王雪燕 馮跨 房亮 常曉華 梁志強(qiáng) 姜鳳云

[摘要] 目的 分析中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白（NGAL）在類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）病人動(dòng)脈粥樣硬化（AS）中的作用。方法 選擇我院收治的RA病人209例，依照是否合并AS分為RA組（C組）和RA合并AS組（D組）;選擇100例健康者作為A組，50例AS病人作為B組。檢測(cè)受試者血中基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）、NGAL、環(huán)瓜氨酸肽（CCP）抗體、紅細(xì)胞沉降率（ESR）、類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）等指標(biāo)。采用Logistics回歸模型分析NGAL等指標(biāo)與RA合并AS的關(guān)系。結(jié)果 4組MMP-9、NGAL、CCP抗體、ESR和RF水平比較存在明顯差異，其中D組MMP-9、NGAL、CCP抗體、ESR及RF水平最高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=354.542～2 057.146，P<0.05）。病人血中MMP-9、NGAL水平異常升高是影響RA病人AS病情的獨(dú)立性危險(xiǎn)因素，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（OR=1.857、1.865，95%CI=（1.228～2.831）、（1.310～2.632），P<0.05）。結(jié)論 NGAL在RA合并AS病人體內(nèi)高表達(dá)，其水平異常升高是影響病情的獨(dú)立性危險(xiǎn)因素。

[關(guān)鍵詞] 關(guān)節(jié)炎，類(lèi)風(fēng)濕;動(dòng)脈粥樣硬化;脂籠蛋白質(zhì)類(lèi);危險(xiǎn)因素

[中圖分類(lèi)號(hào)] R593.22;R341.3

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼] A

[文章編號(hào)] 2096-5532（2022）01-0119-04

doi：10.11712/jms.2096-5532.2022.58.014

類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）是臨床中十分常見(jiàn)的自身免疫性疾病[1]。RA病人主要表現(xiàn)為對(duì)稱(chēng)性多關(guān)節(jié)炎，晚期可能出現(xiàn)關(guān)節(jié)畸形，導(dǎo)致病人的生活質(zhì)量嚴(yán)重降低，甚至勞動(dòng)力完全喪失[2]。而RA病人并發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化（AS）發(fā)生率明顯高于普通人[3]。此外，RA病人在出現(xiàn)AS的過(guò)程中可能受到脂質(zhì)代謝異常、血壓異常、肥胖等因素的影響[4-5]。在AS的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中，常伴隨出現(xiàn)明顯的脂質(zhì)代謝紊亂，可能繼發(fā)引起血管內(nèi)皮損傷從而導(dǎo)致慢性持續(xù)性炎癥反應(yīng)[6]。中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白（NGAL）在體內(nèi)的巨噬細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞中均有表達(dá)，參與體內(nèi)重要的炎癥、免疫反應(yīng)[7]。已有研究結(jié)果顯示，在多種炎癥性疾病中NGAL常呈異常高表達(dá)，且隨著NGAL表達(dá)水平的升高，RA病人炎癥反應(yīng)處于加重狀態(tài)，NGAL可能參與RA的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程[8]。但NGAL與RA并發(fā)AS的關(guān)系仍不明確，本文選擇我院收治的RA病人作為研究對(duì)象，分析NGAL在RA合并AS中的作用?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

2018年1月—2020年1月，選擇承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院收治的RA病人209例為研究對(duì)象，依照病人是否合并AS分為RA組（C組）和RA合并AS組（D組）。其中RA組病人132例，男43例，女89例，年齡（56.27±7.82）歲，病程（7.28±1.22）年。RA合并AS組病人77例，男25例，女52例，年齡（58.19±9.93）歲，病程（7.31±1.31）年。同期選取100例健康體檢者作為對(duì)照組（A組），男33例，女67例，年齡（57.11±10.22）歲。另選擇50例AS病人作為AS組（B組），男性15例，女性35例，年齡（58.38±14.28）歲，病程（7.29±1.22）年。各組受試者一般資料比較差異無(wú)顯著性（P>0.05）。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)審議并批準(zhǔn)。入組標(biāo)準(zhǔn)：①所有入組病人均符合ACR/EULAR分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)[9];②病人RA處于活動(dòng)期;③經(jīng)影像學(xué)檢查確診是否出現(xiàn)AS[10];④對(duì)本研究知情并簽署同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①缺血性腦血管病;②冠心病、心功能異?；蚰[瘤等;③彌漫性結(jié)締組織病、糖尿病、高血壓等;④妊娠或哺乳期女性;⑤使用非類(lèi)固醇抗炎鎮(zhèn)痛藥、腫瘤化療藥等;⑥主動(dòng)申請(qǐng)退出本研究或失訪。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

