謝耀軒

深圳市藥品檢驗(yàn)研究院

國家藥品監(jiān)督管理局中藥質(zhì)量研究與評價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

張偉

深圳市藥品檢驗(yàn)研究院

國家藥品監(jiān)督管理局中藥質(zhì)量研究與評價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

肖麗和

深圳市藥品檢驗(yàn)研究院

國家藥品監(jiān)督管理局中藥質(zhì)量研究與評價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

康帥

中國食品藥品檢定研究院

王淑紅*

深圳市藥品檢驗(yàn)研究院

國家藥品監(jiān)督管理局中藥質(zhì)量研究與評價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

馬雙成*

中國食品藥品檢定研究院

何首烏為蓼科植物何首烏Polygonum multiflorumThunb.的干燥塊根，具有解毒、消癰、截瘧、潤腸通便的功效。制何首烏為何首烏的炮制加工品，具有補(bǔ)肝腎、益精血、烏須發(fā)、強(qiáng)筋骨、化濁降脂的功效[1]。制何首烏自《中國藥典》1985年版開始收載，之后歷版《中國藥典》均有收載?！吨袊幍洹?020年版中規(guī)定蒸至內(nèi)外均呈棕褐色。何首烏經(jīng)炮制后，外表的顏色隨炮制時間的延長而加深，不同的炮制方法（燉法或蒸法）、炮制時間對游離蒽醌的含量影響較大。游離蒽醌的含量隨著炮制時間的延長而增多。為保證成藥的質(zhì)量穩(wěn)定，穩(wěn)定的炮制方法及炮制時間是十分必要的[2]。

制何首烏主要含蒽醌類成份：大黃素、大黃酚、大黃素甲醚、大黃酚蒽酮等；二苯乙烯苷類成份：2,3,5,4′-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D- 葡萄糖苷、2′′-O-單沒食子酰基乙酯-2,3,5,4′-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D- 葡萄糖苷等[3]。

本文通過從市場上抽取適量制何首烏中藥飲片樣品，按照《中國藥典》2020年版一部“制何首烏”項(xiàng)下的規(guī)定進(jìn)行檢驗(yàn)，根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果分析市場上制何首烏質(zhì)量狀況，探究產(chǎn)生問題的內(nèi)在原因，提出相應(yīng)的監(jiān)管對策。

1 樣品采集情況

從生產(chǎn)、流通及使用環(huán)節(jié)采集制何首烏樣品共49 批，樣品標(biāo)識生產(chǎn)企業(yè)所在地涉及廣東、安徽、江西、廣西、湖北、北京6 個?。ㄗ灾螀^(qū)、直轄市），涉及生產(chǎn)企業(yè)共34 家。樣品分布情況詳見表1。

表1 樣品分布情況單位：批

2 檢驗(yàn)及結(jié)果分析

為更加全面調(diào)查制何首烏質(zhì)量狀況，對49 批樣品除按照《中國藥典》2020年版一部“制何首烏”項(xiàng)下的規(guī)定進(jìn)行檢驗(yàn)外，還從鐵鹽篩查、電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS） 法測定Fe 的含量和安全性項(xiàng)目檢驗(yàn)等三方面對樣品質(zhì)量進(jìn)行探索性考察。

2.1 按照《中國藥典》2020年版一部“制何首烏”項(xiàng)下進(jìn)行檢驗(yàn)

2.1.1 檢驗(yàn)項(xiàng)目和標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定

《中國藥典》2020年版一部“制何首烏”項(xiàng)下的檢驗(yàn)項(xiàng)目包括性狀、鑒別、檢查（水分、總灰分）、浸出物及含量測定（二苯乙烯苷、游離蒽醌），各檢驗(yàn)項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定詳見表2。

表2 制何首烏檢驗(yàn)項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定

2.1.2 檢驗(yàn)結(jié)果及分析

性狀：49 批樣品性狀項(xiàng)目均符合規(guī)定，部分樣品表面沉積一些黑褐色的粉末，部分樣品的斷面略呈角質(zhì)樣，淡棕褐色。

鑒別：49 批樣品供試品色譜中，在與何首烏對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，均符合規(guī)定。部分制首烏樣品薄層色譜鑒別圖詳見圖1。

圖1 部分制何首烏樣品薄層色譜鑒別圖

檢查：49 批樣品的水分、總灰分結(jié)果均符合規(guī)定，其中水分檢驗(yàn)結(jié)果為8.0%～11.8%，總灰分檢驗(yàn)結(jié)果為2.1%～5.3%。

浸出物：49 批樣品的浸出物結(jié)果均符合規(guī)定，檢驗(yàn)結(jié)果為6.6%～20.5%。

含量測定：49 批樣品中二苯乙烯苷的含量均符合規(guī)定，檢驗(yàn)結(jié)果為0.79%～3.47%。49 批樣品中游離蒽醌的含量檢驗(yàn)結(jié)果為0.02%～0.60%，其中31 批合格、18 批不合格，不合格樣品檢驗(yàn)結(jié)果為0.02%～0.07%。結(jié)合性狀項(xiàng)目檢驗(yàn)結(jié)果，不合格樣品的斷面均略呈角質(zhì)樣，淡棕褐色，提示可能存在炮制不規(guī)范的情況。

