路 崴 雷錫全 孫東方 鄭 衛(wèi)

(1.國家輕工業(yè)牙膏蠟制品質(zhì)量監(jiān)督檢測中心，黑龍江 哈爾濱 150010；2.中山市多美化工有限公司，廣東 中山 528478)

隨著生活水平的提高，人們越來越重視口腔健康問題，漱口水以其使用便捷、快速清新口氣的優(yōu)勢，越來越受快節(jié)奏都市人的喜愛[1]。漱口水主要分為治療型和保健型，具有清潔、殺菌、防齲護齒等功效[2]。乙醇作為漱口水中常用的助溶劑，能溶解脂溶性成分，但濃度過高易對口腔粘膜產(chǎn)生刺激、灼燒感[3]。同時，在蒸餾制備乙醇的過程中不可避免地會帶入甲醇[4]，其作為麻醉劑能對人體中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生抑制作用[5]。更重要的是甲醇在體內(nèi)的代謝產(chǎn)物甲酸和甲醛具有較大的毒性，過量飲用會導(dǎo)致失明[6]。由于甲醇在體內(nèi)的代謝快，即使少量飲用也會發(fā)生中毒情況[7]。因此，快速、高效檢測漱口水等口腔護理液中甲醇含量具有重要意義。

漱口水產(chǎn)品行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中對甲醇的限值[8]有明確的規(guī)定，并規(guī)定了只有當(dāng)乙醇或異丙醇的含量超過10%的情況下，需要對甲醇項目進行檢測。目前，主要參考《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》[9]中化妝品產(chǎn)品的甲醇檢測方法，并沒有專門針對漱口水等口腔護理液中甲醇含量的檢測方法，并且《規(guī)范》中采用乙醇作為提取溶劑，無法做到對甲醇和乙醇同時測定的目的。文獻報道的甲醇與乙醇檢測方法主要有分光光度法[10-11]、氣相色譜法[12-15]、液相色譜法[16]，氣質(zhì)聯(lián)用法[17]，其中氣相色譜法應(yīng)用較普遍。鑒于漱口水產(chǎn)品中鮮有異丙醇作為添加原料的案例，本研究采用氣相色譜同步測定漱口水中的甲醇與乙醇含量，討論標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系、回收率、精密度等項目，研究結(jié)果旨在為漱口水產(chǎn)品中甲醇與乙醇的檢測提供參考。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

6890N氣相色譜儀配有氫火焰離子化檢測器(FID)和7683B自動進樣器，美國安捷倫公司；GH-500型高純氫氣發(fā)生器，北京市中興匯利科技發(fā)展有限公司；DB-624(30m×0.32mm×1.8μm)毛細(xì)管色譜柱，美國安捷倫公司；DB-INNOWAX(30m×0.25mm×0.25μm)毛細(xì)管色譜柱，美國安捷倫公司；PEG-20M(30m×0.32mm×0.5μm)毛細(xì)管色譜柱，大連中匯達科學(xué)儀器有限公司；甲醇(色譜標(biāo))，以下簡寫MeOH, 含量≥99.9%，天津市津科精細(xì)化工研究所；乙醇(色譜標(biāo))，以下簡寫EtOH,含量≥99.9%，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所；高純氮氣含量≥99.999%；N,N-二甲基甲酰胺(色譜純)，以下簡寫DMF，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的制備

將少許DMF溶液加入一個100mL容量瓶中，分別稱取0.1g甲醇和乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液于容量瓶中，并用DMF溶液定容至刻度，混勻既得濃度為1000mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液。用DMF配制濃度為5、10、50、100、150mg/L標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

1.2.2 樣品的制備

稱取樣品2g，用DMF定容于10mL的容量瓶中，混勻后取清液裝入色譜進樣瓶中待測。

1.2.3 儀器分析條件

GC條件：進樣口溫度：200℃；分流進樣，分流比：10∶1；進樣量：1μL；色譜柱：DB-624(30m×0.32mm，膜厚1.8μm)；恒定流量模式；色譜柱流量：1.0mL/min；升溫程序：初始溫度40℃保持4min，以10℃/min速率升溫至70℃保持1min，以20℃/min速率升溫至220℃保持2min；

FID條件：檢測器溫度：250℃；氫氣流量：40mL/min；空氣流量：300mL/min；輔助氣流量：42mL/min。

2 結(jié)果與討論

2.1 提取溶劑與色譜柱選擇

目標(biāo)物質(zhì)甲醇與乙醇的介電常數(shù)分別是31.2和25.7[18]，根據(jù)相似相溶理論，本研究選擇介電常數(shù)36.71[18]的二甲基甲酰胺作為提取溶劑。由于目標(biāo)物質(zhì)與溶劑均具有一定的極性，適宜選用極性色譜柱進行分離?？疾炝?個型號的毛細(xì)管色譜柱(DB-INNOWAX，DB-624和PEG-20M)對標(biāo)樣和樣品中甲醇與乙醇的峰形與分離效果。結(jié)果顯示，在優(yōu)化的氣相色譜儀器條件下3種毛細(xì)管色譜柱分離效果略有差異。峰形方面，標(biāo)樣中的甲醇與乙醇峰形良好(見圖1)；保留時間方面，DB-624與PEG-20M毛細(xì)管柱的標(biāo)樣譜圖中，甲醇與乙醇的出峰時間間距較大。在大量實際樣品干擾測試中發(fā)現(xiàn)，PEG-20M柱在甲醇峰處存在干擾(見圖2)，使用DB-624柱則能夠達到基線分離(見圖3)，膜厚可增加甲醇和乙醇的保留，從而改善分離，因此本實驗的色譜柱選擇DB-624毛細(xì)管柱(30m×0.32mm，膜厚1.8μm)。

