-IQ-MP）[安東帕（上海）商貿(mào)有限公司]。

2 方法與結(jié)果

2.1 凍干口崩片質(zhì)量評價(jià)

2.1.1 外觀評測 10 批凍干口崩片，每批隨機(jī)抽取20 片，分別置于自制外觀評測裝置（見圖1）的固定白色光源、純色背景下，固定角度觀察片劑。設(shè)計(jì)5 個評價(jià)指標(biāo)：顏色、形態(tài)、裂邊、融化、黏片。分別要求片劑顏色均勻；呈圓形、飽滿光潔；無裂片、裂邊；無底融化、中心融化；沒有與包材粘連殘留的現(xiàn)象。記錄每批20 片中合格片劑的數(shù)量，合格一個記1 分，單個評測項(xiàng)低于15 分即為此項(xiàng)不達(dá)標(biāo)，5 個評測指標(biāo)中存在2 項(xiàng)及以上不達(dá)標(biāo)即為樣品不合格。各批凍干口崩片的外觀評測結(jié)果如表1 所示。

表1 外觀評測結(jié)果
Tab 1 Appearance evaluation

類別 樣品顏色 形態(tài) 裂片 融化 黏片化藥類 氯雷他定口崩片2020202020他達(dá)拉非口崩片2020202020對乙酰氨基酚口崩片2020202020中藥類 百荷凍干含化糖920162020霍山石斛口崩片2020202010桑葚口崩片2020202020銀杏葉凍干口崩片2020181920蛋白類 膠原蛋白肽透明質(zhì)酸鈉凍干含化糖202020 320地龍蛋白含化糖1520202020其他透明質(zhì)酸鈉凍干泡騰片 2020202020

圖1 凍干口崩片外觀評測裝置Fig 1 Appearance evaluation device for lyophilised orally disintegrating tablets

從評測結(jié)果可得，化藥類凍干口崩片多呈白色至類白色，中藥類多為黃色或棕色，10 批凍干口崩片均為圓形片，片面飽滿光潔，但中藥類與蛋白類凍干口崩片更容易出現(xiàn)裂片或融化現(xiàn)象，頂部突起黏附頂鋁的現(xiàn)象可通過調(diào)整灌裝量解決。10 批凍干口崩片外觀評測均合格。

2.1.2 片重差異 根據(jù)2020年版《中國藥典》對于片重差異測定法的要求，對10 批凍干口崩片每批隨機(jī)抽取20 片，精密稱定總重量，求得平均片重后，再分別精密稱定每片的重量，每片重量與平均片重比較，超出重量差異限度的不得多于2 片，并不得有1 片超出限度1 倍。平均片重或標(biāo)示片重0.3 g 以下的重量差異限度為±7.5%。片重差異計(jì)算公式：

圖2 氯雷他定口崩片（左）與銀杏葉凍干口崩片（右）的外觀Fig 2 Appearance of loratadine orally disintegrating tablet（left）and ginkgo leaf lyophilised orally disintegrating tablet（right）

片重差異（%）＝（單片重－平均片重）/平均片重×100%

各批凍干口崩片的試驗(yàn)結(jié)果如表2 所示。由表2 可以看出，10 批凍干口崩片的片重差異均合格。凍干口崩片的片重較輕，大多為19 ～108 mg，通過片重與規(guī)格的比較可以發(fā)現(xiàn)其輔料用量很少，藥物活性成分（API）占比很大，這也是凍干口崩片的優(yōu)勢之一。

表2 片重差異測定結(jié)果
Tab 2 Tablet weight difference

類別樣品規(guī)格/mg平均片重/mg超限數(shù) 結(jié)果化藥類 氯雷他定口崩片1019.030合格他達(dá)拉非口崩片2039.190合格對乙酰氨基酚口崩片100108.060合格中藥類 百荷凍干含化糖5052.070合格霍山石斛口崩片2023.681合格桑葚口崩片6066.760合格銀杏葉凍干口崩片4067.290合格蛋白類 膠原蛋白肽透明質(zhì)酸鈉凍干含化糖5076.611合格地龍蛋白含化糖3057.290合格其他透明質(zhì)酸鈉凍干泡騰片1526.841合格

