梁天，張曉東，張玉，張佐忠，斯日古楞，蘇布登格日勒，娜仁花

（內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，呼和浩特 010018）

堆肥是由細(xì)菌、真菌和其他微生物共同作用分解有機(jī)物質(zhì)的過(guò)程。為了加速生物性降解，通常接種幾種功能菌株進(jìn)入堆肥中，以加快腐殖質(zhì)的形成和縮短堆肥周期[1]。在堆肥初期，畜禽糞便中土著微生物含量少，且厭氧菌在系統(tǒng)中占據(jù)優(yōu)勢(shì)，導(dǎo)致堆體升溫緩慢，并容易產(chǎn)生惡臭，而添加外源微生物菌劑后可明顯改善這一現(xiàn)象。Zhao等[2]研究認(rèn)為，接種有助于提高初始微生物種群和加快堆肥成熟進(jìn)程。Sarkar等[3]報(bào)道，接種可以延長(zhǎng)堆肥高溫期，提高細(xì)菌和真菌群落的多樣性，進(jìn)一步增加腐殖酸和類黃腐酸化合物的分子量和腐殖化程度。此外，外源微生物接種不僅可以增加堆肥過(guò)程中的微生物活性進(jìn)而促進(jìn)堆肥的成熟，而且還可以提高有效微生物濃度，從而迅速提高堆肥速率、溫度，并提高底物特異性微生物的豐度[4]。

在堆肥過(guò)程中，有機(jī)物降解和腐殖質(zhì)的形成都離不開(kāi)微生物酶的生物化學(xué)作用，通過(guò)有目的的腐解作用，將有機(jī)物轉(zhuǎn)化為養(yǎng)分和活性物質(zhì)。任平等[5]研究發(fā)現(xiàn)，添加復(fù)合酶處理可促進(jìn)牛糞堆肥前期纖維素類物質(zhì)的分解轉(zhuǎn)化，從一開(kāi)始就對(duì)整個(gè)發(fā)酵起到積極作用。酶對(duì)堆肥內(nèi)纖維素物質(zhì)的快速降解有利于好氧微生物的快速增殖，從而迅速分解物料中的有機(jī)質(zhì)，產(chǎn)生大量的生物熱，加速物料的升溫，延長(zhǎng)發(fā)酵的高溫期，進(jìn)而縮短發(fā)酵周期。

本研究通過(guò)不同C/N條件下，在牛糞中添加不同菌種和酶劑組合，探究在牛糞堆肥進(jìn)程中細(xì)菌的多樣性演替變化規(guī)律，以期為堆肥高效發(fā)酵提供技術(shù)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

牛糞和小麥秸稈均取自內(nèi)蒙古某奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)。將小麥秸切碎至1～2cm長(zhǎng)度。菌劑包括枯草芽孢桿菌（有效活菌數(shù)200億/g）、黑曲霉菌（有效活菌數(shù)50億/g）、細(xì)黃鏈霉菌（有效活菌數(shù)50億/g），3種菌配制成比例為1:1:1的復(fù)合菌劑。將纖維素酶（有效酶活為20萬(wàn)U/g）和蛋白酶（有效酶活為50萬(wàn)U/g）配制成比例為3:1的復(fù)合酶制劑。三種菌和兩種酶均購(gòu)自湖北某生物工程有限公司。牛糞及小麥秸稈的基本性質(zhì)見(jiàn)表1。

表1 堆肥原料的基本性質(zhì)

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

堆肥試驗(yàn)于2020年9月28日-11月1日在內(nèi)蒙古某奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)彩鋼瓦棚中進(jìn)行。將牛糞和小麥秸稈按一定比例混合，分別設(shè)25/1、30/1、35/1三個(gè)C/N組，每個(gè)C/N組設(shè)三個(gè)處理組，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。按質(zhì)量比添加菌劑和酶制劑，具體分組見(jiàn)表2。

表2 堆肥處理組物料配比情況

各處理組的含水量調(diào)節(jié)在45%～60%之間。將物料進(jìn)行條垛式堆肥，每個(gè)堆體長(zhǎng)1.2m，堆底寬1m，高0.8m，每堆的堆體間隔為1～2m。所有處理組每隔5d人工翻堆一次。

