祁君，王麗

（1.新疆莎車縣畜牧獸醫(yī)站，莎車 844700；2.新疆莎車縣塔尕爾其鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，莎車 844700）

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的偶蹄動物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，其病毒有O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3和Asia1七個血清型，不同血清型之間無交叉免疫保護性[1]。OIE數(shù)據(jù)顯示，全球近年來O型口蹄疫疫情發(fā)生呈持續(xù)走高態(tài)勢，至2018年O型口蹄疫疫情已占絕大部分[2]。我國口蹄疫流行也以O(shè)型血清型為主，且口蹄疫病毒污染面較廣，O型病毒持續(xù)存在，清除難度極大[3,4]。除部分發(fā)達國家保持口蹄疫無疫狀態(tài)外，眾多發(fā)展中國家口蹄疫仍呈流行或散發(fā)情況。根據(jù)OIE/FAD/FMD實驗室報告，全球分為7個流行區(qū)域（Pool1～7），中國大部分中東南區(qū)域?qū)儆赑ool1，西部區(qū)域?qū)儆赑ool2和Pool3[5]。口蹄疫素有“政治經(jīng)濟病”之稱，影響國家對外貿(mào)易、經(jīng)濟發(fā)展和國際聲譽，發(fā)病可造成巨額經(jīng)濟損失和社會政治負面影響[6]。重點對O型口蹄疫免疫抗體進行監(jiān)測，從而進一步科學(xué)制定防控措施就顯得格外重要。本研究以免疫O型口蹄疫后21d的牛血清樣品為研究對象，采用LPBELISA對不同養(yǎng)殖模式下牛免疫質(zhì)量進行監(jiān)測，科學(xué)評估全縣O型口蹄疫免疫效果，為后期進一步做好防控工作提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

2021年上半年，采用整體隨機抽樣法對莎車縣31個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的規(guī)模場采集中國西門塔爾牛血樣465份、散養(yǎng)戶采集中國西門塔爾及本地黃牛血樣1 245份，合計1 710份。分離血清，-20℃保存待檢。

1.2 試劑及儀器

口蹄疫O型LPB-ELISA抗體檢測試劑盒由蘭州獸研生物科技有限公司生產(chǎn)（生產(chǎn)批號：20210408101-3）。

ST-360酶標(biāo)儀、ST-36W洗板機（上?？迫A實驗系統(tǒng)有限公司），MPL-SPJ-150型智能生化培養(yǎng)箱（金壇市大地自動化儀器廠），TD5Z臺式低速離心機（湖南多恒儀器設(shè)備有限公司），STU4100UVFR實驗室反滲透超純水系統(tǒng)（上海穗天環(huán)保科技有限公司），微量移液器等。

1.3 檢測方法

按照口蹄疫診斷技術(shù)（GB/T18935-2018）及口蹄疫O型LPB-ELISA抗體檢測試劑盒說明書，對2021年3月1～31日免疫O型口蹄疫后21d的牛血清樣品進行檢測，樣品抗體效價≥1:128為免疫抗體合格，免疫抗體合格率=免疫抗體合格樣品數(shù)/總樣品數(shù)×100%，免疫抗體達標(biāo)率=免疫抗體合格率≥70%的單位數(shù)/總單位數(shù)×100%。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同養(yǎng)殖方式的牛O型口蹄疫免疫抗體檢測結(jié)果

從表1可以看出，2021年上半年規(guī)模養(yǎng)殖和散養(yǎng)方式的牛O型口蹄疫免疫抗體合格率均達到了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部所要求的70%的標(biāo)準(zhǔn)，兩者處同一水平，無明顯差異?？傮w免疫抗體合格率為81.70%，這表明莎車縣存欄牛在一定范圍內(nèi)建立起了有效的免疫屏障，在免疫期內(nèi)牛對O型口蹄疫疫病具有較強的免疫持久性和保護力，降低了發(fā)生O型口蹄疫疫情的風(fēng)險。

表1 不同養(yǎng)殖方式的牛O型口蹄疫免疫抗體檢測結(jié)果

2.2 各鄉(xiāng)鎮(zhèn)牛O型口蹄疫免疫抗體檢測結(jié)果

從圖1可以看出，被檢的31個鄉(xiāng)鎮(zhèn)中，不論是散養(yǎng)還是規(guī)模養(yǎng)殖方式下，絕大多數(shù)鄉(xiāng)鎮(zhèn)牛O型口蹄疫免疫抗體質(zhì)量良好，但仍有極少數(shù)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的免疫質(zhì)量較差，折線圖顯示鄉(xiāng)鎮(zhèn)間免疫抗體合格率波動幅度較大、離散程度較高，存在免疫水平不均衡的情況。

圖1 各鄉(xiāng)鎮(zhèn)牛O型口蹄疫免疫抗體檢測結(jié)果

2.3 被檢鄉(xiāng)鎮(zhèn)的牛O型口蹄疫免疫抗體達標(biāo)情況

從表2可以看出，被檢的31個鄉(xiāng)鎮(zhèn)，規(guī)模養(yǎng)殖方式的牛O型口蹄疫免疫抗體鄉(xiāng)鎮(zhèn)達標(biāo)率為87.10%，散養(yǎng)方式的鄉(xiāng)鎮(zhèn)達標(biāo)率為77.42%，總體達標(biāo)情況較好。兩者相較而言，散養(yǎng)方式的鄉(xiāng)鎮(zhèn)達標(biāo)率較規(guī)模的低近10個百分點，表明少數(shù)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的牛O型口蹄疫免疫工作還存在不足，在鄉(xiāng)鎮(zhèn)群間免疫上，散養(yǎng)方式的較規(guī)模養(yǎng)殖的還有差距。