2.1.3 崩解時限 根據(jù)2020年版《中國藥典》口崩片崩解時限檢查法的要求，使用口崩片崩解儀測定崩解時限，將崩解籃固定于支架上，浸入1000 mL 杯中，杯內(nèi)盛有溫度為（37±1）℃的水約900 mL，調(diào)節(jié)水位高度使崩解籃最低位時篩網(wǎng)在水面下（15±l）mm，啟動儀器。取本品1 片，置崩解籃中進(jìn)行檢查，應(yīng)在60 s 內(nèi)全部崩解并通過篩網(wǎng)，如有少量輕質(zhì)上漂或黏附于不銹鋼管內(nèi)壁或篩網(wǎng)，但無硬心者，可作符合規(guī)定論。重復(fù)測定6 片，均應(yīng)符合規(guī)定。如有1 片不符合規(guī)定，應(yīng)另取6 片復(fù)試，均應(yīng)符合規(guī)定。各批凍干口崩片的測定結(jié)果如表3 所示。

表3 崩解時限測定結(jié)果(s)
Tab 3 Disintegration time (s)

類別樣品1 23456均值化藥類 氯雷他定口崩片1 111111他達(dá)拉非口崩片1 111111對乙酰氨基酚口崩片97 95 107 117 105 92 102.2中藥類 百荷凍干含化糖10 685446.2霍山石斛口崩片3 222332.5桑葚口崩片2 111121.3銀杏葉凍干口崩片 11 96 10498.2蛋白類 膠原蛋白肽透明質(zhì)酸鈉凍干含化糖4 646655.2地龍蛋白含化糖4 644454.5其他透明質(zhì)酸鈉凍干泡騰片59 64 57 62 67 55 60.7

由表3 可以得出，透明質(zhì)酸鈉凍干泡騰片與對乙酰氨基酚口崩片崩解時限大于60 s，不合格，其余均在10 s 內(nèi)崩解。規(guī)格小的凍干口崩片一般情況下的崩解速度稍快于大規(guī)格凍干口崩片。

2.1.4 水分測定 參照2020年版《中國藥典》中水測定法第一法（費(fèi)休氏法）進(jìn)行測定，取適量樣品，放入研缽中充分研磨，精密稱定重量后，快速放入卡爾費(fèi)休水分測定儀中測定水分，記錄測定結(jié)果，每批平行測定3 次，結(jié)果見表4。

由表4 可以得出，大部分凍干口崩片的含水量在0.5%～5%，但百荷凍干含化糖含水量遠(yuǎn)高于平均水平?；庮惡烤?%以下，中藥類與蛋白類含水量高一些，大部分為3%～5%，中藥由于其成分復(fù)雜，水分不易除去，在生產(chǎn)過程中更難制備。

2.1.5 引濕性試驗(yàn) 根據(jù)2020年版《中國藥典》中9103 藥物引濕性試驗(yàn)指導(dǎo)原則，結(jié)合實(shí)際生產(chǎn)情況，設(shè)計(jì)了引濕性試驗(yàn)。取具塞玻璃稱量瓶，于試驗(yàn)前一日置于藥品穩(wěn)定性試驗(yàn)箱內(nèi)，設(shè)置溫度為（25±1）℃，濕度為（40±2）%，精密稱定稱量瓶質(zhì)量（

m

），每批各取10 片樣品，平鋪于上述稱量瓶中，精密稱定質(zhì)量（

m

），將稱量瓶敞口，并與瓶蓋同置于上述恒溫恒濕條件下，分別于1 h、2 h 取出稱量瓶，蓋好稱量瓶蓋子，精密稱定質(zhì)量（

m

）。增重百分率計(jì)算公式：增重百分率（%）＝（

m

－

m

）/（

m

－

m

）×100%

測定結(jié)果如表4 所示。由表4 可以看出，凍干口崩片1 h 與2 h 的增重百分率相差不大，說明其吸水過程主要發(fā)生在前1 h，在1 ～2 h 期間，吸水較少。10 批凍干口崩片的2 h 增重百分率為0.15%～8.74%，其中化藥類的增重百分率很低，為0.15%～0.16%，中藥類增重百分率較高，為2.85%～8.74%，蛋白類的增重百分率為0.67%～3.97%。

