高慎碩，張智凱，尹國(guó)慶，張紅霞，王緒斌，馬巖，劉洪俊，李樂平，郭曉波（.山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院 胃腸外科，山東 濟(jì)南 500；.山東第一醫(yī)科大學(xué)附屬青州醫(yī)院 胃腸外科，山東 青州 6500；.山東第一醫(yī)科大學(xué) 臨床醫(yī)學(xué)院，山東 濟(jì)南 507）

胃癌是消化道最常見的惡性腫瘤之一[1]。在世界范圍內(nèi)胃癌的發(fā)病率和病死率分別排名第六位和第二位，每年新發(fā)病例超過100 萬(wàn)例，死亡72.3 萬(wàn)例[2]。2020年中國(guó)胃癌新發(fā)病例47.8萬(wàn)（占全球新發(fā)病例的43.9%），死亡37.3 萬(wàn)例（占全球死亡病例的48.5%）[3]。由于缺乏有效的早期診斷生物標(biāo)志物，胃癌確診時(shí)往往已經(jīng)發(fā)展到晚期，而晚期或轉(zhuǎn)移性胃癌患者的5 年生存率僅為5%～20%。為改善胃癌患者的預(yù)后，需要更加有效的早期診斷生物標(biāo)志物。miRNA 是一類小型、高度保守的由內(nèi)源基因編碼的非編碼單鏈RNA分子，長(zhǎng)度為19～25個(gè)核苷酸，在細(xì)胞增殖、遷移、分化、凋亡等過程中起重要作用[4-5]。miR-875-5p 在許多疾病中均表達(dá)異常，包括妊娠期糖尿病、肝纖維化、肺癌、食管癌、肝細(xì)胞癌和甲狀腺癌等[6-11]。上述研究結(jié)果表明，miR-875-5p 在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。上游刺激因子2（upstream stimulatory factor 2，USF2）在多種惡性腫瘤中異常高表達(dá)。目前，miR-875-5p 通過調(diào)控USF2 對(duì)胃癌的作用及其機(jī)制尚少見文獻(xiàn)報(bào)道。因此，本研究過表達(dá)或抑制miR-875-5p 后，檢測(cè)胃癌細(xì)胞生物學(xué)特性及USF2 蛋白的改變，探討miR-875-5p 對(duì)胃癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響及其潛在的作用機(jī)制，旨在為胃癌的早期診斷與治療提供新的生物標(biāo)志物與靶標(biāo)。

1 材料與方法

1.1 細(xì)胞、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及主要試劑

人胃癌細(xì)胞BGC-823、HGC-27、MGC-803、SGC-7901、MKN-45、AGS 和人胃黏膜細(xì)胞GES-1 購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所。雄性、4～6 周齡、16～20 g 的BALB/c 無(wú)胸腺裸鼠購(gòu)自北京維通利華公司（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)：No.110011211102374973）。

RPMI 1640培養(yǎng)基、Opti-MEM減血清培養(yǎng)基、胎牛血清（FBS）、磷酸鹽緩沖液（PBS）均購(gòu)自美國(guó)Gibco公司，青、鏈霉素購(gòu)自上海碧云天公司，RNA抽提試劑TRIzol、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、SYBR Green PCR Master Mix 購(gòu)自日本TaKaRa，miR-875-5p模擬物（mimic）和抑制劑（inhibitor）購(gòu)自上海吉瑪生物公司，U6及miR-875-5p引物購(gòu)自銳博生物公司，苯甲基磺酰氟（PMSF）購(gòu)自北京索萊寶科技有限公司，ECL發(fā)光試劑盒購(gòu)自美國(guó)Millipore 公司，RIPA 蛋白裂解液、BCA 蛋白質(zhì)測(cè)定試劑盒、SDS-PAGE 凝膠配制試劑盒均購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)有限公司，USF2 抗體、LipofectamineTM3000 轉(zhuǎn)染試劑購(gòu)自Invitrogen 公司，兔抗人GAPDH抗體和HRP標(biāo)記的山羊抗兔二抗購(gòu)自武漢三鷹公司，Transwell 小室和基質(zhì)膠購(gòu)自美國(guó)Corning公司，CCK-8試劑盒購(gòu)自美國(guó)MCE公司。