1.3 取樣方法

在堆肥開(kāi)始的第1、5、10、15、20、26、34天進(jìn)行取樣。采樣深度分別距堆體頂部20cm、40cm、60cm處，各層均采用五點(diǎn)采樣方法取樣，取樣后混合均勻。每個(gè)堆體取500g樣品，放入自封袋中，置于-80℃冰箱中保存。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 發(fā)酵堆體中細(xì)菌多樣性分析

通過(guò)高通量測(cè)序技術(shù)測(cè)定各處理組在堆體發(fā)酵過(guò)程中細(xì)菌多樣性變化特征。

1.4.2 堆體微生物DNA的提取

根據(jù)FastDNA?Spin Kit for Soil（MP Biomedicals,GA, U.S.）說(shuō)明書(shū)進(jìn)行微生物群落總DNA抽提，使用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA的提取質(zhì)量，使用NanoDrop2000測(cè)定DNA濃度和純度。

1.4.3 堆體微生物目標(biāo)基因擴(kuò)增

細(xì)菌16S rRNA基因使用338F/806R進(jìn)行擴(kuò)增，引物序列如表3所示。

表3 PCR擴(kuò)增引物堿基序列

1.4.4 細(xì)菌16S rRNA-PCR 擴(kuò)增

細(xì)菌擴(kuò)增反應(yīng)體系見(jiàn)表4。

表4 細(xì)菌PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系

擴(kuò)增反應(yīng)參數(shù)：95℃預(yù)變性3min，之后95℃變性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，此步驟循環(huán)27次，然后72℃穩(wěn)定延伸10min，最后保存于10℃。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物大小為468bp。用2%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。

1.5 微生物數(shù)據(jù)處理

利用FASTP軟件對(duì)原始測(cè)序序列進(jìn)行質(zhì)控，用FLASH軟件進(jìn)行拼接。利用UPARSE軟件對(duì)序列進(jìn)行OTU聚類（相似度為97%）并剔除嵌合體。用RDP classifier對(duì)序列進(jìn)行物種分類注釋。使用美吉云平臺(tái)進(jìn)行圖形制作與部分?jǐn)?shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 堆肥樣品細(xì)菌OTU聚類分析和Alpha多樣性分析

Venn圖用來(lái)統(tǒng)計(jì)多組樣本之間共有和獨(dú)有的OTU個(gè)數(shù)，從而比較直觀地表達(dá)不同組OTU組成的相似和重疊情況。如圖1所示，處理組C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9組細(xì)菌分別有1795、1948、1931、1849、1969、1921、2220、1954、1927個(gè)OTU，每組共有的OTU為1207個(gè)，每組特有的OTU為C1組34個(gè)、C2組19個(gè)、C3組18個(gè)、C4組38個(gè)、C5組36個(gè)、C6組32個(gè)、C7組89個(gè)、C8組18個(gè)、C9組47個(gè)。

圖1 細(xì)菌Venn圖

堆肥樣品中的細(xì)菌多樣性分析（Alpha Diversity）見(jiàn)表5。其中Shannon（香儂指數(shù)）、Simpson（辛普森指數(shù)）可以反映微生物的多樣性，Shannon值越高說(shuō)明群落多樣性越高，Simpson值越高說(shuō)明群落多樣性越低；Chao指數(shù)常用于估計(jì)物種的總數(shù)，從而反映物種平均豐度。與堆肥初期相比，堆肥末期各處理組Shannon指數(shù)、Chao指數(shù)均有增加，Simpson指數(shù)均有下降。堆肥各樣品文庫(kù)的覆蓋率（Coverage）均超過(guò)98.60%。

表5 堆肥樣品中細(xì)菌多樣性

2.2 牛糞堆肥進(jìn)程中門水平細(xì)菌菌群豐度分析

本研究中細(xì)菌門水平相對(duì)豐度大于1%的有9個(gè)，分別為放線菌門（Actinobacteria）、變形菌門（Proteobacteria）、厚壁菌門（Firmicutes）、擬桿菌門（Bacteroidota）、棲熱球菌門（Deinococcota）、綠彎菌門（Chloroflexi）、髕骨細(xì)菌門（patescibacteria）、黏球菌門（myxococcota）和Halanaerobiaeota菌門。隨著堆肥進(jìn)程的推進(jìn)，不同門水平的細(xì)菌群落的相對(duì)豐度變化趨勢(shì)見(jiàn)圖2～4。

