許 敏 孔夏冰 唐冬梅 韓令喜 劉曉麗 萬浩亮 齊 勇賈東杰 聶繼云

（1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部果品質(zhì)量安全風(fēng)險評估實(shí)驗室（青島），全國名特優(yōu)新農(nóng)產(chǎn)品（園藝產(chǎn)品）全程質(zhì)量控制技術(shù)青島中心，青島市現(xiàn)代農(nóng)業(yè)質(zhì)量與安全工程重點(diǎn)實(shí)驗室，山東青島 266109；2.貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹科學(xué)研究所，貴陽 550006）

獼猴桃為獼猴桃科（Actinidiaceae）獼猴桃屬（ActinidiaLindl.），原產(chǎn)于我國[1～2]。獼猴桃屬植物資源極為豐富，廣泛用于商業(yè)化栽培的為中華獼猴桃和美味獼猴桃，軟棗獼猴桃和毛花獼猴桃也有少量應(yīng)用[3]。我國獼猴桃種植面積和產(chǎn)量均居世界首位[2]。據(jù)聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，截至2019年，我國獼猴桃種植面積18.3萬hm2，總產(chǎn)量219.7萬t（占全球獼猴桃總產(chǎn)量的50.5%）[4]。獼猴桃營養(yǎng)豐富，特別是維生素C含量極高，每100 g獼猴桃中維生素C含量一般在100～200 mg，每天吃一個獼猴桃即可滿足人體對維生素C的需要[1]?！F長’獼猴桃（Actinidia deliciosa‘Guichang’）屬美味獼猴桃，是貴州省自主選育并主要推廣的地方優(yōu)良品種，外觀修長勻稱，果肉淺綠色、味甜、香濃，深受消費(fèi)者喜愛[5～6]。該品種在貴州省得到大規(guī)模栽培，面積已接近1.33萬hm2[5，7]。

氯吡脲是一種細(xì)胞分裂素類植物生長調(diào)節(jié)劑，對人畜低毒，是我國獼猴桃生產(chǎn)中主要使用的膨大劑，登記用于幼果期（一般在花后20～25 d）浸果或噴霧處理[8～12]。氯吡脲又稱氯吡苯脲，英文別名CPPU，能促進(jìn)細(xì)胞分裂、增加細(xì)胞數(shù)目、擴(kuò)大細(xì)胞體積，具有增加單果重、提高座果率等作用，對增大果實(shí)、提高產(chǎn)量效果顯著，在獼猴桃生產(chǎn)中被廣泛使用[9～10，12～18]。關(guān)于獼猴桃使用氯吡脲后對果實(shí)品質(zhì)和安全性影響的研究多有報道[10，14，18～25]， 涉及‘紅陽’‘華優(yōu)’‘徐香’‘泰山1號’‘海沃德’‘秦美’等諸多品種；‘貴長’獼猴桃少有研究報道，且僅涉及對果實(shí)品質(zhì)的影響[7，26]，未涉及氯吡脲殘留消解和產(chǎn)品安全性。

在我國獼猴桃栽培管理過程中，氯吡脲使用缺乏科學(xué)規(guī)范，多數(shù)果農(nóng)依靠經(jīng)驗，使用濃度過高的現(xiàn)象仍很普遍，存在著片面追求產(chǎn)量而加大氯吡脲使用劑量的問題，這不僅影響了獼猴桃果實(shí)品質(zhì)和貯藏性，甚至導(dǎo)致消費(fèi)者的消費(fèi)愿望下降[19，22～23，27～28]。氯吡脲使用劑量加大還會造成獼猴桃氯吡脲殘留量增加和產(chǎn)品安全性降低。獼猴桃中氯吡脲殘留可能會對人體帶來潛在的健康風(fēng)險，這正是獼猴桃中氯吡脲殘留限量制定的原因所在[25]。因此，本文根據(jù)氯吡脲登記推薦用量[7]，在‘貴長’獼猴桃幼果期進(jìn)行3種濃度（5、10、20 mg/L）的浸果處理，采收后進(jìn)行貨架期試驗和品質(zhì)安全檢測分析，旨在明確氯吡脲各濃度處理對‘貴長’獼猴桃主要品質(zhì)指標(biāo)和食用安全性的影響，篩選出氯吡脲適宜使用濃度，為‘貴長’獼猴桃生產(chǎn)中氯吡脲的科學(xué)、合理使用提供依據(jù)。