表4 水分、引濕性試驗(yàn)測定結(jié)果
Tab 4 Moisture and hygroscopicity test

類別樣品含水量/%增重百分率/%1 h2 h化藥類氯雷他定口崩片1.660.100.16他達(dá)拉非口崩片1.600.130.15對乙酰氨基酚口崩片0.510.160.16中藥類百荷凍干含化糖11.048.248.74霍山石斛口崩片3.072.852.85桑葚口崩片4.193.173.35銀杏葉凍干口崩片5.175.926.86蛋白類膠原蛋白肽透明質(zhì)酸鈉凍干含化糖5.000.110.67地龍蛋白含化糖1.693.793.97其他透明質(zhì)酸鈉凍干泡騰片3.566.856.85

2.1.6 真密度測定 試驗(yàn)前應(yīng)將全自動真密度分析儀，以及試驗(yàn)材料、用具處于試驗(yàn)室恒溫環(huán)境下放置24 h 以上。準(zhǔn)備開始測定樣品的真密度，首先打開氦氣閥，調(diào)壓力為0.13 ～0.14 MPa，打開儀器電源，預(yù)熱30 min，使儀器恒溫，然后對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。校準(zhǔn)完成后，取適量樣品，精密稱定，放入樣品池內(nèi)進(jìn)行測定，依次測定10 批樣品，結(jié)果如表5 所示。10 批凍干口崩片的真密度較為接近，在1.473 ～1.862 g·cm。

2.1.7 比表面積測定 使用氮?dú)馕椒y定凍干口崩片的比表面積，首先開啟氮?dú)馄康闹鏖y，確認(rèn)壓力不低于5 MPa，再將加壓閥壓力調(diào)至0.08 MPa，然后開啟儀器，準(zhǔn)備做樣品的前處理，取適量樣品放入提前稱好重量的樣品管中，一起精密稱定并記錄，再將樣品管安裝在脫氣站上，進(jìn)行脫氣處理，脫氣完成后，將樣品管取下精密稱定，再將樣品管安裝在分析站上，進(jìn)行測試，記錄試驗(yàn)結(jié)果，依次測定10 批凍干口崩片，結(jié)果如表5 所示。

從表5 可以看出，剔除偏離較大的數(shù)據(jù)（百荷）后，凍干口崩片的比表面積為1.431 ～5.192 m·g，化藥類平均比表面積高于中藥類，百荷凍干含化糖比表面積較低，推測為凍干曲線不合適，在凍干過程中沒有形成孔道。

2.1.8 孔隙率測定 使用壓汞儀來測定凍干口崩片的孔隙率，將儀器打開后，取適量樣品裝入樣品管中，然后將樣品管密封，精密稱定總重量并記錄，把檢測套加在樣品管頭上鎖住，然后進(jìn)行低壓孔隙分析測試以及高壓孔隙分析測試，依次測定10 批樣品，結(jié)果如表5 所示，剔除偏離較大的數(shù)據(jù)（百荷凍干含化糖）后，10 批凍干口崩片的平均孔徑大小為10 254.31 ～29 207.12 nm，孔隙率為76.76%～86.98%。