綜上，按照《中國藥典》2020年版一部“制何首烏”項(xiàng)下的規(guī)定對49 批制何首烏樣品進(jìn)行檢驗(yàn)，結(jié)果31 批合格、18批不合格，不合格率為36.7%，不合格項(xiàng)目均為游離蒽醌含量測定。其中，產(chǎn)自廣東的不合格批次最多，為12 批，占不合格總批數(shù)的66.7%，占廣東采樣批數(shù)的52.2%。采集?。ㄗ灾螀^(qū)、直轄市）樣品檢驗(yàn)情況詳見表3。

表3 采集省（自治區(qū)、直轄市）樣品檢驗(yàn)情況

2.2 探索性項(xiàng)目檢驗(yàn)

制何首烏為何首烏的加工炮制品，炮制對其化學(xué)成份和藥理作用均有一定的影響。何首烏中的蒽醌類成份遇Fe 容易被氧化成為棕紅色的蒽酮類成份，因此，何首烏炮制時要忌使用鐵器。其外表的顏色隨炮制時間的延長而加深，結(jié)合蒽醌類成份隨著蒸制時間的延長而減少，水解反應(yīng)后為游離蒽醌類成份，游離蒽醌的含量隨著炮制時間的延長而增多，還原糖含量逐漸增多，其補(bǔ)益作用得到增強(qiáng)。

49 批樣品的外觀差異可進(jìn)一步細(xì)分為三類。第一類：表面黑褐色或棕褐色，斷面角質(zhì)樣，棕褐色或黑色（圖2）。第二類：表面棕褐色，斷面略呈角質(zhì)樣，淡棕褐色（圖3）。第三類：表面棕褐色，沉積一些黑色的粉末（圖4）。18 批游離蒽醌含量不合格的樣品基本可歸在第二類和第三類。

圖2 外觀正常的樣品

圖3 斷面淡棕褐色的樣品

圖4 表面沉積黑色粉末的樣品

根據(jù)性狀和游離蒽醌含量測定項(xiàng)目檢驗(yàn)情況進(jìn)行推斷，部分生產(chǎn)企業(yè)加工何首烏時未按《中國藥典》2020年版要求進(jìn)行炮制，縮短炮制時間，以致制何首烏中游離蒽醌的含量低于標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。結(jié)合制何首烏非法染色的報(bào)道[4]，為了更進(jìn)一步探究18 批不合格制何首烏樣品是否存在以鐵鹽染色的方式制備出符合外觀性狀要求的制何首烏，本次探索性項(xiàng)目進(jìn)行了鐵鹽篩查、ICP-MS 法測定Fe 的含量和安全性項(xiàng)目檢驗(yàn)。

2.2.1 鐵鹽鑒別

取18 批游離蒽醌含量不合格的制何首烏樣品，參照《中國藥典》2020年版四部通則“0301一般鑒別試驗(yàn)”中“鐵鹽”項(xiàng)下方法進(jìn)行檢驗(yàn)。結(jié)果除2 批呈陰性反應(yīng)外，6 批呈陽性反應(yīng)，提示樣品在加工炮制時涉嫌使用了鐵鹽進(jìn)行染色；10 批呈不同程度的弱陽性反應(yīng)，提示樣品可能在加工炮制時或其生長環(huán)境受到不同程度的鐵污染影響。

2.2.2 ICP-MS 法測定Fe的含量

取18 批游離蒽醌含量不合格的制何首烏樣品，采用ICP-MS法進(jìn)行測定。按全粉（樣品粉碎，過四號篩）中Fe 的含量來計(jì)，有4 批樣品檢出較高含量的Fe，范圍為551～1550μg/g，其余14批樣品中Fe 含量均低于500μg/g。按刮粉（刮取樣品表面粉末）中Fe 的含量來計(jì)，有13 批樣品中Fe 含量均高于500μg/g，范圍為553～12 575μg/g，刮粉與全粉中Fe 的含量比值均大于3.5，認(rèn)定13 批樣品中的Fe 元素主要來源于樣品的表面，提示這13 批樣品的生產(chǎn)炮制不規(guī)范，存在生產(chǎn)企業(yè)為使外觀顏色符合《中國藥典》2020年版要求，非法以鐵鹽進(jìn)行染色。其余5 批樣品中Fe 含量均低于500μg/g，刮粉與全粉中Fe 的含量比值均小于3.5，提示這5 批樣品中的Fe 含量可能受生長環(huán)境土壤的影響。

2.2.3 安全性項(xiàng)目檢驗(yàn)