一、材料和方法

（一）田間試驗幼果氯吡脲浸果處理試驗設(shè)在貴州省貴陽市息烽縣石硐鎮(zhèn)中康公司‘貴長’獼猴桃園。該園采用小棚架樹形，每株獼猴桃樹2個主蔓。藥劑選用四川蘭月科技有限公司生產(chǎn)的蘭月好美得氯吡脲，有效成分含量0.1%，可溶液劑，微毒。試驗設(shè)3種處理濃度（5、10、20 mg/L），分別記為T1、T2和T3。每種處理1個小區(qū)，每個小區(qū)10株獼猴桃樹，樹勢和掛果量基本一致，田間管理相同。每株樹的一個主蔓上的果實(shí)全部進(jìn)行氯吡脲浸果處理，另一個主蔓上的果實(shí)用蒸餾水代替氯吡脲進(jìn)行浸果處理（設(shè)為對照，CK）。浸果處理于2020年6月4日（花后25 d）進(jìn)行，果實(shí)完全浸沒于氯吡脲溶液（處理組）或蒸餾水（對照組）中，停留3 s后取出[25]。處理果和對照果分別做好標(biāo)記。果園按當(dāng)?shù)卣９芾硭竭M(jìn)行土肥水和樹體管理。

（二）樣品采集2020年10月13日，試驗果達(dá)到適采成熟度，采集樣品。每種處理均從每株樹的藥劑處理主蔓隨機(jī)采摘果實(shí)20個，從另一主蔓（未進(jìn)行藥劑處理）隨機(jī)采摘果實(shí)10個。果實(shí)采摘后，3種處理和對照分別做好標(biāo)記，用柔軟材料（珍珠棉水果托）單果隔離包裝。樣品采集當(dāng)天，快遞發(fā)往青島農(nóng)業(yè)大學(xué)。樣品運(yùn)達(dá)當(dāng)天，將其置于室溫（20℃，空調(diào)控溫）和相對濕度85%～90%（適時噴霧保濕）條件下進(jìn)行貨架期試驗。貨架期試驗期間，從第3 d開始，處理組取樣進(jìn)行全果和去皮后果肉氯吡脲殘留檢測，并每隔3 d取樣進(jìn)行獼猴桃品質(zhì)檢測，直至果實(shí)后熟變軟為止。各取樣節(jié)點(diǎn)對照組和各處理組均設(shè)3個重復(fù)，每個重復(fù)取10個果實(shí)。

（三）樣品檢測測定指標(biāo)包括單果重、果實(shí)縱徑、果實(shí)橫徑、果形指數(shù)、果實(shí)硬度、可溶性固形物含量、維生素C含量、可滴定酸含量和氯吡脲殘留量（對照組不測定氯吡脲殘留量），同時觀察果實(shí)有無空心現(xiàn)象。單果重用電子天平（上海津平科學(xué)儀器有限公司，YP2002型）稱量。果實(shí)縱徑和橫徑用游標(biāo)卡尺（香港鼎好工量具有限公司，旗豐）測定。果形指數(shù)以果實(shí)縱徑與橫徑之比表示。果實(shí)硬度用質(zhì)構(gòu)儀（美國Food Technology Corporation公司，TMS—Touch型）測定，用刀片削去獼猴桃中部短軸方向的兩側(cè)各約1cm2果皮，用P/2柱頭（Φ2 mm）進(jìn)行穿刺測試?？扇苄怨绦挝锖?、維生素C含量和可滴定酸含量分別采用折射儀法、2，6—二氯靛酚滴定法和酸堿滴定法測定[29]，可溶性固形物含量測定所用儀器為數(shù)顯糖量計（日本ATAGO公司，PAL—1型）。氯吡脲殘留量用三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀（日本島津公司，LC—MS/MS—8040型）測定，方法依據(jù)GB 23200.110—2018《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中氯吡脲殘留量的測定 液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法》。除可滴定酸含量和維生素C含量外，其余各指標(biāo)均以10個果實(shí)的平均值計。