本研究在受試者入組后采集空腹靜脈血，采用全自動(dòng)生化儀和酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)各組血中基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）及NGAL表達(dá)水平，以及環(huán)瓜氨酸肽（CCP）抗體、紅細(xì)胞沉降率（ESR）和類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）等指標(biāo)水平。采用Logistics回歸模型分析NGAL等指標(biāo)與RA合并AS的關(guān)系。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料采用百分率表示，組間差異比較采用卡方檢驗(yàn)。計(jì)量資料數(shù)據(jù)采用[AKx-D]±s表示，多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。采用Logistics回歸模型分析RA合并AS的影響因素，變量篩選采用前進(jìn)法。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組血清MMP-9與NGAL水平的比較以及二者相關(guān)性

本文研究結(jié)果顯示，4組受試者血清MMP-9及NGAL水平存在明顯差異，其中D組MMP-9和NGAL水平最高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=577.548、1 054.566，P<0.001）。見(jiàn)表1。相關(guān)性分析顯示，NGAL與MMP-9呈顯著正相關(guān)關(guān)系（r=0.743，P<0.05）。

2.2 各組血中常規(guī)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較

本文結(jié)果顯示，4組血中CCP抗體、ESR和RF水平有明顯差異，其中D組CCP抗體、ESR和RF水平最高，差異有顯著性（F=354.542～2 057.146，P<0.001）。見(jiàn)表2。

2.3 各指標(biāo)與RA合并AS的關(guān)系

以RA病人是否合并AS為因變量，以MMP-9、NGAL、CCP抗體、ESR和RF等變量作為自變量建立Logistics回歸模型。Logistics回歸分析顯示，RA病人血中MMP-9、NGAL水平異常升高是影響RA合并AS病情的獨(dú)立性危險(xiǎn)因素，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（OR=1.857、1.865，95%CI=（1.228～2.831）、（1.310～2.632），P<0.05）。見(jiàn)表3、4。

3 討 論

RA是臨床上較為常見(jiàn)的可能導(dǎo)致關(guān)節(jié)功能障礙、累及全身多關(guān)節(jié)的炎癥性自身免疫疾病，其主要病理改變?yōu)殛P(guān)節(jié)滑膜炎癥。RA病人的平均壽命明顯降低，其中心血管并發(fā)癥是導(dǎo)致RA病人死亡首要因素[11]。已有研究表明，RA病人并發(fā)AS性病變的危險(xiǎn)性冠狀動(dòng)脈數(shù)量顯著升高，而傳統(tǒng)的心血管病變危險(xiǎn)因素并無(wú)法有效解釋該現(xiàn)象[12]。有研究指出，多數(shù)病人在早期多無(wú)明顯的臨床癥狀，AS與RA發(fā)病機(jī)制有很多共同之處，如二者均有免疫系統(tǒng)明顯異常，并在其病理發(fā)展過(guò)程中扮演十分重要角色[13-14]。近年的研究結(jié)果顯示，炎癥遞質(zhì)、疾病活動(dòng)度、異常脂質(zhì)譜、基因異常、糖皮質(zhì)激素應(yīng)用和內(nèi)皮細(xì)胞活化等均可能導(dǎo)致RA病人出現(xiàn)AS[4]。

NGAL是常用的評(píng)估炎癥反應(yīng)急性時(shí)相糖蛋白，可與體內(nèi)的MMP-9作用形成二聚體。NGAL在體內(nèi)可有效激活中性粒細(xì)胞，并在出現(xiàn)炎癥損傷情況下由肝細(xì)胞和腎小管細(xì)胞合成并釋放，也可在出現(xiàn)缺血、細(xì)菌感染和毒性損傷后由上皮細(xì)胞合成并分泌[15-16]。已有研究結(jié)果顯示，細(xì)胞鐵載體可與NGAL結(jié)合，有效抑制鐵攝取，進(jìn)而發(fā)揮其強(qiáng)烈的抑菌作用[17]。NGAL在脂肪細(xì)胞中廣泛存在，且肥胖人群胰島素抵抗與NGAL呈顯著相關(guān)性[18]。也有研究結(jié)果表明，多種腫瘤還可有效誘導(dǎo)NGAL合成和分泌，并與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[19]。此外，在急性腎小管損傷病人體內(nèi)可見(jiàn)NGAL水平升高，NGAL可作為評(píng)估和分析急性腎損傷早期標(biāo)志物[20]。在心力衰竭病人體內(nèi)NGAL水平呈現(xiàn)明顯高表達(dá)，并且與AS不穩(wěn)定斑塊和血管重構(gòu)密切相關(guān)[21]。在冠心病、急慢性心力衰竭病人體循環(huán)中NGAL水平也呈現(xiàn)顯著升高，并與病人預(yù)后質(zhì)量密切相關(guān)[22]。NGAL水平可以有效反映中性粒細(xì)胞活性狀態(tài)，中性粒細(xì)胞活化后可伴隨出現(xiàn)大量的NGAL釋放入血，NGAL可作為反映體內(nèi)免疫應(yīng)激狀態(tài)和急性炎癥反應(yīng)指標(biāo)，并可能作為鑒別診斷體內(nèi)病理?yè)p傷與急性炎癥的指標(biāo)[23]。RA屬于常見(jiàn)的自身免疫性疾病，其N(xiāo)GAL水平異常，會(huì)加重體內(nèi)關(guān)節(jié)等區(qū)域的炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致病人病情加劇，因而可通過(guò)檢測(cè)NGAL等相關(guān)體內(nèi)免疫應(yīng)激狀態(tài)和急性時(shí)相蛋白指標(biāo)對(duì)RA合并AS進(jìn)行分析[24-25]。