1.2 細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染與分組

細(xì)胞用含10%FBS、100 U/mL青霉素和100 mg/mL鏈霉素的RPMI 1640 培養(yǎng)基常規(guī)培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到50%～70%時(shí)，參照LipofectamineTM3000 轉(zhuǎn)染試劑說明書的方法進(jìn)行轉(zhuǎn)染，將miR-875-5p mimic及陰性對(duì)照（miR-NC）、miR-875-5p inhibitor 及陰性對(duì)照（Anti-miR-NC）分別轉(zhuǎn)染至AGS 細(xì)胞或MKN-45細(xì)胞中，空白對(duì)照組（Control 組）不轉(zhuǎn)染。實(shí)驗(yàn)分為Control 組、miR-875-5p mimic 組、miR-NC 組、miR-875-5p inhibitor組和Anti-miR-NC組。

1.3 qPCR法檢測(cè)胃癌細(xì)胞中miR-875-5p的表達(dá)水平

細(xì)胞轉(zhuǎn)染48 h 后，用TRIzol 試劑提取培養(yǎng)細(xì)胞的RNA，用紫外分光光度計(jì)測(cè)定RNA 濃度及純度，并將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，進(jìn)行qPCR擴(kuò)增，U6 用作內(nèi)參照。另外，解鏈曲線用于評(píng)估非特異性擴(kuò)增。引物序列（5'-3'）：miR-875-5p上游為GCGGGC GGTATACCTCAGTTTTAT，下游為ATCCAGTGC AGGGTCCGAGG；U6上游為GGAACGATACAG AGAAGATTAGC，下游為TGGAACGCTTCACGA ATTTGCG。qPCR 反應(yīng)條件：95 ℃持續(xù)30 s；95°C 5 s，60°C 30 s，共進(jìn)行40 個(gè)循環(huán)。使用2-ΔΔCt方法計(jì)算目的基因miRNA的相對(duì)表達(dá)量。

1.4 雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證miR-875-5p 與USF2的靶向關(guān)系

通過TargetScan（http://www.targetscan.org/vert_71）、miRmap（https://mirmap.ezlab.org/）和Starbase（https://starbase.sysu.edu.cn/）數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)miR-875-5p的靶基因，分析miR-875-5p與USF2 mRNA之間的互補(bǔ)結(jié)合位點(diǎn)。在含10%FBS的RPMI 1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)AGS細(xì)胞，按照LipofectamineTM3000轉(zhuǎn)染試劑說明書方法，將含psiCHECK2-hUSF2-3′UTR的野生型（WT）和突變型（MUT）報(bào)告基因質(zhì)粒與miR-875-5p mimic或miR-NC共轉(zhuǎn)染至細(xì)胞中，培養(yǎng)48 h后，用雙熒光素酶活性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞中熒光素酶活性。

1.5 WB法檢測(cè)AGS 和MKN-45細(xì)胞中USF2 蛋白表達(dá)水平

細(xì)胞轉(zhuǎn)染72 h 后，用BCA 蛋白質(zhì)測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白質(zhì)濃度，用10%SDS-PAGE 分離蛋白質(zhì)（每個(gè)樣品20 μg），將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到NC 膜上。在5%脫脂牛奶中封閉印跡膜30 min 后，加入抗USF2（1∶1 000）、抗GADPH（1∶10 000）一抗，4 ℃過夜。TBST洗膜后，室溫下加入HRP標(biāo)記的山羊抗兔二抗（1∶5 000）中處理1 h。采用增強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光法對(duì)蛋白質(zhì)條帶進(jìn)行曝光，以GADPH 用作內(nèi)參照，使用ImageJ軟件分析蛋白條帶的灰度值。

1.6 克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)AGS和MKN-45細(xì)胞的增殖能力

將各組轉(zhuǎn)染后細(xì)胞用胰蛋白酶消化，計(jì)數(shù)并以1×103細(xì)胞的密度重新鋪板。每3 d更換一次培養(yǎng)基。10 d 后，用PBS 洗滌細(xì)胞，4%多聚甲醛固定30 min，后用1%結(jié)晶紫溶液染色30 min 以進(jìn)行可視化和計(jì)數(shù)，計(jì)算克隆形成率[（克隆數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)）×100%]。

1.7 CCK-8法檢測(cè)AGS和MKN-45細(xì)胞的增殖能力

細(xì)胞轉(zhuǎn)染24 h后，按CCK-8試劑盒說明方法，將AGS 和MKN-45 細(xì)胞接種到96 孔板（2.0×103個(gè)/孔）中，每孔中加入10 μL CCK-8試劑，1 h后上酶標(biāo)儀檢測(cè)波長(zhǎng)在450 nm 處每孔的光密度（D）值，以D值表示細(xì)胞增殖能力。