如圖2所示，在堆肥初期（1d），C/N為25/1的C1、C2、C3組的第一優(yōu)勢(shì)菌群為放線菌門，相對(duì)豐度分別為46.43%、52.52%、46.48%。高溫期（5d），C1、C2、C3組第一優(yōu)勢(shì)菌群演替為厚壁菌門，豐度分別為46.29%、54.94%、45.72%。堆肥結(jié)束時(shí)（34d），C1、C2組第一優(yōu)勢(shì)菌群演替為變形菌門，豐度為34.06%、33.30%，C3組第一優(yōu)勢(shì)菌群演替為放線菌門，為26.06%。

圖2 C/N為25/1組細(xì)菌門水平的相對(duì)豐度

圖3 C/N為30/1組細(xì)菌門水平的相對(duì)豐度

圖4 C/N為35/1組細(xì)菌門水平的相對(duì)豐度

由圖3所示，在堆肥初期（1d），C/N為30/1的C4、C5、C6組放線菌門相對(duì)豐度分別為52.27%、53.35%、50.86%，為優(yōu)勢(shì)菌群。高溫期（5d），厚壁菌門成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，豐度分別為51.58%、47.00%、60.57%。堆肥結(jié)束時(shí)（34d），C4組放線菌門再次成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，豐度為53.35%，C5、C6組變形菌門成為第一優(yōu)勢(shì)菌，豐度分別為29.95%、31.00%。

由圖4所示，在堆肥初始期（1d），C/N為35/1的C7、C8、C9組放線菌門細(xì)菌相對(duì)豐度分別為47.26%、50.05%、40.50%，為該時(shí)期的優(yōu)勢(shì)菌群。高溫期（5d），3個(gè)處理組放線菌門細(xì)菌相對(duì)豐度均下降，厚壁菌門成為高溫期第一優(yōu)勢(shì)菌群，豐度分別為39.90%、35.54%、60.36%。堆肥結(jié)束時(shí)（34d），C7組變形菌門成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，豐度為29.49%；C8、C9組放線菌門再次成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，豐度分別為37.12%、29.39%。

2.3 牛糞堆肥進(jìn)程中綱水平細(xì)菌菌群豐度分析

本研究中細(xì)菌水平綱相對(duì)豐度大于1%的有14個(gè)，分別為放線菌綱（Actinobacteria）、γ-變形菌綱（Gammaproteobacteria）、芽孢桿菌綱（Bacilli）、擬桿菌綱（Bacteroidia）、α-變性菌綱（Alphaproteobacteria）、梭菌綱（Clostridia）、恐球菌綱（Deinococci）、綠彎菌綱（Chloroflexia）、Halanaerobiia菌綱、Rhodothermia菌綱、Limnochordia菌綱、酸微菌綱（Acidimicrobiia）、Saccharimonadia菌綱、Polyangia菌綱。綱水平細(xì)菌群落相對(duì)豐度的變化見(jiàn)圖5～7。

圖5 C/N為25/1組細(xì)菌綱水平的相對(duì)豐度

圖6 C/N為30/1組細(xì)菌綱水平的相對(duì)豐度

圖7 C/N為35/1組細(xì)菌綱水平的相對(duì)豐度

如圖5所示，在堆肥初始期（1d），C/N為25/1的C1、C2、C3組放線菌綱的相對(duì)豐度分別為45.81%、52.29%、46.21%，為第一優(yōu)勢(shì)菌群。高溫期（5d），C1組優(yōu)勢(shì)菌群仍為放線菌綱，豐度為43.71%；C2、C3組芽孢桿菌綱成為第一大優(yōu)勢(shì)菌群，豐度分別為43.20%、38.57%。堆肥結(jié)束時(shí)（34d），C1、C2組γ一變形菌綱成為第一大優(yōu)勢(shì)菌群，豐度分別為28.10%、26.34%，C3組的優(yōu)勢(shì)菌群不變，仍為放線菌綱，豐度為24.27%。

