趙壯志 鐘梓奇 高文 吳江 效梅 安立龍

摘要 [目的]探討日糧中添加不同劑量的姜黃素對羅曼粉殼蛋雞產(chǎn)蛋性能以及卵巢結(jié)構(gòu)和功能的影響。[方法]選取體重相近、健康、生產(chǎn)性能相近的29周齡羅曼粉殼蛋雞144只，隨機分為對照組（NC）和3個處理組（NT1、NT2、NT3），對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，各處理組在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上，分別添加50、150和200 mg/kg姜黃素，溫度保持在（25±2）℃，相對濕度均保持在65%～80%，分析姜黃素對羅曼粉殼蛋雞產(chǎn)蛋性能、卵巢結(jié)構(gòu)與卵泡發(fā)育以及卵巢組織生殖激素水平的影響。[結(jié)果]在產(chǎn)蛋性能方面，與對照組（NC）相比，各處理組（NT1、NT2、NT3）日均采食量、產(chǎn)蛋率、平均蛋重、蛋破損率均無顯著差異（P>0.05）;在卵巢結(jié)構(gòu)和卵泡發(fā)育方面，與對照組相比，各處理組蛋雞卵巢組織形態(tài)未見異常，NT2組的小白卵泡（SWF）數(shù)提高了35.64%（P<0.05）;在卵巢組織生殖激素方面，NT3組的促卵泡生成素（FSH）和雌二醇（E 2）含量與NC組相比分別提高了21.11%（P<0.05）和7.44%（P<0.05），NT2組和NT3組的孕酮（P 4）含量與NC組相比分別提高了9.36%（P<0.05）和10.89%（P<0.05）。[結(jié)論]日糧中添加姜黃素可以改善羅曼粉殼蛋雞的卵泡發(fā)育，顯著提高卵巢組織FSH、E 2、P 4的含量，但對蛋雞產(chǎn)蛋性能并無顯著影響。

關(guān)鍵詞 姜黃素;羅曼粉殼蛋雞;卵巢組織;結(jié)構(gòu)與功能

中圖分類號 S831? 文獻標(biāo)識碼 A? 文章編號 0517-6611（2022）07-0088-04

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2022.07.020

開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）：

Effects of Curcumin on the Egg-laying Performance，Ovarian Structure and Function of Roman Pink-shell Laying Hens

ZHAO Zhuang-zhi，ZHONG Zi-qi，GAO Wen et al

（College of Costal Agricultural Sciences，Guangdong Ocean University，Zhanjiang，Guangdong 524088）

Abstract [Objective] To investigate the effects of different doses of curcumin on the laying? performance，ovarian structure and function of Roman pink-shell laying hens.[Method] 144 29-week-age Roman pink- shell laying performance with similar body weight，health and similar production performance were selected and randomly divided into control group （NC） and three treatment groups （NT1 and NT2，NT3）.The laying hens in control group were fed with the based diet，and the laying hens in three treatment groups （NT1 and NT2，NT3） were fed with the diet with adding 50，150，200 mg/kg curcumin in the basal diet.The temperature was kept at （25±2） ℃，and the relative humidity in each group was maintained at 65%-80%.The effects of curcumin on the laying performance，ovarian structure and follicle development，reproductive hormones in ovarian tissues of Roman pink-shell laying hens were studied.[Result] In terms of production performance，there was no significant differences in average daily feed intake，laying rate，average egg weight and egg’s breakage rate between treatment groups （NT1，NT2，NT3） and control group （NC） （P>0.05）.In terms of ovarian structure and follicle development，there was no abnormality in the morphology of ovarian tissues in laying hens in the treatment groups， compared with control group. Compared with control group，the number of SWF in NT2 group increased by 35.64% （P<0.05）.In terms of reproductive hormones in ovarian tissues，compared with control group，the contents of FSH and E 2 in NT3 group significantly increased by 21.11% （P<0.05） and 7.44% （P<0.05） respectively，P 4 content in NT2 group and NT3 group significantly increased by 9.36% （P<0.05） and 10.89% （P<0.05） respectively.[Conclusion] Adding curcumin in the diet could improve the follicle development，significantly increase the contents of FSH，E 2 and P 4 in ovarian tissues of laying hens，but it had no significant effect on the laying performance of laying hens.