2.2.3.1 74 種農(nóng)藥篩查

參照《中國藥典》2020年版四部通則“2341 農(nóng)藥殘留量測定法”中第四法農(nóng)藥多殘留量測定法（質(zhì)譜法），對49 批樣品進(jìn)行74 種農(nóng)藥篩查，其中有1 批檢出殺螟硫磷（殘留量0.001mg/kg），《中國藥典》2020年版“制何首烏”項(xiàng)下暫未對其農(nóng)藥殘留限量進(jìn)行規(guī)定，本次以GB 2763—2019 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》中“殺螟硫磷”項(xiàng)下茶葉規(guī)定的最大殘留限量（不得過0.5mg/kg）作為參考限度，該批制何首烏的殺螟硫磷殘留量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于參考限度，其余樣品均未檢出，即合格率為100%。

2.2.3.2 重金屬及有害元素的殘留量測定

參照《中國藥典》2020年版四部通則“2321 鉛、鎘、砷、汞、銅測定法”，采用ICP-MS法對49 批制何首烏中鉛、鎘、砷、汞、銅5 種重金屬及有害元素的殘留量進(jìn)行測定，參照《中國藥典》2020年版一部黃芪的限度，結(jié)果49 批樣品的鉛、鎘、砷、汞、銅均未超過參考限度，合格率為100%。

2.2.3.3 黃曲霉毒素測定

參照《中國藥典》2020年版四部通則“2351 真菌毒素測定法”中黃曲霉毒素測定法，結(jié)果49 批樣品均未檢出黃曲霉毒素，合格率為100%。

2.2.3.4 二氧化硫殘留量

參照《中國藥典》2020年版四部通則“2331 二氧化硫殘留量測定法”第一法酸堿滴定法和第二法氣相色譜法，結(jié)果49批樣品的二氧化硫殘留量均小于150mg/kg [《中國藥典》2020年版四部通則“0212 藥材和飲片檢定通則”規(guī)定藥材及飲片（礦物類除外）的二氧化硫殘留量不得過150mg/kg]，合格率為100%。

3 結(jié)論

按照《中國藥典》2020年版一部“制何首烏”項(xiàng)下的規(guī)定對49 批制何首烏樣品進(jìn)行檢驗(yàn)，18批樣品的游離蒽醌含量測定項(xiàng)不符合規(guī)定，不合格率為36.7%。從鐵鹽篩查、ICP-MS 法測定Fe 的含量和安全性項(xiàng)目檢驗(yàn)等三方面對49 批制何首烏樣品進(jìn)行探索性考察，推斷其中13 批樣品的生產(chǎn)企業(yè)可能存在炮制工藝不規(guī)范，以鐵鹽染色的方式制備出符合外觀性狀要求的制何首烏。

4 討論和建議

監(jiān)管部門經(jīng)過近年來的強(qiáng)力監(jiān)管和精準(zhǔn)打擊，市場上制何首烏摻假行為得到基本控制，但部分生產(chǎn)企業(yè)為壓低生產(chǎn)成本，不規(guī)范炮制飲片，使用鐵鹽染色等違法行為依然存在。生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)嚴(yán)格控制工藝參數(shù)，嚴(yán)格把關(guān)半成品及成品質(zhì)量，規(guī)范炮制飲片。監(jiān)督管理部門應(yīng)加強(qiáng)對生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)規(guī)范的監(jiān)管力度，嚴(yán)厲打擊非法染色等不規(guī)范炮制行為，從源頭上控制不合格飲片流入市場。

現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)未規(guī)定鐵鹽的限量標(biāo)準(zhǔn)，無法全面監(jiān)控制何首烏的質(zhì)量。建議在現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中加入鐵元素限量的檢查方法和限度規(guī)定，進(jìn)一步完善質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA） 在21CFR part 73 中規(guī)定合成氧化鐵可用于藥品的著色，每天的攝入量不得超過5mg（以鐵元素計(jì)）[5]。中國營養(yǎng)學(xué)會制定的我國居民膳食鐵參考攝入量為男性成人15mg/d、女性成人20mg/d、老年人15mg/d[6]以及聯(lián)合國FAO/WHO 食品添加劑專家委員會（JECFA）規(guī)定的氧化鐵每日容許攝入量（ADI）為0～0.5mg/kg[7]，按60kg 體重計(jì)算，每日攝入的高限為30mg[8]。按照《中國藥典》2020年版規(guī)定的制何首烏用量6～12g，根據(jù)本次實(shí)驗(yàn)的測定結(jié)果，結(jié)合我國居民膳食鐵參考攝入量15mg/d 的限定值及美國 FDA 擬定的每天不得超過5mg 的限量規(guī)定，建議將制何首烏中鐵元素限度定為0.5mg/g。按此限度，18 批不合格樣品中有4 批制何首烏全粉中鐵含量超過0.5mg/g，占22%；有13 批刮粉中鐵含量超過0.5mg/g，范圍為0.553～12.575 mg/g，占72%。該結(jié)果的判定與鐵鹽鑒別以及ICP-MS 法測定結(jié)果相吻合，初步判斷可有效監(jiān)控制何首烏使用鐵鹽染色的行為，但限度的合理性仍需進(jìn)一步研究和驗(yàn)證。