二、結(jié)果與分析

（一）氯吡脲處理對‘貴長’獼猴桃外觀形態(tài)的影響對照組和各處理組之間果形無明顯差異，均呈細(xì)長橢圓形，但對照組果皮和茸毛的顏色均較處理組淺，且對照組果實(shí)茸毛比處理組密而長。無論對照組還是各處理組，果實(shí)均未發(fā)現(xiàn)空心現(xiàn)象[19]。3個處理組（T1、T2和T3）的單果重、果實(shí)縱徑、果實(shí)橫徑、單果重/果實(shí)縱徑和單果重/果實(shí)橫徑均極顯著（P＜0.01）大于對照組（見表1），表明氯吡脲處理能使‘貴長’獼猴桃明顯增大果實(shí)和提高產(chǎn)量。其中，單果重分別提高了35.4%、42.1%和38.3%，果實(shí)縱徑分別增大了6.9%、11.5%和13.6%，果實(shí)橫徑分別增大了9.0%、14.5%和11.3%，單果重/果實(shí)縱徑分別提高了16.5%、24.4%和24.4%，單果重/果實(shí)橫徑分別提高了18.6%、27.5%和25.5%。3種處理之間這5項指標(biāo)均無極顯著差異，表明幼果期5、10、20 mg/L氯吡脲浸果處理對‘貴長’獼猴桃大小的影響效果是一樣的。3種處理與對照之間果形指數(shù)均無顯著差異，表明氯吡脲處理未改變‘貴長’獼猴桃的果實(shí)形狀，其所引起的‘貴長’獼猴桃果實(shí)增大是縱徑與橫徑協(xié)同增大。

表1 氯吡脲處理對‘貴長’獼猴桃大小和形狀的影響

（二）氯吡脲處理對‘貴長’獼猴桃內(nèi)在品質(zhì)的影響獼猴桃屬呼吸躍變型果實(shí)，采摘后需經(jīng)后熟變軟方可食用[30]。無論對照組還是各處理組，樣品果采摘后第3 d運(yùn)至實(shí)驗室，在室溫（20℃）和相對濕度85%～90%條件下放至第12d時均已后熟變軟，達(dá)到可食用狀態(tài)[31]，但對照組后熟變軟速度明顯慢于各處理組（見表2）。從表2可知，貨架期試驗的第3 d果實(shí)硬度仍很大，第3 d至第6 d果實(shí)硬度急劇下降，此后果實(shí)硬度下降速度放緩；總的趨勢是氯吡脲處理濃度越高，果實(shí)硬度越小，果實(shí)硬度下降速度越快。果實(shí)可溶性固形物含量隨放置時間延長而呈升高趨勢，各處理組的果實(shí)可溶性固形物含量均顯著（P＜0.05）高于對照組（見表3），至放置第12 d時，分別比對照組高出31.2%、30.9%和30.8%，而3種處理組間果實(shí)可溶性固形物含量無明顯差異。果實(shí)可滴定酸含量隨貯藏時間的延長而逐漸降低（見表4），放置至第12 d時，各處理組分別比對照組低25.2%、24.4%和7.3%，且各處理組的固酸比均顯著高于對照組（見圖1）。李國田等[21]在 ‘泰山1號’獼猴桃上，張承等[7]和趙治兵等[26]在‘貴長’獼猴桃上的研究也表明，幼果期氯吡脲浸果處理的獼猴桃采后放至后熟變軟時固酸比高于對照。樣品放至第12 d時，對照組的維生素C含量最低，3種處理的維生素C含量分別比對照高9.8%、16.8%和18.2%，表明氯吡脲處理能在一定程度上提高‘貴長’獼猴桃的維生素C含量（見表5）。

圖1 氯吡脲處理對獼猴桃固酸比的影響（采后第12 d）

表2 氯吡脲處理對‘貴長’獼猴桃硬度的影響 （kg/cm2）

表3 氯吡脲處理對‘貴長’獼猴桃可溶性固形物含量的影響 （%）

表4 氯吡脲處理對‘貴長’獼猴桃可滴定酸含量的影響 （%）

表5 氯吡脲處理對獼猴桃維生素C含量的影響 （mg/100g）

（三）浸果處理濃度對‘貴長’獼猴桃氯吡脲殘留的影響樣品運(yùn)到實(shí)驗室后，立即將獼猴桃全果和去皮后果肉制成試樣，保存于—80℃冰箱中，隨后測定氯吡脲殘留量。經(jīng)檢測，3種處理的全果中氯吡脲殘留量分別為0.011 0、0.016 1、0.037 2 mg/kg，均低于GB 2763—2021《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》設(shè)定的獼猴桃中氯吡脲最大殘留限量0.05 mg/kg。結(jié)果表明，‘貴長’獼猴桃幼果期氯吡脲浸果處理后至成熟采摘后第3 d（中間間隔135 d），果實(shí)中仍有氯吡脲殘留，而且浸果處理濃度越大，氯吡脲殘留量越高（見圖2）；在3種處理濃度下，果實(shí)雖有氯吡脲殘留檢出，但殘留水平是安全的。果實(shí)去皮（約0.6 mm厚）后測定果肉中氯吡脲殘留量，均未檢出。綜上結(jié)果說明，獼猴桃果實(shí)中氯吡脲殘留主要存在于果皮上，獼猴桃去皮后食用，消費(fèi)者基本不會攝入氯吡脲殘留；只要氯吡脲浸果處理濃度不超過最高推薦使用濃度（20 mg/L），獼猴桃產(chǎn)品的安全性是有保障的。