表5 物理常數(shù)測定結(jié)果
Tab 5 Physical constants

類別樣品真密度/（g·cm－3） 比表面積/（m2·g－1） 平均孔徑/nm孔隙率/%化藥類氯雷他定口崩片1.8624.33614 039.3786.95他達(dá)拉非口崩片1.6615.19210 254.3180.29對乙酰氨基酚口崩片1.7132.77929 207.1276.76中藥類百荷凍干含化糖1.6040.14658 411.9365.96霍山石斛口崩片1.7563.37124 401.386.98桑葚口崩片1.5851.43124 059.9984.62銀杏葉凍干口崩片1.5442.06010 944.7381.49生物類膠原蛋白肽透明質(zhì)酸鈉凍干含化糖1.4732.01211 114.2378.83地龍蛋白含化糖1.5973.15717 072.6581.75其他透明質(zhì)酸鈉凍干泡騰片1.7884.58411 655.9177.81

2.1.9 加速試驗(yàn) 取氯雷他定口崩片300 片放置在溫度（40±1）℃，濕度（75±5）%的恒溫恒濕箱中6 個月，分別于0、1、2、3、6 個月取樣，測定其外觀、含量、有關(guān)物質(zhì)、水分、崩解時限。試驗(yàn)結(jié)果如表6 所示。

表6 加速試驗(yàn)測定結(jié)果
Tab 6 Accelerated test

檢測項(xiàng) 外觀評分單一雜質(zhì)/% 總雜質(zhì)/% 含量/%水分/%01000.100.30102.802.40 11000.060.20103.402.20 2 980.060.20100.402.40 3 990.060.20101.302.40 6 980.070.30101.702.50

① 外觀、水分、崩解時限測定：外觀測定方法按“2.1.1”項(xiàng)下方法；水分測定按“2.1.4”項(xiàng)下方法；崩解時限測定按“2.1.3” 項(xiàng)下方法。

② 含量測定：照高效液相色譜法（《中國藥典》2020年版四部通則0512）測定。色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相為乙腈-甲醇-0.02%的二乙胺溶液（50∶20∶30）（用磷酸調(diào)pH 值至4.0±0.1）；檢測波長247 nm；進(jìn)樣量20 μL；流速1.0 mL·min；柱溫25℃。

測定法：取本品10 片（相當(dāng)于氯雷他定100 mg），置100 mL 量瓶中，加水5 mL，超聲處理2 min，加流動相80 mL，再超聲處理15 min，加流動相稀釋至刻度，作為儲備液；精密量取儲備液10 mL，置50 mL 量瓶中，加流動相稀釋至刻度，用聚四氟乙烯濾膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。另精密稱取105℃干燥至恒重的氯雷他定對照品適量，加流動相溶解并稀釋成每1 mL中含氯雷他定0.1 mg 的溶液，作為對照品溶液。分別吸取供試品溶液和對照品溶液各20 μL 注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

③ 有關(guān)物質(zhì)測定：記錄色譜圖至主峰保留時間的3 倍，供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，各雜質(zhì)峰面積的總和不得大于對照溶液主峰面積（1.0%），單個雜質(zhì)峰的峰面積不得大于對照溶液主峰面積的0.5 倍（0.5%）。

2.2 各評測結(jié)果相關(guān)性分析

將上述結(jié)果導(dǎo)入SPSS 20.0 進(jìn)行相關(guān)性分析，首先對8 組數(shù)據(jù)的正態(tài)分布進(jìn)行分析，符合正態(tài)分布的組別使用Pearson 相關(guān)性分析，不符合正態(tài)分布的組別使用Spearman 相關(guān)性分析，結(jié)果如表7 所示：水分含量與比表面積成強(qiáng)負(fù)相關(guān)關(guān)系；水分含量與引濕性成極強(qiáng)正相關(guān)關(guān)系；崩解時限與孔隙率成強(qiáng)負(fù)相關(guān)關(guān)系；真密度與比表面積成強(qiáng)正相關(guān)關(guān)系。

表7 評測結(jié)果相關(guān)性分析
Tab 7 Correlation analysis of evaluation

注（Note）： ＜0.05， ＜0.01。

項(xiàng)目比表面積平均孔徑孔隙率水分崩解時限片重引濕性真密度比表面積1平均孔徑－0.4181孔隙率0.486－0.1271水分－0.697*0.030－0.1881崩解時限－0.3220.237－0.687*0.2431片重－0.5300.030－0.3210.1640.5351引濕性－0.3900.237－0.5120.796**0.473－0.1451真密度0.696*0.2240.304－0.564－0.116－0.582－0.2061