表2 不同養(yǎng)殖方式下牛O型口蹄疫免疫抗體合格率達標(biāo)情況

3 討論

3.1 關(guān)于不同養(yǎng)殖方式下牛O型口蹄疫的免疫質(zhì)量

2021年上半年，莎車縣規(guī)模養(yǎng)殖和散養(yǎng)方式的牛O型口蹄疫免疫抗體合格率分別為80.43%、82.17%，均超過農(nóng)業(yè)農(nóng)村部所要求的70%標(biāo)準(zhǔn)，兩者處同一水平。這至少說明在養(yǎng)殖這個大環(huán)節(jié)，莎車縣整體上牛O型口蹄疫免疫質(zhì)量整體良好，規(guī)模養(yǎng)殖和散養(yǎng)的免疫質(zhì)量相差不大，免疫工作值得肯定。歷史監(jiān)測數(shù)據(jù)亦表明，莎車縣牛O型口蹄疫免疫抗體合格率多年來保持在較高水平，免疫質(zhì)量呈現(xiàn)出穩(wěn)定性高的特點。這說明在牛口蹄疫免疫工作方面，莎車縣多年來的工作扎實有效，積累了較好的免疫基礎(chǔ)。但從局部看，少數(shù)鄉(xiāng)鎮(zhèn)在免疫工作上還存在不足，雖散養(yǎng)的免疫抗體合格率略高于規(guī)模場，但散養(yǎng)方式的鄉(xiāng)鎮(zhèn)達標(biāo)率卻較大幅度低于規(guī)模場的，這提示在鄉(xiāng)鎮(zhèn)層面上，散養(yǎng)的群間免疫質(zhì)量不均衡，免疫質(zhì)量離散度較大。對于免疫抗體合格率不達標(biāo)的鄉(xiāng)鎮(zhèn)，后續(xù)還需加強免疫。

3.2 關(guān)于在技術(shù)層面上造成免疫失敗的因素

把免疫質(zhì)量放在一個大的尺度上看，總會有一些個體或群體出現(xiàn)免疫效價低、免疫質(zhì)量差的情況。在實際工作中，有防疫人員也會提出疑問，在同等條件下確實給動物打了疫苗，但免疫抗體水平有高有低。造成免疫失敗的因素很多，而在同等條件下造成免疫失敗的原因除免疫對象個體差異外，主要是由于免疫技術(shù)操作不當(dāng)造成的。主要表現(xiàn)為：疫苗使用中保溫箱內(nèi)不加冰袋或長時間將疫苗暴露在陽光下，口蹄疫滅活疫苗的抗原穩(wěn)定性得不到很好保障，易造成疫苗中FMDV裂解，免疫后將達不到預(yù)期效果；其次是打飛針、注射部位淺、走針等導(dǎo)致進入機體的有效疫苗劑量減少；再就是免疫時機選擇不當(dāng)，在使用有免疫抑制的抗生素等藥物后不久就進行免疫[7,8]。對在技術(shù)層面上造成免疫失敗能明確原因的，應(yīng)及時、有針對性地對防疫員進行免疫技術(shù)培訓(xùn)，規(guī)范免疫行為，促進免疫提質(zhì)。一般情況下，一年春秋兩次的口蹄疫集中免疫均可達到較好的免疫效果，一年三次免疫可使免疫抗體平均效價提高且維持時間長，達到更好的免疫效果[9,10]。對于長期、多頻次口蹄疫免疫質(zhì)量不理想的養(yǎng)殖單位，在有條件的情況下，可嘗試實行一年三次的免疫方略。

3.3 關(guān)于開展免疫抗體監(jiān)測的重要性

注射疫苗后機體能否有效抵御病原侵襲，阻斷疫情傳播，重點體現(xiàn)在免疫質(zhì)量上。在口蹄疫疫苗免疫后不同時間牲畜體內(nèi)的免疫抗體水平都會發(fā)生變化，只有及時、準(zhǔn)確、持續(xù)監(jiān)測免疫抗體消漲情況，全面掌握各區(qū)域牲畜免疫水平高低，科學(xué)評估免疫效果，才能為后續(xù)免疫工作提供數(shù)據(jù)支撐，才能科學(xué)指導(dǎo)相關(guān)單位進一步做好免疫工作，從而確保轄區(qū)的免疫質(zhì)量持續(xù)保持在較高水平，將口蹄疫的發(fā)生風(fēng)險不斷地向零趨近，使畜牧業(yè)免遭“頭號殺手”之害。

4 結(jié)論

2021年上半年，新疆莎車縣規(guī)模和散養(yǎng)方式的牛O型口蹄疫免疫抗體合格率均達到國家70%的標(biāo)準(zhǔn)要求，全縣養(yǎng)殖環(huán)節(jié)牛免疫質(zhì)量總體良好，規(guī)模與散養(yǎng)方式下免疫質(zhì)量無明顯差異，鄉(xiāng)鎮(zhèn)間免疫質(zhì)量呈現(xiàn)不均衡情況，個別鄉(xiāng)鎮(zhèn)免疫效果不理想，今后還需強化免疫。