如圖6所示，在堆肥初始期（1d），C/N為30/1的C4、C5、C6組放線菌綱的相對(duì)豐度分別為52.14%、53.11%、50.72%，為該時(shí)期的第一優(yōu)勢(shì)菌群。高溫期（5d），芽孢桿菌綱成為第一大優(yōu)勢(shì)菌群，C4、C5、C6組豐度分別為48.04%、43.06%、49.82%。堆肥結(jié)束時(shí)（34d），放線菌綱再次成為第一大優(yōu)勢(shì)菌群，C4、C5、C6組豐度分別為24.88%、25.64%、25.18%。

如圖7所示，在堆肥初始期（1d），C/N為35/1的C7、C8、C9組放線菌綱相對(duì)豐度為47.12%、49.82%、40.35%，為該時(shí)期第一優(yōu)勢(shì)菌群。高溫期（5d），C7、C8組放線菌綱仍為第一優(yōu)勢(shì)菌群，豐度分別為33.88%、30.19%；C9組芽孢桿菌綱成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，豐度為51.17%。堆肥結(jié)束時(shí)（34d），放線菌綱再次成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，豐度分別為27.45%、35.44%、27.94%。

2.4 牛糞堆肥進(jìn)程中屬水平細(xì)菌菌群豐度分析

本研究共得到19個(gè)細(xì)菌屬，所有樣品中屬水平相對(duì)豐度均大于0.05%。包括棒桿菌屬（Corynebacterium）、高溫雙岐菌屬（Thermobifida）、芽孢桿菌屬（Bacillus）、嗜鹽單胞菌屬（Halomonas）、嗜冷桿菌屬（Psychrobacter）、特呂珀菌屬（Truepera）、Marinimicrobium屬、喬治菌屬（Georgenia）、肉桿菌屬（Atopostipes）、嗜冷咸海鮮球菌屬（Jeotgalicoccus）、未命名菌屬（norank_f__Cellvibrionaceae屬）、嗜熱新芽孢桿菌屬（Novibacillus）、未命名菌屬（norank_f__JG30-KF-CM45屬）、嗜鹽菌屬（Halocella）、熱微菌屬（Tepidimicrobium）、大洋芽孢桿菌屬（Oceanobacillus）、薄壁芽孢桿菌屬（Garcilibacillus）、費(fèi)克藍(lán)姆菌屬（Facklamia）。沒(méi)有科學(xué)名稱細(xì)菌，以noran作為標(biāo)記。屬水平細(xì)菌群落的相對(duì)豐度變化見(jiàn)圖8～10。

圖8 C/N為25/1組細(xì)菌屬水平的相對(duì)豐度

圖9 C/N為30/1組細(xì)菌屬水平的相對(duì)豐度

圖10 C/N為35/1組細(xì)菌屬水平的相對(duì)豐度

如圖8所示，在堆肥初始期（1d），C/N為25/1的C1、C2、C3組棒桿菌屬相對(duì)豐度分別為31.19%、42.15%、37.81%，為該時(shí)期第一優(yōu)勢(shì)菌群。高溫期（5d），棒桿菌屬豐度下降最大，C1、C3組芽孢桿菌屬成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，分別為31.07%、21.59%；C2組高溫雙岐菌屬成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，為19.93%。堆肥結(jié)束時(shí)（34d），C1、C2組嗜鹽單胞菌屬成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，分別為8.80%、6.18%；C3組特呂珀菌屬成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，為6.60%。C1、C2、C3組在堆肥初始期嗜冷桿菌屬相對(duì)豐度分別為5.08%、12.65%、10.54%，其他時(shí)期幾乎檢測(cè)不到。

如圖9所示，在堆肥初始期（1d），C/N為30/1的C4、C5、C6組棒桿菌屬相對(duì)豐度分別為45.33%、42.70%、42.28%，為該時(shí)期第一優(yōu)勢(shì)菌群，隨著堆肥的進(jìn)行棒桿菌屬呈下降趨勢(shì)。高溫期（5d），C4組高溫雙岐菌屬成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，為13.23%；C5、C6組芽孢桿菌屬成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，分別為13.15%、13.77%。堆肥結(jié)束時(shí)（34d），C4、C6組喬治菌屬成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，為6.93%、5.54%；C5組芽孢桿菌屬成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，為6.77%。