Key words Curcumin;Roman pink-shell laying hens;Ovarian tissues;Structure and function

近年來，為提高畜禽生產(chǎn)性能，加快畜牧業(yè)發(fā)展，對植物添加劑的開發(fā)利用顯得尤為迫切。姜黃素 （curcumin） 是一種從姜科植物姜黃等的根莖中提取的一種酚類物質(zhì)[1]，具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化和抗炎的作用[2]，能有效提高畜禽的生產(chǎn)性能[3]。因其天然、無殘留、無污染的特點，姜黃素作為綠色飼料添加劑被廣泛應(yīng)用于畜禽生產(chǎn)中[4]，是家禽生產(chǎn)中有效的生長促進劑之一[5]。近年來，關(guān)于姜黃素免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗炎作用的研究報道越來越多，但關(guān)于姜黃素對蛋雞產(chǎn)蛋性能和卵巢結(jié)構(gòu)與功能的研究很少。為此，筆者探討了日糧中添加不同劑量的姜黃素對羅曼粉殼蛋雞產(chǎn)蛋性能以及卵巢結(jié)構(gòu)和功能的影響，以期為姜黃素作為飼料添加劑應(yīng)用于家禽生產(chǎn)中提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物。144只29周齡羅曼粉殼蛋雞購自廣州喜迎珍禽養(yǎng)殖有限公司。

1.1.2 試驗材料。姜黃素（≥95%）購自西安金綠生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 試驗設(shè)計。選取體重、產(chǎn)蛋性能相近的29周齡羅曼粉殼蛋雞144只，隨機分為1個對照組（NC組，飼喂基礎(chǔ)日糧）和3個姜黃素處理組，即NT1組（基礎(chǔ)日糧+50 mg/kg）、 NT2組（基礎(chǔ)日糧+150 mg/kg）、 NT3組（基礎(chǔ)日糧+200 mg/kg姜黃素），每組6個重復(fù)，每個重復(fù)6只雞，溫度保持在（25±2）℃，相對濕度均保持在65%～80%。

飼糧為玉米-豆粕型，結(jié)合德國羅曼家禽育種有限公司（LOHMANN TIERZUCHT GmbH，Germany）提供的飼料營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)和《中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)-雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 33—2004）》以及本地實際情況設(shè)計[6]?；A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.2.2 飼養(yǎng)管理。試驗用羅曼粉殼蛋雞用三層梯式蛋雞籠籠養(yǎng)，飼養(yǎng)于廣東海洋大學(xué)動物醫(yī)院動物生產(chǎn)室。每只籠飼養(yǎng)2只雞，每天早晚各投料1次，自由飲水和采食。通過空調(diào)、保溫?zé)簟⒊闈駲C調(diào)節(jié)室內(nèi)溫濕度;采用自然光照和人工補光結(jié)合的方法，試驗期間光照強度為10～15 lx，保持每天光照16 h（06：00—22：00）。免疫程序參照羅曼粉殼蛋雞標(biāo)準(zhǔn)并結(jié)合廣東當(dāng)?shù)貭顩r進行。

1.2.3 樣品采集。在試驗第21天07：00隨機從每個重復(fù)中隨機挑選1只雞，斷頸處死后迅速取出卵巢，用眼科鑷迅速剝離直徑大于1 mm的卵泡。取部分卵巢組織與預(yù)冷的PBS緩沖液或生理鹽水按照1∶9（g∶mL）的比例充分勻漿，10 000? r/min離心10 min后取上清，放入-20 ℃下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.4 測定項目與方法。

1.2.4.1 產(chǎn)蛋性能測定。試驗期間每周統(tǒng)計各重復(fù)的日均采食量（g/只）、產(chǎn)蛋率（%）、平均蛋重（g）和蛋破損率（%），計算公式如下：