本文研究結(jié)果顯示，對(duì)照組、RA組和RA合并AS組MMP-9、NGAL、CCP抗體、ESR、RF水平存明顯差異，其中RA合并AS組各指標(biāo)水平最高。進(jìn)一步采用Logistics回歸模型分析結(jié)果顯示，病人血中MMP-9、NGAL、CCP抗體、ESR和RF水平異常升高是影響RA合并AS病情的獨(dú)立性危險(xiǎn)因素。其原因可能與在AS的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中炎癥反應(yīng)起到十分重要的作用，而NGAL在炎癥反應(yīng)過(guò)程中是重要的調(diào)控因子，在RA合并AS病人體內(nèi)NGAL可與MMP-9前體結(jié)合，并可與金屬蛋白酶組織抑制因子結(jié)合而形成三元復(fù)合物，進(jìn)而有效抵消復(fù)合物中基質(zhì)金屬蛋白酶活性，促進(jìn)心血管疾病發(fā)生[26]。王雪燕等[27]研究亦顯示，RA病人體內(nèi)的NGAL含量與其是否合并AS以及生存結(jié)局之間關(guān)系密切，NGAL水平是其主要的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

綜上所述，NGAL在RA合并AS病人體內(nèi)高表達(dá)，且其水平異常升高是影響病情的獨(dú)立性危險(xiǎn)因素。但本研究并未對(duì)病人進(jìn)行長(zhǎng)期隨訪追蹤，有待以后的持續(xù)隨訪研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1]LIPINSKI M， DEGOWSKA M， RYDZEWSKA G. Cystic fluid neutrophil gelatinase-associated lipocalin （NGAL） concentration in differential diagnosis of pancreatic cystic lesions：a new factor enters the scene[J]？ Przeglad Gastroenterologiczny， 2018，13（2）：132-136.

[2]XIAO W， CHEN W， HU H N， et al. The clinical significance of neutrophil gelatinase-associated lipocalin in ischemic stroke patients with acute kidney injury[J]. Journal of Clinical Laboratory Analysis， 2019，33（6）：e22907.

[3]馬晨，鄭福增. 類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎與動(dòng)脈粥樣硬化的相關(guān)性探討[J]. 風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎， 2018，7（3）：62-65.

[4]王長(zhǎng)磊，孔純玉，戚務(wù)芳. 類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病患病率及其影響因素10年橫斷面研究[J]. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)， 2020，41（10）：1068-1076.

[5]周力，陳暉，李衛(wèi)萍，等. 類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎合并冠心病患者的冠狀動(dòng)脈病變特點(diǎn)及院內(nèi)不良事件分析[J]. 中國(guó)介入心臟病學(xué)雜志， 2018，26（5）：274-278.

[6]GOMBERT A， PRIOR I， MARTIN L， et al. Urine neutrophil gelatinase-associated lipocalin predicts outcome and renal failure in open and endovascular thoracic abdominal aortic aneurysm surgery[J]. Scientific Reports， 2018，8（1）：12676.

[7]王雪燕，馮跨，梁志強(qiáng)，等. 外周血T細(xì)胞亞群及NGAL與RA動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系[J]. 中國(guó)免疫學(xué)雜志， 2020，36（22）：2779-2782.

[8]MIN J H，LEE H， CHUNG S J， et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin for predicting intensive care unit admission and mortality in patients with pneumonia[J]. The Tohoku Journal of Experimental Medicine， 2020，250（4）：243-251.