如圖10所示，在堆肥初始期（1d），C/N為35/1的C7、C8、C9組棒桿菌屬相對(duì)豐度最大，分別為41.03%、41.17%、35.47%，為該時(shí)期第一優(yōu)勢(shì)菌群，隨著堆肥的進(jìn)行棒桿菌屬呈下降趨勢(shì)。高溫期（5d），C7、C8組棒桿菌屬仍為第一優(yōu)勢(shì)菌群，分別為12.70%、17.62%；C9組芽孢桿菌屬成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，為17.93%。堆肥結(jié)束時(shí)（34d），C7組高溫雙岐菌屬成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，為7.03%；C8、C9組喬治菌屬成為第一優(yōu)勢(shì)菌群，分別為8.34%、7.40%。

3 討論

微生物是堆肥物料的分解者，不同的優(yōu)勢(shì)細(xì)菌類群在堆肥進(jìn)程中呈現(xiàn)菌群演替。本研究中，各處理組在堆肥結(jié)束時(shí)細(xì)菌群落的香儂多樣性指數(shù)均呈增加的變化趨勢(shì)，此結(jié)果與Ren等[6]的研究結(jié)果一致。主要是因?yàn)樵诙逊实纳郎仄诋a(chǎn)生了充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，有利于細(xì)菌的生長(zhǎng)和代謝[7]，致使該時(shí)期香儂指數(shù)的增加。當(dāng)進(jìn)入高溫期后香儂指數(shù)下降，此時(shí)耐熱細(xì)菌開(kāi)始占據(jù)優(yōu)勢(shì)[8]，其他物種由于溫度過(guò)高死亡。

細(xì)菌豐度結(jié)果顯示，門水平的細(xì)菌群落多樣性隨堆肥進(jìn)程有一定的改變。無(wú)處理組（C1組、C4組、C7組）在堆肥初期放線菌門為優(yōu)勢(shì)菌群，高溫期演替為厚壁菌門。堆肥結(jié)束時(shí)，除C4組外，其他2組的優(yōu)勢(shì)細(xì)菌門均演替為變形菌門。添加菌酶制劑后（C2組、C3組、C5組、C6組、C8組、C9組），優(yōu)勢(shì)菌群在堆肥初期和高溫期與無(wú)處理組相同，堆肥結(jié)束時(shí)，除C2組外，其他組優(yōu)勢(shì)菌群均又演替為放線菌門。放線菌門和厚壁菌門是堆肥初始期相對(duì)豐度最大的細(xì)菌門。在堆肥過(guò)程中，難被降解的纖維素和木質(zhì)素含量較高，放線菌門能夠有效降解纖維素、半纖維素和木質(zhì)素，因此占據(jù)主導(dǎo)地位，這與Insam等[9]的研究結(jié)果相似。Steger等也提到，放線菌門可分解堆肥中有機(jī)物，并能釋放與腐殖質(zhì)產(chǎn)生有關(guān)的無(wú)機(jī)物[10]。因此放線菌門對(duì)于堆肥的腐熟起著重要的作用。本研究顯示，無(wú)論C/N如何，添加菌酶制劑堆肥結(jié)束腐熟時(shí)均有助于增加放線菌門的豐度。厚壁菌門能夠產(chǎn)生內(nèi)生孢子[11]，所以它具有較高的耐受性[12]，能夠生存在不適宜的環(huán)境中[13]，本研究中，各試驗(yàn)組在高溫期優(yōu)勢(shì)菌群均為厚壁菌門。另外，擬桿菌門和變形菌門也占一定主導(dǎo)地位。有研究表明擬桿菌門中很多種細(xì)菌都具有降解大分子有機(jī)物的能力，包括纖維素、淀粉和幾丁質(zhì)等[14]，本試驗(yàn)中，牛糞及小麥秸稈均含有較多的纖維素，為擬桿菌門細(xì)菌生長(zhǎng)代謝提供了充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。變形菌門是細(xì)菌中最大的類群，具有固氮和降解木質(zhì)素等多種功能，在堆肥各時(shí)期均有大量的分布。本研究表明，這四種細(xì)菌門占總鑒定序列的90%以上，這與Tortosa等[15]研究結(jié)果一致，表明這四種細(xì)菌門對(duì)堆肥過(guò)程中的有機(jī)物分解起主要作用[11,16]。