日均采食量=每日總采食量/雞只數(shù)（1）

產(chǎn)蛋率=每日總產(chǎn)蛋數(shù)/雞只數(shù)×100%（2）

平均蛋重=總蛋重/產(chǎn)蛋數(shù)（3）

蛋破損率=破損蛋數(shù)/總雞蛋數(shù)×100%（4）

1.2.4.2 卵巢不同等級卵泡的測定。

用眼科鑷剝離直徑大于1 mm卵泡的同時，使用電子游標(biāo)卡尺測量已剝離卵泡的直徑，按其直徑大小分為小黃卵泡（SYF）、大黃卵泡（LYF）、小白卵泡（SWF）、大白卵泡（LWF）和等級卵泡，并分別統(tǒng)計各級卵泡的數(shù)量。

1.2.4.3 卵巢結(jié)構(gòu)切片觀察。

取卵巢組織放入10%甲醛溶液中常溫浸泡24 h，通過乙醇脫水和二甲苯處理，制作厚度4 μm的石蠟切片后，再進行HE染色。使用普通光學(xué)顯微鏡觀察卵巢組織，分析不同處理組間是否存在結(jié)構(gòu)差異。

1.2.4.4 生殖激素含量的測定。

采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定卵巢組織中促卵泡生成素（FSH）、促黃體生成素（LH）、孕酮（P 4）、雌二醇（E 2）的含量，所用試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析。使用Excel 2019軟件進行數(shù)據(jù)整理，使用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析（One-way ANOVA），使用GraphPad Prism繪制柱狀圖。試驗結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧中添加姜黃素對蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響

如表2所示，各處理組（NT1、NT2、NT3）的日均采食量、產(chǎn)蛋率與對照組（NC）相比均無顯著差異（P>0.05）;各處理組（NT1、NT2、NT3）的平均蛋重與對照組（NC）相比差異均不顯著（P>005）; NT2組和NT3組蛋破損率與對照組（NC）相比分別降低了33.33%和13.33%，差異均不顯著（P>0.05）。

2.2 日糧中添加姜黃素對蛋雞卵巢結(jié)構(gòu)和卵泡發(fā)育的影響

如圖1所示，各處理組蛋雞卵巢組織中有結(jié)構(gòu)完整的成熟卵泡及初級卵泡，形態(tài)無異常;結(jié)構(gòu)完整且發(fā)育良好的卵巢顆粒細胞呈橢圓形，在目鏡觀測中其細胞核大小正常，有完整的細胞膜和核膜。

如表3所示，各處理組（NT1、NT2、NT3）的等級卵泡數(shù)、SYF數(shù)、LWF數(shù)、LYF數(shù)與對照組（NC）相比均無顯著差異（P>0.05）;NT2和NT3組的SWF數(shù)與對照組（NC）相比差異顯著，其中NT2組的SWF數(shù)較對照組（NC）顯著提高了3564%（P<0.05）。

2.3 日糧中添加姜黃素對蛋雞卵巢組織生殖激素含量的影響

如圖2所示，與對照組（NC）相比，NT3組卵巢組織的FSH含量提高了21.11%（P<0.05）、E 2含量提高了7.44%（P<0.05）;NT2和NT3組蛋雞卵巢組織的P 4含量比對照組（NC）分別提高了9.36% （P<0.05）和10.89%（P<0.05）;各姜黃素處理組蛋雞卵巢組織LH含量與對照組（NC）相比均有所提高，但均無顯著差異（P>0.05）。

3 討論

3.1 日糧中添加姜黃素對蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響

迄今為止，國內(nèi)外關(guān)于在日糧中添加姜黃素對蛋雞生產(chǎn)性能的影響研究報道很少。Solis-Cruz等[7]研究表明日糧中添加姜黃素可以改善肉雞的生產(chǎn)性能;Johannah 等[8]研究表明姜黃素可以提高雞的體增重和飼料利用率;王進波等[9]研究表明在大黃魚飼料中添加0.04%的姜黃素可以提高魚的平均體增重和成活率;胡忠澤等[10]研究發(fā)現(xiàn)，在肉雞日糧中添加一定量的姜黃素對于促進采食量、增加日增重、降低料重比有較好的效果;王鵬[11]報道在肉仔雞日糧中添加姜黃素可以提高肉仔雞的日均采食量和平均日增重;楊泰[12]報道添加姜黃素可以提高海蘭蛋雞的產(chǎn)蛋性能。該試驗結(jié)果表明，與對照組（NC）相比，日糧中添加不同劑量的姜黃素對羅曼粉殼蛋雞的日均采食量、產(chǎn)蛋率、平均蛋重、蛋破損率有不同程度的影響，但均無顯著差異（P>0.05）。日糧中添加姜黃素可用作畜禽生產(chǎn)的生長因子[13]，在產(chǎn)蛋期可作為一種天然的抗氧化劑[2]，能夠提高生產(chǎn)性能[14]，但在該試驗日糧中添加姜黃素對蛋雞產(chǎn)蛋性能有一定的影響，但差異不顯著。