[9]TSANG A C O， ORRU E， KLOSTRANEC J M， et al. Thrombectomy outcomes of intracranial atherosclerosis-related occlusions[J]. Stroke， 2019，50（6）：1460-1466.

[10]鄭筱萸. 中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則：試行[M]. 北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社， 2002.

[11]徐子涵，張群燕，蔡輝. 類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎心血管損害的危險(xiǎn)因素[J]. 安徽醫(yī)藥， 2016，20（7）：1233-1236.

[12]TARJUS A， MARTNEZ-MARTNEZ E， AMADOR C， et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin， a novel mineralocorticoid biotarget， mediates vascular profibrotic effects of mineralocorticoids[J]. Hypertension （Dallas， Tex：1979）， 2015，66（1）：158-166.

[13]RAHIMI S， ROUSHANDEH A M， AHMADZADEH E， et al. Implication and role of neutrophil gelatinase-associated lipocalin in cancer： lipocalin-2 as a potential novel emerging comprehensive therapeutic target for a variety of cancer types[J]. Molecular Biology Reports， 2020，47（3）：2327-2346.

[14]曾婷，施丹，顧科峰，等. 類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者脂聯(lián)素水平與動(dòng)脈粥樣硬化的相關(guān)性[J]. 中華老年心腦血管病雜志， 2016，18（2）：161-164.

[15]SCHREIBER A， ROUSSELLE A， KLOCKE J， et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin protects from ANCA-induced GN by inhibiting TH17 immunity[J]. Journal of the American Society of Nephrology， 2020，31（7）：1569-1584.

[16]ORDOOEI JAVAN A， SALAMZADEH J， SHOKOUHI S， et al. Evaluation of renal toxicity of colistin therapy with neutrophil gelatinase-associated lipocalin： a biomarker of renal tubular damage[J]. Iranian Journal of Kidney Diseases， 2017，11（6）：447-455.

[17]HOU X Z， LIU C， LIAN H W， et al. The value of neutrophil gelatinase-associated lipocalin and citrullinated alpha enolase peptide-1 antibody in diagnosis，classification， and prognosis for patients with Sepsis[J]. Medicine， 2020，99（34）：e21893.

[18]劉洪，馮小蘭，袁曉玲，等. 糖尿病患者血清sKlotho、NGAL、MCP-1和TGF-β1的表達(dá)及意義[J]. 河北醫(yī)藥， 2019，41（2）：186-189.

[19]KARADENIZ M S， ENITE I A， IFTI H S， et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin significantly correlates with ischemic damage in patients undergoing laparoscopic partial nephrectomy[J]. Balkan Medical Journal， 2019，36（2）：121-128.

[20]史俊，季晨，雷鑫，等. 類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎合并冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病的研究進(jìn)展[J]. 新醫(yī)學(xué)， 2020，51（7）：506-511.

[21]KRZEMIE G， PACZYK-TOMASZEWSKA M， KOTUA I， et al. Serum neutrophil gelatinase-associated lipocalin for predicting acute pyelonephritis in infants with urinary tract infection[J]. Central-European Journal of Immunology， 2019，44（1）：45-50.

[22]NAIR A， INGRAM N， VERGHESE E T， et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin as a theragnostic marker in perihilar cholangiocarcinoma[J]. Anticancer Research， 2018，38（12）：6737-6744.

[23]BUONAFINE M， MARTNEZ-MARTNEZ E， AMADOR C， et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin from immune cells is mandatory for aldosterone-induced cardiac remodeling and inflammation[J]. Journal of Molecular & Cellular Cardiology， 2018，115（1）：32-38.

[24]EILENBERG W， STOJKOVIC S， KAIDER A， et al. Neutrophil gelatinase associated lipocalin （NGAL） for identification of unstable plaques in patients with asymptomatic carotid stenosis[J]. European Journal of Vascular and Endovascular Surgery， 2019，57（6）：768-777.

[25]SIVALINGAM Z， LARSEN S B， GROVE E L， et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin as a risk marker in cardiovascular disease[J]. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine， 2017，56（1）：5-18.

[26]李超，彭瑜，高涵翔，等. 血漿中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白水平與急性ST段抬高型心肌梗死病變嚴(yán)重程度的關(guān)系[J]. 中國(guó)循環(huán)雜志， 2018，33（3）：222-226.

[27]王雪燕，馮跨，梁志強(qiáng)，等. 類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者NGAL、Lp-PLA2及血脂異常對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的預(yù)測(cè)及在轉(zhuǎn)歸中的價(jià)值[J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志， 2020，40（1）：125-129.

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