圖2 不同浸果處理的‘貴長’獼猴桃成熟果實(shí)采后第3 d的氯吡脲殘留量

三、討論

幼果期氯吡脲浸果處理能增大獼猴桃果實(shí)縱徑、果實(shí)橫徑和單果重，但對果形指數(shù)沒有明顯影響，即不會改變果實(shí)的基本形狀，這與前人研究結(jié)果一致[7，19～23，27]。與對照組相比，各處理組的果實(shí)硬度均有明顯下降，總體趨勢是處理濃度越大，果實(shí)硬度越小， 這與張承等[7]、 王瑋等[19]和李國田等[21]的研究結(jié)果一致。導(dǎo)致果實(shí)硬度降低的原因是氯吡脲加速了細(xì)胞分裂，致使果實(shí)組織疏松[23]?？扇苄怨绦挝锖渴欠从倡J猴桃內(nèi)在品質(zhì)的主要指標(biāo)[27]。3種濃度的氯吡脲處理均會促進(jìn)獼猴桃可溶性固形物含量提高，究其原因，可能是氯吡脲處理增強(qiáng)了果實(shí)調(diào)運(yùn)光合產(chǎn)物的能力，改善了果實(shí)中有機(jī)營養(yǎng)狀況[24]。氯吡脲處理往往會導(dǎo)致獼猴桃維生素C含量降低， 且處理濃度越高， 降低程度越大[7，19～20]。 本文及其他學(xué)者對‘徐香’[20]、‘紅陽’[22]和‘貴長’[26]獼猴桃的研究表明，氯吡脲處理也可能導(dǎo)致獼猴桃維生素C含量升高。氯吡脲處理還會導(dǎo)致‘貴長’獼猴桃可滴定酸含量降低，其他學(xué)者對‘泰山1號’獼猴桃的研究也發(fā)現(xiàn)了同樣的情況[21]。

‘貴長’獼猴桃幼果期氯吡脲浸果處理，至成熟采摘后第3 d（中間時隔135 d），果實(shí)中仍有氯吡脲殘留檢出，而且高濃度處理組的氯吡脲殘留水平比低濃度處理組高。李菁等[11]和譚永中等[22]的研究也發(fā)現(xiàn)，處理濃度越大，獼猴桃中氯吡脲殘留量越大。從相關(guān)報道[11，22，25]可見，獼猴桃幼果期氯吡脲浸果處理濃度即使在20 mg/L以上，甚至達(dá)到100 mg/L，成熟采摘時獼猴桃中氯吡脲殘留均已降至最大殘留限量以下，說明氯吡脲殘留水平是安全的，不會危害消費(fèi)者人體健康。氯吡脲合理使用濃度的設(shè)定，不僅要考慮獼猴桃的食用安全性，還要考慮氯吡脲處理對獼猴桃品質(zhì)的影響和不同獼猴桃品種對氯吡脲處理的反應(yīng)差異性。多數(shù)研究提出的獼猴桃幼果期氯吡脲浸果處理的合理/最佳使用濃度均不超過10 mg/L[11，19～20，22～23，26～27]。 本文試驗結(jié)果表明，總體來看，3種處理濃度中以10 mg/L氯吡脲處理效果最好。

四、結(jié)論

‘貴長’獼猴桃幼果期5、10、20 mg/L氯吡脲浸果處理能顯著促進(jìn)單果重、果實(shí)縱徑和果實(shí)橫徑的增大，但對果實(shí)形狀和果形指數(shù)無明顯影響。3種濃度的氯吡脲處理均使‘貴長’獼猴桃可溶性固形物含量、維生素C含量和固酸比顯著提高，同時引起果實(shí)硬度、可滴定酸含量和貯藏性下降。各濃度處理組的‘貴長’獼猴桃成熟采摘時氯吡脲殘留量均遠(yuǎn)低于最大殘留限量，且主要?dú)埩粲诠ど?，對消費(fèi)者是安全的。綜合考慮氯吡脲使用效果和使用后對果實(shí)品質(zhì)（包括貯藏性）及食用安全性的影響，‘貴長’獼猴桃上氯吡脲的使用濃度以10 mg/L為宜。