3.2 日糧中添加姜黃素對蛋雞卵巢結(jié)構(gòu)和卵泡發(fā)育的影響

在禽類卵泡發(fā)育過程中，只有極少數(shù)的卵泡可以發(fā)育成等級卵泡并成熟排卵，家禽產(chǎn)蛋性能是由卵巢中未分化的等級前卵泡數(shù)量所決定的[15]。前人研究表明，姜黃素可以緩解卵巢功能不全[16]，對卵巢有一定的保護作用[17]。陳振國等[18]報道姜黃素可以促進新生大鼠原始卵泡的發(fā)育啟動，并抑制卵母細胞的凋亡。Tiwari-pandey等[19]研究表明姜黃素可以促進小鼠卵巢細胞增殖、促進卵子生成和卵泡發(fā)育、緩解凋亡。該試驗結(jié)果表明，與對照組（NC）相比，日糧中添加姜黃素的各處理組蛋雞卵巢組織形態(tài)未見異常，其中添加150 mg/kg 姜黃素可以顯著提高羅曼粉殼蛋雞SWF數(shù)（P<0.05）;日糧中添加150和200 mg/kg的姜黃素可以不同程度地提高羅曼粉殼蛋雞的等級卵泡數(shù)、SYF數(shù)、LYF數(shù)和LWF數(shù)，但均無顯著差異（P>0.05）。

3.3 日糧中添加姜黃素對蛋雞卵巢組織生殖激素的影響

動物的生殖過程受下丘腦-垂體-性腺軸（HPG）調(diào)控[20]，HPG 軸通過下丘腦分泌促性腺激素釋放激素 （GnRH） 刺激垂體分泌的FSH 和LH，是促進卵巢發(fā)育的主要激素[21]。Moro-Balbás等[22]研究表明，E 2對顆粒細胞凋亡和卵泡閉鎖有抑制作用。該試驗結(jié)果表明，日糧中添加不同劑量的姜黃素可以顯著提高羅曼粉殼蛋雞卵巢組織生殖激素含量，其中添加200 mg/kg 姜黃素可以顯著提高羅曼粉殼蛋雞卵巢組織的FSH、E 2含量（P<0.05）;添加150和200 mg/kg 姜黃素可以顯著提高羅曼粉殼蛋雞卵巢組織的P 4含量（P<0.05），說明日糧中添加姜黃素可以促進性腺激素和固醇類激素的分泌。目前，姜黃素作為一種飼料添加劑，在家禽生產(chǎn)中的研究主要集中在其抗氧化性能，而關(guān)于姜黃素對常溫環(huán)境中蛋雞卵巢生殖激素影響的作用機制則有待進一步研究。

4 結(jié)論

日糧中添加姜黃素可以改善羅曼粉殼蛋雞的卵泡發(fā)育，顯著提高卵巢組織FSH、E 2、P 4的含量，但對蛋雞產(chǎn)蛋性能并無顯著影響。

參考文獻

[1]

陳明霞，方心靈，劉賢旭.姜黃素的生理功能及其在肉雞生產(chǎn)上的應(yīng)用研究進展[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2020（11）：43-46.

[2] BOROUMAND N，SAMARGHANDIAN S，HASHEMY S I.Immunomodulatory，anti-inflammatory，and antioxidant effects of curcumin[J].Journal of herbmed pharmacology，2018，7（4）：211-219.