(a)DB-624毛細(xì)管柱

圖2 樣品色譜圖：甲醇處存在干擾

圖3 樣品色譜圖：甲醇處干擾被分開

以下色譜圖中，1為甲醇，2為乙醇，3為DMF溶劑，4為干擾峰。

2.2 儀器條件優(yōu)化

柱箱溫度是影響物質(zhì)分離的重要因素[19]，甲醇與乙醇均為低沸點溶劑(甲醇沸點64.7℃，乙醇沸點78℃)，而DMF的沸點152.8℃，作為溶劑不會對目標(biāo)峰有干擾。柱箱初始溫度選擇從40℃到80℃之間進行優(yōu)化。結(jié)果顯示，隨著柱箱初始溫度的升高，甲醇與乙醇的分離度逐漸變小，當(dāng)初始溫度為40℃時，獲得了較為理想的峰形、出峰時間和分離度，標(biāo)準(zhǔn)溶液中甲醇與乙醇的氣相色譜圖如圖4所示?；谑谒畼悠分械某煞謴?fù)雜，采用程序升溫的方式除去色譜柱上保留的其它成分。最終確定的升溫條件是初始溫度40℃保持4min，以10℃/min速率升溫至70℃保持1min，以20℃/min速率升溫至220℃保持2min。

圖4 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的氣相色譜圖

2.3 線性范圍、檢出限、定量限

按照1.2.1配制標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，在優(yōu)化的儀器條件下進行測定，如表1所示，甲醇與乙醇在各區(qū)間內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.999。滿足色譜測定的要求。選取陰性漱口水樣品，添加適量混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，按照1.3方法進行測定，以3倍信噪比(S/N=3)和10倍信噪比(S/N=10)計算甲醇與乙醇的儀器檢出限和定量限，結(jié)合前處理的稀釋倍數(shù)，得到甲醇與乙醇的方法檢出限均為5mg/kg，定量限均為25mg/kg。

表1 甲醇乙醇的線性方程、線性范圍、相關(guān)系數(shù)檢出限和定量限

2.4 方法的回收率、精密度

選用陰性漱口水樣品進行加標(biāo)回收實驗，添加量分別為25mg/kg、250mg/kg、750mg/kg，每個濃度分別處理6個樣品，結(jié)果見表2。在色譜條件下，測定處理后的樣品，記錄峰面積。通過分析計算，甲醇的方法加標(biāo)回收率在92.4%～99.6%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.4%～3.3%之間；乙醇的方法加標(biāo)回收率在95.4%～103.8%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.7%～3.1%之間。

表2 加標(biāo)回收率實驗結(jié)果(n=6)

另取某一個濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，連續(xù)重復(fù)進樣6次，記錄峰面積。甲醇與乙醇的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為RSD(n=6)為2.5%、2.1%，表明本方法的精密度良好。

圖5 標(biāo)準(zhǔn)樣品與空白樣品加標(biāo)的堆疊圖

2.5 穩(wěn)定性

取某一濃度的甲醇及乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于4℃保存，分別于第1天、第3天、第7天進樣，每天進兩次，記錄各組分峰面積，并計算其RSD值，見表3。任取精密度實驗樣品1個，置于4℃保存3天，分別每天進行色譜分析，記錄峰面積，并計算其RSD值，見表4。結(jié)果顯示，甲醇與乙醇的標(biāo)準(zhǔn)溶液在一周內(nèi)保持穩(wěn)定，樣品在3天內(nèi)保持穩(wěn)定，適合于大批量的樣品測試任務(wù)。

表3 標(biāo)準(zhǔn)溶液穩(wěn)定性試驗

表4 樣品穩(wěn)定性試驗

2.6 實際樣品的檢測

筆者采用上述方法對52款市售漱口水與實驗室小試樣品進行測試，其中在成分表中注明乙醇原料的18款漱口水樣品中6款漱口水中檢出甲醇；在包裝上面沒有明確標(biāo)識乙醇原料的34款漱口水樣品中，其中21款檢出乙醇，7款檢出甲醇。以上共13款檢出甲醇的樣品，甲醇的檢出量均符合漱口水行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求[8]。

圖6 陽性樣品色譜圖

3 結(jié)論

本研究采用氣相色譜配氫火焰離子化檢測器的方法，以N,N-二甲基甲酰胺溶液為提取溶劑，同時測定漱口水中甲醇與乙醇的含量，并比較了不同的色譜柱的出峰情況以及標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性結(jié)果并優(yōu)化了色譜儀器條件。結(jié)果顯示，選用DMF對漱口水中的甲醇和乙醇有較好的提取，且其保留時間不干擾二者的同時分離與測定；選用膜厚1.8mm的極性毛細(xì)管氣相色譜柱有助于甲醇和乙醇的同時分離，在流量1.0mL/min，分流比為10∶1，F(xiàn)ID檢測器溫度250℃條件下，甲醇和乙醇的保留時間分別為5.0min和6.3min，回收率、精密度、重復(fù)性和穩(wěn)定性均表現(xiàn)良好。本方法前處理操作簡便，分析時間短，靈敏度高，無干擾，適用于漱口水中甲醇和乙醇含量的快速測定。