1.8 Transwell 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)AGS 和MKN-45 細(xì)胞的遷移和侵襲能力

細(xì)胞轉(zhuǎn)染24 h 后，通過胰蛋白酶消化，收集細(xì)胞。將Transwell 小室置于24 孔培養(yǎng)板孔中，將上室和下室分開。在Transwell 下室中添加600 μL 含20%FBS 的RPMI 1640 培養(yǎng)基，將250 μL 含5×104個(gè)細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基添加到Transwell 上室，進(jìn)行細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)。進(jìn)行細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)時(shí)，使用加入預(yù)鋪基質(zhì)膠的上室。在37 ℃、5%CO2條件下培養(yǎng)24 h 后，用棉簽除去上室中殘留的細(xì)胞。侵襲小室基膜的細(xì)胞在4%多聚甲醛中固定20 min，1%結(jié)晶紫染色20 min后PBS 沖洗、封片，在光學(xué)顯微鏡下隨機(jī)選取5 個(gè)視野進(jìn)行觀察、計(jì)數(shù)遷移或侵襲細(xì)胞數(shù)并拍照。

1.9 裸鼠MKN-45細(xì)胞移植瘤模型的構(gòu)建及觀察

轉(zhuǎn) 染miR-875-5p mimic 和miR-NC 至MKN-45細(xì)胞，將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的5×105個(gè)細(xì)胞懸浮在100 μL的PBS中，隨后接種到裸鼠的右腋部皮下，實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組、miR-NC 組和miR-875-5p mimic 組，每組3 只。每4 d 通過用游標(biāo)卡尺測(cè)量長(zhǎng)度（L）和寬度（W）來測(cè)量移植瘤的大小，并按照公式(L×W2)/2計(jì)算移植瘤的體積。28 d后處死裸鼠并剝離移植瘤，測(cè)量移植瘤體積。

1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

以上所有實(shí)驗(yàn)均獨(dú)立重復(fù)3次。采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量數(shù)據(jù)以表示，兩組間數(shù)據(jù)比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，以P<0.05 或P<0.01 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 miR-875-5p在胃癌細(xì)胞中呈低表達(dá)

qPCR 法檢測(cè)結(jié)果（圖1）顯示，與GES-1 細(xì)胞相 比，BGC-823、HGC-27、SGC-7901、MGC-803、MKN-45和AGS細(xì)胞中miR-875-5p的表達(dá)均顯著降低（均P<0.01）。結(jié)果表明，miR-875-5p 在胃癌細(xì)胞中呈低表達(dá)，以在AGS細(xì)胞中表達(dá)最低，MKN-45細(xì)胞中表達(dá)最高，因此，后續(xù)實(shí)驗(yàn)選擇AGS 細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-875-5p mimic 構(gòu)建過表達(dá)細(xì)胞，MKN-45 細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-875-5p inhibitor構(gòu)建抑制細(xì)胞。

圖1 miR-875-5p在胃癌細(xì)胞和胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1中的表達(dá)

2.2 成功構(gòu)建miR-875-5p 過表達(dá)或抑制的AGS 細(xì)胞或MKN-45細(xì)胞

轉(zhuǎn)染miR-875-5p mimic 或inhibitor 后，qPCR 法檢測(cè)結(jié)果（圖2）表明，與Control 組和miR-NC 組相比，miR-875-5p mimic 組AGS 細(xì)胞中miR-875-5p 的表達(dá)水平顯著升高（均P<0.01）；與Control組和AntimiR-NC 組相比，miR-875-5p inhibitor 組MKN-45 細(xì)胞中miR-875-5p 的表達(dá)水平顯著降低（均P<0.01）。結(jié)果表明，成功構(gòu)建miR-875-5p 過表達(dá)或抑制的胃癌細(xì)胞，可以進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

圖2 轉(zhuǎn)染miR-875-5p mimic(A)或inhibitor(B)后胃癌細(xì)胞中miR-875-5p表達(dá)水平

2.3 miR-875-5p靶向USF2基因并抑制其表達(dá)

TargetScan、miRmap 和Starbase 數(shù)據(jù)庫(kù)分析結(jié)果（圖3A）顯示，USF2 是miR-875-5p 的靶基因，其序列中包含一個(gè)保守的miR-875-5p mRNA 同源位點(diǎn)。雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)結(jié)果（圖3B）顯示，與miR-NC 組相比，miR-875-5p mimic 與USF2 WT共轉(zhuǎn)染組細(xì)胞的熒光素酶活性明顯降低（P<0.01），而miR-875-5p mimic 與USF2 MUT 共轉(zhuǎn)染組細(xì)胞的熒光素酶活性無(wú)變化（P>0.05）。WB 法檢測(cè)結(jié)果（圖3C）顯示，miR-875-5p mimic 組AGS細(xì)胞中USF2 蛋白表達(dá)顯著低于Control 組和miR-NC 組（均P<0.01）；miR-875-5p inhibitor組MKN-45細(xì)胞中USF2 蛋白表達(dá)顯著高于Control 組和Anti-miR-NC組（均P<0.05）。結(jié)果表明，miR-875-5p 直接靶向USF2基因并抑制其表達(dá)。