本研究的優(yōu)勢(shì)綱共有14個(gè)，放線菌綱是所有處理組在堆肥初始期相對(duì)豐度最大的優(yōu)勢(shì)菌綱。芽孢桿菌綱對(duì)高溫的耐受性較高，能夠在45～70℃溫度范圍內(nèi)生長(zhǎng)繁殖[17]，會(huì)在高溫期明顯增加。本試驗(yàn)在高溫期除了C8組的優(yōu)勢(shì)菌為放線菌綱外，其他處理組優(yōu)勢(shì)菌群均為芽孢菌綱。而放線菌綱在堆肥的整個(gè)階段起著重要作用，尤其在對(duì)于難降解化合物的降解和和腐殖質(zhì)的形成過(guò)程中[18]。除在堆肥末期C1組、C2組的γ一變形菌綱成為第一大優(yōu)勢(shì)菌群外，其他處理組優(yōu)勢(shì)菌群再次演替為放線菌綱，尤其是C/N為25組變化較為一致。

在本研究中，優(yōu)勢(shì)菌屬共有19個(gè)，這些細(xì)菌屬在自然環(huán)境以及人為環(huán)境中分布廣泛，包括土壤和許多堆肥體系[19,20]。在堆肥初始期，糖類、淀粉和蛋白質(zhì)等易降解成分得到迅速分解；半纖維素、纖維素及木質(zhì)素等難降解物質(zhì)開(kāi)始緩慢分解。該時(shí)期主要是嗜溫微生物占優(yōu)勢(shì)，而棒狀桿菌屬屬于堆肥嗜溫期優(yōu)勢(shì)微生物。本試驗(yàn)同樣顯示了各組的棒桿菌屬相對(duì)豐度最大，為該時(shí)期第一優(yōu)勢(shì)菌群。高溫期嗜熱微生物迅速繁殖成為優(yōu)勢(shì)菌落，進(jìn)而對(duì)結(jié)構(gòu)復(fù)雜的半纖維素、纖維素及木質(zhì)素等進(jìn)行分解。而在嗜熱期優(yōu)勢(shì)菌群大多分布于高溫雙岐菌屬、嗜熱霉菌屬、曲霉屬、泛菌屬、芽孢桿菌屬、糖單胞菌屬等[21]。芽孢桿菌屬能夠產(chǎn)生孢子來(lái)抵御高溫環(huán)境，由于高溫期堆體中噬中溫細(xì)菌因不耐高溫而大量死亡，所以使其相對(duì)豐度增加。本研究結(jié)果顯示，在高溫期除了C7、C8組的第一優(yōu)勢(shì)菌群仍為棒桿菌屬外，其他處理組優(yōu)勢(shì)菌群演替為芽孢桿菌屬和高溫雙岐菌屬。堆肥結(jié)束時(shí)優(yōu)勢(shì)細(xì)菌多樣性增加，轉(zhuǎn)變成嗜鹽單胞菌屬、特呂珀菌屬、喬治菌屬、芽孢桿菌屬、高溫雙岐菌屬。

4 結(jié)論

本研究中各試驗(yàn)組細(xì)菌多樣性隨不同的堆肥進(jìn)程呈現(xiàn)高-低-高的趨勢(shì)。堆肥初期，各組優(yōu)勢(shì)細(xì)菌門均為放線菌門，添加菌酶制劑處理組的放線菌門豐度大于無(wú)添加處理組。高溫期時(shí)，各組優(yōu)勢(shì)菌門均為厚壁菌門，但各組之間厚壁菌門豐度變化不一致。堆肥結(jié)束時(shí)，除C2組外，其他組優(yōu)勢(shì)菌群均又演替為放線菌門。在堆肥初始期、高溫期及結(jié)束期各組菌群基本是放線菌綱-芽孢菌綱-放線菌綱的演替規(guī)律。堆肥初期，各組優(yōu)勢(shì)菌屬均為棒桿菌屬，但組間棒桿菌屬豐度變化不一致。在高溫期除了C7、C8組的第一優(yōu)勢(shì)菌群仍為棒桿菌屬外，其他處理組優(yōu)勢(shì)菌群演替為芽孢桿菌屬和高溫雙岐菌屬。堆肥結(jié)束時(shí)優(yōu)勢(shì)細(xì)菌多樣性增加，轉(zhuǎn)變成嗜鹽單胞菌屬、特呂珀菌屬、喬治菌屬、芽孢桿菌屬、高溫雙岐菌屬。