3 討論

考慮到國內(nèi)已上市的凍干口崩片品種較少，本研究除選取已上市產(chǎn)品外，其余凍干口崩片均采用與已上市藥品相同的制備工藝得到。因此，可以保證其質(zhì)量穩(wěn)定可靠。且選取的品種類別涵蓋范圍較廣，得到的質(zhì)量評價(jià)結(jié)果具有較高的可信度與普適性。自凍干口崩片收載于2015年版《中國藥典》以來，其質(zhì)量評價(jià)的發(fā)展比較緩慢，國內(nèi)研究大多為對于某一種產(chǎn)品的崩解時限、溶出度、含量測定等，進(jìn)行質(zhì)量評測，本文針對這一劑型進(jìn)行系統(tǒng)性的質(zhì)量評價(jià)研究，為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供了新方法、新思路。

凍干口崩片容易出現(xiàn)顏色不均勻、裂片、底部融化、中心融化、黏片等現(xiàn)象。凍干口崩片片型的好壞與其凍干前溶液均勻度、處方、凍干曲線等因素有關(guān)，出現(xiàn)裂片現(xiàn)象可適當(dāng)增加黏合劑進(jìn)行改善，出現(xiàn)融化現(xiàn)象可適當(dāng)調(diào)整凍干曲線。圖3、圖4 為凍干口崩片的三維顯微結(jié)構(gòu)圖與切片圖，可看見其疏松多孔的骨架結(jié)構(gòu)，API 均勻的分布在骨架結(jié)構(gòu)上，這也是其可以快速崩解的原因。

圖3 氯雷他定口崩片在X 線三維顯微鏡下的結(jié)構(gòu)Fig 3 Structure of loratadine orally disintegrating tablets under X-ray three-dimensional microscope

圖4 氯雷他定口崩片在X 線三維顯微鏡下的切片圖Fig 4 Sectional view of loratadine orally disintegrating tablet under X-ray three-dimensional microscope

2020年版《中國藥典》規(guī)定冷凍干燥法制備的口崩片可不進(jìn)行崩解時限檢查，但是在研究中發(fā)現(xiàn)，也存在幾種凍干口崩片的崩解時限超出了藥典規(guī)定的60 s，經(jīng)過多次試驗(yàn)，推測崩解慢與其規(guī)格較大或者原料的黏性大有關(guān)。

從相關(guān)性分析可以看出，水分含量與比表面積成負(fù)相關(guān)、與引濕性成正相關(guān)，水分含量越低的凍干片比表面積越大，引濕性越弱，因此可以通過控制凍干口崩片的水分，從而來保證其質(zhì)量；崩解時限與孔隙率成負(fù)相關(guān)，孔隙率越高的凍干口崩片崩解速度越快，因此可以通過增大孔隙率的方法來加快其崩解的速度。

本研究通過對外觀、片重差異、崩解時限、水分、真密度、比表面積、孔隙率、引濕性試驗(yàn)的評測，可以初步判斷凍干口崩片的質(zhì)量優(yōu)劣。但是這些方法評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的制訂還需積累更多的數(shù)據(jù)。藥品審批過程中涉及到的一些方法也可用于質(zhì)量評價(jià)，如口感、口味，含量均勻度，有關(guān)物質(zhì)，溶出度，溶出曲線，穩(wěn)定性試驗(yàn)等。質(zhì)量評價(jià)研究可以幫助快速發(fā)現(xiàn)和解決在研發(fā)、生產(chǎn)過程中遇到的問題，從而保證產(chǎn)品的質(zhì)量。準(zhǔn)確客觀的凍干口崩片質(zhì)量評價(jià)方法，可以為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供依據(jù)，推動凍干口崩片劑型的發(fā)展，服務(wù)更多的患者，提高其用藥依從性。