圖3 miR-875-5p靶向抑制USF2表達(dá)

2.4 miR-875-5p表達(dá)變化對(duì)胃癌細(xì)胞增殖的影響

CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果（圖4A）顯示，在轉(zhuǎn)染第4天時(shí)miR-875-5p mimic組AGS細(xì)胞的增殖水平顯著低于Control組和miR-NC 組（均P<0.01）；miR-875-5p inhibitor 組MKN-45 細(xì)胞中的增殖水平顯著高于Control 組和Anti-miR-NC 組（均P<0.01）?？寺⌒纬蓪?shí)驗(yàn)結(jié)果（圖4B）顯示，miR-875-5p mimic 組AGS 細(xì)胞的克隆形成率顯著低于Control 組和miR-NC 組（均P<0.01）；miR-875-5p inhibitor 組MKN-45 細(xì)胞的克隆形成率顯著高于Control 組和Anti-miR-NC 組細(xì)胞（均P<0.01）。結(jié)果表明，miR-875-5p過表達(dá)顯著抑制胃癌細(xì)胞增殖和克隆形成能力。

圖4 miR-875-5p的過表達(dá)或抑制對(duì)AGS和MKN-45細(xì)胞增殖（A）和克隆形成（B）的影響

2.5 miR-875-5p表達(dá)變化對(duì)胃癌細(xì)胞遷移和侵襲的影響

Transwell 實(shí)驗(yàn)結(jié)果（圖5）顯示，與Control 組和miR-NC 組相比，miR-875-5p mimic組AGS細(xì)胞的遷移和侵襲細(xì)胞數(shù)均顯著減少（均P<0.01）；而miR-875-5p inhibitor 組MKN-45 細(xì)胞的遷移和侵襲細(xì)胞數(shù)較Control 組和Anti-miR-NC 組均顯著增多（P<0.05或P<0.01）。結(jié)果表明，過表達(dá)miR-875-5p降低胃癌細(xì)胞的遷移與侵襲能力，抑制miR-875-5p 表達(dá)則提高胃癌細(xì)胞的遷移與侵襲能力。

圖5 miR-875-5p的過表達(dá)或抑制對(duì)AGS細(xì)胞（A）和MKN-45細(xì)胞（B）遷移和侵襲的影響（結(jié)晶紫染色，×200）

2.6 miR-875-5p過表達(dá)顯著抑制裸鼠MKN-45細(xì)胞移植瘤的生長(zhǎng)

裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果（圖6）顯示，miR-875-5p mimic 組裸鼠移植瘤的體積顯著小于Control 組和miR-NC組（均P<0.01），表明miR-875-5p過表達(dá)可顯著抑制裸鼠MKN-45細(xì)胞移植瘤的生長(zhǎng)。

圖6 過表達(dá)miR-875-5p抑制裸鼠成瘤

3 討論

中國(guó)胃癌病死率位列惡性腫瘤的第二位，主要是由于胃癌確診時(shí)往往已進(jìn)展到晚期，失去了早期診斷與疾病治愈的機(jī)會(huì)。胃癌的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移是一個(gè)多基因、多階段的序貫級(jí)聯(lián)過程，迄今為止，關(guān)于胃癌進(jìn)展的分子機(jī)制研究報(bào)道仍然很少。因此，對(duì)涉及腫瘤形成和發(fā)展的分子機(jī)制的更好理解將有助于研發(fā)新的治療策略和靶標(biāo)來治療胃癌。在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中，發(fā)揮作用的基因分為癌基因和抑癌基因，當(dāng)這些基因失調(diào)時(shí)，很可能導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。miRNA參與機(jī)體的一系列重要的生物學(xué)活動(dòng)，例如早期胚胎發(fā)育、細(xì)胞增殖、凋亡和分化等。細(xì)胞增殖和凋亡通常在腫瘤中發(fā)生異常改變，推測(cè)miRNA 的異常缺失、突變或過表達(dá)與惡性腫瘤的發(fā)生有關(guān)[12-14]，miRNA可能是腫瘤診斷的重要生物標(biāo)志物與治療靶標(biāo)。