[3] 楊泰，王慧，田科雄，等.姜黃素的生理功能及其在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].動物營養(yǎng)學(xué)報，2017，29（10）：3460-3466.

[4] 張紅，肖定福.姜黃素的生理功能及其在養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用[J].飼料研究，2021（5）：133-136.

[5] DHAMA K，TIWARI R，KHAN R U，et al.Growth promoters and novel feed additives improving poultry production and health，bioactive principles and beneficial applications：The trends and advances：A review[J].International journal of pharma cology，2014，10（3）：129-159.

[6] 李光輝，鐘秀伶，AAMIR NAWAB，等.姜黃素對羅曼蛋雞血液和組織抗氧化性能的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2018，46（21）：96-99.

[7] SOLIS-CRUZ B，HERNANDEZ-PATLAN D，PETRONE V M，et al.Evaluation of cellulosic polymers and curcumin to reduce aflatoxin B1 toxic effects on performance，biochemical，and immunological parameters of broiler chickens[J].Toxins，2019，11（2）：121.

[8] JOHANNAH N M，ASHIL J，BALU M，et al.Dietary addition of a standardized extract of turmeric （TurmaFEEDTM） improves growth performance and carcass quality of broilers[J].Journal of animal science and technology，2018，60（1）：1-9.

[9] 王進波，吳天星.姜黃素在大黃魚飼料中的應(yīng)用效果研究[J].水利漁業(yè)，2007，28（6）：105-106.

[10] 胡忠澤，金光明，王立克，等.姜黃素對肉雞生產(chǎn)性能和免疫機能的影響[J].糧食與飼料工業(yè)，2004（10）：44-45.

[11] 王鵬.低聚木糖和姜黃素對肉仔雞生產(chǎn)性能及免疫機能影響的研究[D].鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2018：48.

[12] 楊泰.姜黃素對蛋雞蛋品質(zhì)、抗氧化與免疫功能及腸道形態(tài)的影響[D].長沙：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2018：55.

[13] MOLOSSE V，SOUZA C F，BALDISSERA M D，et al.Diet supplemented with curcumin for nursing lambs improves animal growth，energetic metabolism，and performance of the antioxidant and immune systems[J].Small ruminant research，2019，170：74-81.

[14] DALAL R，KOSTI D，TEWATIA B S.Effect of turmeric powder on egg quality，gut morphology，ecology and on immune system of laying hen：A review[J].Journal of entomology and zoology studies，2018，6（3）：978-982.

[15] 李琴.家禽卵泡發(fā)育特點及選擇機制的研究進展[J].中國家禽，2018，40（13）：1-6.

[16] ALEKSEYEVA I N，MAKOGON N V，BRYZGINA T M，et al.Effects of NF-κB blocker curcumin on oogenesis and immunocompetent organ cells in immune ovarian injury in mice[J].Bulletin of experimental biology and medicine，2011，151（4）：432-435.

[17] CORT A，TIMUR M，OZDEMIR E，et al.Effects of curcumin on bleomycin-induced apoptosis in human malignant testicular germ cells[J].Journal of physiology and biochemistry，2013，69（2）：289-296.

[18] 陳振國，許錦階，羅麗莉，等.姜黃素對新生大鼠卵巢卵泡發(fā)育和卵母細胞凋亡的影響[J].汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2009，22（4）：193-196.

[19] TIWARI-PANDEY R，RAM SAIRAM M.Modulation of ovarian structure and abdominal obesity in curcumin-and flutamide-treated aging FSH-R haploinsufficient mice[J].Reproductive sciences，2009，16（6）：539-550.

[20] SHERWOOD S C，HUBER M.An adaptability limit to climate change due to heat stress[J].Proceedings of the national academy of sciences，2010，107（21）：9552-9555.

[21] ABD EL-HACK M，SONBOL S，ASKAR A，et al.Some histological observations on ovary and spleen of heat-stressed laying hens treated with antioxidants[J].Journal of animal and poultry production，2011，2（2）：33-41.

[22] MORO-BALBS J A，GATO A，ALONSO M I，et al.Basal lamina heparan sulphate proteoglycan is involved in otic placode invagination in chick embryos[J].Anatomy and embryology，2000，202（4）：333-343.