大量研究結(jié)果表明，miR-875-5p參與了腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。如WANG等[8]的研究結(jié)果顯示，miR-875-5p在肺癌中高表達(dá)，同時(shí)其能調(diào)控SATB2（stabilin-2）的表達(dá)而發(fā)揮促癌作用；KANG 等[9]的研究結(jié)果表明，miR-875-5p通過靶向CAPZA1（capping protein of muscle Z-line alpha 2 subunit）促進(jìn)食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞的增殖和遷移；BEZAWY 等[15]的研究結(jié)果表明，miR-875-5p 通過抑制EGFR-ZEB1 軸而阻斷上皮細(xì)胞向間充質(zhì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，增強(qiáng)前列腺癌細(xì)胞的放療反應(yīng)。有研究結(jié)果[16]發(fā)現(xiàn)，miR-875-5p過表達(dá)可影響胃癌細(xì)胞中Notch3 的表達(dá)從而影響胃癌細(xì)胞的增殖。本課題首先檢測(cè)了miR-875-5p在人胃癌細(xì)胞中的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)miR-875-5p在胃癌細(xì)胞BGC-823、HGC-27、SGC-7901、MGC-803、MKN-45和AGS中的表達(dá)水平顯著低于正常胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1。在6 種胃癌細(xì)胞中，miR-875-5p 在AGS 細(xì)胞中表達(dá)最低，而在MKN-45 細(xì)胞中表達(dá)最高，因此，選擇AGS和MKN-45細(xì)胞進(jìn)行深入的功能研究。為探討miR-875-5p對(duì)胃癌細(xì)胞增殖的影響，進(jìn)行CCK-8和克隆形成實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，miR-875-5p 表達(dá)的降低提高了胃癌細(xì)胞的增殖和集落形成能力，而miR-875-5p過表達(dá)則顯著抑制細(xì)胞增殖和集落形成能力；通過Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-875-5p對(duì)胃癌細(xì)胞侵襲和遷移的作用，結(jié)果表明miR-875-5p 表達(dá)的降低促進(jìn)細(xì)胞的侵襲和遷移，而miR-875-5p 過表達(dá)顯著抑制細(xì)胞的侵襲和遷移。

USF2是基本螺旋-環(huán)-螺旋-亮氨酸拉鏈轉(zhuǎn)錄因子家族的成員之一，其編碼的蛋白質(zhì)可以參與調(diào)節(jié)多種細(xì)胞過程。作為一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子，USF2 已經(jīng)被報(bào)道有大量的靶基因，涉及細(xì)胞增殖、葡萄糖和脂質(zhì)代謝[17]。有研究結(jié)果[18-19]證實(shí)USF2 在多種腫瘤中高表達(dá)，且敲低USF2 后腫瘤細(xì)胞的增殖和遷移能力明顯減弱[20]。此外，USF2 也受到miRNA 的調(diào)控，從而影響腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移能力，例如miR-362-3p 通過靶向USF2 而抑制結(jié)腸癌細(xì)胞遷移[21]。本課題組在前期研究[22]中發(fā)現(xiàn)，miR-875-5p和USF2基因之間存在一定的調(diào)控關(guān)系。本研究的結(jié)果證實(shí)，miR-875-5p靶向下調(diào)USF2的表達(dá)進(jìn)而抑制胃癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲。既往的研究結(jié)果[23]顯示，單個(gè)miRNA可以同時(shí)影響多個(gè)靶基因，在miR-875-5p 的預(yù)測(cè)靶基因中，本課題組發(fā)現(xiàn)USF2 充當(dāng)miR-875-5p的關(guān)鍵效應(yīng)靶基因，雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)和WB 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，miR-875-5p 直接與USF2 mRNA 中3'-UTR 的靶向位點(diǎn)結(jié)合并負(fù)向調(diào)節(jié)USF2 表達(dá)。miR-875-5p 的增殖抑制作用可能歸因于miR-875-5p 靶向USF2 mRNA 的3'-UTR，并抑制胃癌細(xì)胞中USF2 的表達(dá)。此外，裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，過表達(dá)miR-875-5p 顯著抑制MKN-45 細(xì)胞的成瘤，這進(jìn)一步明確了miR-875-5p 抑制胃癌細(xì)胞增殖的作用。

綜上所述，本研究通過使用miR-875-5p mimic和inhibitor轉(zhuǎn)染胃癌細(xì)胞，證實(shí)了miR-875-5p 表達(dá)變化可以影響胃癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲，過表達(dá)miR-875-5p 通過靶向下調(diào)USF2 發(fā)揮抑制胃癌生長(zhǎng)的作用。本研究結(jié)果表明，miR-875-5p 可能是胃癌潛在的診斷生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。